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利用制备的抗三聚氰胺单克隆抗体建立了间接竞争ELISA方法,采用棋盘滴定法确定最佳三聚氰胺-OVA包被浓度为1.0μg/mL,单抗最佳稀释度为1∶1 000,最佳的封闭液为50g/L的脱脂乳,标准曲线的线性方程为y=-15.12x+107.3(R2=0.997)。批内变异系数(CV)为1.07%~5.53%,批间CV值为3.33%~11.92%,确定此方法精确度良好。利用建立的间接竞争ELISA方法,测定添加有三聚氰胺标准溶液的样品(宠物食品、小麦面筋、饲料、牛乳、鸡蛋),得到三聚氰胺在各样品中的回收率范围分别为宠物食品73.8%~84.32%,小麦面筋67.3%~88.27%,饲料70.3%~85.9%,牛乳83.47%~89.76%,鸡蛋76.2%~87.29%。确定可以利用此间接竞争ELISA方法检测样品中的三聚氰胺含量。 相似文献
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研究建立了GC/MS测定鸡蛋中三聚氰胺残留的方法。样品以10g/L三氯乙酸溶液提取,Cleanert PCX固相萃取柱净化,50℃水浴中氮气吹干后衍生化。以气相色谱-质谱选择99、171、327、342四个碎片离子进行定性定量分析。三聚氰胺在0.05mg/L~2.5mg/L成线性(R2为0.999),鸡蛋中3种不同添加浓度0.05、0.10和0.50mg/kg下三聚氰胺平均回收率分别为84.71%、88.12%、92.62%,相对标准偏差分别为10.57%、7.12%、6.92%,样品中最低检测限(S/N=3)为0.005mg/kg。 相似文献
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建立了畜产品包括生鲜乳、禽蛋、禽肉中三聚氰胺残留检测的反相高效液相色谱方法。样品经1%的三氯乙酸提取,饱和乙酸铅沉淀蛋白。经固相萃取柱MCX净化,于高效液相色谱仪紫外法测定,外标法定量。三聚氰胺在0.2~20.0μg/mL范围内线性良好,相关系数为0.9998。在0.2~1.0mg/kg浓度范围内,平均加标回收率在70%以上,批内变异系数在10%以内,批间变异系数在15%以内。方法的检出限为0.05mg/kg,定量限为0.10mg/kg。该方法定量限低,回收率高,可以同时测定多种样品,方便省时,满足农产品检验工作的需要。 相似文献
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同位素内标、GC-MS法测定饲料中三聚氰胺 总被引:1,自引:0,他引:1
本文旨在建立同位素内标法定量测定饲料中三聚氰胺的方法。饲料用三氯乙酸和乙酸铅溶液提取,再经PCX固相萃取柱净化、BSTFA衍生化,定容后用气相色谱-质谱(GC-MS)测定,并以同位素内标定量。饲料中三聚氰胺的检出限为50μg/kg,三聚氰胺的测定在125~5000ng/mL范围内具有良好的线性关系,配合饲料、浓缩饲料、预混饲料中的平均回收率分别为95.0%、95.6%、94.9%,平均变异系数为2.8%、3.3%、3.7%。通过与外标法比较,该方法定量准确可靠,更加适合用作饲料中三聚氰胺的定量测定。 相似文献
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建立了一种简单、实用的鸡蛋中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ残留的凝胶渗透色谱-超高效液相色谱检测方法。样品用乙腈∶丙酮=9∶1(V/V)溶液提取,经凝胶渗透色谱(GPC)净化后,反相液相色谱分离测定。本方法的检测限为20μg/kg,定量限为50μg/kg。四种苏丹红染料在20~2000 ng/mL范围内呈线性相关。在空白鸡蛋中添加50~1000μg/kg浓度下,四种苏丹红的平均回收率为65%~85%,批内变异系数在1.0%~4.8%之间(n=5),批间变异系数在2.1%~5.9%之间(n=3)。结果表明,该法简单、灵敏、特异性强、重现性好,适用于鸡蛋中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ残留的测定。 相似文献
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通过4,6-二氨基-2-氯-1,3,5-三嗪与对氨基苯丁酸反应获得三聚氰胺半抗原,再以活性酯法与载体蛋白偶联制备三聚氰胺免疫原或包被原。免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备出针对三聚氰胺的特异性单克隆抗体。采用间接竞争酶联免疫吸附法(ciELISA)建立检测三聚氰胺的标准曲线,线性范围是17.4~345.5ng/mL,50%抑制浓度(IC50)61.3ng/mL。牛奶和奶粉加标回收率在68.1%~91.0%,变异系数在2.4%~14.5%。结果表明,该方法可以满足牛奶和奶粉中三聚氰胺残留分析要求。 相似文献
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玉米蛋白粉相对于其它饲料原料价格较高,其等级主要是以粗蛋白含量的高低决定,因此可能会出现在玉米蛋白粉中非法添加三聚氰胺以次充好。动物饲喂非法添加三聚氰胺的玉米蛋白粉后,导致肾结石、肾衰结等疾病,严重者甚至造成动物死亡,给正常畜牧生产造成很大危害。试验以高效液相色谱-串联质谱法测定玉米蛋白粉中违禁药物三聚氰胺的含量,样品经三氯乙酸溶液提取,提取液离心后经混合型阳离子交换固相萃取柱净化,再用碱性甲醇洗脱,洗脱液吹干后用20%甲醇溶液复溶,用液相色谱-串联质谱仪检测,采用电喷雾离子源,在多反应监测(MRM)模式下进行分析,外标法定量,定性离子对分别为:m/z126.7>84.8、126.7>68.1,定量离子对为126.7>84.8。经试验:此方法具有操作简单、重复性好等特点,标准曲线相关系数r≥0.9999,平均回收率可达到84.5%~95.6%,回收率日内变异系数≤4.3%,回收率日间变异系数≤4.9%。 相似文献
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试验拟通过在日粮中添加不同剂量的三聚氰胺,研究其在鸡蛋和蛋鸡组织中的残留规律。选用65周龄的海兰灰商品蛋鸡240只,随机分为6个处理,分别饲喂添加了0、2、10、100、1000 mg/kg和2000 mg/kg三聚氰胺的日粮,试验期21 d。结果表明:随着日粮三聚氰胺添加量的增加,鸡蛋、肝脏、肾脏、血浆、肌肉和小肠组织中三聚氰胺的沉积量均呈线性增加(R2≥0.93);蛋鸡饲喂三聚氰胺7 d后,鸡蛋中三聚氰胺的沉积量基本保持稳定;而肝脏、肾脏、血浆、肌肉和小肠中的三聚氰胺沉积量呈现先增加后降低的趋势,14 d时达到最大值,第21天略微下降。结果提示,日粮中的三聚氰胺会富集在鸡蛋和蛋鸡组织中,且随着日粮三聚氰胺添加量的增加,鸡蛋和组织中三聚氰胺沉积量均呈线性增加。 相似文献
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建立了鸡蛋中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ残留测定的超高效液相色谱方法。样品经乙腈提取后,反相液相色谱分离测定,本方法的检测限为10μg/kg。四种苏丹红染料在浓度50-2000ng/mL范围内与峰面积呈线性相关。在空白鸡蛋中添加100~600μg/kg浓度下,四种苏丹红的平均回收率为80%~100%,批内变异系数在0.6%~2.8%(n=4),批间变异系数在0.7%~6.1%(n=3)。结果表明,该法简单、灵敏、特异性强,适用于鸡蛋中苏丹红染料残留的测定。 相似文献
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高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中三聚氰胺 总被引:3,自引:0,他引:3
本研究建立了高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定饲料中三聚氰胺含量的方法。饲料用三氯乙酸和乙酸铅溶液提取,再经PCX固相萃取柱净化,HILIC色谱柱分离、电喷雾离子化(ESI~+)和选择反应监测(SRM)方式采集,并以~(15)N_3-三聚氰胺为同位素内标定量。该方法的检出限为1 μg/kg;三聚氰胺的测定在1~50ng/mL时具有良好的线性关系;配合饲料、浓缩饲料、预混饲料中的平均回收率分别为97.5%、98.9%和98.0%,平均变异系数分别为4.3%、4.1%和4.3%。通过与外标法比较,该方法定量准确可靠,更加适合用作饲料中三聚氰胺的定量测定。 相似文献
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猪肉和鸡肉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素酶联免疫吸附检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
为保障动物源性食品安全,本研究建立了分别检测猪肉和鸡肉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和T-2毒素残留的间接竞争酶联免疫吸附法.结果显示,该方法在猪肉和鸡肉样本中DON的检测限分别为34.9和43.5 μg/kg,添加回收率为72.7%~97.1%,变异系数小于8.7%;T-2毒素的检测限分别为33.7和28.7 μg/kg,添加回收率为72.1%~95.0%,变异系数小于11.3%.该方法灵敏度高、准确、简便,适用于猪肉和鸡肉中DON和T-2毒素残留的快速检测. 相似文献
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《中国兽医杂志》2014,(9)
建立一种间接竞争ELISA方法,检测牛组织中的阿维菌素类药物(Avermectins,AVMs)残留。该方法可同时检测牛肝脏和肌肉中的阿维菌素、伊维菌素和埃普里诺菌素残留。标准曲线:y=-45.613x+81.191,R2=0.9951,IC50=4.8ng/mL,线性范围为1.1ng/mL21.9ng/mL。空白牛肝脏组织中以20、50ng/mL和100ng/g浓度添加时,AVMs回收率为53.8%21.9ng/mL。空白牛肝脏组织中以20、50ng/mL和100ng/g浓度添加时,AVMs回收率为53.8%80.4%,变异系数为3.4%80.4%,变异系数为3.4%17.9%;空白牛肌肉组织中以5、10ng/mL和20ng/g浓度添加时,AVMs回收率为70.9%17.9%;空白牛肌肉组织中以5、10ng/mL和20ng/g浓度添加时,AVMs回收率为70.9%108.6%,变异系数为3.7%108.6%,变异系数为3.7%17.1%。 相似文献
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ELISA一步法快速检测牛奶中三聚氰胺的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在制备三聚氰胺单克隆抗体的基础上建立了一种用于检测牛奶中三聚氰胺含量的间接竞争酶联免疫检测方法,采用一步法操作,评估了方法的回收率、准确度、精密度和特异性,并利用液相色谱―串联质谱法进行了盲样确证试验。结果显示,该方法的线性检测范围为10~810 ng/mL,灵敏度为10 ng/mL,回收率为84.0%~90.0%,同类似物交叉反应率均小于0.1%。本试验建立的ELISA一步法能满足牛奶中三聚氰胺的检测要求。 相似文献