牛精液新型冷冻保护剂的研究

通过对不同浓度的甘油和乙二醇对牛精液冷冻保存效果的测定,探讨冷冻保护剂乙二醇与传统冷冻保护剂甘油的冷冻效果,并通过对葡萄糖和卵黄及Tris等成分的调整进一步分析了主要营养成分和缓冲体系对牛精液冷冻保存的影响程度。试验表明:1GL和EG对牛精子均有良好的冷冻保护能力,解冻后6h的活力GL组中以GL1.2和GL1.4的活力最高,均为0.50;EG组中以EG0.7的活力最高,达到0.53,高于0.35以上的国标。2其他营养成分的变化对GL和EG保护精子的效果有一定影响,特别是卵黄的作用比较明显;3在同等条件下,GL对精子的冷冻保护效果优于EG,EG组的活力衰竭快于GL组。     

牛GV期卵母细胞冷冻保存后发育潜力的研究

二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PROH)、乙二醇(EG)和甘油(GL)4种冷冻保护剂程序化冷冻牛GV期卵母细胞的结果表明,EG和PROH的保护效果比GL和DMSO好。4种不同冷冻方法冷冻保存牛GV期卵母细胞,比较解冻后卵母细胞的体外成熟率、受精后卵裂率。结果表明,在程序化冷冻法与细管玻璃化法(Straw)之间的差异不显著(P>0.05),在开放式拉管法(OPS)与毛细玻管法(GMP)之间的差异不显著(P>0.05);但OPS和GMP与程序化冷冻法和Straw之间的差异极显著(P<0.01)。玻璃化冷冻效果优于程序化冷冻。说明GMP和OPS玻璃化冷冻优于Straw玻璃化冷冻。说明可以采用GMP方法冷冻保存牛GV期卵母细胞。     

新型稀释液TCM199、EG和GL冻存牛精液效果试验测定

[目的]为探讨新型稀释液冻存牛精液效果。[方法]通过对以TCM199为主要稀释剂,以EG和GL分别为冷冻保护剂的牛细管冻精的活力测定,筛选出了以TCM199、EG和GL为稀释剂和冷冻保护剂的新型牛细管冻精制作配方。[结果]表明:以EG为冷冻保护剂时,配方11的活力最高,达到0.55,以GL为冷冻保护剂时,配方11的活力最高,达到0.6。     

固体分散型地克珠丽抗鸡柔嫩艾美耳球虫的效果

为研究固体分散新剂型地克珠丽对鸡柔嫩艾美耳球虫的防治效果,试验选用120只艾维茵肉仔鸡,试验分4个组,空白对照组、感染不治疗组、添加地克珠丽简单预混剂组和添加固体分散型地克珠丽组。试验结果表明,2种剂型地克珠丽均有抗鸡柔嫩艾美耳球虫的效果,但固体分散型地克珠丽作用效果明显优于简单预混剂地克珠丽。     

两种不同剂型人工饲料饲养家蚕的比较试验

为了比较不同剂型人工饲料对家蚕的饲养效果,本试验以‘优食一号’为试验品种,采用1～2龄饲料育、3～5龄桑叶育的饲养模式,研究粉体饲料和膨化颗粒饲料对家蚕生长发育的影响。结果表明:两种剂型的人工饲料饲育家蚕的疏毛率基本一致,低于桑叶育;2种剂型的人工饲料饲育家蚕的体重和龄期经过无显著差异,均显著低于桑叶育;颗粒饲料育家蚕的生长发育略低于粉体饲料育和桑叶育家蚕;2种剂型的人工饲料的茧丝长、茧丝纤度和解数率比桑叶组低,茧丝质量无显著性差异。表明2种剂型的人工饲料均可用于小蚕期使用,大蚕转桑后补偿效应显著。     

牛皮肤成纤维细胞的体外培养与冻存

利用牛皮肤组织块直接培养法，得到牛皮肤细胞的原代培养物，再用酶消化法和反复贴壁法处理，能够纯化成纤维细胞。成纤维细胞的冻存是通过选用6种分别含有二甲基亚砜（DMSO）、甘油（GL）及乙二醇（EG）的保护液，以相同的冻前处理方法，对牛皮肤成纤维细胞进行缓慢冷冻，冰箱预冷平衡1－2h，逐步投入液氮（－196℃）中保存，再经37℃水浴解冻，Hanks液脱保护剂，以贴壁率评价冻存效果。结果表明，20％DMSO保护液对牛皮肤成纤维细胞表现出较好且稳定的冷冻保护效果，其平均贴壁率达87．9％。     

不同剂型维生素C对罗非鱼生长的影响

本文研究了不同剂型Vc对奥尼罗非鱼的饲喂效果。结果表明，添加Vc的5个试验组的增重率、饲料转化率均优于对照组，而稳定型Vc组又优于结晶Vc组，各稳定型Vc组以Vc磷酸酯镁和Vc硫酸酯钾效果更好。在本试验条件下，Vc硫酸酯镁组的增重率比对照组和结晶Vc组分别提高25.4％、23.3％，饲料转化率分别提高21.7％、18.9％；Vc硫酸酯钾组的增重率比对照组和结晶Vc组分别提高18.6％、16.7％，饲料转化率分别提高16.7％、14.0％。     

穿心莲对肉鸡淋巴细胞活性及白细胞吞噬功能影响的研究

本试验研究了不同剂型穿心莲对肉鸡细胞免疫的影响.将1日龄肉鸡随机分为七个试验组,处理如下:A组为1%超微粉;B组为2%超微粉;C组为0.2%浓缩颗粒(1g浓缩颗粒相当于5g生药);D组为0.4%浓缩颗粒;E组为1%浓缩颗粒;F组为2%细粉;G组为不加中药的空白对照.在试验的第14、21,28、35、42 d分别采血,进行淋巴细胞转化率、白细胞吞噬率及吞噬指数测定.试验结果表明,穿心莲对肉鸡淋巴细胞活性及白细胞活性(吞噬率和吞噬指数)有显著的提高作用(P＜0.05).同时,穿心莲超微粉和浓缩颗粒提高细胞免疫的效果优于细粉;相同剂量下,超微粉的效果有优于浓缩颗粒的趋势.     

不同剂型中草药添加剂对晋汾白猪猪肉品质的影响

试验选取晋汾白猪30头,分为中草药超微粉(Ⅰ组)、颗粒剂组(Ⅱ组)和对照组3个组,每组10头,进行不同剂型的筛选试验,2种剂型分别加入Ⅰ组和Ⅱ组进行饲喂,以期研究中草药不同剂型对晋汾白猪猪肉品质的物理性状、呈味氨基酸、必需不饱和脂肪酸及胆固醇等化学性状的影响。结果显示:pH1、B值(黄度)、剪切力最大值、眼肌面积和肌内脂肪含量Ⅰ组、Ⅱ组与CK组相比,差异显著,且Ⅰ组效果较好;6种呈味氨基酸Ⅰ组均显著高于CK组;亚油酸Ⅰ组和Ⅱ组显著高于CK组;胆固醇检测结果可见3个组间差异不显著,但Ⅰ组数值明显偏低。说明在饲料中添加中草药能够改善猪肉品质,而且制成超微粉剂添加后的效果要优于颗粒剂。     

穿心莲对肉鸡淋巴细胞活性及白细胞吞噬功能影响

试验肉鸡于1日龄随机分为7个试验组，A组为1％超微粉；B组为2％超微粉；C组为0．2％浓缩颗粒（1g浓缩颗粒相当于5g生药）；D组为0．4％浓缩颗粒；E组为1％浓缩颗粒；F组为2％细粉；G组为不加中药的空白对照在试验的第14、21、28、35、42天分别采血，进行指标测定，观察不同剂型穿心莲对肉鸡细胞免疫的影响试验结果表明，穿心莲对肉鸡淋巴细胞活性及白细胞活性（吞噬率和吞噬指数）有显著的提高作用（P〈0．05），同时，穿心莲超微粉和浓缩颗粒提高细胞免疫的效果优于细粉；相同剂量下，超微粉的效果有优于浓缩颗粒的趋势。     

玻璃化冷冻对猪GV期卵母细胞成熟及发育能力的影响

为了获得最适的冷冻猪GV期卵母细胞的冷冻保护液配方和最适冷冻载体,本研究就目前应用最多的7种冷冻保护液配方进行筛选,并且比较3种不同冷冻载体冷冻卵母细胞的效果差异。结果表明:7组冷冻保护液对GV期卵母细胞有低毒性作用,各组分裂率、囊胚率、囊胚细胞数均低于对照组,综合各组指标选取3组对猪MII期卵母细胞的发育能力损伤最小的冷冻保护剂,应用GMP管对其冷冻保护效果进行比较,发现第6组的极体率29.47%,第5组的极体率23.54%与第3组的极体率8.28%相比差异显著(P0.05),且第5组的存活率、极体率与第3组相比差异显著(P0.05)。综合考虑,选取第5组HM+7.5%(DMSO+EG),HM+15%(DMSO+EG)+0.5 mol/L Su组作为冷冻保护液来比较3种不同冷冻裁体冷冻卵母细胞的效果差异,发现半麦管冻融后的卵母细胞存活率高达54.11%与OPS管、GMP管的33.11%和26.79%差异显著(P0.05),半麦管法更适合GV期猪卵母细胞的玻璃化冷冻。     

绵山羊双羔素提高东北细毛羊繁殖率的研究

为了提高东北细毛羊的繁殖率,增加养殖户和养殖场的经济效益,试验采用绵山羊双羔素(睾酮-3-羧甲基肟·牛血清白蛋白)水剂型、Ⅰ型油剂型和Ⅱ型油剂型,对齐齐哈尔种羊场和大庆种羊场的东北细毛羊进行了免疫试验,测定了三种剂型的免疫效果。结果表明:水剂型绵山羊双羔素免疫效果最好。齐齐哈尔试验点,与对照组相比,初产母羊水剂试验组双羔率和产羔率显著提高(P0.05),经产母羊水剂试验组双羔率和产羔率极显著提高(P0.01);大庆试验点,与对照组相比,经产母羊水剂试验1,2组双羔率和产羔率也显著提高(P0.05)。     

不同剂型及稀释精液平衡时间对藏獒冻精品质的影响研究

为了探讨每剂含不同前进运动精子数(≥1 000万个和≥2 000万个)和稀释精液不同平衡时间(1 h、2 h、3.5 h)对藏獒冻精品质的影响,试验比较了0.25 m L细管剂型藏獒冻精解冻后精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率、精子37℃存活时间。结果表明:每剂含前进精子数≥2 000万个与≥1 000万个相比,藏獒冻精解冻精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率差异不显著(P0.05);而每剂含前进运动精子≥2 000万个组的藏獒冻精解冻后37℃存活时间优于每剂含前进运动精子数≥1 000万个组,且差异显著(P0.05)。藏獒稀释精液平衡2 h组的冻精活力显著高于平衡1 h组和3.5 h组(P0.05),而平衡1 h组和3.5 h组间差异不显著(P0.05)。冻精顶体完整率以平衡2 h组最高,为(41.00±1.47)%,与平衡3.5 h组间存在显著差异(P0.05)。平衡2 h组的冻精畸形率低于平衡1 h组和3.5 h组。说明藏獒0.25 m L细管剂型以每剂含前进运动精子数≥2 000万个,稀释精液平衡时间以2 h为宜,可获得较好的冷冻效果。     

中草药提取物对团头鲂生长及免疫力的影响

试验以团头鲂为研究对象,在饲料中添加5种不同剂型的中草药提取物1500mg/kg,分别为中草药1号、中草药2号、中草药3号、中草药4号和中草药5号,测定其对团头鲂的生长性能(体质量特定生长率(SGR)等)、生理机能(超氧化物歧化酶SOD、溶菌酶LSZ、谷丙转氨酶GPT、谷草转氨酶GOT、血红蛋白Hb含量)和体组织常规营养成分的影响,探讨5种剂型中草药提取物间的差异和优劣。养殖64d后,中草药4号组的生长速度最快、饲料系数最低且鱼体条形良好(肥满度适中、内脏指数和肝胰指数小),效果相对较理想。5种剂型中草药提取物对保护鱼体肝胰功能方面均具有很好的作用;对血清溶菌酶活力和各种超氧化物歧化酶活力等方面表现出提高鱼体免疫力和防御力的作用;血红蛋白各试验组都表现正常,其中添加5种剂型中草药提取物试验组优于对照组;在添加5种剂型中草药提取物试验组中,4号组表现出较强的优势。     

精浆含量对绒山羊精液低温保存效果的影响

为了研究精浆含量对绒山羊精液低温保存效果的影响,试验以低倍稀释(1∶2)为对照组,研究以高倍稀释(1∶10,高倍稀释组)和离心洗涤(洗涤组)两种方式去除精浆后的精子保存效果,再人为添加不同浓度精浆(0、10%、20%,30%、40%)于低温保存稀释液中,测定精子活率、运动速率、顶体完整性、质膜完整性及线粒体活性等精液品质指标。结果表明:高倍稀释组在各时间段内的精子活率、运动速率[直线速率(VSL)、曲线速率(VCL)及平均路径速率(VAP)]、质膜完整率均显著高于对照组和洗涤组(P0.05);高倍稀释组的精子顶体完整率和线粒体活性与对照组和洗涤组相比无显著差异(P0.05);在外源添加不同浓度精浆的试验中,10%、20%精浆组的精子活率、质膜完整率及运动速率均显著高于其他组(P0.05),而10%、20%精浆组之间无显著差异(P0.05),但20%精浆组的各项精子质量指标略高于10%精浆组。说明在低温保存山羊精液时存在一定浓度的精浆可以有效提高保存效果,在本试验条件下10%～20%的精浆添加量比较适宜,但20%精浆组的保存效果相对更好。     

玻璃化冷冻对猪MII期卵母细胞发育能力的影响

以MII期卵母细胞作为试验材料,应用玻璃化冷冻方法,就目前应用最多的7组冷冻保护液配方进行筛选,并且比较3种不同冷冻载体冷冻卵母细胞的效果。结果发现:7组冷冻保护液对MII期卵母细胞有低毒性作用,各组分裂率、囊胚率、囊胚细胞数均低于对照组;综合各组指标,选取3组对猪MII期卵母细胞的发育能力损伤最小的冷冻保护剂,应用GMP管对其冷冻保护效果进行比较,发现第7组冷冻保护液配方EFS不适于MII期卵母细胞的冷冻,其形态正常率、分裂率分别为1.19%、0,与第3组、第6组形态正常率、分裂率(59.48%、53.55%;24.19%、35.02%)差异显著(P0.05)。综合考虑,选取HM+7.5%(DMSO+EG),HM+17%(DMSO+EG)+0.4 mol/L Su作为冷冻保护剂来比较3种不同冷冻载体冷冻卵母细胞的效果差异,发现半麦管冻融后MII期卵母细胞的分裂率高达53.67%,与OPS法的29.33%及GMP法的35.00%相比差异显著(P0.05),半麦管法更适合MII期猪卵母细胞的玻璃化冷冻。     

7日龄小鼠生精上皮单细胞冷冻保存

在DMEM中添加10％小牛血清（NBS），并分别添加不同浓度的抗冻剂二甲基亚砚（DMSO）、丙二醇（PG）、乙二醇（EG）及甘油（G），对7日龄小鼠生精上皮单细胞进行冷冻保存，复苏后台齿蓝染色测定细胞复苏率。结果：当冻存液中DMSO分别为5％、10％、15％、20％时，细胞复苏率分别为77．1％、88．2％、86．5％、73．5％、65．5％，其中10％和15％DMSO组细胞复苏率最高，与其作各组间均差异极显著（P＜0．01）。当冻存液中PG分别为5％、10％、15％、20％、25％时，细胞复苏率分别为66．2％、84．3％、72．1％、69．9％、47．5％，其中10％PG组细胞复苏率最高，与其余各组间均差异极显著（P＜0．01）。当冻存液中EG分别为5％、10％、15％、20％时，细胞复苏率分别为64．9％、81．6％、60．9％、44．7％，其中10％EG组细胞复苏率最高，与其余各组间均差异极显著（P＜0．01）。当冻存液中G分别为5％、10％、20％、25％时，细胞腹苏率均低于10％。10％DMSO组细胞复苏率与10％PG组和10％EG组之间均差异显著（P＜0．05）或极显著（P＜0．01）。结果表明，10％DMSO、10％PG及10％EG均适宜冷冻保存小鼠精原细胞，以及10％DMSO的冻存效果最好，而则不适宜冷冻保存。在含10％DMSO的冻存液中，二步慢速冷冻，液氮储存，37C水浴复苏小鼠精原细胞，是一种具有较高细胞复苏率的冷冻保存方法。     

重庆板角山羊细管冷冻精液的研究

为了建立重庆板角山羊精液的细管冷冻保存方法,实验进行了不同冷冻稀释液(配方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、不同冷冻保存剂(甘油、EG)及不同离心速度(1000、1200、1400r/min)对重庆板角山羊细管精液冷冻保存效果的研究,结果表明:配方Ⅱ对重庆板角山羊精液的冻后活率显著优于配方Ⅰ和Ⅲ(P<0.05)。在配方Ⅱ中添加相同剂量(5%)的EG和甘油,精液冻后活率差异不显著(P>0.05)。以1200r/min的速度对山羊鲜精作离心处理后,冻后活率相对于对照组有所提高,但差异不显著(P>0.05)。     

玻璃化冷冻山羊卵母细胞效果研究

为了提高玻璃化冷冻保存山羊卵母细胞的效果,试验用不含Ca2+的玻璃化冷冻液1[30%乙二醇(EG)]、玻璃化冷冻液2[27.5%EG+2.5%二甲基亚砜(DMSO)]和玻璃化冷冻液3(25%EG+5%DMSO)研究抗冻保护剂DMSO和EG的不同浓度配比对山羊卵母细胞形态正常率、孤雌激活率、体外受精卵裂率及胚胎发育能力的影响。结果表明:山羊卵母细胞经玻璃化冷冻液1,2,3处理后细胞形态正常率(97.1%、97.3%、97.3%)与对照组(100%)相比有所降低,但差异不显著(P>0.05),且对卵母细胞均不产生具有化学毒性作用的孤雌激活;山羊卵母细胞经3种玻璃化冷冻液冷冻保存后,玻璃化冷冻液2冷冻保存卵母细胞的囊胚率(13.8%)显著高于玻璃化冷冻液1(5.7%)和玻璃化冷冻液3(5.1%)(P<0.05)。说明采用玻璃化冷冻液2冷冻保存山羊卵母细胞可获得较为理想的效果。     

饲喂复合益生菌对湖羊粪便微生物多样性的影响研究

为研究饲喂复合益生菌对湖羊粪便微生物多样性影响,试验选取4月龄、体重（34.6±0.65）kg的湖羊40只,按照“体重相近”原则随机分为对照组（CG组）和益生菌组（EG组）,每组20只。CG组和EG组分别饲喂全混合日粮,全混合日粮+复合益生菌,试验期60 d。试验结束后,每个处理随机选取10只湖羊,采集直肠末端粪样,利用16S rDNA技术进行测序分析。结果表明：（1）饲喂复合益生菌可以显著降低湖羊的腹泻率（P <0.05）。（2）按OTU聚类分析,EG组OTU(599个)高于CG组（466个）,且EG组的Ace指数、Chao1指数和Shannon指数均显著高于CG组（P <0.05）,Simpson指数两组差异不显著（P> 0.05）。（3）门水平上,EG组厚壁菌门、拟杆菌门、螺旋菌门、疣微菌门和纤维杆菌门的相对丰度高于CG组,变形菌门低于CG组,但差异不显著（P> 0.05）;属水平上,两组优势菌属为UCG＿005菌属、未分类的毛螺菌属、理研菌科RC9粪肠属和拟杆菌属,EG组高于CG组,但差异不显著（P>0.05）。（4）LEfSe分析结果显示,EG组...