鸡减蛋综合症病原分离鉴定

通过鸭胚传代，病毒中和试验，Ｈ１交叉试验，理化特性测定，血凝谱试验，琼脂免疫扩散试验，电镜观察证实，我们所分离的病原为减蛋综合症病毒（暂定为ＥＤＳＶ－Ｒ９３１），该病毒的鸭胚毒价为１０＾１４．４４ＥＩＤ５０／０．１ｍ１。     

应用鸭胚肝细胞培养鸭肝炎病毒的研究

利用鸭胚肝细胞成功地培养了鸭肝炎病毒．并呈现典型ＣＰＥ，向其细胞维持液中加入１％的鸭胚尿囊液，ＣＰＥ的维持时间可延长至６０小时．将该病毒的细胞培养物回归鸭胚和雏鸭，其致病力不见明显减弱．鸭胚中和试验证明，鸭肝炎病毒在鸭胚肝细胞上形成ＣＰＥ的能力能被特异抗血清所中和．     

鸡,鸭体内传染性法氏囊病病毒的分离及理化性质比较

从疑似传染性法氏囊病（ＩＢＤ）病鸡及同群饲养的鸭体内各分离到１株病毒，用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ试验证明两病毒均为ＩＢＤＶ，病毒血清型为Ⅰ型。病毒可致死鸡胚，适应于鸡胚成纤维细胞并产生细胞病变（ＣＰＥ）。理化性质比较表明，两病毒为同源ＩＢＤＶ。研究表明，鸭可成为ＩＢＤＶ的携带者或传染源。     

鸡产蛋下降综合症灭活疫苗研究──EDS_（76）—NE_（4）株病毒的培养与鉴

在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚（ＣＥ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＣＥＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１∶２０４８０─１∶３２７６８０倍。     

鸡产蛋下降综合症灭活疫苗研究：EDS76—NE4株病毒的培养与鉴定

在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＥＣＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１：２０４８０－１：３２７６８０倍。     

鸭肝炎病毒A_(66)弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养

将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）Ａ６６株接种于鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）进行细胞培养,通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查,证明了（ＤＨＶ）Ａ６６毒株能够在ＣＥＦ上增殖。试验还表明,犊牛血清对ＤＨＶ增殖具有明显的抑制作用。此外,还根据细胞培养物病毒滴度测定结果绘制出了病毒在ＣＥＦ上的生长曲线。从生长曲线可以看出,接种后８～１６ｈ病毒开始增殖,３６～６０ｈ细胞培养物中病毒滴度达最高水平。这与（ＤＨＶ）Ａ６６死鸡胚的时间基本一致鸭肝炎病毒A_(66)弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养@张小飞$安徽…     

雏鸭病毒性肝炎的研究

１９９１年从云南某地疑似鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）的病雏鸭肝脏分离到一株病毒，经鸡胚染试验，电镜形态观察，中和试验鉴定，证明为鸭病毒性肝炎病毒１型（ＤＨＶ－Ｉ）毒株。该病毒对鸡胚高度适应，传递至８０代对雏鸭无致病力，经易感雏鸭连传代毒力无反强现象，故命名为ＤＨＶ－ＫＭ６０株。鸡胚测试其滴度为ＬＤ５０１０６－７．３２／０．２ｍｌ。采用ＤＨＶ－ＫＭ６０制备疫苗，经口服免疫，对１日龄雏鸭的安全性高，免疫原性     

地高辛标记的核酸探针检测EDS病毒的研究

地高辛标记的核酸探针检测ＥＤＳ病毒的研究王雪敏（邯郸农业高等专科学校牧医系河北永年０５７１５０）郑明球蔡宝祥陈溥言（南京农业大学动物医学院１材料与方法１．１地高辛标记的ＥＤＳ病毒核酸探针制备将ＥＤＳ病毒ＮＥ４株（南京农大传染病教研室提供）鸭胚尿囊液（...     

鸡减蛋综合症油乳剂灭活苗的试制与应用

采用鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）Ｋ－１１株细胞毒为种毒,通过鸭胚盲传５代,使其扩增,收获尿囊液作为基础种子毒。基础各 非免疫歪 增殖动态的试验表明,ＥＤＳ－７６病毒在羊水、尿囊膜（包含羊膜）、尿囊液中含量较高,增殖动态趋于一致;接种病毒后１２０ｈ为最佳收毒时间,突破了传统的只收集尿囊液作为病毒材料的做法,使收 病毒材料由原来的每胚５．２ｍＬ增加到每胚４９．４ｍＬ,显著降低了研究费用和制苗成本。确定     

鸭肝炎病毒A66弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养：张小飞

将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）Ａ６６侏接种于鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）进行细胞培养,通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查,证明了ＤＨＶＡ６６毒株能够在ＣＥＦ上增殖。试验还表明,犊牛血清对ＤＨＶ增殖具有明显的抑制作用。此外,还根据细胞培养物病毒滴度毒滴度测定结果绘制出了病毒在ＣＥＦ上的生长曲线。     

鸭疱疹病毒Ⅱ型（暂定名）的分离鉴定

自1990年以来，在福建、浙江和广东等省发生一种以双翅羽毛管淤血呈紫黑色、断裂和脱落以及皮下、脏器（肝脏、胰脏）和肠道（十二指肠、直肠和盲肠）出血为主要特征的新的鸭传染病，暂定名为鸭出血症。我们对从自然感染该病典型病死番鸭脏器中获得的1株含2种病毒粒子（直径大小分别为30－40mm和80－120mm)的分离物，以Ⅰ型雏鸭病毒性肝炎标准阳性血清进行连续4代中和后接种番鸭胚，收集死亡番鸭胚胚液进行病毒纯化、负染、电镜观察和SPF鸡胚接种试验证明获得单一病毒分离株（定名为鸭出血症病毒）。该病毒为不耐酸、不耐碱、不耐热、对氯仿处理敏感、核酸类型为双股DNA的有囊膜病毒，直径为80－150nm；对番鸭胚、鹅胚、麻鸭胚、半番鸭胚、北京鸭胚和SPF鸡胚的致 死率分别为100％、100％、78．3％、60％、82．1％和0％；对10－11日龄番鸭胚的ELD50为10^-7.78/0.2ml；无血凝活性，不凝集“O”型人、鸭、鸡、鹅、家兔、小鼠，豚鼠、猪和绵羊红细胞；经血清中和试验证明该病毒与Ⅰ型雏鸭肝炎病毒、雏番鸭细小病毒、雏鹅细小病毒、鸭瘟病毒无血清学相关性。据以上结果可将该病毒确定为疱疹病毒科成员，但鉴于其与鸭瘟病毒（鸭疱疹病毒Ⅰ型）无血清学相关性，则暂定名为鸭疱疹病毒Ⅱ型，此为国内外首次报道。     

应用鸭胚肝细胞培养鸭肝炎病毒的研究

利用鸭胚肝细胞成功地培养了鸭肝炎病毒，并呈现典型ＣＰＥ，向其细胞维持液中加入１％的鸭胚尿囊液，ＣＰＥ的维持时间可延长至６０小时，将该病毒的细胞培养物回归鸭胚和雏鸭，其致病力不见明显减弱。鸭胚中和试验证明，鸭肝炎病毒在鸭胚肝细胞上形成ＣＰＥ的能力能被特异血清所中和。     

鸡减蛋综合征的研究──Ⅱ．鸡减蛋综合征病原的分离和鉴定

用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种１０～１２日龄鸭胚盲传，分离到一株ＥＤＳ－７６·ＥＸＫ２病毒。自第３代起至第１０代，均从鸭胚尿囊液中检出血凝素．凝集鸡红细胞的特性可被ＥＤＳ－７６阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集兔红细胞。应用第３和第４代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡．成功地复制了ＥＤＳ－７６。攻毒后３５天内１１只试验鸡的总产蛋数无明显变化．产蛋率为８５～９４％，但产各种异常蛋占总产蛋数的２９％。电镜下发现原囊液中病毒颗粒呈球形、大小为７０～８０ｎｍ、无囊膜。     

郑州地区家鸭EDS－76血清学调查

郑州地区９个鸭场鸭群中有７个鸭场为ＥＯＳ－７６ＨＩ抗体阳性，阳性率为６６～１００％．不同日龄和不同品种鸭群对感染无明显差异．被感染ＥＤＳ－７６病毒鸭群虽无可见临床症候，对产蛋率也无明显影响，但有一定流行病学意义．试验证明，使用ＥＤＳ－７６ＨＩ母原抗体４．８Ｌｏｇ２以下的鸭胚，用ＨＡ５×２１２的种毒接种，对其病毒增殖没有明显的影响，可用于制造ＥＤＳ－７６灭活疫苗．但鸭胚母原抗体超过４．８Ｌｏｇ２以上，每增加１个滴度，所培养的病毒ＨＡ价下降５×２１．７．不宜作为制苗鸭胚．鸭群ＥＤＳ－７６血清抗体和卵黄抗体检测比较结果表明，被检的血清和卵黄抗体平均效价基本相同，可用卵黄代替血清作为血清学检查的被检材料．     

鸡新城疫、产蛋下降综合征、传染性支气管炎三联油佐剂灭活疫苗研制

应用鸡新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ株病毒和产蛋下降综合征（ＥＤＳ７６）病毒、传染性支气管炎（ＩＢ）病毒分别接种鸡胚、鸭胚和鸡胚，增殖病毒，收获感染的胚液，制备抗原液，经甲醛溶液灭活后与油相佐剂乳化，制出三联灭活油苗。对制品的安全性和免疫性进行了测定，具有良好的安全性和免疫效果。     

郑州地区家鸭EDS—76血清学调查

郑州地区９个鸭场鸭群中有７个鸭场为ＥＤＳ－７６ＨＩ抗体阳性，阳性率为６６～１００％，不同日龄和不同品种鸭群对感染无明显差异。被感染ＥＤＳ－７６病毒鸭群虽无可见临床症候，对产蛋率也无明显影响，但有一定流行病学意义，试验证明，使用ＥＤＳ－７６ＨＩ母原抗体４．８Ｌｏｇ２以下的鸭胚，用ＨＡ５×２＾１２的种毒接种，对其病毒增殖没有明显的影响，可用于制造ＥＤＳ－７６灭活疫苗，但鸭胚母原抗体超过４．８Ｌｏｇ２以     

Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒的分离与鉴定

从福州某鸭场大批发病和死亡的15～20日龄雏鸭肝脾中分离到1株病毒，该病毒无血凝性，可使4日龄健康鸭90．6％发病、62．5％死亡，利用Ⅰ型鸭肝炎病毒（DH）标准血清进行鸡胚中和试验和血清被动免疫保护试验，证明该分离的病毒株为I型DHV。     

一株鸭肝炎病毒的分离与鉴定

从山东某养殖场送检的疑似鸭病毒性肝炎病料中分离到一株病毒（暂命名为SD株）,分别用鸭胚、雏鸭进行传代和病毒含量测定,E1-E8代鸭胚适应毒的ELD50在1015^-5.0-10^-6.0／0．1mL之间,E1、E2代鸭肝组织毒的LD50分别为10^-5.5／0．1mL、10^-6.7／0．1mL。动物回归试验结果表明,SD株鸭胚适应毒E2对4日龄雏鸭的致死率为100％;雏鸭毒力测定试验结果表明SD株雏鸭肝组织毒E,代对12日龄内雏鸭具有较高致死率,12日龄后随着日龄的增大,雏鸭的死亡率逐渐降低;理化特性鉴定结果表明,SD株为无囊膜病毒,对脂溶剂（乙醚和氯仿）、胰酶、酸、热均不敏感,且无血凝性。血清交叉中和试验和交叉保护试验结果表明,在血清型上,SD株与DHV-1无关。通过对SD株与韩国N-DHVVP1基因的序列比对和进化树分析,发现二者同源性在99％以上。结果证实,SD株是新型鸭病毒性肝炎病毒,而不是DHV-1。     

鸡新城疫(D_(10)株)和减蛋综合征(GC_2株)鸭胚源二联灭活苗免疫效果观察

鸡新城疫（ＮＤ）和减蛋综合征（ＥＤＳ）是危害我国养鸡业的２种重要传染病。目前,本地区已将接种ＮＤ和ＥＤＳ列入蛋鸡群免疫程序,虽然取得了较好的免疫防治效果,但产蛋鸡ＮＤ仍有零量发生。为有效控制该病,简化免疫程序,我们对南京农业大学最新研制的ＮＤ和ＥＤＳ鸭胚源二联灭活苗进行了免疫效果观察,并与江苏另２家科研单位所研制的ＮＤ·ＥＤＳ二联苗作了比较,现报告如下。１　材料与方法１－１　疫苗　鸡新城疫（Ｄ１０株）和减蛋综合征（ＧＣ２株）鸭胚源二联灭活疫苗,由南京农业大学动物医学院用同一鸭胚同时增殖２种病毒法…     

1型鸭甲肝病毒LY0801株VP1基因在鸭胚传代中的变异规律研究

为了解1型鸭甲肝病毒（Duck hepatitis A virus type 1）VP1基因在鸭胚传代中的变异规律,本研究将LY0801株DHAV-1在鸭胚体内传代至30代,分别对1~5、10、15、20、25、30代病毒进行VP1基因的克隆测序。各代次病毒分别以108copies/胚接种9日龄健康鸭胚,测定各组鸭胚的平均死亡时间和病毒在鸭胚尿囊液中的增殖拷贝数。结果表明：DHAV-1在鸭胚传代过程中,不同代次之间出现12个氨基酸的反复变异和同步变异,分别为R43M（K）、T48A、T101S、L169F、T180I、S181L、R183Q、E184A（K）、G187D、D193N、M213R、H219Y;在传代过程中,病毒致死鸭胚的时间逐渐延迟,但病毒在鸭胚内的增殖拷贝数未呈现稳定增长的趋势。