几种真菌对马铃薯腐烂茎线虫趋化性的影响及其引诱物质的初步分析

马铃薯腐烂茎线虫Ditylenchus destructor Thorne是我国重要的检疫性病原线虫。为筛选对该线虫具有高效引诱活性的物质,本研究利用水琼脂平板法测试了不同真菌及其培养滤液对马铃薯腐烂茎线虫的引诱作用。结果表明,线虫对不同测试真菌趋性不同,其中对灰葡萄孢的趋性最强。在处理36 h后灰葡萄孢菌饼对线虫诱集率达到15%,其培养滤液对线虫的诱集率为8%,显著高于相应的禾谷镰刀菌、半裸镰刀菌处理与对照。灰葡萄孢对线虫的引诱作用随着处理时间延长而增加,处理96 h后灰葡萄孢菌片诱集到的线虫数为78头,引诱率为26%。经80℃加热120 min后灰葡萄孢菌饼对线虫的引诱能力未显著降低,说明灰葡萄孢中对线虫具诱引活性的物质对热稳定。灰葡萄孢正丁醇和乙醇提取物对线虫诱集率分别为11.6%和11.0%,显著高于石油醚提取物和甲醇对照。本研究可为开发马铃薯腐烂茎线虫防治新策略奠定基础。     

嗜菌异小杆线虫的分离鉴定及生物学特性分析

为了发掘具有耐高温特性的昆虫病原线虫,本实验室对在山东地区采集的122份土样进行了线虫分离,得到异小杆线虫JNR,扩增其ITS基因和D2-D3基因,并构建系统进化树,分析可得:线虫JNR与嗜菌异小杆线虫Heterorhabditis bacteriophora在同一分支,同源性达到98%以上,为嗜菌异小杆线虫品系。为进一步了解该线虫品系的生物学特性,本试验研究了其侵染力、高温耐受力及水平运动能力。结果表明,线虫JNR有较好的耐热性,38℃条件下处理16 h,存活率最高54%,24 h时为32%;40℃水浴处理2 h,低浓度500 IJs/mL下存活率28%,3 h后全部死亡。对大蜡螟和小菜蛾的生测结果显示,在10、15、20、25、30、35、40、60、120、240 IJs/头剂量下处理24 h,蔬菜害虫小菜蛾先出现死亡,大蜡螟则在48 h后出现死亡;大于20 IJs/头剂量下,处理48 h后线虫对大蜡螟的校正死亡率达到59.5%,高于对小菜蛾的侵染效果。在剂量120 IJs/头以上,72 h后寄主的校正死亡率均能达到100%。异小杆线虫JNR在30℃条件下水平运动能力比在18、25℃时强,48 h时有31%的个体运动到3.6 cm处。以上研究表明,该线虫有较强的侵染力,特别是在温度相对较高时具有较好的耐热力和水平运动能力,对防治蔬菜田小菜蛾具有应用开发潜力。     

三种杀线虫剂对甘薯茎线虫扩散的Hormesis效应

在实验室条件下应用沙柱法及水琼脂平板法,测定了低剂量水平的涕灭威、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和丙溴磷对甘薯茎线虫Ditylenchus destructor扩散行为的影响。结果表明:在含5 μ g/mL 药剂的沙柱中,以及甘薯茎线虫经0.1 μ g/mL的药剂浸渍24 h后在不含药剂的沙柱中,其运动扩散能力均受到抑制;在含较低质量浓度(5×10－3 μ g/mL)药剂的沙柱中,以及线虫经较低质量浓度(10－2,10－3 μ g/mL)的涕灭威和(10－4,10－5 μ g/mL)甲氨基阿维菌素苯甲酸盐浸渍24 h后在不含药剂的沙柱中,其通过率均比空白对照高10%以上,差异显著,表现出Hormesis效应(兴奋效应);经较低质量浓度(10-1 μ g/mL)的丙溴磷浸渍后在不含药剂的沙柱中未表现出该效应。在水琼脂平板试验中,虽然在低剂量水平下药剂对线虫的扩散具有促进作用,但产生的Hormesis效应不如沙柱法的结果明显。     

新疆塔城地区甘薯茎线虫病原鉴定

为研究新疆塔城地区甘薯茎线虫病的病原种群分类地位,2010年从乌兰乌苏镇发病地块采集病薯样本,通过贝曼漏斗法分离线虫后,对其致病性进行了室内接种测定,在显微镜下观察病原线虫形态和测量特征数值.结果表明:该线虫具有很强的致病力,接种薯块全部发病,与田间发病薯块症状相同;线虫虫体侧区有6条侧线,尾末端钝圆,雌虫后阴子宫囊较长,常延伸到尾长的3/4,这些典型分类特征与马铃薯腐烂线虫形态特征相符,且所测量数值与其基本一致.研究结果表明该病原线虫为马铃薯腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor Thorne),新疆地区应加强病区甘薯种薯及种苗的管理.     

两种亚菊属植物挥发油及其主要成分对马铃薯腐烂茎线虫的触杀活性

为探究植物挥发油对马铃薯腐烂茎线虫的防治效果，本研究用丝裂亚菊和光苞亚菊挥发油及其主要组分对该线虫进行触杀毒杀活性的测试。采用药物浸泡法，将提取的两种植物挥发油及其主要的共有组分桉叶油醇和马鞭草烯醇作用于马铃薯腐烂茎线虫，测试致死中浓度，进而将桉叶油醇和马鞭草烯醇按不同比例进行复配混合，测试两者复配后的杀线虫活性，结果显示：处理24 h后，丝裂亚菊和光苞亚菊的挥发油均对马铃薯腐烂茎线虫有一定的触杀毒杀活性，致死中浓度（LC_{50/24 h}）分别为1.50 mg/mL和1.23 mg/mL；处理48 h后，丝裂亚菊和光苞亚菊的挥发油对马铃薯腐烂茎线虫的致死中浓度（LC_{50/48 h}）分别为1.06 mg/mL和0.70 mg/mL，较处理24 h后杀虫作用更显著。处理24 h后，桉叶油醇（LC₅₀＝0.49 mg/ml）与马鞭草烯醇（LC₅₀＝1.09 mg/mL）的杀线虫活性强于两种亚菊属植物挥发油；桉叶油醇和马鞭草烯醇以2：6、4：4和3：5的体积比混配后，其LC₅₀（0.18、0.17和0.20 mg/mL）都明显比两种化合物单独处理时要低，说明这两种化合物在挥发油中发挥了协同杀线虫的作用，且效果明显。本研究可为亚菊属植物挥发油及其主要组分绿色防控马铃薯腐烂茎线虫奠定基础。     

昆虫病原线虫JLSY 003的鉴定及其生物学特性测定

经28S rDNA和ITS序列分析,从吉林省松原市土样中分离到的昆虫病原线虫JLSY 003为Oscheius myriophila品系.本研究以大蜡螟末龄幼虫为寄主,测定该线虫的生物学特性.结果表明,JLSY 003浓度为80IJs/larva时具有较高的侵染力,致死中时间LT50为15.409 h,侵染24、48h...     

当归麻口病中致病茎线虫的鉴定研究

从当归上分离出的致病线虫具备口针,断定其为植物寄生型线虫。经形态学比较研究,与甘薯腐烂茎线虫基本相同。其侵入初期外表无明显症状,待为害繁殖达到高峰后,被害块根外表出现干皱龟裂典型“麻口”症状,后期病灶腐烂,与对甘薯的致病过程近同。作者认为此种茎线虫与甘薯茎线虫同为腐烂茎线虫-Ditylenchus destructor Thorne,1945。     

棉铃虫危害对转基因棉花挥发物成分和释放速率的影响

采用顶空吸附法和气质联用对棉铃虫轻度危害的苗期转基因棉花33B释放的挥发物进行研究。结果表明:棉花挥发物的主要成分是绿叶气体、萜类及其衍生物,包括己醛,α-蒎烯、莰烯、β-蒎烯、柠檬烯、β-水芹烯、香芹醇、壬醛、顺3己烯醇乙酸酯、十四碳烯、β-石竹烯和柏木酮等;棉花的茎、叶及地上部分的释放速率分别为27.2、391.4、223.5 ng/g.h,棉株挥发物的总释放量主要由叶片所释放;棉花受棉铃虫幼虫轻度危害后,地上部分挥发物的释放速率明显增加,危害后1 h和12 h时的释放速率分别为622.54、69.6 ng/g.h,与对照棉花有明显差异;24h后其释放速率基本恢复;在受害棉花的挥发物组分中,主要是绿叶气体和萜类成分变化明显。     

根瘤菌Sneb183对大豆胞囊线虫二龄幼虫的作用方式研究

大豆胞囊线虫是大豆生产中的主要病害之一,由于化学防治存在费用高,效果不佳,污染环境和危害人畜安全等方面的诸多问题,生物防治成为了防治大豆胞囊线虫的新方法。本试验利用体外生物测定方法,研究了费氏中华根瘤菌Sinorhizobium fredii Sneb183对大豆胞囊线虫二龄幼虫的存活、卵孵化、呼吸作用以及体液渗透的影响。结果表明,根瘤菌Sneb183处理幼虫72 h后,死亡率达86.7%,处理初期,线虫出现活动迟缓等症状,而后表现出整个身体僵直的死亡症状;对卵的孵化抑制率可达59.4%;根瘤菌Sneb183对二龄幼虫呼吸有较强抑制作用,处理24 h后,耗氧量下降93.1%;同时根瘤菌Sneb183发酵液可引起二龄幼虫体液渗漏,处理48 h后电导率增加了62.4%。因此,根瘤菌Sneb183可成为大豆胞囊线虫病生物防治资源中的新成员。     

寒区昆虫病原线虫冷冻储存条件优化

以我国高寒地区分离、筛选出的高致病力昆虫病原线虫嗜菌异小杆线虫(Heterorhabditis bacteriophora HBN)为研究对象, 对其冷冻储存条件进行优化。结果显示, 介质中不同含水量对线虫HBN的冷冻存活率有着显著的影响; 其中含水量为50%的蛭石中线虫回收率最高, 为87.4%; 冷冻储存后的线虫经4 ℃ 24 h+室温1 h解冻利于线虫冷冻休眠后复苏; 线虫经阶段性降温较直接降温至-4 ℃的冷冻存活率提高31.6百分点; 储存介质蛭石中采用灭菌自来水较适于HBN线虫在-4 ℃冷冻存活; 7 d内冷冻储存增强了HBN线虫对寄主昆虫的侵入能力。     

Characterisation of volatiles produced from <Emphasis Type="Italic">Bacillus megaterium</Emphasis> YFM3.25 and their nematicidal activity against <Emphasis Type="Italic">Meloidogyne incognita</Emphasis>

A member of plant growth-promoting rhizobacteria, Bacillus megaterium YMF3.25, was demonstrated to be an efficient biocontrol agent (BCA) against root-knot nematode Meloidogyne incognita. Results from three-compartmented Petri dish tests and a pot experiment indicated that the bacterial culture could significantly inhibit the hatch of eggs and reduce infection of the nematode through production of nematicidal volatiles. After analysis by gas chromatograph/mass spectrometer and confirmation with commercial pure compounds, the nematicidal volatiles produced by the bacterium were characterised to include mainly the benzeneacetaldehyde, 2-nonanone, decanal, 2-undecanone and dimethyl disulphide, which were active against to both juveniles and eggs at the concentration of 0.5 mmol. Six compounds (phenyl ethanone, nonane, phenol, 3,5-dimethoxy-toluene, 2,3-dimethyl- butanedinitrile and 1-ethenyl-4-methoxy- benzene) with nematicidal activityies of 30%–63% also contributed to nematicidal efficacy of the bacterium.     

瑞香狼毒根提取物及不同溶剂萃取物对马铃薯腐烂茎线虫触杀活性研究

采用实验室活体生物试验方法,测定和比较了瑞香狼毒乙醇提取物及不同极性溶剂萃取物对马铃薯腐烂茎线虫的触杀活性。结果表明,瑞香狼毒根乙醇提取物及其石油醚、氯仿、乙酸乙酯及水相萃取物对马铃薯腐烂茎线虫有不同程度的触杀活性,其中乙酸乙酯萃取物对马铃薯腐烂茎线虫的触杀活性最强,显著高于其他萃取物。随着处理浓度的增大和处理时间的增长,该萃取物对线虫的触杀活性明显增强,表现出良好的量效关系。     

Nematicidal activity of anion transport blockers against Meloidogyne incognita, Caenorhabditis elegans and Heterorhabditis bacteriophora

BACKGROUND: Because methyl bromide has been phased out as a soil sterilant, new nematicides are urgently needed. Four different chemical classes of organic acids acting as anion transport (AT) blockers were tested against a free-living nematode, Caenorhabditis elegans Maupas, a plant-parasitic nematode, Meloidogyne incognita (Kofoid and White) Chitwood, and an entomopathogenic nematode, Heterorhabditis bacteriophora Poinar, in toxicity bioassays. The materials tested were DIDS (4,4'-diisothiocyanatostilbene-2,2'-disulfonic acid), 9-AC (anthracene-9-carboxylic acid), NPPB [5-nitro-2-(3-phenylpropylamino)benzoic acid] and IAA-94 (indanyloxyacetic acid). RESULTS: All the compounds showed slowly developing nematicidal activity against second-stage juveniles of M. incognita and adults of C. elegans, but not against H. bacteriophora infective-stage juveniles. The LC(50) values of these compounds were < 50 mg L(-1) after 48 and 72 h incubation, while at 168 h incubation the LC(50) values were < 10 mg L(-1) for both sensitive species. Across both species and time, the LC(50) values generally differed no more than twofold among the four compounds tested in this study. In contrast, none of the compounds (200 mg L(-1)) caused more than control mortality to H. bacteriophora, even after 168 h of incubation. CONCLUSION: These compounds are potential leads for commercial nematicides. The insensitivity to H. bacteriophora is consistent with the natural exposure of this nematode to DST (3,5-dihydroxy-4-isopropylstilbene), a stilbene produced by its symbiotic bacterium. Based on the known activity of the compounds used in this study, it is suggested that anion transporters form the probable target sites for DIDS, 9-AC, NPPB and IAA-94 in nematodes.     

Nematicidal activity of Ochradenus baccatus against the root‐knot nematode Meloidogyne javanica

Ochradenus baccatus is a widely distributed shrub in desert regions of the Middle East and North Africa. This plant's nematicidal activity against the root‐knot nematode Meloidogyne javanica was evaluated because it has been found to contain exceptionally high levels of glucosinolates. In in vitro assays with aqueous extracts of the plant, 100% of second‐stage juveniles were immobilized after exposure to 4% root‐core extract for 48 h; 8% root‐core extract suppressed their hatching by 87%, whereas stem, flower and root bark showed lower activity. Incorporation of root core or bark into the soil, as fresh or dry powder at 1 and 0·5% (w/w), respectively, reduced the number of nematodes recovered from the soil by 95–100%, whereas the flower and stem were much less effective. Results from further pot experiments indicated that only the root bark consistently contains nematicidal compounds which are effective in soil, whereas the nematicidal activity of the root core in soil was inconsistent. The presence of non‐volatile lipophilic and lipophobic nematicidal compounds in the root bark was suggested by extraction with different polar solvents, but these compounds do not seem to be isothiocyanates – glucosinolate‐hydrolysed compounds with nematicidal activity. Very poor host status of Ochradenus baccatus to M. javanica, M. incognita and M. hapla, but with root‐penetration rates of juveniles similar to those in tomato roots, suggest that this plant may be used as a cover plant or trap plant to reduce nematode populations in the soil.     

杀线虫植物以及植物源杀线虫活性化合物研究与应用进展

植物寄生线虫现已成为危害农业生产的第二大类病害,其防治迫在眉睫。线虫的生物防治是一种新型的线虫防治策略,主要是利用动植物和微生物及其次级代谢产物对线虫进行防治。植物源次级代谢产物即植物源化合物,源于自然,是植物源农药的核心。相比于化学杀线虫剂,植物源杀线虫剂对环境影响较小、靶向性强且不易使线虫产生抗药性。因此,从植物中获得结构新颖且杀线虫活性好的小分子化合物并将其开发成绿色农药,对于线虫病的防治具有重要意义。本文对杀线虫植物、具有杀线虫活性的植物源化合物及其杀虫机理、植物源杀线虫农药的应用情况展开综述,并对该研究领域进行了展望,希望能为植物寄生线虫病的防治与植物源杀线虫农药的开发利用提供参考和帮助。     

拟青霉云南菌株的杀线虫作用

测定了来自云南部分地区的拟青霉36株菌株对全齿复活线虫的杀虫作用。结果表明，除已知种淡紫拟青霉对线虫有毒杀作用外，拟青霉属中其余菌株对线虫也有一定的杀虫作用。其中，采自昆明西山的环链拟青霉．11号菌株对线虫有很强的降解作用，在CMV和沙氏培养基上，24h对线虫的致死率分别为68．7％和90．8％；一株待定种A-43-1菌株对线虫有很强的致死作用，在CMA培养基上，24h对线虫的致死率达94．7％，并且其分泌的红色素能被线虫吸收，使虫体变红。     

茶皂素杀线虫活性测定分析

 茶皂素(Tea saponin, TS)是由各类茶籽(油茶Thea sinesis或茶Camellia sasauqua)饼粕中提取出来的五环三萜类化合物,具表面活性、生理活性和鱼毒活性以及溶血性等。近10年来,国内有关TS杀虫抑菌活性有较多的研究报道,但未见杀线虫活性方面的报道。     

南方根结线虫拮抗链霉菌的筛选和鉴定

通过生物测定和温室防病试验 ,对分离自江苏省南京、淮阴和上海三地 3 0份土样的 3 44株放线菌菌株进行筛选 ,得到了 1株对南方根结线虫有较高生物活性的链霉菌菌株LH1 2 1。其培养滤液在离体条件下对南方根结线虫二龄幼虫有较强的触杀作用 ,4h内击倒率达 1 0 0 % ,1 2h内致死率达 1 0 0 % ;番茄植株上的活体防病试验表明 ,2ml/株培养滤液对根结和卵块形成的抑制率分别为52 .8%和 63 .5%。遗传稳定性试验表明LH1 2 1菌株能稳定产生杀线活性物质。LH1 2 1培养滤液主要通过直接触杀二龄幼虫或干扰其侵入植株而达到防治目的。根据形态、培养和生理生化特性的分析 ,将LH1 2 1鉴定为玫瑰暗黄链霉菌     

淡紫紫孢菌微菌核发酵滤液生防活性及代谢组学分析

淡紫紫孢菌是一种重要的生防真菌,在特定培养条件下可产生抗逆结构-微菌核。本文通过室内生测和温室盆栽试验,研究了淡紫紫孢菌微菌核发酵滤液对植物病原菌和根结线虫的抑制作用。结果表明,微菌核发酵滤液具有较强的杀线抑菌活性,其中对核盘菌生长抑制率达到70.5%,并显著降低菌核数量,滤液稀释10倍后对根结线虫二龄幼虫的致死率达到50%以上。用量为10 mL/株时对根结线虫病防效达到44.9%,黄瓜株高和茎粗分别增加21.6%和38.4%。同时,基于LC-MS构建了淡紫紫孢菌微菌核培养代谢组。分析表明,微菌核形成过程中芥酸、胡椒酚和泛酸等抑菌物质以及丁酸、咪唑乙酸等杀线化合物相对含量显著增加。本研究为揭示淡紫紫孢菌生防机制奠定了基础,为微菌核制剂的研发提供了理论依据。     

几种化学药剂和微生物菌剂对腐烂茎线虫的室内触杀活性

本研究比较了5种化学药剂和4种微生物菌剂对腐烂茎线虫的室内触杀活性,并在此基础上进一步探究了化学药剂与微生物菌剂复合使用的效果.结果 表明,在5种供试化学药剂推荐浓度条件下,70％噁霉灵可湿性粉剂26.92 g/L对腐烂茎线虫的触杀效果最好,72 h的校正死亡率可达87.32％,20％噻唑膦水乳剂6.06 g/L与41...