猪细小病毒2型、3型、6型多重PCR检测方法的建立及初步应用

为建立同时快速检测猪细小病毒2型(PPV2)、猪细小病毒3型(PPV3)、猪细小病毒6型(PPV6)的方法,本研究根据PPV2、PPV3、PPV6各自的NS基因序列设计3对特异性引物,建立了一种能同时检测上述病原的多重PCR方法。结果显示,建立的多重PCR方法对PPV2、PPV3、PPV6的基因组DNA均能有效扩增,对猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、副猪嗜血杆菌(HPS)、猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、日本乙型脑炎病毒(JEV)的核酸均无特异性扩增,特异性较强;对PPV2、PPV3、PPV6的重组质粒最低检测限分别为4.32×10^3拷贝/μL、9.62×10^3拷贝/μL、4.25×10^3拷贝/μL,与其他研究者已建立的单一PCR检测结果一致,敏感性较高。利用本研究建立的多重PCR方法对25份可疑临床样品检测,同时利用文献报道的单一PCR方法检测,二者结果一致。本研究建立的多重PCR方法为检测PPV,及该病的流行病学调查提供了技术支持。     

猪细小病毒研究进展

猪细小病毒 (PPV)是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一。 PPV最早是从培养细胞中发现并分离得到的一种小 DNA病毒。PPV按照其致病性与组织嗜性大致可以分为 4个类型。研究表明 ,PPV不仅是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一 ,而且能够引起多种猪病。PPV基因组为单股负链 DNA,大小约为 50 0 0 bp,基因组有两个主要的开放阅读框架 ,基因组共编码 3种结构蛋白和两种非结构蛋白 ,即 VP1、VP2、VP3和 NS1、NS2。VP2蛋白是主要的免疫原性蛋白 ,可以诱导机体产生强烈的免疫反应 ,NS1蛋白是 PPV基因组本身编码的反式激活蛋白 ,对PPV早期和晚期的转录发挥着重要作用 ,另外有研究表明 ,NS1蛋白是具有多种功能的锚定蛋白 ,在 PPV体外感染过程中具有重要功能。随着对猪细小病毒研究的不断深入 ,目前已经在猪细小病毒病原学、诊断与防制以及分子生物学方面取得了进展。     

Porcine parvovirus infection in a commercial piggery

Abstract

Extract

Madam:– We have recently been involved in a consultative role with a 60-sow commercial piggery. Over the year preceding the incident recorded here, this unit had approximately doubled in size by the purchase of improved large white gilts. An infertility problem involving irregular returns to service and small litter sizes was first noted around Christmas 1984. In early January 1985 all the adult stock were bled and serological tests undertaken. There was no evidence of infection with Aujeszky's disease virus or leptospires, but 42 sows had haemagglutination inhibition (HI) titres(2 Joo, H.O., Donaldson-Wood, C. and Johnson, R.H. 1976. A standardised haemagglutination inhibition test for porcine parvovirus antibody. Aust. vet. J., 52: 422–424.  [Google Scholar]) of >320 against porcine parvovirus (PP), and were considered to have been actively infected. (1 Johnston, R.H., Donaldson-Wood, C., Joo, H.O. and Allender, U. 1976. Observations on the epidemiology of porcine parvovirus. Aust. vet. J., 52: 80–84.  [Google Scholar]) Seventeen other gilts and sows in their second pregnancy had titres ?320 and were considered to be still susceptible to infection. These animals were bled again 75 days later and HI tests on the paired sera showed that 15 of the 17 had now scroconverted (minimum titre 1,280). Eleven of these animals were in early to mid-pregnancy during the period of seroconversion. Five of these animals subsequently failed to farrow, and the remaining six produced a mean of only 6.5 (S.D. 2.8) live piglets at birth. In contrast the two animals which did not seroconvert, and four other previously infected gilts with HI titre of >10,240 at the first bleeding, produced a mean of 9.8 (S.D. 1.7) live piglets. This was considered a satisfactory live birth rate for this age group, and was significantly higher (Student's t-test; P<0.05) than for the six sows which seroconverted and produced live pigs.     

猪细小病毒检测技术研究进展

近年来,随着猪细小病毒分子生物学的研究进一步深入,各种新型疫苗的成功研制,为猪细小病毒病的防制带来希望。但目前为止猪细小病毒的检测技术以传统方法为主,大量研究发现猪细小病毒常与其他病原微生物混合感染,为了根除本病,必须提高诊断和防疫水平。文章就该病诊断方法的研究进展做一综述。     

An economic assessment of porcine parvovirus vaccination

SUMMARY A decision analysis model was designed to evaluate the cost effectiveness of a vaccination program for preventing endemic or epidemic porcine parvovirus (PPV) Induced reproductive failure in a 100-sow pig herd. The results showed that the cost of vaccination was less than the cost incurred by continuing endemic PPV infection, or the cost of a severe epidemic. A long term vaccination program is a cost effective method for controlling PPV-induced reproductive failure in pig herds suffering endemic and epidemic PPV infection.     

猪细小病毒结构蛋白VP2研究进展

猪细小病毒(PPV)是引起猪繁殖障碍性疾病的重要病原之一,目前该病在世界很多国家均有流行和报道,给养猪业带来巨大损失。传统的灭活苗和弱毒苗又都存在各自的缺陷,新型诊断试剂及疫苗的研究迫在眉睫。VP2蛋白是病毒粒子的主要衣壳蛋白,具有在体外能自我装配成类病毒粒子,并能刺激机体产生抗PPV中和抗体,可作为抗原转运载体等特性,故VP2蛋白在猪细小病毒诊断试剂及新型疫苗研究领域具有很大的潜力。论文就VP2的分子生物学及其在该病诊断与预防等方面的研究进展进行了综述。     

猪细小病毒感染诊断方法研究进展

猪细小病毒感染是由猪细小病毒引起的一种病毒性传染病。其疾病的传播是由易感母猪通过胎盘传染给胎儿 ,导致母猪流产 ,产出死胎、木乃伊胎或弱子 ,给养猪业造成巨大的经济损失。为了减少该病的发生 ,广大兽医工作者建立了许多用于检测和诊断该病的方法 ,如病毒分离培养、对流免疫电泳试验、血清中和试验、酶联免疫吸附试验、银加强胶体金技术及聚合酶链反应等。文章对其研究进展作了较全面地综述     

猪细小病毒检测基因芯片的构建及初步应用

本研究以猪细小病毒VP2基因为目的基因设计引物和探针,通过不对称PCR扩增Cy3标记的DNA片段与固定于芯片上的探针进行杂交,对杂交芯片进行扫描分析,根据荧光信号的强度来确定是否存在猪细小病毒。结果表明,采用浓度为5μmol/L的探针与PCR产物于47℃杂交1 h即可得到清晰的荧光信号,检测灵敏度可达34.5 ng/μL,同时用制备的基因芯片对临床20份疑似猪细小病毒病感染的病料进行检测,检测结果与PCR检测结果符合率达100%,表明基因芯片检侧技术是一种灵敏度高、特异好的检侧方法。该方法的建立可以快速有效地对猪细小病毒做出诊断,具有较好的应用前景。     

一例猪伪狂犬病和细小病毒病混合感染的诊治报告

2008年1月海南某猪场发生了以母猪流产和仔猪死亡为特征的疾病,经过流行病学调查、临床症状观察、病理解剖及实验室诊断,诊断为猪伪狂犬病(PR)及猪细小病毒病(PPV)混合感染.通过采取综合有效的防治措施,使猪场疫情得到有效的控制.