柑桔基因组DNA的MADS盒基因噬菌斑原位杂交

以大三岛脐橙基因组DNA为材料，用拟南芥AP1和矮牵牛FBP1的混合质粒DNA为模板，采用随机引物法标探针对柑桔基因组DNA文库进行噬菌斑原位杂交，结果表明，柑桔基因组中也存在控制花特异表达的MADS盒基因。     

羽衣甘蓝MADS–box基因BoaAGL6的克隆及表达分析

以羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)野生型及其在选育过程中发现的2种花瓣数量变化的突变体品种为试材,通过RACE方法克隆了AGL6基因的同源基因,命名为BoaAGL6,并用半定量RT–PCR和实时荧光定量PCR分析了BoaAGL6在3种不同花型的羽衣甘蓝各类花器官的表达模式。结果表明:克隆的BoaAGL6基因长999 bp(GenBank登录号为KC984301),开放阅读框长759 bp,编码252个氨基酸;系统发育分析表明,BoaAGL6基因属于AGL6–like进化系;半定量RT–PCR和实时定量RT–PCR结果表明,BoaAGL6基因具有较宽泛的表达区域,在不同花型的花瓣中的表达有所区别,在多瓣花型的花瓣中高丰度表达,有别于在其他2种花型中的中等水平。说明该基因在调控羽衣甘蓝花器官特征属性及形成过程中发挥重要作用。     

一个与矮牵牛开花相关的MADS盒基因克隆与序列分析

利用逆转录－多聚酶链反应成功地从矮牵牛花瓣总ＲＮＡ中分离出一条长７４４ｂｐ的ｃＤＮＡ片段．该片段被克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体中．序列分析表明，该ｃＤＮＡ片段与Ａｎｇｅｎｅｎｔ等发表的ｆｂｐ１基因仅在３′非编码区有２个核苷酸不同．它包含一个开放阅读框架，具有编码２４．６ＫＤ蛋白质能力．推导的蛋白质氨基酸序列中，Ｎ端包含一个完整的ＭＡＤＳ盒．该基因编码转录因子，参与花形态建成过程的调节机制     

白桦MADS基因的克隆及序列分析

在分析了欧洲白桦MADS3与拟南芥AP1中的保守性后,设计了一对引物。以白桦雄花芽为材料,从总RNA中通过RT-PCR分离得到一个MADS基因,其cDNA长738bp,包含了基因完整的编码序列,白桦MADS基因与已发表的欧洲白桦MADS3基因仅相差6个碱基,同源性高达99％;推导氨基酸序列的差异为5个,同源性达97％。分析其氨基酸序列表明,存在典型的MADS MEF2转录因子结构域和K-box结构域。     

辣椒MADS–box基因家族的鉴定及表达分析

利用辣椒的全基因组数据鉴定到104个MADS–box基因,对它们的理化性质、染色体定位、系统进化关系、蛋白保守基序和组织表达水平进行分析。结果表明：辣椒MADS–box基因家族各成员在染色体上的分布不均,理化性质差异较大,104个家族成员编码的氨基酸长度为100~567 aa,蛋白相对分子质量为11 203.9~ 63 559.7,蛋白理论等电点(PI)为4.63~10.46,系统进化树分析结果表明,辣椒MADS–box基因家族可分为2大类,与拟南芥和番茄的进化关系类似;组织表达水平分析结果表明,CaMADSs主要在花、果实和种子中表达,在叶片中表达量相对较低,推测MADS–box基因可能参与调控果实的发育和成熟。     

苦瓜性别分化程度表达的研究

苦瓜的性别分化过程要先经过一个两性期，再分别向雄性或雌性的方向发育。对两性期和雄，雌花早期发育的3个典型时期的花蕾进行毛细管电泳分析，结果表明，一种分子量为11kD的蛋白质在雌花发育的3个时期都存在，并且含量变化很小，很可能是雌花程序表达中的一种“关键蛋白”；类似地，一种分子量为30kD的蛋白质很可能是雄花程序表达中的一种“关键蛋白”。此外，蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮抑制离体两性花的体外性别分化，而核酸合成抑制剂3－脱氧腺苷则不影响两性花的体外性别分化。     

苦瓜性别分化程序表达的研究（英文）

苦瓜的性别分化过程要先经过一个两性期,再分别向雄性或雌性的方向发育. 对两性期和雄,雌花早期发育的3个典型时期的花蕾进行毛细管电泳分析,结果表明,一种分子量为11 kD的蛋白质在雌花发育的3个时期都存在,并且含量变化很小,很可能是雌花程序表达中的一种"关键蛋白";类似地,一种分子量为30 kD的蛋白质很可能是雄花程序表达中的一种"关键蛋白".此外,蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮抑制离体两性花的体外性别分化,而核酸合成抑制剂3-脱氧腺苷则不影响两性花的体外性别分化.     

性别决定基因Sry原核表达载体的构建和蛋白检测

动物的性别在畜牧业是一项很重要的经济性状，而哺乳动物的性别决定受睾丸决定基因Sry的启动，获得SRY蛋白并探索它与其他相关因子之间的相互关系对于深入了解该因子的作用机理和寻求高效经济的性别控制方法尤为重要。本研究以小鼠为实验材料，通过PCR、质粒重组、酶切和测序等方法构建小鼠Sry的原核表达载体，使用IPTG诱导蛋白表达、SDS-PAGE电泳和western blotting等方法检测重组表达载体的原核表达。PCR、酶切和测序结果一致显示成功地构建了原核表达载体pET-21b-Sry；使用anti-Sry和anti-His特异性抗体进行的western blotting实验结果验证了蛋白表达的正确性。本实验不仅实现了哺乳动物性别决定因子的Sry原核表达，而其还获得了具有生物活性的SRY蛋白，对于深入研究Sry及其他相关基因的相互作用奠定了实验基础。     

大鳞副泥鳅Sox基因保守区的克隆与特征分析 

为探讨大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)的性别决定与分化机制,采用Sox基因HMG盒保守区的2对简并引物,SoxN与Sox9,用以扩增大鳞副泥鳅的基因组DNA,并对其性腺组织进行RT-PCR分析。SoxN引物扩增基因组DNA共获得pdSox1、pdSox2、pdSox3、pdSox4、pdSox11、pdSox14、pdSox19、pd-Sox21等13个Sox基因,分属SoxB与SoxC类群;Sox9引物扩增基因组DNA共获得pdSox8、pdSox9等5个Sox基因,属于SoxE类群,这5个Sox基因均含有一个内含子,且内含子的起始位置一致。基于Sox基因HMG盒蛋白质的遗传距离构建的NJ系统进化树表明,大鳞副泥鳅18个Sox基因在小鼠或斑马鱼中均能找到相应的Sox直系同源基因,其中,pdSox4、pdSox8、pdSox9、pdSox11、pdSox14、pdSox19等6个基因存在基因加倍现象,具有2个或2个以上的拷贝。用Sox9引物对大鳞副泥鳅的性腺进行RT-PCR扩增和测序分析,结果表明,在精巢中表达的是pdSox9a,在卵巢中表达的是pdSox8a。以上结果表明,pdSox8与pdSox9是大鳞副泥鳅的性别相关基因,它们可能在大鳞副泥鳅的性别分化中发挥作用。     

苦瓜几丁质酶基因的克隆、表达及酶学特性分析

采用一步法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),以苦瓜幼叶为材料克隆几丁质酶基因的cDNA序列,序列分析表明其包含了基因完整的编码序列,编码由333个氨基酸组成的几丁质酶,对所克隆的基因进行了原核表达和纯化.纯化的几丁质酶具有分解几丁质的生物活性.当底物质量浓度在100～400 mg·L-1时,几丁质酶分解底物的能力随底物浓度增加而增大;大于400 mg·L-1时,几丁质酶分解底物的能力反而降低;当底物质量浓度固定时,几丁质酶分解底物的量随反应时间延长而增多.苦瓜几丁质酶基因的克隆和表达将为研究其结构和生物学功能奠定基础.     

不同苦瓜品种果肉中酚类物质含量及抗氧化能力比较

 【目的】比较不同苦瓜品种果肉中游离态和结合态多酚含量及其抗氧化能力差异。【方法】选用14个代表性的苦瓜品种,分析其果肉中的游离态和结合态总酚含量及其单体酚类的组成,采用铁离子还原能力(FRAP,Ferric reducing/antioxidant power）、DPPH (1,1-二苯基-2-苦基苯肼自由基,1,1-diphenyl-2-picrylhydrazy）和ABTS+• (2, 2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸, 2, 2’-azinobis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid diammonium salt）自由基法测定其抗氧化能力差异,同时分析其多酚含量和抗氧化活性的关系。【结果】14个不同苦瓜品种的游离态酚、结合态酚和总酚含量分别介于157.58—382.92、6.46—54和175.27—413.79 mg GAE/100 g DW,变异系数分别为23.50%、61.04%和21.58%,游离态酚含量占总酚含量的91.34%,结合态酚含量仅占总含量的8.66%;14个品种的总黄酮含量介于8.97—18.22 mg CE/100 g DW,变异系数为22.80%;苦瓜中主要单体酚类物质香草醛酸、表儿茶素和芦丁含量亦存在显著的品种间差异,品种间的变幅分别为1.83—9.29、35.17—114.52和0.91—4.53 mg/100 g DW,变异系数分别为43.85%、26.97%、33.09%。FRAP抗氧化能力为272.16—713.32 mg TE/100 g DW,变异系数为27.67%;DPPH清除能力的IC50值为11.43—34.14 mg GAE/100 g DW,变异系数为35.10%;ABTS+•清除能力的IC50值为21.57—119.71 mg GAE/100 g DW,变异系数为63.75%。总酚含量与FRAP值呈极显著正相关（P＜0.01）,与DPPH和ABTS+•清除能力的IC50值分别呈极显著负相关（P＜0.01）。【结论】不同苦瓜品种间酚类物质含量和抗氧化能力存在显著基因型差异,其酚类物质和抗氧化能力主要以游离态形式存在,且酚类物质是苦瓜发挥抗氧化作用的重要物质基础。     

苦瓜栽培要点及管理

中国苦瓜栽培历史约600a，栽培区从南向北拓展，现已分布到全国大部分地区。苦瓜含有大量的生物碱、氨基酸、苦味素、维生素和矿物质，能有效消暑，平衡机体功能。在炎热的夏季，苦瓜既可清热，又能去火，深受消费者的青睐。本文主要介绍了苦瓜栽培的要点和管理技术，对广大农民种植苦瓜有很好的指导作用。     

苦瓜育种及相关基础研究进展

苦瓜虽然栽培历史悠久,但其育种及相关遗传基础研究起步较晚,落后于葫芦科其他主要瓜类蔬菜,目前主要集中在3个方面：一是产量、品质、熟性、主要果实性状及其他相关经济性状等的遗传研究;二是抗病性及其遗传基础研究;三是DNA分子标记在苦瓜遗传育种研究中的应用。近年来,许多学者采用品种提纯、有性杂交、杂种优势和诱变育种等方法,通过对耐冷凉、抗病、丰产、早熟、强雌系等苦瓜品种进行选育,育成一批表现较好的苦瓜品种,如大肉一号、桂农科一号和桂农科二号、玉5号、早优苦瓜、早绿苦瓜、农优1号、新科3号苦瓜、强雌品种＂Q11-2＂和＂屿强-2＂等。由于苦瓜的遗传育种研究基础相对比较薄弱,今后应加强对苦瓜主要性状遗传规律的研究,如主要性状的表现、杂种二代及以上性状的分离比例、主要性状的遗传力等;加强对苦瓜种质资源的收集、鉴定、评价,尤其是从苦瓜发源地引进种质资源;加强苦瓜分子育种的研究,如指纹图谱数据库、遗传多样性的研究及种质资源的创新利用等方面;建立苦瓜高效组织培养再生体系和高效苦瓜遗传转化体系,采用分子育种手段进行种质资源创新或品种改良;利用化学或物理方法处理愈伤组织以获得抗病、耐冷凉育种材料,或利用花粉小孢子进行培养等。苦瓜发源地国家之间或与苦瓜栽培国家之间应加强合作与交流,共享部分苦瓜种质资源,为苦瓜育种提供更多的基因来源。     

苦瓜、山楂清凉茶饮料的研制

研究了在一定的超声波条件下苦瓜汁的护色和包埋脱苦技术,并着重研究苦瓜、山楂清凉茶饮料的配方工艺。结果表明：苦瓜汁中加入柠檬酸与抗坏血酸复合护色液总量为0.3%,其护色效果最佳配比为2:3;在功率为400w超声波条件下,控制温度为55℃浸提30分钟,包埋剂β-CD环状糊精添加量为0.3%时,包埋脱苦效果最佳;茶饮料最佳配方工艺为：料水比为1:1的苦瓜汁、料水比为5:100的山楂汁和茶水比为1:100的绿茶汁混合体积比为2:2:16;蛋白糖和柠檬酸添加总量为0.12%,其配比为1:3;稳定剂黄原胶、CMC-Na的添加总量为0.12%,其配比为1:3,此时,饮料色泽澄清透亮,口感细腻,气味芳香。     

S195柴油机技术状态参数与排烟关系的试验研究

外源ＧＡ３和ＣＣＣ处理可以调节株洲长白品种苦瓜的性别表现．外源ＧＡ３有促雌作用，使第一雄花形成推迟，第一雌花形成提前．植株总的雌花数和雌、雄花比值较对照明显上升．低浓度的ＣＣＣ（５０～２００ｍｇ／Ｌ）表现出促雄作用，高浓度的ＣＣＣ（５００ｍｇ／Ｌ）则表现为促雌作用．ＧＡ３在０．０４～４ｍｇ／Ｌ对苦瓜离体两性花的性别分化有促雌作用，０．４～４０ｍｇ／Ｌ的ＣＣＣ则有促雄作用，高浓度的ＣＣＣ具有促雌作用．核酸合成抑制剂３′－脱氧腺苷不影响离体两性花的性别分化，而蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮则抑制两性花的性别分化，激素对性别分化向雌或雄的程序表达的调控发生在翻译水平上     

苦瓜的保健功能及其应用研究进展

苦瓜富含多种生物活性成分，具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤、抗生育、抗氧化、抑茵等功能特性。综述了苦瓜的保健功能以及其在食品、医学领域的应用研究进展，并展望了其研究和应用前景。     

苦瓜的干物质和养分累积与分配规律

理解作物的干物质和养分累积规律是实现作物高产高效的基础。采用大田栽培试验,研究了苦瓜干物质和N、P、K养分累积动态。结果表明,苦瓜结果前的干物质累积速率慢,累积量仅占整个生育期干物质累积量的4.0%,主要以生产叶片为主;结果期的干物质累积速率快,累积量占全生育期的96%,主要用于叶片和果实的生长;苦瓜养分累积总量表现为KNP,且不同生长时期、不同部位的养分累积特征不同。总体上N、P、K的吸收比例可以归纳为幼苗期至采收初期1.0∶0.1∶1.4,采收盛期至末期1.0∶0.2∶1.6;整个生育期内,平均生产每吨苦瓜所需N量为4.63 kg,P为0.72 kg,K为6.87 kg。     

苦瓜性别分化研究进展

从苦瓜在自然条件下性别的表现特点、性别分化的形态学、遗传基础、性别分化调控等方面对苦瓜性别分化研究概况进行了综述,同时介绍了苦瓜性别表现在育种和生产上的利用.     

苦瓜花粉母细胞减数分裂行为研究

研究苦瓜花粉母细胞的减数分裂行为,发现苦瓜花粉母细胞减数分裂中细胞质分裂类型为同时型,并且在减数分裂过程中存在不同步现象。在苦瓜花粉母细胞细胞核分裂中,从前期I到中期I,核仁逐渐消失,到前期Ⅱ又重新出现,随后消失。同时,从前期I到中期I,染色体开始收缩并逐渐变得清晰,到末期I时,苦瓜染色体发生解螺旋并逐渐模糊,前期Ⅱ再次变得清晰。研究还发现,苦瓜花粉母细胞减数分裂前期I和前期II中,存在多核仁现象。苦瓜减数分裂过程中产生部分多分孢子,这可能与逆境及染色体不同步分离相关。