减少非洲猪瘟病毒接触后发病的“五分”策略

让非洲猪瘟病毒不接触到猪是一个理想的防控非洲猪瘟的策略,但在万一非洲猪瘟病毒突破围墙、“铁桶”屏障进入猪场的情况下,决不可“坐以待毙”,必须预先“以猪为本”筑起一道物理性、生物性防控屏障,使得“非洲猪瘟病毒+猪≠非洲猪瘟”的这个“不等式”能够成立。     

黄芪多糖对肉鸡脾淋巴细胞转化及信息分子的影响

本实验研究了黄芪多糖对肉鸡脾淋巴细胞转化率及细胞内信息分子 -一氧化氮 (NO)、Ca2 + 及 c AMP、c GMP的影响。发现黄芪多糖能剂量依赖性促进脾淋巴细胞转化率及细胞内 NO、Ca2 + 浓度 ;当作用时间为 2 0 min时 ,4 0 μg/ ml黄芪多糖能增加 c AMP浓度 ,降低 c GMP浓度 (P<0 .0 1) ;而当作用时间为 6 0 m in,对 c AMP和 c GMP浓度无显著影响。以上结果提示 ,黄芪多糖能显著提高脾淋巴细胞免疫功能 ,其作用是通过改变细胞内信息传导实现的。     

肉仔鹅能量需要和日粮代谢能水平的研究

应用禽用呼吸测热装置 ,对 66只溆浦鹅与吉林白鹅的杂交后代进行育雏期和生长期能量代谢研究。结果表明 :肉仔鹅 ME、MEm和 MEg需要量 ,体重在 1 kg左右时 ,分别为 1 474、499和 975k J/ d·只或 1 554、52 6和 1 0 2 8k J/ kg0 .75· d;体重在 3kg左右时 ,分别为 2 4 4 8、1 0 2 9和1 41 9k J/ d·只或 1 1 1 9、470和 649k J/ kg0 .75· d。育雏期日粮 ME水平为 1 1 .37MJ/ kg,生长期为1 1 .83MJ/ kg,能量利用率和经济效益均比较理想     

Clade2.3.2.1c H5N1亚型禽流感疫苗候选株的构建

近年来clade2.3.2.1c中的H5N1亚型禽流感病毒的抗原性发生了很大变化,Re-6疫苗并不能对其提供有效保护。为对该分支毒株进行有效防控,研究以A/Puerto Rico/8/34(H1N1,PR8)毒株为内部基因供体,以clade2.3.2.1c的H5N1亚型毒株A/chicken/Jiangsu/YB7/2015(YB7)的HA和NA基因作外部供体,并删除YB7株HA中裂解位点处的多个碱性氨基酸,通过反向遗传方法成功拯救出1株重组病毒r YB7。r YB7株病毒在鸡胚和MDCK细胞上均有较好的繁殖性能,对SPF鸡胚和鸡均无致病性。本实验室在对毒株抗原性研究的基础上研发的疫苗候选株为防控变异的clade2.3.2.1c的禽流感病毒提供了良好的疫苗备选。     

重组鸭β-防御素-2对肉鸭生长性能的影响

试验旨在研究鸭β-防御素-2制剂对肉鸭生长性能的影响.将试验雏鸭分为5组,每组4个重复,每重复50只鸭.A组为基础饲粮(不合任何抗生素);B组为基础饲粮+抗生素;C组为基础饲粮+重组鸭β-防御素-2制剂(300 g/t);D组为基础饲粮+重组鸭β-防御素-2制剂(450g/t);E组为基础饲粮+重组鸭β-防御素-2制剂(600g/t).结果表明:50日龄肉鸭末质量,C组比A和B组分别高4.09％和3.10％,均具有显著差异.日均增质量,C组比A和B组分别高4.17％和3.25％,差异均显著.日均采食量,E组比D组高6.49％,差异显著.料重比,C组比A、B和E组分别低3.05％、3.05％和5.71％,差异显著;D组比A、B和E组分别低3.91％、3.91％和6.54％,差异显著.结果表明:重组鸭β-防御素-2制剂对肉鸭生长性能均有正面效果,但添加不同剂量的效果有差异.     

猪卵泡抑制素α模拟肽基因在大肠杆菌中的融合表达

克隆了猪抑制素 α1 - 3 2 基因 (简称抑制素基因 ,INH) ,与 p ET- 32 c载体的 Thioredoxin基因重组 ,表达的 INH-Thioredoxin融合蛋白相对分子质量约 140 0 0 ,在 E.coli DH5α中表达效率较高。在 IPTG浓度为 0 .34 0 m mol/L、诱导16 .8h条件下 ,有最大表达量 ,电泳扫描净灰度达 38.78%。     

猪圆环病毒2型感染裸鼠及BALB/c小鼠的研究

用猪圆环病毒2型（PCV2）经腹腔注射BALB/c小鼠及裸鼠各15只,每隔2周1次,共感染3次.BALB/c小鼠初次、再次感染后均未出现明显的临床症状,仅有2只小鼠出现病理变化;从血清中可检测到PCV2核酸及其ORF2抗体;同时淋巴细胞增殖反应显著增强,NK和CTL细胞杀伤率显著升高;CD4^＋、CD8^＋、CD3^＋T淋巴细胞及CD19^＋B淋巴细胞数量显著减少.裸鼠也未出现明显的临床症状,从血清中可检测到PCV2核酸,但未检测到PCV2 ORF2抗体;除NK细胞杀伤率显著升高外,其余免疫学指标无显著改变.结果表明,BALB/c小鼠比裸鼠对PCV2易感,各项免疫学指标变化与PCV2感染猪一致,但不表现临床症状,仅个别BALB/c小鼠出现病理变化,说明BALB/c小鼠对PCV2不如猪易感.     

中草药添加剂与土霉素对荣昌仔猪生长及腹泻的比较研究

本试验采用完全随机分组试验设计 ,共设 4个组 :组 1为对照组 ,饲喂基础日粮 ;组 2为基础日粮 +10 0 mg/ kg土霉素 ;组 3为基础日粮 +中草药配方 1(2 .0 % ) ;组 4为基础日粮 +中草药配方 2 (2 .0 % ) ,分别对 30日龄左右的断奶荣昌仔猪进行为期 30 d的比较试验。试验结果表明 :中草药配方 2的效果最好 ,与对照组相比 ,能明显提高断奶仔猪的日增重 (ADG) (P<0 .0 5 ) ,显著降低料肉比 (F/ G)和腹泻率 (P<0 .0 1) ;而且经济效益较高 ,在饲料生产中可以作为抗生素添加剂的理想替代品。     

肝螺杆菌感染促进四氯化碳导致的BALB/c小鼠肝纤维化研究

为探讨肝螺杆菌(Helicobacter hepaticus,H.h)感染对四氯化碳(CCl₄)致BALB/c小鼠肝纤维化病程的影响,选取5～6周龄雄性BALB/c小鼠40只,随机分为4组(对照组、H.h组、CCl₄组、H.h+CCl₄组)。H.h和CCl₄组分别采用灌胃法和腹腔注射法处理,分别于H.h感染后4和12周进行采样,检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,分别采用HE染色、天狼猩红染色、免疫组化法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小鼠肝脏纤维化情况。结果显示：处理4周时,CCl₄组和H.h+CCl₄组小鼠出现轻度肝纤维化,其他组未见明显病变;处理12周时,与H.h组相比,H.h+CCl₄组小鼠肝脏中H.h活菌量显著升高(P>0.01),血清中ALT和AST均显著升高(P>0.01),肝脏中大量胶原纤维沉积,炎症和纤维化相关因子转录水平显著升高(P>0.01...     

口服猪A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌对BALB/c小鼠的免疫保护作用

将轮状病毒pW425et-Vp4乳酸菌重组质粒口服免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间眼球采血脱臼处死,收集小鼠血清、脾细胞及肠道内容物,用ELISA方法检测血清IgG水平,用试剂盒检测肠黏膜SIgA水平,以流式细胞仪检测CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群和CD19+B细胞亚群的变化情况,最后进行攻毒试验。结果显示,pW425et-Vp4基因工程乳酸菌口服免疫小鼠血清IgG及肠黏膜SIgA水平较对照组有明显差异,且S/N2.0,CD4+/CD8+比值显著高于对照组,且比值大于2:1;表明猪A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌重组表达质粒可以增强小鼠机体免疫保护能力。     

结核分枝杆菌rv3036c基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

为制备结核分枝杆菌(Mtb) rv3036c基因的多克隆抗体,本研究以Mtb强毒株H37Rv基因组DNA为模板,扩增rv3036c基因,克隆至表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-rv3036c,并转化大肠杆菌BL21(DE3),经1 mmol/L IPTG诱导表达组氨酸标签融合蛋白Rv3036c,采用Ni-NTA His-Bind Resin纯化目的蛋白,经western blot验证纯化蛋白.将Rv3036c蛋白纯化产物免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.SDS-PAGE和western blot分析结果表明,Rv3036c以可溶形式表达,蛋白分子量大小为28 ku,并且具有良好的免疫原性.以上结果为进一步研究rv3036c基因在Mtb的致病性作用奠定了基础.     

SREBP-1c基因重组腺病毒的构建及其在犊牛原代肝细胞中的表达

将携带有化学合成的SREBP-1c基因的质粒先用Xba Ⅰ酶切,Klenow补平突出末端,纯化回收后再用Hind Ⅲ酶切,切胶回收目的基因片段;并将其克隆至用EcoR Ⅴ/HindⅢ酶切回收的pShuttle-EGFP-CMV(-)TEMP穿梭载体上.经酶切鉴定后,重组穿梭质粒和腺病毒pAdxsi质粒分别用I-Ceu Ⅰ+I-Sce Ⅰ双酶切处理,T4DNA连接酶连接,获得重组质粒pAdxsi-GFP-SREBP1c,酶切鉴定后经Pac Ⅰ酶切线性化转染HEK293细胞,经包装扩增后用TCID50测定病毒滴度.以重组腺病毒感染犊牛原代肝细胞,采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中SREBP1c mRNA和蛋白的表达量.结果显示,重组腺病毒酶切鉴定正确,滴度可达1.2×1010,腺病毒感染犊牛原代肝细胞中SREBP-1c mRNA和蛋白的表达显著升高.结果表明,本试验成功构建了SREBP-1c基因过表达重组腺病毒,且SREBP-1c在犊牛原代肝细胞中高度表达.     

囊素对哺乳动物免疫促进作用的研究Ⅱ.不同剂量囊素对猪瘟疫苗接种猪抗体水平的影响

囊素是一种新型的免疫活性物质 ,为了研究其对哺乳动物的免疫促进作用 ,探索正确的使用方法。作者采用不同剂量 (0 .0 3 ,0 .0 6,0 .0 9m L/ kg)囊素与猪瘟疫苗同时接种 3 0日龄仔猪进行试验。在接种后 2周内 ,试验猪没有出现异常临床反应 ,表明囊素与猪瘟疫苗同时使用无不良影响。在接种后 6周内 ,每隔一周检测各组猪瘟抗体水平。结果表明 :囊素按 0 .0 6m L /kg和 0 .0 9m L/ kg剂量与猪瘟疫苗同时使用组其抗体水平明显高于对照组。通过抗体水平比较及统计学分析 ,表明囊素最佳使用剂量为0 .0 6m L/ kg。     

应用MABA法与试管法测定蛇床子素和8-甲氧基补骨脂素体外抗结核活性的研究

为筛选有开发价值的抗结核中草药,本研究通过MABA(Microdilution MABA Assay)与试管法分别测定蛇床子素和8-甲氧基补骨脂素对结核分支杆菌H37Rv(ATCC27294)和H37Ra(ATCC25177)的体外抗菌活性,即最低抑菌浓度(MIC),同时比较两种方法的检测结果;并以MTT法研究蛇床子素和8-甲氧基补骨脂素对Balb/C小鼠的脾细胞和肝细胞的细胞毒性试验。蛇床子素和8-甲氧基补骨脂素对这两种结核菌的最低抑菌浓度分别均为32μg/mL和128μg/mL,并且对BALB/c小鼠的脾细胞和肝细胞均无毒性。MABA法与试管法相比较,完全符合率为90%(9/11),具有较好的一致性。本研究为蛇床子素和8-甲氧基补骨脂素作为抗结核药物的开发及它们的抗菌机制研究奠定了基础。     

酵母硒和苜草素联用对产蛋后期蛋鸡蛋品质、抗氧化能力和胆固醇代谢的影响

本试验旨在研究不同水平酵母硒和苜草素联用对产蛋后期蛋鸡蛋品质、抗氧化能力和胆固醇代谢的影响。试验选取756只69周龄海兰褐蛋鸡,随机分为7组,每组6个重复,每个重复18只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加0.2 mg/kg酵母硒+500 mg/kg苜草素、0.2 mg/kg酵母硒+1 000 mg/kg苜草素、0.6 mg/kg酵母硒+500 mg/kg苜草素、0.6 mg/kg酵母硒+1 000 mg/kg苜草素、1.0 mg/kg酵母硒+500 mg/kg苜草素和1.0 mg/kg酵母硒+1 000 mg/kg苜草素。试验预试期2周,正试期8周。结果表明:1)饲粮添加酵母硒和苜草素可显著提高蛋鸡产蛋率(P0.05),显著降低料蛋比(P0.05),有提高鸡蛋蛋壳强度、蛋白高度和哈氏单位的趋势。2)饲粮添加酵母硒和苜草素极显著提高蛋鸡血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总超氧化物歧化酶活性、肝脏GSH-Px活性以及肝脏GSH-Px1、硫氧还蛋白还原酶1 mRNA表达量(P0.01);极显著降低蛋鸡肝脏甘油三酯含量和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶mRNA表达量(P0.01),极显著提高肝脏胆固醇7α-羟化酶和固醇调节元件结合蛋白-1c mRNA表达量(P0.01);极显著提高蛋黄硒含量(P0.01)。3)添加0.6 mg/kg酵母硒+1 000 mg/kg苜草素可极显著提高蛋鸡血浆总抗氧化能力(P0.01),极显著降低蛋鸡血浆丙二醛含量(P0.01),极显著降低蛋黄胆固醇和甘油三酯含量以及肝脏胆固醇含量(P0.01)。综上,饲粮中添加酵母硒和苜草素可提高产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质、抗氧化能力及胆固醇代谢功能,以0.6 mg/kg酵母硒+1 000 mg/kg苜草素组合效果最佳。     

乐果诱导大鼠肝胞凋亡的分析

为研究乐果对大鼠肝细胞凋亡的影响,将24只SD大鼠分成对照组和3个染毒组,分别按体质量以0、1、6和30 mg·kg-1的剂量灌服乐果,连续灌服30 d后,观察肝脏组织学和超微结构变化.同时,通过给大鼠肝细胞培养液中加入乐果(染毒终浓度分别为0、3、10、30、100和300 μmol·L-1),染毒12、24 h后,Annexin V/PI双染法检测肝细胞凋亡率;分别用Fluo-2/AM、双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)和罗丹明123检测细胞内Ca2+浓度、活性氧(ROS)和线粒体膜电位(△ψm)变化.结果表明,组织学和超微结构检查显示肝细胞脂肪变性、凋亡等.肝细胞染毒12和24 h后,细胞凋亡率明显升高,除3 μmol·L-1组外,与对照组相比差异显著(P<0.05或P<0.01),且呈时间-剂量效应;3μmol·L-1组细胞内Ca2+浓度极显著高于对照组(P<0.01),之后随染毒剂量的增加,细胞内Ca2+浓度逐渐下降;细胞内ROS水平在3～100μmol·L-1范围内随染毒剂量的增大和染毒时间的延长而升高,而在300 μmol·L-1组略有下降,除3μmol·L-1组外,与对照组相比均差异极显著(P<0.01);△ψm除24 h高剂量染毒组(300 μmol·L-1)外均出现持续下降,30～300 μmol·L-1组均小于对照组(P<0.01).本研究表明低剂量乐果染毒可诱导肝细胞发生凋亡,细胞内Ca2+、ROS和△ψm可能参与了这一过程.     

日本矮生沿阶草愈伤组织的诱导及其分化

选用不同外植体和不同培养基,对日本矮生沿阶草Ophiopogon japonicus进行了愈伤组织的诱导及分化的研究.结果表明:幼嫩叶片的基部是最适宜诱导愈伤组织的外植体.G3(MS+KT 0.2 mg/L +2,4-D 0.1 mg/L)培养基的愈伤组织的诱导率达到89%以上,将诱导的愈伤组织置于J1(MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L)培养基中的愈伤组织的分化率最高,达到59%.因此,选用幼嫩的叶片基部置于G3培养基进行诱导,继代一次后置于J1培养基进行分化是最有利于再生的途径.     

规范ε-Ricci流下一类几何算子特征值的研究

考虑度量满足规范ε-Ricci流的闭的n维黎曼流形,给出一类几何算子-Δ+c R的特征值的发展方程,其中常数c≥1/4,R是流形上的数量曲率。作为应用,在闭曲面上证明了这类几何算子的特征值沿着规范ε-Ricci流保持单调性,从而推广了前人的相关研究结果。     

超声辅助提取玉米皮中黄色素及其稳定性研究

以玉米皮为原料,采用超声波辅助提取玉米皮中黄色素。探讨了料液比、超声温度、超声时间、乙醇体积分数对玉米黄色素提取率的影响。结果表明,最佳工艺条件为:料液比1:18g/mL、超声时间30min、超声温度60℃、乙醇体积百分数80%,在此条件下,玉米黄色素的提取效果最好。稳定性研究表明,玉米黄色素在温度较低时,稳定性较好,而温度较高时,稳定性略差;在中性偏酸时,稳定性较性高,而在强酸或者强碱性条件下,其稳定性较差;Al3+和Fe3+对玉米黄色素的稳定性影响较大,Mg2+、Zn2+和Fe2+对玉米黄色素稳定性的影响不大。     

菜粕替代面粉对黄颡鱼生长性能和形体指标的影响

本研究在黄颡鱼商业配方中使用不同比例的菜粕替代面粉,观察对黄颡鱼生长性能、鱼体品质指标的影响.试验配制了3组黄颡鱼膨化配合饲料,包括面粉组(面粉18％+菜粕0％,能蛋比38.80 kJ/g)、6％菜粕组(面粉12％+菜粕6％,能蛋比35.71 KJ/g)和10％菜粕组(面粉8％+菜粕10％,能蛋比34.99 kJ/g)...