翠菊‘花束绯红’叶片的植株再生体系建立

以翠菊‘花束绯红’无菌苗为材料,研究了植物生长调节剂浓度及组合、光照条件、不同附加物对叶片及其愈伤组织再生植株的影响。结果表明:(1)在光照培养条件下,诱导翠菊叶片不定芽形成的最适培养基为MS+6-BA3.0mg·L-1+IBA1.0mg·L-1,诱导率为56.7%,平均不定芽数为3.3;(2)黑暗培养不利于叶片不定芽的分化,但促进叶片愈伤组织的形成;(3)培养基中分别添加脯氨酸、水解酪蛋白和NH4NO3等均能明显促进愈伤组织不定芽的诱导,最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+脯氨酸300mg·L-1,诱导率为82.8%,平均不定芽数为4.5;(4)不定芽移到幼苗生根培养基(1/2MS+IBA0.1mg·L-1)上,生根率为89.1%,移栽后成活率达89.3%。     

茄子子叶下胚轴离体再生体系建立

以3份茄子材料无菌苗子叶和下胚轴为外植体,研究其在MS附加不同浓度6-BA和NAA的培养基上的分化情况.结果表明:在不同培养基上,茄子子叶和下胚轴均能诱导出愈伤组织和分化形成不定芽,但不定芽诱导率存在明显差别,诱导3份材料下胚轴愈伤组织形成和芽分化的最佳培养基均为:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,子叶因品种不同有较大差异,紫色长棒茄芽分化最佳生长调节物质组合是6-BA 1.0 mg/L-+NAA 0.5 mg/L;紫红线茄是6-BA2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;紫黑短棒茄是6-BA 3.0 mg/L-+NAA 0.5 mg/L.     

新疆恰玛古子叶及下胚轴植株再生体系的建立

以新疆恰玛古种子萌发5d无菌苗的子叶及下胚轴为外植体,研究了各种不同激素配比条件下新疆恰玛古的再生体系.结果表明:培养基MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 0.1mg/L对愈伤组织诱导效果较好,子叶、下胚轴的愈伤诱导率分别为65.4％、95.5％;再生芽的诱导培养基为6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AgNO3 5.0 mg/L,子叶、下胚轴的芽分化率分别为20.8％、65.0％.将芽转入生根培养基MS+IBA 0.5 mg/L中诱导生根.20 d后,生根的小植株练苗移入花土中,成活率达95％.     

二倍体马铃薯高效再生体系的建立

 以二倍体马铃薯抗青枯病基因型ED13、CE171和感青枯病基因型ED25的茎段为外植体,在优化植物生长调节剂配比的基础上,对不同基因型的组培再生进行了研究。结果表明：不同基因型具有不同生长调节剂配比要求。固体－液体培养基双层看护培养对于二倍体马铃薯茎段愈伤组织的诱导是有效的,尤以固体培养基中NAA 2.0 mg · L^-1 : 6-BA 2.0 mg · L^-1的配比为佳。对于ED13而言,液体培养基中以2,4-D 2.5 mg · L^-1 : KT 0.5 mg · L^-1的配比为佳,相比之下CE171则以2,4-D 1.5 mg · L^-1 : KT 1.0 mg · L^-1为最好,二者的愈伤诱导率均达100%;对于基因型ED25,只有在NAA 2.0 mg · L^-1 : 6-BA 1.0 mg · L^-1和2,4-D 1.5 mg · L^-1 : KT 1.0 mg · L^-1时才能形成较好的愈伤。ZT在愈伤组织诱导芽分化过程中具有重要作用,单独使用ZT浓度为1.0 mg · L^-1时,ED13和CE171的芽分化率均达95％以上;而ED25则只有在ZT和6-BA配合使用,配比为ZT 0.5 mg · L^-1 : 6-BA 2.5 mg · L^-1时才可获得较高的芽分化率。     

白姜花胚性愈伤组织的诱导与植株再生体系的建立

将白姜花（Hedychium coronarium）未成熟花丝接种在MS + 4 mg ? L^-1 2,4-D + 4 mg ? L^-1 NAA + 1 mg ? L^-1 6-BA的培养基上,经过180 d的培养,诱导出3种愈伤组织：Ⅰ,浅黄色松散易碎;Ⅱ,白色疏松半透明水渍状;Ⅲ,黄色致密颗粒状。对愈伤组织继代培养基中的2,4-D、NAA和6-BA浓度进行优化,结果表明培养基中含有1 mg ? L^-1 2,4-D、0.25 mg ? L^-1 NAA、0.25 mg ? L^-1 6-BA时可获得胚性状态良好的愈伤组织。胚性愈伤组织在MS无机盐 + 0.25 mg ? L^-1 NAA + 0.5 mg ? L^-1 TDZ + 维生素B₅ + 100 mg ? L^-1谷氨酰胺 + 230 mg ? L^-1脯氨酸 + 100 mg ? L^-1麦芽提取物 + 45 g ? L^-1蔗糖的体胚诱导培养基中培养20 d后,转移到MS基本培养基上培养30 d,1 g胚性愈伤组织可获得50 ~ 60个体胚。成熟体胚在MS + 0.2 mg ? L^-1 IAA + 0. 5 mg ? L^-1 6-BA的萌发培养基上培养20 d时,体胚萌发率为85%。萌发的体胚转移到1/2 MS + 1 g ? L^-1活性炭的成苗培养基中可发育成正常植株,植株室外栽培成活率达90%。对100株再生植株的染色体数进行分析,发现3株三倍体（2n = 3x = 51）、6株四倍体（2n = 4x = 68）和2株六倍体（2n = 6x = 102）。     

文冠果组织培养和植株再生研究

以文冠果实生苗幼嫩叶片为外植体,研究了植物生长调节剂种类及配比对文冠果组织培养及植株再生的影响,经愈伤诱导、增殖、分化、伸长和生根培养,获得了再生植株,建立了文冠果体细胞胚发生及再生植株体系.结果表明:最适合文冠果胚性愈伤诱导的培养基为DKW+ 6-BA0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0mg/L;最适分化及增殖的培养基为DKW+6-BA0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L;伸长培养基为DKW+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.5 mg/L;生根培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L,生根率为81％,移栽成活率可达到90％以上.该再生体系的建立为文冠果快速繁殖和遗传转化的研究奠定了基础.     

药用植物半夏细胞悬浮培养和植株再生体系建立研究

为了建立甘肃产药用植物半夏的细胞悬浮培养和植株再生体系,通过对其不同外质体筛选、愈伤组织诱导和悬浮培养的愈伤组织类型、激素水平、起始密度、震荡速率等影响因素以及细胞生长状态、生长曲线和pH值变化等指标的研究.结果表明:以叶柄为外质体,选择"松散型"愈伤组织和2×105个/mL的起始培养密度,在附加2,4-D 2.0 mg/L BA 0.5 mg/L NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基上培养,温度(23±2)℃,转速90 rpm,pH值6.0,黑暗培养为最适悬浮培养体系;经检测细胞生长曲线呈"S"型,培养液pH随着细胞的生长先上升后下降,18 d时细胞基数达到最大值;悬浮继代培养后,通过降低或停止震荡转速,在添加BA 0.5 mg/L NAA0.5 mg/L的MS液体和固体培养基上可诱导分化出芽和根,进一步形成完整的植株.     

青蒿组织培养再生体系的建立

为了建立和优化青蒿的组织培养再生体系,获得快速繁殖技术,以青蒿叶片和叶柄为外植体,研究了不同激素配比对其离体培养和大量快速繁殖的影响。结果表明:以青蒿叶片为外植体,其愈伤组织诱导培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D,诱导率为78.0%;分化培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+3%蔗糖+0.7%琼脂粉,分化率达95.3%。分化苗在1/2MS+1.0mg/L NAA培养基上快速生根,且根系发达,粗壮,生根率达98.9%。以青蒿叶柄为外殖体,叶柄可在培养基MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D上一次成苗,在1/2MS+1.0mg/L NAA培养基上生根良好。该体系有效的缩短了培养周期,具有重要的研究价值。     

山杏愈伤组织诱导及植株再生

以山杏成熟胚和胚乳为外植体,以MS为基本培养基进行组织培养,研究了基于山杏经愈伤组织途径建立的再生植株技术。结果表明:以胚乳为外植体诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-苄基腺嘌呤(6-BA)1.0mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;愈伤组织的继代及分化培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+萘乙酸(NAA)0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;以成熟胚诱导愈伤组织和丛生芽增殖分化培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;生根培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L。     

石蒜愈伤组织的诱导及其植株再生研究

以石蒜为试材,研究了不同激素组合和外植体选择对石蒜愈伤组织诱导及植株再生的影响.结果表明:外植体选择是石蒜愈伤组织诱导的关键因素,3种外植体中,种子胚诱导愈伤组织的效果最好;在MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中,诱导愈伤率最高可达82.4％.并能较好地诱导愈伤组织发生不定芽,MS+ NAA 0.1mg/L能较好地诱导愈伤组织发生根.石蒜再生植株进行移栽的最佳基质应为腐殖质和珍珠岩以1∶1的比例组成,其成活率为70％.     

基于颠茄发根的外源基因表达系统的建立

 用携带植物高效表达载体pCAMBIA1304 ⁺ “解除武装”的重组C58C1工程菌转化颠茄无菌苗真叶, 发根诱导率达100%。PCR检测证实发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304 ⁺均能整合到颠茄发根基因组内, 共转化率达30%。建立了基于颠茄发根的高效外源基因表达系统, 为将托品烷类生物碱东莨菪碱的生物合成关键酶基因导入颠茄, 实现其次生代谢工程及开展分子育种奠定了基础。     

颠茄最佳采收期的研究

通过研究颠茄干物质、生物碱含量积累动态来确定最佳采收期,为颠茄规范化种植提供理论依据.结果表明:在整个生育期内,颠茄的干重呈不断增加的趋势,于9月下旬达到最大值,单株干重可达152.48 g;生物碱的含量花果期积累最快,9月中旬达到最大值,可达4.86％,而后则出现下降的趋势.综合分析产量与质量因素,9月中旬颠茄经济产量最高,为最佳采收时间.     

非洲菊再生体系的建立

以非洲菊幼嫩花托为外植体,以MS为基础培养基,研究了添加6-BA和NAA的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽发生和丛生芽生根的影响。结果表明:花托的大小影响到愈伤组织的诱导和褐化,0.8cm的花托愈伤组织的诱导率高且褐化率低;愈伤组织诱导和芽分化的适宜培养基为MS+6-BA 10mg/L+NAA 0.2mg/L,丛生芽增值的适宜培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,生根培养基为1/2MS+IAA 0.2mg/L。     

甜瓜再生体系的建立

以‘鑫福999’甜瓜5 d龄无菌苗的子叶、下胚轴、真叶为外植体,研究了添加6-BA、IAA和2,4-D的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽的发生和丛生芽生根的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最适外植体为子叶,由子叶诱导的愈伤组织生长速度最快、品质最好、数量最多,最适愈伤组织的诱导培养基为MS+IAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L。最适宜诱导丛生芽的外植体为子叶,最适丛生芽诱导培养基MS+6-BA 1.0 mg/L,最适生根培养基为MS培养基。     

萱草再生体系技术建立的研究

以萱草的根茎为材料,进行愈伤组织诱导和分化,试管苗的生根、移栽和移植的研究,建立萱草再生体系技术。结果证明:MS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L+2,4-D0.1mg/L是愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS+NH_4H_2PO_450mg/L+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L是愈伤组织增殖继代培养的理想培养基;MS+AgNO_30.5mg/L+GA_30.5mg/L+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;1/2MS+NAA0.1mg/L+IAA0.2mg/L是不定芽生根培养的理想培养基。在河沙中试管苗易移栽成活;移植到花坛中的试管苗根系发达、生长旺盛。     

西瓜子叶离体再生体系的建立

以西瓜品种134-2标为材料,进行子叶高效再生体系建立的研究。结果表明:西瓜子叶不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+IAA 0.2mg/L,出芽率可达96%;芽伸长最佳培养基为MS+KT 0.2mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+IAA 0.1mg/L。     

燕子掌叶片再生体系的建立

以燕子掌叶片为试材,采用植物组织培养方法,研究了消毒时间、不同浓度2,4-D、6-BA、NAA对燕子掌再生的影响。结果表明:叶片用70%~75%的酒精浸泡10~15s,再用0.1%HgCl2消毒12~15min,具有较低污染率和较高的存活率;用MS+1.5mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1)2,4-D进行不定芽诱导,平均可以产生13.7个不定芽;不定芽在MS+6-BA 1.5mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1)+GA30.5mg·L~(-1)中增殖倍数为11.0;在1/2MS+IBA 0.5mg·L~(-1)或MS+IBA0.5mg·L~(-1)培养基中平均能产生9~11条根。     

南瓜子叶再生体系的建立

以5个南瓜品种为试材,比较了植物生长物质、基因型、子叶切割和接种方式等因素对不定芽分化的影响。结果表明:4~5 d无菌苗的子叶沿中脉纵切,将其中脉斜插入培养基中,分化率最高。易于诱导不定芽的南瓜品种为"绿栗"南瓜和"夷香红栗"南瓜。"夷香红栗"南瓜的不定芽诱导最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,不定芽分化率为37.5%,平均芽数2.2个;"绿栗"南瓜最佳培养方式为在MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L的培养基中培养12 d,再转入MS+6BA 2.0 mg/L+GA30.5 mg/L上继续培养,不定芽分化率达到52%,平均芽数3.7个。     

番茄植株再生体系的建立

选用杂交番茄早丰(07-13)为材料,以下胚轴、子叶作为外植体,根据控制单一变量与多重比较的原则,设计添加不同种类和不同浓度的植物生长物质的培养基配方,建立了一套简便有效地番茄再生体系。结果表明:愈伤组织的诱导及增殖,以配方MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA0.3 mg/L为佳;诱导不定芽的分化,以培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L为佳;生根培养基以MS+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.1 mg/L为佳,生根率高且根粗壮。     

苜蓿高频再生体系的建立

以10个品种苜蓿无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同培养基、不同激素种类和配比对愈伤组织诱导率及分化率的影响。结果表明:国产苜蓿下胚轴外植体愈伤组织分化率最高;愈伤组织诱导最适培养基为MS盐+UM维生素+2mg/L 2,4-D+0.25mg/L KT+2g/L水解酪蛋白+6g/L琼脂+30g/L蔗糖;愈伤组织最适分化培养基为MS+0.5mg/L KT+0.1mg/L NAA;最适生根培养基为1/2MS。