杜仲愈伤组织诱导与继代培养研究

[目的]对杜仲进行愈伤组织诱导及继代培养,建立愈伤组织的培养系统。[方法]以杜仲子叶、幼叶、下胚轴为外植体,接种于不同培养基中诱导和继代。[结果]不同外植体愈伤组织的诱导率高低顺序为：下胚轴〉子叶〉幼叶。子叶和幼叶在MS＋NAA 1.00 mg/L、MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 2.00 mg/L、MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳;胚轴在MS＋NAA 3.00 mg/L、MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 1.00 mg/L和MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中诱导出的愈伤组织在MS＋6-BA1.00 mg/L＋NAA 2.00 mg/L、MS＋6-BA 1.00 mg/L＋NAA 1.00 mg/L和MS＋2,4-D 1.00 mg/L培养基中继代培养为佳。[结论]杜仲的子叶、幼叶和胚轴可采用多条途径实现愈伤组织的诱导和继代增殖培养,为进一步筛选高产细胞系打下基础。     

桂花愈伤组织的诱导与增殖

[目的]探索影响桂花愈伤组织诱导及增殖的激素组合。[方法]以紫银桂的幼叶、茎尖和幼胚为材料,对影响桂花愈伤组织形成和继代培养的激素组合进行研究。[结果]叶片、茎尖和幼胚在不同培养基中均能产生愈伤组织。在诱导培养基中NAA浓度为0.3 mg/L的条件下,当幼胚、幼叶和茎尖培养基中6-BA浓度分别为3.0、5.0和5.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。在诱导培养基中NAA浓度为0.5 mg/L的条件下,当幼胚、茎尖和幼叶培养基中6-BA浓度为3.0、3.05、.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。从节省成本的因素考虑,最适合愈伤组织增殖的激素组合应为6-BA 2.0+NAA 0.5 mg/L。[结论]该研究为桂花愈伤组织的诱导和增殖的进一步研究奠定了基础。     

大穗黑麦草成熟种子愈伤组织诱导及分化的研究

以大穗黑麦草成熟种子为外植体 ,采用MS基本培养基 ,研究了不同浓度的 2 ,4-D和 6-BA及其组合对其愈伤组织诱导的影响 ,不同浓度的NAA和 6-BA组合对愈伤组织分化成苗的影响。结果表明 :不同浓度 2 ,4-D对大穗黑麦草愈伤组织诱导率差异显著 ,以 7mg/L效果最好 ,浓度过高 ,愈伤组织诱导率下降 ;在 0～ 1 .0mg/L范围内 ,6-BA浓度越高 ,愈伤组织诱导率越高 ,但长势渐差 ;2 ,4-D + 6-BA的不同配比浓度的愈伤组织诱导率存在差异 ,以MS + 7mg/L 2 ,4-D + 0mg/L 6-BA的组合为最优 ,产生的愈伤组织数量多、质量好 ;NAA+ 6-BA不同配比浓度的愈伤组织分化率存在一定差异 ,以MS +NAA 0 .5mg/L + 6-BA 1mg/L的愈伤组织分化率最高。初步建立了一个以大穗黑麦草成熟种子为外植体的愈伤组织诱导及分化体系     

外植体及激素对SANDITI紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响

以SANDITI紫花苜蓿无菌苗下胚轴、茎、叶3种不同外植体为试材，在附加不同激素浓度的MS培养基上诱导愈伤组织。结果表明，SANDIT最佳外植体为下胚轴，最佳下胚轴愈伤组织诱导培养基为MS 2，4-D2．0mg／L 6-BA0．5mg／L。15d继代1次，或适当降低2，4-D浓度，提高6-BA或KT浓度，可以降低愈伤组织褐化率。愈伤组织在6-BA0．5mg／L，NAA0．1mg／L，GA31．0mg／L，YE250mg／L，CH250mg／L的MS培养基上，可获得较高的分化率。     

文冠果细胞悬浮培养技术研究

[目的]建立文冠果体细胞胚胎发生和快速成苗的悬浮培养体系,为文冠果的产业化和规模化发展提供参考。[方法]以文冠果新旧种子为材料,诱导体胚发生,进行文冠果细胞悬浮培养。[结果]适合胚性愈伤诱导的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L＋3％蔗糖;适合胚性愈伤组织不定芽诱导培养的最佳诱导培养基为MS＋6一BA1．0mg／L．4-NAA1．0mg／L＋3％蔗糖,且萌芽率最高;适合单细胞团再生植株培养的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋3％蔗糖。[结论]NAA和2,4-D混合使用有利于胚性愈伤组织的形成;一定浓度的NAA对文冠果愈伤组织萌芽培养有较大的促进作用。     

植物生长调节剂对广西地不容愈伤组织诱导的影响

以广西地不容叶片、茎段为材料,采用正交设计法研究6-BA、2,4-D、NAA3种植物生长调节剂组合对广西地不容愈伤组织诱导的影响。结果表明：不同组合均能诱导广西地不容叶片和茎段产生愈伤组织,但诱导效果存在一定差异;除6-BA、NAA对茎段愈伤组织相对生长速率影响显著外,3种生长调节剂对叶片、茎段愈伤组织诱导率及叶片愈伤组织相对生长速率影响均不显著。诱导叶片、茎段愈伤组织形成的适宜培养基分别为6-BA0．5mg／L＋2,4-D0．4mg／L＋NAA0．2mg／L和6-BA1．0rag／L＋2,4-DO．8mg／L＋NAA0．8mg／L,有利于提高愈伤组织生长速率的适宜培养基是：叶片6-BA0．5mg／L＋2,4-D0．4mg／L＋NAA0．2mg/L,茎段6-BA2．0mg／L＋2,4-D0．2m昏几＋NAA0．4mg／L。研究结果为广西地不容再生体系的建立奠定基础。     

五鹤续断愈伤组织的诱导和增殖

[目的]探讨五鹤续断愈伤组织的培养及增殖。[方法]以五鹤续断初春萌发的幼嫩茎、叶为外植体,研究不同植物生长调节物质及其组合对五鹤续断愈伤组织的诱导效应。[结果]当NAA浓度为1．0mg／L时,对五鹤续断愈伤组织的诱导率最高,为65．4％。当2,4-D浓度为1．0mg／L时,对五鹤续断愈伤组织的诱导率最高,为60．2％。当6-BA浓度为1．5mg／L时,对五鹤续断愈伤组织的诱导率最高,为67．2％,且其诱导的愈伤组织的生长势比NAA的更好。当KT浓度为0．5mg／L时,对五鹤续断愈伤组织的诱导率最高,仅为35．2％。6-BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L和6-BA1．0mg／L＋2,4．D2．0ng／L对五鹤续断愈伤组织的诱导率分别达89．5％和92．7％。在黑暗和光照培养条件下,愈伤组织的生长曲线均呈“S”型,符合Logistic生长模型。[结论]该研究为五鹤续断次生代谢物的提取和多倍体诱导提供了理论依据。     

小蓟叶片愈伤组织的诱导及增殖条件优化

[目的]建立小蓟愈伤组织的诱导及增殖培养体系。[方法]以野生小蓟无菌苗叶片为外植体,分析2,4-D、6-BA、NAA对小蓟愈伤组织的诱导及增殖的影响,确定最适宜的激素组合。[结果]单因素条件下,0.8 mg/L 2,4-D、0.9 mg/L 6-BA、2.0 mg/L NAA为小蓟叶片愈伤组织诱导的最佳浓度;MS+2,4-D 0.6 mg/L+6-BA 0.9 mg/L+NAA 2.5 mg/L培养基为小蓟叶片愈伤组织最适诱导组合。单因素条件下,2,4-D、NAA不适合小蓟愈伤组织增殖培养,MS+6-BA 0.3 mg/L为小蓟叶片愈伤最佳增殖培养基。[结论]该研究为小蓟的进一步开发利用奠定基础。     

瓜叶菊花梗和花托的愈伤组织诱导与植株再生研究

为建立瓜叶菊愈伤组织再生体系，以瓜叶菊花梗、花托为外植体进行了愈伤组织诱导和分化研究．结果表明：1）在MS＋2，4-D2mg／L＋NAA0．1mg／L，3／4MS＋2，4-D2mg／L＋6-BA1mg／L＋NAA0．1mg／L，3／4MS＋6-BA2mg／L＋NAA0．1mg／L培养基上花梗、花托的出愈率可达100％，但在3／4MS＋6-BA1mg／L＋NAA0．1mg／L，3／4MS＋6-BA1mg／L培养基上花梗的出愈率不及花托；2）3／4MS无激素培养基对花托愈伤组织芽的分化较好，诱导率可达95％，3／4MS＋6-BA1mg／L培养基对花梗愈伤组织芽的分化较好，诱导枣为90％；3）W生苗在1／2MS＋IBA0．2mg／L培养基中生根完成植株再生。     

不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响

[目的]寻求代替ZT提高猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的最佳激素组合。[方法]以美味猕猴桃离体茎段为外植体,以MS为基本培养基,附加2,4-D0.5、1、2.0mg/L和NAA0.1、0.3、0.5mg/L与6-BA0.5mg/L分别组成诱导愈伤组织的6个激素组合,并以同样浓度的2,4-D和NAA与6-BA1.0mg/L分别组成分化芽的6个组合激素,研究不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响。[结果]6种不同浓度的激素组合对猕猴桃茎段愈伤组织均有一定的诱导作用,其中2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L的组合有利于愈伤组织诱导,诱导率达86.1%;绿色愈伤组织在MS培养基附加激素2,4-D+6-BA组合中芽的分化率很低,而在附加NAA+6-BA组合中芽的分化率较高,其中,NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L的组合有利于芽分化,芽分化率为75.2%。[结论]2,4-D与6-BA组合对猕猴桃绿色愈伤组织的芽分化有一定抑制作用。     

不同激素种类和配比对秤锤树愈伤组织诱导的影响研究

[目的]为秤锤树的组培快繁提供依据。[方法]以WPM培养基为基本培养基,秤锤树叶片为外植体,比较了不同激素及其组合对秤锤树愈伤组织诱导的影响。[结果]不同浓度2,4-D诱导出的愈伤组织呈褐色透明的水渍状,放置约40d后逐渐褐化并坏死;2.0mg/L2,4-D和不同浓度KT的激素组合诱导出的愈伤组织呈乳白色的致密颗粒状或团块状。单独使用6-BA未诱导出愈伤组织,6-BA和NAA的激素组合诱导出了愈伤组织。当6-BA添加量为1.0mg/L时,出愈率随着NAA添加量的增加而提高。单独使用TDZ未诱导出愈伤组织,TDZ和NAA的不同浓度组合的出愈率分别为46.5%、37.1%、25.4%、24.5%和11.7%,诱导出的愈伤组织呈绿色、颗粒状、小而致密。[结论]只有激素组合2,4-D2.0mg/L+KT0.25～2.00mg/L才能诱导出致密、颗粒状、生长快的愈伤组织。     

激素对也门铁叶片愈伤组织的诱导效果

[目的]寻求诱导也门铁叶片愈伤组织的最佳激素配方。[方法]以也门铁无菌苗叶片为外植体,以MS为基本培养基,分别添加不同浓度的2,4-D、BA和NAA,配制成24种激素组合,通过离体组织培养,探讨不同激素配比对也门铁叶片愈伤组织的诱导效果。[结果]当NAA为0 mg/L,2,4-D与BA 2种激素以不同浓度组合,在2,4-D浓度是BA浓度的1.0~1.5倍时,也门铁愈伤组织诱导效率较高,但质量较差。当2,4-D为0 mg/L时,BA与NAA 2种激素组合的诱导率为0。当2,4-D、NAA与BA 3种激素组合且2,4-D与NAA的浓度比值为1时,也门铁愈伤组织的诱导时间短,愈伤组织质量较好。也门铁叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS＋0.5 mg/L2,4-D＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L BA,诱导率为44.4%。[结论]该研究为探索高效的也门铁组培快繁新方法提供科学依据。     

白皮松成熟合子胚的胚性愈伤组织诱导研究

[目的]建立白皮松体细胞胚胎发生快速繁殖体系,诱导出胚性愈伤组织。[方法]以白皮松成熟合子胚为外植体,以DCR作为基本培养基,研究不同浓度激素对外植体发育和胚性愈伤组织得率的影响。同时在不同激素浓度下对培养4周的外植体外形以及胚性愈伤组织进行了观察与分析。[结果]培养基中加入2,4-D可以使得外植体生长减慢,并出现愈伤组织,6-BA则使外植体的子叶变长,膨大并玻璃化。当2,4-D浓度为8mg/L、6-BA浓度为2mg/L时,胚性愈伤组织的诱导效果较好,诱导率平均为40.625%,该愈伤组织为白色半透明状,细胞小而细胞质浓,说明高浓度2,4-D和低浓度6-BA有利于白皮松成熟胚的胚性愈伤组织的获得。[结论]合适的激素种类和浓度是诱导白皮松成熟胚产生胚性愈伤组织的关键因素。     

喜树愈伤组织诱导与抑制褐化的研究

[目的]筛选喜树外植体的最佳诱导培养基,研究抑制外植体及继代愈伤组织褐化的方法。[方法]以喜树的幼叶和种胚作为外植体,通过测定过氧化物酶和多酚氧化酶的活性,从外植体选择、培养基种类、激素配比、添加物的处理等方面进行愈伤组织的诱导和抑制外植体及继代愈伤组织褐化的研究。[结果]幼叶外植体的最佳诱导培养基为:SH+NAA2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.25mg/L;种胚外植体的最佳诱导培养基为:MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L。抑制幼叶外植体褐化的方法为:增加外植体大小,吹干培养基表面水分。抑制愈伤组织继代培养褐化的方法为:最佳诱导培养基附加30mg/L抗坏血酸和5g/L活性碳;1次继代后,将质地致密的愈伤组织转移到MS培养基上培养。[结论]该研究为喜树的遗传转化和植株再生提供理论基础。     

荷兰月季快繁技术研究

[目的]探讨荷兰月季快速繁殖技术。[方法]以荷兰月季一年生枝条为试材,以MS为基本培养基,添加不同浓度激素,组配成具有不同激素组合的12种培养基,研究不同浓度的激素组合对无菌芽诱导、丛生芽增殖、成愈率、分化率及生根的影响,筛选出适合无菌芽诱导、丛生芽增殖和诱导愈伤的培养基和适合愈伤分化的培养基。[结果]在12种培养基中,适合无菌芽诱导的培养基为MS＋BA1．0mg／LBA＋0．2mg／LNAA,腋芽诱导率最高达68．0％;适合丛生芽增殖培养基为MS＋1．0mg/L BA＋0．1mg/L NAA,增殖倍数为3．6倍;适合产愈培养基为MS＋3．0mg／LBA＋0．2mg／L NAA,产愈率最高达41．6％;适合分化培养基为MS＋2．0mg／LBA＋0．2mg/L NAA,分化率最高为21．1％;适合生根培养基为MS＋0．1mg／L NAA＋2．0g／L活性炭,小苗移载成活率高达90％以上。[结论]该研究为实现荷兰月季工厂化育苗奠定了基础。     

影响益母草愈伤组织诱导的因素

[目的]研究影响益母草愈伤组织诱导的因素。[方法]以益母草种子萌发的真叶为外植体,MS为基本培养基,研究了不同浓度的植物激素和蔗糖以及不同的培养方式和光照条件对益母草愈伤组织诱导的影响。[结果]培养基中2,4-D为0.5或1.0mg/L和6-BA为2.0mg/L时,益母草愈伤组织诱导率相对较高,可达93.3%;愈伤组织诱导率随培养基中蔗糖含量的增加而增加,在蔗糖含量达到30g/L时达到最高,为86.7%,超过30g/L时则下降;在3种培养方式中,固体培养的诱导率是液体培养的1.63倍;3种光照中,全光条件下的愈伤组织诱导率可达到92.8%,全暗条件下的愈伤组织诱导率仅有43.6%。[结论]培养基添加合理的植物激素组合、蔗糖,并采用合适的培养方式和光照条件有利于益母草愈伤组织的诱导。     

马铃薯茎尖组织培养技术研究

[目的]提高离体马铃薯茎尖组织培养的成苗率和脱毒率。[方法]从马铃薯上取生长健壮的芽,经消毒后在显微镜下切取1．0到1．5min长度的茎尖,接种于诱导分化培养基上,研究了不同浓度的GA3、KT与6-BA和不同激素配比以及不同浓度的基础培养基的诱导效果,探讨了茎尖组织诱导分化的最适培养条件。[结果]低浓度的GA3可促进愈伤组织的形成,过高的GA3浓度会抑制愈伤组织的形成;KT比6BA具有更好的诱导效果;在MS＋GA30．1mg/L＋NAA0．1mg／L＋BBA0．5mg／L培养基中激素配比的诱导效果较好。[结论]MS＋0．5mg／LKT＋0．2mg／LGA3＋0．1mg／LNAA是最为适宜的茎尖组织培养基。在28℃、每天光照16h、光照强度〉2000lx的培养条件下,经7d左右即可得到形态良好愈伤组织,经15d左右即可得到分化良好的试管植株。     

福鼎大白茶愈伤组织的诱导条件优化

[目的]优化福鼎大白茶愈伤组织的诱导条件。[方法]以茶叶品种福鼎大白茶的幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的2,4-D、KT、NAA和蔗糖,研究不同激素组合、蔗糖浓度对其愈伤组织诱导的影响。在继代培养过程中,研究了不同抗褐变剂对愈伤组织生长情况的影响及抗褐变的效果。[结果]不同激素对福鼎大白茶愈伤组织的诱导影响依次为2,4-D>KT>NAA。适宜福鼎大白茶愈伤组织生长的培养基为MS+2,4-D1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L+KT0.5 mg/L+蔗糖30 g/L,pH值为5.8。在培养基中添加0.5%的活性炭和0.1%的聚乙烯吡咯烷酮可有效减轻愈伤组织的褐变。[结论]不同的激素组合、蔗糖浓度及抗褐变剂对福鼎大白茶愈伤组织的诱导均有较大影响。