猪精液冷冻稀释液配方的筛选

本试验优选出的冷冻稀释液1号和2号配方,冻精活率达0.5,解冻后精子在38～40℃恒温下存活指数分别为1.98±0.64和2.27±0.62。应用日立 H-800型透射电子显微镜对冻精进行超微结构观察,精子顶体完整率分别达59.61%和63.54%。2号配方的冷配情期受胎率达70.57%,其顶体完整率与受胎率呈正相关。     

海藻糖、蔗糖和乳糖对猪精液冷冻保护效果的影响

比较了在冷冻保存液中添加不同水平海藻糖、蔗糖和乳糖对猪精液冷冻保护的效果。结果表明,添加3种双糖均能提高精液的冷冻保护效果,其最佳添加水平均为0.035 g/mL,在该添加水平下,海藻糖组的精子活率、活力和精子质膜完整率分别为(46.34±0.52)%,(41.38±0.39)%和(43.51±1.78)%,与蔗糖组差异均不显著(P>0.05),但均显著高于乳糖和对照组(P<0.05);海藻糖组的有线粒体活性精子百分率和精子顶体完整率分别为(44.56±1.16)%,(64.09±0.81)%,显著高于蔗糖、乳糖和对照组(P<0.05),3种双糖均随添加水平升高精子的顶体完整率逐渐升高;海藻糖组获能处理前后的精子获能率分别为(3.68±0.07)%和(41.82±0.56)%,显著优于蔗糖、乳糖和对照组(P<0.05)。说明海藻糖对猪精液冷冻保护的效果最好,最佳添加水平为0.035 g/mL。     

牛精清及牛用稀释液在猪精液冷冻中的应用

为了验证牛精清及牛用精液冷冻稀释液在猪精液冷冻中的有效性,将牛精清(0、2.50%、5.00%、10.00%)加入猪精液冷冻稀释液(葡萄糖1.10%、柠檬酸1.48%、Tris 2.42%、NAC 0.02%、卵黄20.00%、甘油6.00%、青霉素0.06%、链霉素0.10%)中,或用改良猪精液冷冻稀释液(另加入0.10 mmol/L他克林)、牛精液冷冻稀释液及改良牛精液冷冻稀释液,对猪精液进行冷冻处理。结果表明,在本试验条件下,牛精清对猪精子冷冻保存没有正面作用;改良牛用稀释液用于猪的精液冷冻,效果与改良猪用稀释液相当,优于未改良牛用稀释液。     

猪精液冷冻技术研究进展

概述了猪精液冷冻的研究历史、冷冻损伤机理,并从稀释液添加剂、冷冻保存承载工具、精子密度、精子冷冻种间差异和个体差异等方面阐述了影响猪精液冷冻的因素,介绍了解冻后精子质量的检测方法,探讨了猪精液冷冻中存在的问题并进行了展望。     

猪精液预处理稀释液与冷冻基础液的配伍效应

采用6种预处理稀释液对猪精液进行预处理,然后用3种冷冻基础液冷冻保存,研究精液预处理稀释液和冷冻基础液对精子冷冻保存效果的影响,以及其间的配伍效应。结果表明,不同的预处理稀释液对解冻后精子活力的影响差异显著(P<0.05),而3种冷冻基础液对冻后精子活力的影响差异不显著(P>0.05)。不同的预处理稀释液与冷冻基础液之间存在明显的配伍效应,并且用含甘油的稀释液对平衡不同时间的精液冷冻时,其配伍效应又有所不同。猪精液中去除精清可显著提高精子冻后活力和顶体完整率(P<0.05),有利于提高精液品质。     

猪精液冷冻方法试验

试验表明,初冻温度是影响猪精液冷冻效果的重要因素。冻前及冷冻过程中,不同温度下制作的冻精活率差异极显著(P<0.01)。精液降至8℃、采用-70～-90℃的初冻温度,冷冻效果最好,不同剂型和剂量的冷冻效果差异不显著(P>0.05),本试验,30毫升块状和15毫升塑料安瓿冷冻后精子活率达0.39～0.40,复苏率达57％。     

巴马香猪精液冷冻过程中精子内抗氧化酶活性与精子质膜完整性关系研究

猪精液冷冻过程中,精子质膜往往因受到活性氧(ROS)的氧化而发生损伤,精子品质也随之下降.精子 ROS水平受抗氧化酶活性的影响,然而冷冻过程中精子细胞内抗氧化酶活性变化与细胞膜完整性的关系还缺乏报 道.该试验将巴马香猪精液冷冻保存降温过程中的精子分为4种状态,即鲜精、15 ℃精液、5 ℃精液和冷冻解冻 后精液,检测了各种状态下精子的运动参数、质膜完整性(PMI)和顶体完整性(AI),分析了超氧化物歧化酶(SOD) 活性、谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)活性和ROS(丙二醛MDA)水平.结果表明:15 ℃精子各项指标和鲜精无显著 差异(p>0.05);5℃精子运动能力、质膜完整性和抗氧化酶活性低于鲜精(p<0.05),而精子细胞内MDA 水平与 鲜精无显著差异(p>0.05);冷冻解冻后精子的运动能力、质膜完整性和抗氧化酶活性均低于其他各组(p< 0.05),精子MDA水平显著高于其他各组(p<0.05).同时,SOD和Gpx活性与精子PMI和AI之间的相关性均达 到了显著水平(p<0.05).可见,当精子降温至15℃以下直至冷冻时,SOD和GPX活性逐渐降低,精子细胞清除 ROS的能力随之下降,精子质膜脂质过氧化反应增强,质膜受损,内容物外渗是精液品质降低的重要原因.     

不同解冻方法对猪精液冷冻效果的影响

以姜曲海种公猪冷冻精液为研究对象,观察了使用2种不同解冻方法对精液品质及体外受精胚胎发育的影响.试验结果表明,冷冻精液从液氮取出后,使用37℃水浴30s解冻在精子运动度、质膜完整率、顶体完整率和体外受精胚胎发育率方面均显著优于在室温放置20s后迅速投入37℃水浴10s解冻(P＜0.05).而与新鲜精液体外受精卵裂率和4细胞胚胎发育率相比,37℃水浴30s解冻方法与对照组无显著差异(P＞0.05).表明37.C水浴30s解冻方法优于室温放置20s后迅速投入37℃水浴10s解冻方法.     

稀释液·清洁剂·冷冻程序对猪精液冷冻效果的影响

探讨了稀释液、清洁剂及冷冻程序对猪精液冷冻保存效果的影响。结果显示:①稀释液Ⅳ保存鲜精,精子活率明显低于其他组(P<0.05);但其作为冻精的解冻稀释液时,效果最佳(P<0.05),说明猪精液冷冻保存时可采用第Ⅰ～Ⅲ组稀释液,而解冻时采用第Ⅳ组较佳。②稀释液中于不同阶段添加SDS(Sodiumlaurylsulfate,十二烷基硫酸钠)或OEP(OrvusESPaste,清洁剂)均能显著提高冷冻精子活率(P<0.05),SDS与OEP对冻精活率的影响无显著差异(P>0.05)。③精液冷冻程序采用-70℃、液氮熏蒸与直接液氮熏蒸在对解冻后冻精精子活率上无显著差异(P>0.05)。添加咖啡因能有效提高冻精的解冻后活率。     

猪精液0.5 ml细管快速冷冻和解冻方法的优化

 【目的】优化冷冻-解冻方法,提高0.5 ml细管快速冷冻保存猪精液的质量。【方法】冷冻方法：分别将细管水平置于液氮面上方3、5、7、9和11 cm处,每一水平位置细管分别熏蒸3、5、10、15和20 min后投入液氮保存,37℃×30 s水浴解冻,确定最优冷冻方法;在选择最优冷冻方法的基础上,分别采用37℃×30s(对照组)、42℃×25 s、47℃×20 s、52℃×15 s、57℃×10 s和62℃×5 s共6种方法水浴解冻,确定最佳解冻方法。【结果】采用3 cm×10 min冷冻方法,解冻0、8 h精液中精子活率、质膜完整率和顶体完整率均最高。采用相对“高温短时”解冻,精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜电位均较高,同时丙二醛浓度降低;57℃×10 s和62℃×5 s解冻的精子各项指标无显著差异（P＞0.05）,但前4项指标显著高于对照组（P＜0.05）,丙二醛浓度显著降低（P＜0.05）。【结论】优化猪精液0.5 ml细管快速冷冻的冷冻和解冻方法可以显著提高解冻质量,采用3 cm×10 min冷冻、57℃×10 s或62℃×5 s解冻方法效果最佳。     

不同稀释剂对猪冷冻精液的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液,在37℃下离心,弃去精清,收集浓缩段富含精子部分,用7种不同的稀释液进行稀释,应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。结果表明,在7种稀释液中,7号稀释液优于其他6种稀释液(p<0.05);与其他的冷冻保护剂相比,甘油的冷冻保护性能较好(p<0.01),其适宜浓度为2~4ml/l;干解冻(40~45℃)效果优于湿解冻,解冻后精子活率达0.46~0.49(p<0.05);稀释液中添加安钠咖可有效地延长精子的冻后存活时间(p<0.01)。     

枸杞多糖对猪精液冷冻效果影响的研究

通过在猪精液的冷冻基础液中添加不同浓度的枸杞多糖,来研究冻后猪精子的活率、质膜完整性、线粒体完整性和顶体完整性等各项参数指标,探讨枸杞多糖不同浓度对猪精液冷冻保存效果,试图寻找一种能较好地保护精子的天然抗冻剂.     

谷氨酰胺与鸡卵黄低密度脂蛋白提高猪精液冷冻效果的研究

为提高猪精液冷冻保存效果,在9％鸡卵黄低密度脂蛋白(LDL)冷冻稀释液的基础上,研究了添加不同浓度的谷氨酰胺对猪精液冷冻效果的影响.结果表明:在LDL冷冻稀释液中添加谷氨酰胺可显著提高猪精子冷冻效果(P＜0.05),较适宜添加量为40 mmol/L.     

犬精液冷冻稀释液配方优化试验

<正>犬是最早被驯化的一个物种,人们根据需要培育了许多不同的犬品种。犬业在国内外已经发展成为重要的产业,犬精液冷冻保存技术在犬种资源的保护、品种选育和加快良种进程等方面都能发挥关键作用。发达国家对犬的冷冻精液研究与推广启动早、发展快,而且制定了冷冻精液的采集、运输和贮存等操作规则,并由专门组织或机构进行负责。在我国,随着养犬业越来越受到人们的青睐,犬的冷冻保存技术也已逐渐被人们熟识,在10多年当     

海藻糖和牛血清白蛋白对牛精液的冷冻效果

【目的】研究海藻糖(TH)和牛血清白蛋白(BSA)单独或配合使用对牛精液冷冻效果的影响。【方法】向种公牛精液商业稀释液中添加不同浓度的TH(0,0.000 37,0.025和0.05 mol/L)和BSA(0,1,2,3 g/L),TH和BSA的4个添加水平分别两两组合,组成16个处理,以其中二者添加水平均为0作为对照,制作0.25 mL细管冻精,解冻(40℃,10 s)后比较分析精子活率、顶体完整率和质膜完整性3个指标。【结果】单独添加TH、BSA及其互作对牛精液的冷冻效果与对照组相比达到显著水平。与对照组相比,单独添加不同水平的TH或BSA对冻后牛精子活率和质膜完整率均有明显影响(P<0.05),但对顶体完整率均影响不大(P>0.05),TH适宜的单独添加量为0.025mol/L,BSA为1 g/L;两者的交互作用对冻后牛精子活率、顶体完整率和质膜完整率均有明显影响(P<0.05),TH0.000 37 mol/L×BSA 2 g/L为较适宜的添加量。【结论】单独添加TH和BSA,均能对冻后精子品质产生明显影响;各TH×BSA组表现出显著的互作效应,其中以TH 0.000 37 mol/L×BSA 2 g/L的添加效果最好。     

最小综合损失准则与多指标均匀正交试验设计的优化

对多指标均匀正交试验设计引入回归模型与响应损失概念，用响应损失变量的主成分建立一个多指标综合损失模型，并把该模型应用到可食性热水溶性膜特性的研究中，使该膜获得满意的工艺参数与配方。     

三种稀释液对猪精液常温保存与受胎率的影响

本文研究了三种稀释液对猪精液常温保存效果与受胎率的影响。选用三种不同稀释液对常温保存的猪精液进行稀释,并为母猪进行配种,比较不同稀释液的保存效果与受胎率。结果表明,(1)2号稀释液的保存效果较好,存活时间、生存指数与1号稀释液比较,差异极显著(P<0.01);与3号稀释液比较,差异不显著(P>0.05);(2)2号稀释液与1、3号稀释液相比也有较高的受胎率;(3)1、2、3号稀释液保存精子的畸形率间差异均不显著(P>0.05)。     

大幅度提高绵羊冷冻精液繁殖率技术设计研究

分３次试验。试验１：Ａ组，供试羊２１４只，对照和精液激素处理的情期产羔率分别为４０％和５７％；Ｂ组，供试羊３０８只，分成（１）对照，（２）精液处理＋混合精液。（３）精液处理＋个体精液，３种处理的情期产羔率分别为６１％、７５％和８０％。试验２；供试母羊１１７只，分成（１）对照，（２）ＨＣＧ（绒毛膜促性腺激素）处理母羊，（３）ＨＣＧ处理＋精液处理，（４）母羊排卵控制＋精液处理，４种处理的情期产羔率分别为６２．２８％，５５．６９％，６９．２４％和７１．１０％。试验３：供试羊５５６只，分成（１）对照，（２）ＬＲＨ－Ａ３（促排卵３号）肌注，（３）精液处理，（４）ＬＲＨ－Ａ３静注，（５）排印控制，５种处理的第一情期受胎率分别为５０．８％，６４．４％，７０．４％，７７．５％和８４．１５％；手术探查结果，排印控制处理后４８—５６ｈ母羊排卵同期率为９０％。试验证实，ＬＲＨ－Ａ３、催产素和ＨＣＧ处理冷冻精液及母羊可以作为大幅度提高绵羊冷冻精液繁殖率的技术设计用于养羊生产实践。     

多指标综合评价玉竹酒蒸炮制工艺

 为了改善玉竹Ploygonatum odordatum炮制品的质量,提高玉竹在药用或保健食品等方面的应用价值,在兼顾多糖、皂苷、总黄酮、醇溶物、水溶物和水分各指标的抗氧化活性和含量基础上,采用多指标综合评分法、层次分析法和正交试验法优化了玉竹的酒蒸炮制条件。玉竹最佳酒蒸炮制工艺为：酒润时间2.0 h,料液比100 ∶ 20（玉竹 ∶ 黄酒）,酒蒸温度60 ℃,酒蒸时间1.0 h,其中料液比对各指标综合得分影响最显著。该方法操作简单、经济,有效提高了玉竹的利用率。图1表6参31     

卵黄、牛奶及EDTA对冷冻过程中猪精子内Zn~(++)和Ca~(++)含量的影响

冷冻过程中,卵黄能有效地抑制精子内Zn~(++)含量的升高,而牛奶则无此作用。由于卵黄和牛奶中都含有大量的Ca~(++),因此当用作保护剂时,会使冻后精子内Ca~(++)的含量大大升高,但卵黄的影响较小。如果在卵黄中加入EDTA,则能明显阻止精子内Ca~(++)含量的升高。而且,解冻后精子的存活时间也延长。试验结果表明:(1)卵黄对精子的保护作用优于牛奶;(2)卵黄和牛奶中的Ca~(++)会影响解冻后精子的存活,但添加EDTA后可得到明显改善。