高温米糠粕中蛋白质的提取工艺优化

米糠粕在热稳定化加工过程中蛋白质容易发生变性,导致可溶性蛋白减少,给米糠蛋白的提取带来困难。为了研究高温米糠粕中蛋白的提取工艺,本试验比较了碱法、碱法+超声波、碱法+超声波+碱性蛋白酶三种方法,结果发现,采用碱法+超声波+碱性蛋白酶提取的米糠蛋白得率最高,为3.98%;然后考察了碱性蛋白酶添加量、酶解时间、酶解后pH值对蛋白得率的影响。在单因素试验的基础上,采用正交试验对米糠蛋白的提取工艺进行了优化,结果表明,三个因素均是影响米糠蛋白得率的极显著因素,影响顺序依次为酶解时间>蛋白酶添加量>酶解后pH值;最佳的提取条件为碱性蛋白酶添加量1.5%、酶解时间1 h、酶解后pH值11.0。在此条件下,米糠蛋白得率为7.10%,比优化前(0.12%)提高了6.98%;蛋白含量为70.5%。     

纤维素酶解复合碱提酸沉法提取杏鲍菇蛋白质

为提高杏鲍菇(Pleurotus eryngii)蛋白质的提取率,本试验采用纤维素酶解复合碱提酸沉法进行提取,以料液比、酶的添加量、反应时间和温度为因素进行单因素试验,蛋白质提取率为响应值,利用Box-Behnken进行响应面优化纤维素酶解条件,与单一碱提酸沉法提取蛋白质后的提取率进行比较。试验结果表明,纤维素酶解最佳工艺条件为:料液比1:55,温度40℃,时间100 min,酶的添加量1.5%,复合碱提酸沉后蛋白质提取率为51.36%,显著高于碱提酸沉法的45.89%。因此,纤维素酶复合碱提酸沉法提取杏鲍菇蛋白质优于碱提酸沉法。     

银耳多糖的提取及其在饮料中的应用

研究了银耳多糖的提取工艺 ,结果表明 :酶法浸提效果最佳 ,碱浸提法其次 ,两者均优于热水浸提法。酶法提取银耳多糖溶液的最适条件为 :加水量 1∶5 0 ,加入 1%的果胶酶 ,置于 4 5℃水浴锅中恒温酶解 4 5min ,然后迅速升温至 98℃灭酶 ,并保温浸提 6 0min ;利用银耳多糖的浸提液代替羧甲基纤维素等人工合成稳定剂制作调配型奶饮料 ,结果表明 ,银耳多糖溶液添加量为奶饮料总量的 30 %时 ,按原奶饮料的生产工艺 ,可代替羧甲基纤维素等稳定剂的稳定与增稠作用。制品稳定性好 ,并具有银耳的保健功能。     

香蕉皮中果胶提取工艺的比较研究

以香蕉为试材,研究比较了酸法、酶法、酸酶联用法对香蕉皮果胶的提取效果及最佳提取工艺.结果表明:酸法、酶法、酸酶联用法提取果胶的得率依次为16.57％、17.47％、20.92％,酶法优于酸法,酸酶联用法显著优于酶法和酸法.酸酶联用法提取香蕉皮果胶的最佳工艺为:酸解过程中,料液比1∶20、提取pH 1.0、提取温度70℃、提取时间90min;酶解过程中,纤维素酶用量0.25％、酶解pH 5.0、酶解温度50℃、酶解时间25 min.     

响应面优化酶法辅助提取边麻菇多糖工艺

为了优化酶法辅助提取边麻菇多糖工艺条件,通过单因素试验,研究液固比、酶解时间、pH值和酶复合剂用量对多糖得率的影响,并在此基础上采用响应面法优化提取条件。结果表明:液固比21,酶解时间62 min,pH值5,酶复合剂质量分数1.65%,3次重复验证试验平均多糖得率为(10.96±0.12)%;优化的酶法提取边麻菇多糖的工艺简便易行,可作为边麻菇多糖的提取工艺。     

酶法提取香菇多糖新工艺研究

采用中性蛋白酶酶解法提取香菇中多糖．即在水提香菇多糖前．先用中性蛋白酶处理香菇粗粉，通过实验确定最佳的酶解工艺条件：酶解温度50℃，酶解pH4．8，酶解时间60min，酶与香菇粗粉配比为1．5：100。与传统工艺相比，提取率提高了40％以上．多糖中杂质蛋白质的含量降低了50％。     

碱解醇沉法从酸枣果肉中提取水溶性膳食纤维的工艺研究

以酸枣果肉为原料,采用碱解醇沉法从中提取水溶性膳食纤维(SDF);在单因素试验基础上,采用正交实验研究A(NaOH浓度)、B(料液比)、C(碱解温度)、D(碱解时间)对酸枣果肉水溶性膳食纤维得率的影响。结果表明:4个因素对酸枣果肉水溶性膳食纤维得率的影响大小为ACBD;优化选择出酸枣果肉水溶性膳食纤维最佳提取工艺为碱解温度90℃,料液比1∶8g/mL,NaOH浓度8%,碱解时间60min,在此条件下水溶性膳食纤维的得率可达40.42%。     

微波协同酶法提取玫瑰花渣多糖工艺优化

为有效解决玫瑰花渣多糖提取率过低的问题,本试验创新性地采用微波协同酶法提取玫瑰花渣多糖,通过单因素试验、正交试验优化提取工艺。结果表明,微波协同酶法提取玫瑰花渣多糖的最佳工艺为纤维素酶添加酶量4.2%,酶解温度50℃,酶解pH值4.4,微波功率650 W,微波处理时间4 min,料液比1:30,此时多糖得率为6.53%。其中酶解温度和微波功率是主要影响因素。与传统热水浸提法、微波法、超声法、酶法等提取方法比较,该方法提取条件温和,多糖得率较高。     

香菇子实体多糖分步酶解法提取研究

首先采用正交试验优化纤维素酶﹑果胶酶和木瓜蛋白酶对香菇(Lentinula edodes)子实体多糖酶解提取的工艺参数,然后在优化酶解条件下,依次采用纤维素酶﹑果胶酶和木瓜蛋白酶分步处理香菇子实体以提取香菇多糖,并与单一酶解提取法和传统热水浸提法进行对比.结果表明,纤维素酶﹑果胶酶﹑木瓜蛋白酶的最佳提取工艺参数依次为加酶量0.8%、温度45 ℃、pH 4.5、提取时间1 h,加酶量1.0%、温度45 ℃、pH 3.5、提取时间2.0 h和加酶量1.0%、温度45 ℃、pH 4.0、提取时间1.5 h;在优化提取条件下,分步酶解法提取香菇粗多糖的提取率可达14.17%,比传统热水浸提法提高128.2%,比单独采用纤维素酶﹑果胶酶﹑木瓜蛋白酶酶解提取分别提高了43.71%、46.99%和23.11%.紫外光谱分析表明,分步酶解法提取的香菇多糖纯度明显高于热水浸提法提取的香菇多糖.-     

提取方法对红枣色素抗氧化活性的影响

以枣皮为试材,采用碱提、超声辅助碱提、酶-超声辅助碱提3种方法提取红枣色素,并比较了不同提取方法获得的红枣色素清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧自由基(O_2~)、亚硝基(NO_2~)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基、H2O2能力及还原能力,以探究红枣色素的最适提取方法。结果表明:3种方法提取的红枣色素均具有较好的自由基清除能力,且碱提取色素对DPPH·、O_2~、·OH、NO_2~、H2O2清除能力较强;当色素质量浓度大于0.25mg·mL~(-1)时,酶-超声辅助碱提取色素对ABTS+·清除能力最强;当色素质量浓度大于0.4mg·mL~(-1)时,还原能力强弱依次为碱提取色素酶-超声辅助碱提取色素超声辅助碱提取色素。不同方法提取色素的抗氧化活性有一定差异,以碱提取色素最佳。     

酶法提取椰子蛋白质及其对亚基的影响

研究酶制剂的种类、用量、提取温度、pH、料液比等因素对椰子蛋白质提取率的影响,通过正交试验研究最佳的提取条件。得到的椰子蛋白质进行SDS-PAGE分析,研究酶法提取对椰子蛋白质亚基组成的影响。结果表明,添加质量分数0.3%的风味蛋白酶的提取效果最好,各因素对提取率影响的次序为:料液比>pH>温度>提取时间,其中,料液比和pH对提取率的影响达到了显著水平;最佳工艺参数为:酶质量分数0.3%、50℃、pH8.5、料液比1∶15和时间2h,在此条件下,椰子蛋白质的提取率为78.28%。SDS-PAGE分析表明,风味蛋白酶对椰子蛋白的酶解作用十分显著,与缓冲溶液提取的椰子蛋白质相比,酶法提取的椰子蛋白质中小分子质量亚基含量很高。     

UV-spectrophotometric screening of 5α-reductase inhibitors for benign prostatic hyperplasia treatment

AIM: Tranditional methods of screening drugs for benign prostatic hyperplasia (BPH) requires senile male animals such as dogs or rats. It consumes a long time to get the results. Over-expression of type Ⅱ5α-reductase in prastate induces BPH. A fast and efficient screening model of type Ⅱ5α-reductase inhibitors for BPH was set up in this paper. METHODS: Microsomes were extracted from male Sprague-Dawley rat livers by gradient centrifugation. Type Ⅱ5α-reductase enzyme-catalyzed reaction was assayed by UV-spectrophotometry using testosterone as a substrate and NADPH as hydrogen donor. The change of enzymatic activity was recorded with a NADPH wavelength of 340 nm by subtracted descending velocity of the control (without 5α-reductase). Effects at different conditions (temperatures, pH, enzyme and testosterone concentrations) on 5α-reductase were assayed. RESULTS: The suitable condition of type Ⅱ5α-reductase reaction was defined as concentration of 109.05 mg protein/L enzyme (pH 6.00) with 2 μmol/L testosterone at 37 ℃. Michaelis constant of type Ⅱ5α-reductase was 0.6 μmol/L. Finasteride, a new drug for BPH, significantly inhibited activity of type Ⅱ5α-reductase. IC50 of finasteride was 64.1 nmol/L. As solvent of drugs, concentration of ethanol below 1.1% did not inhibite enzymatic activity (P>0.05). Concentration of ethanol above 1.6 % could obviously suppress enzymatic activity (P<0.01). Daytime difference within five days had no significant difference (P>0.05). CONCLUSION: A handy and fast screening method for type Ⅱ5α-reductase inhibitors has been set up using UV-spectrophotometry. It may be used to screening drugs for BPH treatment.     

香菇柄多糖蛋白提取的研究

本文报道了一种经过粉碎→酶解→分离→提纯香菇中多糖及氨基酸方法。实验结果表明：香菇中各部分的营养成分存在差异，但采用复合酶提取法，由菇盖和菇柄所得提取物在营养成分上的差距明显缩小，如两者总氨基酸中所占必需氨基酸的比例趋于相近，相比于热水浸提法而言，总氨基酸含量提高２倍，多糖含量提高４倍，某些特殊成份的含量也显著得以提高。     

刺梨果渣栽培平菇及其酶法提取菌糠氨基酸工艺研究

刺梨中含有丰富的营养成分,经榨汁的刺梨果残渣仍可作为一种可持续化利用资源。为充分利用刺梨果渣中的有效成分,首先利用刺梨渣果栽培平菇(Pleurotus ostreatus),通过混料设计优化平菇培养基配方;完全出菇后剩余的菌糠通过酶法提取其氨基酸成分,并通过响应面法优化提取工艺。结果显示,通过混料设计优化平菇培养基配方为刺梨果渣73%、玉米面19%、普钙3%。经验证该配方比例下,平菇菌丝长满菌袋的周期为25 d,生物转化率为126%;通过响应面法优化菌糠氨基酸提取的工艺条件为酶用量0.39%,酶解温度40.9℃,酶解时间4.3 h,pH值6.5。经验证该条件下,氨基酸提取率为7.92%。结果表明,刺梨果渣可用于平菇的栽培,且能缩短菌丝长满菌袋的周期,提高产量。酶法提取可作为菌糠氨基酸提取的一种适宜方法。     

酶法提取竹荪深层发酵菌丝体多糖的研究

本文讨论了竹荪深层发酵菌丝体多糖的提取方法，考察了多糖及还原性寡糖的含量。实验结果表明，利用夏合酶法处理结合热水浸提的提取方法，能显著提高可溶于热水的多糖及还原性寡糖的浸提率，且缩短浸提时间，竹荪多糖提取率达４．５８％（ｌｇ多糖／１００ｇ菌丝干粉），总糖提取率达到ｌ．８４％ｃ。同时还考察了酶法提取的最佳条件。     

覆盆子在核桃乳中的应用

以水提、醇提、酶提、复合式提取4种方式提取覆盆子果实。通过对提取液的物理参数和有效物质含量进行测定,最终确定以复合式提取方式提取覆盆子为最佳。将提取液与养元核桃乳按不同配比进行混合,选定最适波长为680nm,观察不同比例的核桃乳的稳定性,获得具有覆盆子营养物质的核桃乳。结果表明:核桃乳和覆盆子提取液的最佳配比为20∶5。覆盆子提取液与核桃乳混合而成的复合饮料,不仅使核桃乳风味独特,并且增加了覆盆子的营养成分,丰富了饮料种类,促进了覆盆子的深加工。     

百合鳞茎淀粉磷酸化酶分离纯化及酶学性质研究

 从兰州百合（Lilium davidii var. unicolor）鳞茎中分离纯化淀粉磷酸化酶（Starch Phosphorylase,SP）并研究其酶学性质。结果表明：选用30% ~ 60%硫酸铵分级沉淀,SP 纯化倍数为14.78,回收率为23%,纯化的SP 亚基分子量约62.5 kD;SP 的最适反应体系缓冲液为pH 5.0 的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,最适反应温度为30 ℃,且体系中不适合加入酚类抑制剂聚乙烯吡咯烷酮（PVP）;SP 不耐强酸,在中性和弱碱性条件下活性稳定,pH < 5 时活性较弱;在合成方向上,SP 对葡萄糖–1–磷酸（G-1-P）的Km值为2.84 mmol · L-1;1 mmol · L-1 Mg2+、Ca2+对SP 活性有极显著的促进作用,K+、Zn2+也有一定的促进作用;大部分离子在高浓度（> 10 mmol · L-1）下抑制SP 活性,但Na+随着浓度的升高,对SP 活性的促进作用增强;10 mmol · L-1 的抗坏血酸可将SP 活性提高30%。     

银杏叶片可溶性蛋白质测定非直线性原因分析

曾报告用考马斯亮蓝法测定银杏叶片可溶性蛋白质含量缺乏直线性,猜想其可能具有较高的蛋白水解酶活性。研究表明,银杏叶片蛋白水解酶用ｐＨ７．０缓冲液提取时活性最高,酶活最适ｐＨ５．５~６．０,因而不能解释ｐＨ８．３缓冲液提取出的蛋白质含量下降的原因。比较不同的蛋白质测定方法表明,双缩脲法测得的ＯＤ５４０值相当稳定,而考马斯亮蓝法测定的ＯＤ５９５值随时间延长而升高;同样比色５ｍｉｎ,双缩脲法测得的蛋白质浓度比考马斯亮蓝法高２０~３０倍,说明银杏叶片蛋白质不能迅速溶解于酸性考马斯亮蓝显色液是其测定非直线性的主要原因。