黄瓜种质核心样本构建方法初探

 对来自不同国家或地区的90份代表性黄瓜种质进行了RAPD分析, 并利用其数据对构建黄瓜核心样本的方法进行了探讨。在聚类分析的基础上, 分别按初选核心样本的10%、15%、20%、25%、35%和45%抽取核心样本, 通过对它们的多态位点数、丢失位点数和遗传多样性指数的比较, 认为25%左右是构建黄瓜种质核心样本较为理想的比例; 另外经过对组内随机取样法、最大离差度法和最大遗传距离法3种不同抽样方法的比较, 认为最大遗传距离法较为适合用RAPD数据构建黄瓜核心样本。进一步的验证表明, 按上述方法构建的核心样本能比较好地代表初选核心样本, 同时也不能忽视保留样本的作用。     

基于形态数据的大白菜核心种质构建方法的研究

 以国家蔬菜种质资源中期库收集保存的1 651份大白菜种质为试材,按照大白菜分类系统和生态型,采用分层分组法,将所有种质分为6组。基于43个形态性状的数据,比较了4种组内取样比例法、6种总体取样规模和2种取样方法在构建大白菜核心种质中的作用和效果。结果表明：组内以多样性比例法更能使各组的取样份数或比例趋于平衡,并较好地保持原始收集品的变异度。当总体取样规模为15%时,多样性比例法所构建的核心种质的遗传多样性指数达到最大,表型保留比例亦能达到98％左右;而当总体取样规模增加到20%以上时,虽然表型保留比例接近100％,但核心种质遗传多样性指数迅速降低。因此,认为15%总体取样规模较为合适。在一定的组内取样比例法和总体取样规模下,聚类取样构建的核心种质的遗传多样性指数（I）、表型保留比例（RPR）和变异系数（CV）均比随机取样的高。根据获得的优化方案最终在表型水平建立了包含248份种质的中国大白菜核心种质。     

基于果实相关性状的桃品种初级核心种质取样策略研究

以国家种质资源圃(北京)编目的558份桃品种的18个形态学和农艺学性状为基本数据,研究了桃品种初级核心种质构建的取样策略,包括总体取样比例的确定及取样方案的选择,以获得最佳的初级核心种质。本试验共设10%～90%9个总体取样比例;取样方案研究包括分组原则和组内取样比例的确定。结果表明,桃初级核心种质的适宜总体取样比例为10%;按品种类群分组结合多样性比例取样为构建桃初级核心种质的最佳取样方案;利用此取样策略从558份桃品种中提取56份作为核心样本,对其代表性进行检测表明所构建的初级核心种质能够很好地代表桃原始种质的遗传多样性。     

山葡萄种质资源原花青素分布及其含量动态变化

采用香草醛-HPLC结合法对39份山葡萄种质资源及"贝达"的种子、果皮中原花青素含量进行测定,比较了山葡萄种质资源间原花青素含量和分布的特点与差异,并对其中4个山葡萄品种"双优"、"双红"、"双丰"和"双庆"的叶片、茎皮、果皮和种子原花青素动态含量进行测定,分析了原花青素在山葡萄各器官中的变化规律。结果表明:山葡萄种质资源原花青素含量存在较大变异,成熟果实种子与果皮原花青素含量变化幅度较大,变化范围分别为0.42～8.00mg/gFW和1.2～14.7mg/g FW;野生资源与选育品种间、不同花性种质间、不同地域种质间原花青素含量差异均不显著;果皮中原花青素含量高于种子,且差异显著;4个山葡萄品种不同器官原花青素含量动态变化与欧亚种酿酒葡萄存在明显差异,叶片原花青素含量在青果期升高,转色期下降,成熟期小幅度升高;茎皮原花青素含量在青果期升高,转色期、成熟期下降;果皮中原花青素含量在青果期,转色期缓慢升高,成熟期迅速升高;种子原花青素含量在青果期、转色期升高,成熟期下降。     

山葡萄种质资源SSR遗传多样性分析

对360份山葡萄种质资源进行了遗传多样性分析研究。从245对引物中筛选出18对用于供试材料的SSR扩增;单条引物扩增条带为4~13条,平均9.44条;扩增产物长度介于150~1 000 bp,以200~750 bp的扩增片段居多;18对引物共扩增出170条带,其中多态性条带167条,多态性百分率为98.2%;Shannon’s多样性指数(I)为1.778051。某些品种(系)产生了特有SSR标记带,共5条,占2.95%。     

基于果实相关性状的江西野生毛花猕猴桃初级核心种质的构建方法研究

【目的】利用在江西省南城县、宜黄县境内收集的118份野生毛花猕猴桃资源果实的20个表型性状,研究野生毛花猕猴桃初级核心种质的构建方法。【方法】采取逐步聚类,在30%取样比例下,以欧式距离为遗传距离,对3种取样方法(随机取样、偏离度取样和优先取样)、4种系统聚类方法(类平均法、离差平方和法、最长距离法和最短距离法)进行比较,以筛选出的最佳构建策略进一步比较不同取样比例(15%、20%、25%、30%、35%及40%)的构建效果,从而确定最适取样比例。【结果】(1)比较3种取样方法表明,采用优先取样法优于其他2种取样方法;(2)比较4种聚类方法表明,类平均法优于其他3种聚类方法;(3)最适取样比例为30%。【结论】通过主成分分析法验证表明,在30%取样比例下,采取欧式距离,利用类平均法进行逐步聚类,结合优先取样法构建的野生毛花猕猴桃初级核心种质能够最大程度地保留原始种质的遗传信息。     

利用ISSR分子标记构建南疆杏种质资源核心种质

【目的】探讨分子水平构建南疆杏核心种质的方法,建立最适核心种质。【方法】以138份南疆杏种质资源为材料,根据SM、Jaccard和NeiLi遗传距离,采用UPGMA聚类法进行多次聚类,以随机取样策略为对照,利用位点优先取样策略研究核心种质构建的方法;采用丢失的等位基因数以及遗传多样性各指标进行t检验来确定最适构建方法;分别将核心种质与原种质和保留种质进行t检验和遗传多样性比较,以此来评价核心种质的代表性;并用主坐标轴分析法和表型性状对核心种质进行确认。【结果】位点优先取样策略优于随机取样策略;通过Jaccard遗传距离构建的核心种质要优于SM和NeiLi遗传距离;采用主坐标轴分析法和表型数据分析显示,利用位点优先取样策略和Jaccard遗传距离构建的核心种质能够较全面的代表原种质的遗传多样性;31份核心种质资源,保留了原种质22.46%的样品,多态性位点数、多态性位点百分率、观测等位基因数、有效等位基因数、Nei’s遗传多样性指数和Shannon信息指数的保留率分别达到92.37%、97.62%、98.82%、102.52%、107.17%和106.36%。【结论】采用位点优先取样策略和Jaccard遗传距离进行多次聚类,是较适宜的构建南疆杏种质资源核心种质的方法,构建的31份核心种质能全面代表原种质的遗传多样性。     

辽宁省山楂资源微核心种质的构建方法和评价

以30份辽宁省山楂资源为试材,利用35个农艺性状的鉴定数据(形态指标法)、13条ISSR引物的扩增结果(分子标记法)和二者的总体数据(综合法),采用优化的最小距离逐步取样法分别获得了组成不完全相同的8份核心种质资源。再根据原产地把30份资源划分为数量均衡的2组,每组采用同样方法分别获得了由4份不完全相同资源组成的核心种质。通过农艺性状和分子标记位点覆盖率分析了各组资源和所得核心种质的特征。结果发现,不分组时所构建8份核心种质的农艺性状和分子标记位点占有量的累加值明显高于分组又合并所得8份核心种质的各项数据;在本研究中形态指标法构建的核心种质是有效和可用的。     

不同农药组合对山葡萄病虫害防治效果研究

以"双优"山葡萄为试材,比较5种不同农药组合对山葡萄病虫害的防治效果。结果表明:在山葡萄萌芽前喷洒4°Bé石硫合剂、开花前喷洒75%百菌清1 500倍液、花后结果期喷洒1∶0.5∶240的波尔多液、果实膨大期喷90%敌百虫1 000倍液、雨后喷洒1∶0.5∶240的波尔多液、转色成熟期喷洒25%甲霜灵750倍液,可有效的防治山葡萄病虫害的发生,农药残留量符合国家标准。     

山葡萄种质资源枝条的低温半致死温度研究

以山葡萄种质资源的成熟1年生休眠枝条为试材,测定了不同梯度低温处理下电导率的变化,采用相对电导率拟合Logistic方程,计算低温半致死温度(LT50),鉴定不同山葡萄种质资源的抗寒性。结果表明:用Logistic方程进行拟合后,拟合度高,所求低温半致死温度准确可信,可作为山葡萄抗寒性鉴定指标;试验的9份山葡萄种质资源间抗寒性存在一定差异,低温半致死温度范围为-31.98~-39.41℃,种质资源的抗寒性与枝条成熟度无明显相关性。     

完全花山葡萄四倍体种质的发现及鉴定

 山葡萄种质2413为75—2-200(通化3号×双庆)植株的一个枝蔓变异的自然授粉后代。对2413及75-2-200进行了形态学、组织学、孢粉学、细胞学鉴定。结果表明,2413叶片大而厚,叶柄和枝条粗壮,节间长,气孔大,花粉粒大,花粉发芽率低,体细胞染色体2n：76,证明其为四倍体。     

山葡萄花序蛋白质双向电泳技术体系的建立

【目的】为开展山葡萄花序蛋白质组学研究。【方法】以山葡萄(Vitis amurensis Rupr)花序为试材,通过对蛋白质提取方法、裂解液成分、胶条pH梯度的改进,建立了适于山葡萄花序蛋白质组学研究的最佳双向电泳技术体系。【结果】采用酚提取法提取花序蛋白质,用含有硫脲和DTT的裂解液Ⅱ裂解,选用17 cm pH 4～7的IPG胶条在适宜的双向电泳条件下分离,可以获得分辨率高、背景清晰且重复性好的双向电泳图谱,可以检测出1 088个清晰的蛋白点。【结论】酚提取法适于山葡萄花序蛋白质的提取,硫脲和DTT可增强花序蛋白质的溶解性。     

不同调控措施对山葡萄生理落果的影响

严重的生理落果会造成山葡萄产量及品质的下降。山葡萄花期之前采取疏花、摘心、喷施叶面肥及植物生长调节剂等调控措施,对提高山葡萄坐果有明显的促进作用。结果表明,花前留6片叶摘心、喷施0.2%硼酸和人工减掉花序长度的1/5,落果率分别为55.33%、47.96%和50.84%,均显著低于对照。     

山葡萄生长过程中不同组织部位白藜芦醇含量的变化

以"左山一"山葡萄为试材,应用HPLC技术,研究山葡萄叶、茎、卷须、果实生长过程中白藜芦醇含量的变化规律。结果表明:不同组织部位的白藜芦醇含量在整个发育过程中都呈现先增长后下降的变化趋势,白藜芦醇含量由高到低的顺序为叶、卷须>茎>种子>果皮果肉。叶中白藜芦醇含量最高,达20.12μg/g。     

山葡萄的花型遗传

对１５个杂交组合１１３８株山葡萄种内杂交后代的花型进行了调查，结果表明：山葡萄花型的遗传符合Ｌｅｖａｄｏｕｘ（１９４６）的假说〔１〕，受Ｍ．Ｈ．Ｆ３个等位基因控制。野生状态下，雄花植株基因型为异质ＭＦ；目前发现唯一的两性花种质资源‘双庆’基因型为异质ＨＦ；雌能花植株基因型为ＦＦ；人工杂交以后可以产生基因型为ＨＨ的两性花植株和基因型为ＭＨ的雄花植株。     

山葡萄‘双红’、‘双优’在戈壁滩上栽培的表现

报道我国西部栽培的‘双红’和‘双优’两个山葡萄品种不埋土能正常越冬,调查、测定和分析这两个山葡萄品种在冬季寒冷、冬春又极干旱的西部戈壁滩上栽培的生产表现。两个山葡萄品种根系耐低温能力比欧亚种酿酒葡萄品种强,枝条保水能力更强,因此,在干旱荒漠的戈壁石砾地上不埋土能安全越冬和抗御春日多风和干旱。一年生枝条长势好,花芽能正常形成,但在开花季节花序干枯和脱落现象严重。‘双红’、‘双优’山葡萄表现生产性能差、果穗少、果穗小、穗重轻、果粒小,故产量低,仅为原产地的1／3,但其品质好,可溶性固形物高出3．9～4．6个百分点。为使‘双红’、‘双优’在河西戈壁滩上栽培,既不埋土又有较高的产量,提出一些解决措施。     

干旱胁迫对山葡萄光合作用及光响应特性的影响

采用盆栽试验研究了干旱胁迫对"左山一"和"双丰"山葡萄当年生扦插苗光合作用及光响应特性的影响。结果表明:干旱胁迫能显著降低山葡萄的最大净光合速率(Pnmax)、光饱和点(LSP)和表观量子效率(AQY),而光补偿点(LCP)和暗呼吸速率(Rd)得到显著提高。无论在正常供水还是各种干旱胁迫处理情况下,净光合速率(Pn)、蒸腾速率(E)和气孔导度(Gs)都随光强增加呈逐渐上升的趋势,而后趋于平缓,胞间CO2浓度(Ci)随光强的增加呈下降趋势而后趋于平缓;与CK相比,各梯度干旱处理的山葡萄Pn、E和Gs值均低于CK,Ci随干旱胁迫程度的加重先降低后升高。因此认为,山葡萄对干旱胁迫敏感,生产中在山葡萄的生长季节要保证充分灌水。     

山葡萄性别相关AFLP分子标记的筛选及SCAR标记的转化

 山葡萄是一种重要的抗寒、抗病葡萄种质资源。通过AFLP分子标记方法,应用64对引物组合EcoR I-NNN/Mse I-NNN对山葡萄雌花、雄花和完全花植株基因池进行筛选,引物E-AGC/M-CTG在雄花和完全花植株基因池DNA中扩增出一条分子量为283 bp的特异性条带;经组池个体和其它品系验证,该特异性条带能在雄株和完全植株中稳定出现。将该特异性条带回收、克隆、测序,设计SCAR标记引物,对已知性别的85份山葡萄种质进行盲测,准确率达到97.6％,表明标记转化成功。由于该SCAR标记在绝大多数山葡萄栽培品种和有育种价值的种质资源中得到验证,可利用该SCAR标记对山葡萄杂交后代在苗期进行性别鉴定,提高育种效率。