随机扩增多态性DNA技术的原理及应用

1985年,美国人Kary Mullis等发明了PCR技术,两年后PCR自动化装置仪器的完成使基进入实际应用的阶段,该装置用于扩增特定的模板DNA,使DNA的量成倍增加,可用于各种用途的DNA分析。1990年,由杜帮公司的Williams等人基于PCR技术之上首次推出了一种简便、灵敏可行的新的遗传标记技术——随机扩增多态性DNA（Random amplified poly-morphic　DNA,RAPD）[1]。尽管RAPD技术诞生的时间很短,但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及简便快速的特点,且具有可用引物数量大,检测区域几乎覆盖整个基因组,多态信息含量大等,使得该技术已渗透到分子生物学领域基因研究的各个方面。可以预料,该技术的发展会使分子遗传学得到更广泛的应用。     

随机扩增多态DNA（RAPD）技术在鹅育种上的应用

本文用4种引物（OPH5、OPH13、OPH16和OPF4）对隆昌鹅、太湖鹅和新太湖鹅进行基因组DNA、RAPD分析。结果表明：三种鹅都有特异性的条带,扩增DNA条带都表现为多态性,条带数为3-12条,大小范围在0.36-0.38kb之间,多态频率为72.14%;RAPD标记可作为一种辅助手段来比较鹅群体的遗传变异性,太湖鹅遗传变异性大于隆昌鹅;OPF-04很可能用作区分隆昌鹅与太湖鹅的标记性引物。     

藏系绵羊随机扩增多态性DNA最佳反应体系的研究

以高原型藏羊的基因组DNA为模板，通过对RAPD反应体系中的各种参数进行优化试验，建立了适宜于藏系绵羊RAPD分析的最佳反应体系：在PE2400型DNA扩增仪的25μL反应体系中，模板DNA的量为60－120ng，引物量为4－8pmol，Mg^2 浓度为2.0mM，Taq DNA聚合酶为1－2.5U,dNTP浓度为150－200μM;94℃预变性3分钟后35次循环的参数设定为：94℃1分钟，36℃1分钟，72℃2.5分钟，最后72℃延伸10分钟，利用这些条件对藏系绵羊的基因组DNA进行RAPD分析，其结果的重复性和可靠性大为提高。     

鸭沙门菌的随机扩增多态性DNA分析

以5株同一血清型的鸭沙门茵为研究对象，分别提取基因组DNA后，用20条随机引物对其进行RAPD分析。结果，20条随机引物中不能扩出任何条带的引物有2条，能扩出条带但扩增图谱中没有特异性条带出现的引物有10条，能扩出条带且扩增图谱具有多态性的引物有8条。对筛选到的具有多态性的8条引物进行分析，共扩增出46个DNA片段，片段大小为0．2～3．2kb，其中5个菌株共有的片段有13条，显示多态性的片段有33条。     

以随机扩增多态性DNA(RAPD)技术筛选意大利蜜蜂重要农艺性状遗传标记

为了获得意大利蜜蜂重要农艺性状的分子遗传标记 ,本研究以 30种RAPD随机引物对平湖浆蜂、美意、澳意、苏意等 4个在产浆、采蜜和抗病性上存在较大差异的意蜂品系的基因组DNA进行RAPD_PCR扩增筛选。试验结果显示 ,随机引物W 1 8(5′_CGGACGGCGG_3′)和W2 3(5′_GTACCGCCCG_3′)的扩增图谱呈多态性。其中 ,在引物W 1 8所扩增出的 9条片断中 ,2 35 2bp和 36 4bp条带为美意所特有 ,表明可将之用于鉴别美意 ;2 0 92bp条带仅出现于蜂蜜高产的美意和澳意中 ,意味着该条带为一个蜂蜜高产性状的遗传标记 ;而 6 32bp条带在王浆高产品系平湖浆蜂中出现的频率 (0 91 )显著高于 (P <0 0 1 )美意(0 0 4 )、澳意 (0 0 2 )和苏意 (0 0 0 ) ,说明 6 32bp条带可能为王浆高产性状的一个遗传标记。在W2 3引物扩增条带中 ,6 5 1bp条带为澳意所特有 ,可用于澳意鉴别     

动物线粒体DNA特性及其多态性研究进展

本文在线粒体ＤＮＡ基因组特点的基础上，综述了ｍｔＤＮＡ多态性分析在动物起源进化、分类和育种等方面的研究进展，并给以简要的评述。     

桑树栽培种的随机扩增DNA多态性（RAPD）研究

通过２０个随机引物的扩增结果，显示出分属于４个栽培种的２０个材料的ＲＡＰＤ多态性，表明各种、品种间遗传分化上的差异：计算了２０个材料的遗传相似系数和遗传距离，建立了它们的ＵＰ－ＧＭＡ系统树：结果表明小官桑与鲁桑系有较近的亲缘关系，广东桑有较复杂的遗传背景。进一步探讨了桑树栽培种及种内各品种之间的亲缘关系。     

中国柞蚕DNA多态性的RAPD分析

用随机扩增多态DNA(RAPD)标记技术对 4个代表性的柞蚕品种河 41、四青、青黄 1号、杏黄和 3个家蚕品种大造、C10 8、75 32的 2 8个个体进行了DNA多态性分析。结果表明 :柞蚕具有极为丰富的DNA多态性 ;不同品种的个体间 (种内 )的多态性为 80 7%,而同一品种个体间的多态性也达到 45 8%～ 49 4 %;同一品种个体间的遗传距离为 0 133～ 0 2 38,远大于家蚕的 0 0 0 8～ 0 0 81;不同品种个体间的遗传距离为 0 2 15～ 0 382 ,与家蚕相似。柞蚕的DNA多态性有 6 0 %来源于品种内的个体间 ,而来源于品种间的部分只占 40 %。UPGMA聚类时 ,柞蚕的各个体均能按品种聚在一起。     

采用随机扩增多态性DNA技术（RAPD）在桑属植物系统学研究的应用初报

用ＲＡＰＤ技术研究了桑属９种材料基因组ＤＮＡ的多态性，获得了９种材料基因组ＤＮＡ的指纹图谱，并估算了遗传距离，绘出了系统树状图。探讨了桑属９个种的亲缘关系和进化分类。     

片形吸虫DNA随机扩增多态性分析

为区别从南京市江宁县采集的片形吸虫非典型形态虫体，应用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术，对6株片形吸虫总DNA进行了扩增。结果，10条引物中有8条能产生扩增图谱，电泳图谱经聚类分析，与传统的分类结果一致，并表明来自江宁的片形吸虫既有形态典型的肝片形吸虫，也有形态不典型的大片形吸虫。     

用RAPD技术检测不同来源微孢子虫基因组DNA多态性

家蚕微粒子病是由微粒子原虫（微孢子虫）类寄生于蚕体引起的病害。微粒子病对蚕丝业生产危害极大,一直被列为蚕种制造检疫对象。许多学者对病原的传播途径、侵染机制及分类地位作了大量研究。其中微孢子虫的分类又以血清学关系、发育增殖方式和孢子超微结构作为主要划分依据,这些表型依据仍然具有局限性。随机扩增多态性ＤＮＡ技术（ＲａｎｄｏｍｌｙＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ,ＲＡＰＤ）因能方便、快速提供ＤＮＡ多态性的丰富信息而被广泛用于动植物和微生物的遗传差异、亲缘关系和进化分类等领域,但应用于微…     

从动物毛发中提取DNA进行RAPD扩增的研究

经实验改进了一种快速,简便提取动物毛囊细胞中ＤＮＡ的方法,电泳检测,ＤＮＡ带型整齐集中清晰,无拖尾现象;进行ＲＡＰＤ扩增,扩增带多而清晰,证明改进后的方法简便可行。     

RAPD技术及其在动物医学中的应用

RAPD技术即随机扩增多态性DNA技术，是一种建立在PCR基础上的新的DNA多态性检测技术，其主要特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组DNA片段，通过凝胶电泳分析其指纹图谱特征。该技术具有快速灵敏，程序简便等优点，现已经广泛应用于多个领域，此文综述了RAPD技术的原理、优缺点、影响因素及其在动物医学中的应用。     

鸭不同品种的随机扩增多态性DNA分析

随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡＳ,ＲＡＰＤ）是利用含有１０个（或９个）碱基的随机引物（单引物）通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对模板ＤＮＡ进行随机扩增,根据扩增的某一ＤＮＡ片段的有无来比较不同基因组ＤＮ...     

家兔随机扩增多态性DNA分析

从２５个随机引物中筛选出５个具有较高多态性的引物,分别对５个群体的８０只家兔基因组ＤＮＡ进行了ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增。经统计分析得到了５个家兔群体之间的远近不同的进化亲缘关系,聚类结果与预期目标一致。     

RAPD技术在动物遗传育种中的应用

ＲＡＰＤ技术在动物遗传育种中的应用龙火生方心葵（西北农业大学动物科学系陕西杨凌７１２１００１关于ＲＡＰＤ技术１９９０年,Ｗｉｌｉａｍｓ和Ｗｅｌｓｈ的两个研究小组几乎同时在各自的实验室建立了检测ＤＮＡ多态性的随机扩增多态ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆ...     

RAPD技术在动物育种上的应用

RAPD技术自1990年创立以来得到了广泛的应用,但其重复性差,多态性低和成本较高等缺点始终是应用中较大的制约因素。近年来,RAPD技术在模板DNA获得方面有一定进展,并通过改变反应条件和检测手段提高了结果的多态性和可重复性。本文综述了RAPD技术的原理、研究进展,并探讨了RAPD技术存在的问题、完善方法及应用前景。     

RAPD技术及其在动物育种中的应用

ＲＡＰＤ技术的兴起,使ＤＮＡ指纹技术的应用走向了一个新的发展阶段。此技术已成功应用到群体遗传关系分析、跟踪选育进展,基因定位等领域。本文系统论述了ＲＡＰＤ的技术原理、特点及近年来国内的研究概况,并探讨了这一新的分子遗传标记在动物育种中的应用及其发展前景。