马传贫弱毒疫苗免疫机理的研究——马传贫弱毒接种马、驴体内病毒抗原跟踪观察

用免疫荧光技术对接种马传贫弱毒的14匹马和20头驴体内病毒抗原进行了8～9个月的连续跟踪观察。结果表明,病毒抗原主要出现在肝淋、脾淋、骨髓等免疫器官。其形态主要有三大类。第一类存在于巨噬细胞胞浆内;第二类是以免疫复合物形式附贴在增生的嗜酸性粒细胞及其崩解的颗粒上;第三类的为泡沫样无定型荧光,主要存在于肾细尿管管腔中。本文就弱毒抗原在体内持续存在的机理、弱毒抗原与免疫形态学及机体免疫状态关系、神经-内分泌调节在免疫发生中的作用以及马与驴免疫形态差异产生的原因等进行了讨论。     

马传贫弱毒疫苗免疫机理的研究：—马传贫弱毒接种马、驴体内病毒抗原跟踪观

用免疫荧光技术对接种马传贫弱毒的14匹马和20头驴体内病毒抗原进行了8－9个月的连续跟踪观察，结果表明，病毒抗原主要出现在肝淋、脾淋、脾淋、蛋白髓等免疫器官，其形态主要有三大类，第一类存在于巨噬细胞胞浆内；第二类是以免疫复合物形式附贴在增生的嗜酸性粒细胞及其崩解的颗粒上，第三类的为泡沫样无定型荧光，主要存在于肾细胞管管腔中，本文就弱毒抗原在体内持续存在的机理，弱毒抗原与免疫形态学及机体免疫状态关系，神经内分泌调节在免疫发生中的作用以及马与驴免疫形态差异产生的原因等进行了讨论。     

马传贫弱毒疫苗免疫马、驴免疫形态学研究

本试验共用马传贫弱毒疫苗免疫驴10头,马14匹及健康对照驴7头,马2匹,马传贫强毒对照马2匹,进行了免疫形态学观察。结果表明免疫动物的主要反应出现在免疫器官。与健康动物相比,胸腺体积与重量增大4.5倍以上,脾脏滤泡增大1.5倍以上。以及淋巴结的淋巴小结扩大均为实质性增殖的结果。在骨髓、脾脏动脉周围淋巴鞘及淋巴结副皮质区等,亦有免疫活性细胞增多的现象。在肝脏见到细胞性小结节。其它变化极其轻微。与健康马、驴及各型传贫病马的病理变化规律有明显差异。 免疫动物各免疫器官巨噬细胞均明显增多,并且骨髓中的巨噬与具有免疫活性的浆细胞密切联系形成“浆细胞岛”。在脾动脉周围淋巴鞘区也有巨噬细胞与母化的T淋巴细胞密切接触的现象。胸腺皮质区细胞母化显著,胸腺髓质区胸腺小体及特殊细胞增多等马传贫免疫形态学的变化。 用组化法显示的免疫活性细胞的活动及分布状态的观察表明,在免疫形成过程中免疫动物的中枢免疫器官从疫苗注射一开始就十分活跃,免疫后3个月内,外周免疫器官中,淋巴细胞有减少的趋势,但免疫3个月以后外周器官中的T、B淋巴细胞和巨噬细胞的增殖出现了新的平衡。甚至在淋巴结的髓索,脾脏小淋巴管及窦周围等部位见有几种主要免疫活性细胞同时增殖的现象,且持续很久,未出现免疫缺陷     

马传贫弱毒疫苗接种马攻强毒后病理及免疫形态学变化规律的研究

本试验观察到三种类型变化的病理和免疫表态变化，一种型具有出血性素质铁塑转，组织球及淋巴祥细胞浸润，网状内皮系统增生，实质器官变性，坏死，心肌腱斑及全身性结缔组织增生，表明是传贫病马的规律性变化，一种类型是免疫活性作用，一种类型无任何病理变化，主要表现免疫反应显著增强，表明这些马全保护，这三种类型的划分对区另传贫病马，免疫马，血清学鉴别及现地马传贫净化工作提供了科学依据。     

马传贫弱毒疫苗免疫马诊断盒的研制

应用马传贫驴白细胞弱毒株系特异性单克隆抗体(McAb),以免疫斑点试验(DB)与免疫扩散试验(ID)相结合的方法,已成功地用于马传贫自然病马与马传贫弱毒疫苗免疫马的鉴别诊断。为方便推广应用,我们在上述成果的基础上研制了马传贫弱毒疫苗免疫马诊断试剂盒,经与原法比较,结果稳定,方法简易,适于现地使用。现将结果报告于后。     

马传贫弱毒疫苗免疫马外周血TB淋巴细胞的动力学观察

近年来,研制成功了马传贫驴白细胞弱毒疫苗,在现地广泛用于马传染性贫血病(简称马传贫)免疫收到了良好效果。但是,人们对马传贫的免疫机理,尚不清楚。为此,我们肘接种马传贫弱毒疫苗马进行了外周血TB淋巴纠胞的动力学观测,以期为     

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究 Ⅲ.马传贫弱毒LP继代细胞冻干疫苗保存期及对马免疫期试验

马传贫弱毒LP继代细胞疫苗冻干后置于-40℃及冷库保存18个月,其毒价为10~(-7)/ml,与冻干前湿苗的毒价一样。用冻干疫苗免疫的马其免疫期可达25个月。     

马传贫弱毒疫苗接种马(骡)免疫反应动力学研究

本试验对注射马传贫弱毒疫苗后的马(骡)50匹,分别进行了体温、血液学、血清抗体及血液中T淋巴细胞等项目的检测。在此基础上,探讨了注苗后马(骡)免疫反应及其动态规律。提出注苗马(骡)在T细胞恢复到正常水平前,仍有感染强毒的可能,因此对马(骡)仍需进行监控。     

应用单克隆抗体对马传贫弱毒疫苗接种马血清中相应抗原的检测

应用马传贫驴白细胞弱毒株系特异单克隆抗体酶结合物的免疫斑点试验检测证明,自28份马传贫弱毒疫苗免疫马血清中均检出与单抗呈阳性反应的相应抗原,持续期达51个月以上;自19份人工感染传贫马、自然感染传贫马、弱毒疫苗免疫后攻毒马及42盼健康马血清中均未捡出单抗相应抗原。病理学检查表明,弱毒疫苗免疫马无马传贫病理学改变。以弱毒免疫马肝、脾、骨髓材料进行生物学试验表明,弱毒免疫马体内不存在致病性病毒。这为阐明该弱毒疫苗的免疫本质提出一个非常值得今后深入加以探讨的课题。     

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究——Ⅱ.马传贫弱毒LP继代细胞疫苗及其免疫效力的研究

将马传贫弱毒通过LP继代细胞传代研制成LP继代细胞疫苗,接种马匹,血清阳转率可达80％以上;用L系传贫血清强毒攻击,可保护75％以上;免疫持续期至少16个月。该苗10~(-4)1ml接种马,保护75％;10~(-5)1ml接种驴,保护50％。按1:1加入牛驴清制成的冻干疫苗,与湿苗一样对马有较好的免疫力。用异源传贫强毒(Wyoming株及云南株)攻击疫苗接种马,表现有交叉免疫性。疫苗现地区域试验的结果,与试验室结果一样,对马具有较好的安全性及免疫性。     

应用单克隆抗体对马传贫弱毒疫苗接种马血清中相应抗原的检测

应用马传贫驴白细胞弱毒株系特异单克隆抗体酶结合物的免疫斑点试验检测证明，自28份马传贫弱毒疫苗免疫马血清中均检出与单抗呈阳性反应的相应抗原，持续期达51个月以上，自19份人工感染传贫马、自然感染传贫马、弱毒疫苗免疫后攻毒马及42份健康马血清中均未检出单抗原，病理学检查表明，弱毒疫苗免疫马无马传贫病理学改变，以弱毒免疫马肝、脾、骨髓材料进行生物学试验表明，弱毒免疫马体内不存在致病性病毒，这阐明该弱毒疫苗的免疫本质提出一个非常值得今后深入加以探讨的课题。     

注射马传贫弱毒疫苗后马骡发生传贫问题的调查

近几年来,东北地区马骡大都注射马传贫弱毒疫苗,疫情稳定,没有暴发流行,马传贫病马显著减少,基本上控制了本病的发生,充分证明马传贫弱毒疫苗免疫效果好、安全稳定。但个别单位注苗后仍有散在发生。从1977～1983年我区部队统计注弱毒疫苗后,     

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究：Ⅲ．马传贫弱毒LP继代细胞冻干疫苗保存期及

马传贫弱毒LP继代细胞疫苗冻干后置于－40℃及冷库保存18个月，其毒价为10^-7/ml，与冻干前温苗的毒价一样，用冻干疫苗免疫的马其免疫期可达25个月。     

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究 Ⅳ.马传贫弱毒LP继代细胞疫苗使用代次的研究

用马传贫驴白细胞123代弱毒通过 LP 继代细胞传代获得的 LP 继代毒制备了6、8、10、13及15代 LP 继代细胞疫苗,然后分别用10倍稀释及原液疫苗2 ml/匹皮下接种马进行效力试验。结果,在10倍稀释疫苗免疫组中,6代疫苗及15代疫苗保护率均为50%,10代疫苗保护率为100%;在原液疫苗免疫组中,6代疫苗保护率为50%,8、10、13及15代疫苗保护率均在90%以上。为此,该疫苗使用最佳代次为8～13代。     

马传贫弱毒疫苗免疫马与自然病马沉淀及补反抗体耐热性差异的探讨

本试验测定了马传贫弱毒疫苗免疫马与传贫病马琼脂扩散沉淀抗体(沉淀抗体)及补体结合反应抗体(补反抗体)活性的耐热曲线。证明免疫马的抗体较传贫病马的耐热性差。64℃水浴15分钟后,免疫马血清沉淀抗体完全丧失反应活性,而传贫病马血清一般多能保持阳性反应。用65℃水浴15分钟处理琼扩阳性反应血清,结果传贫病马血清142份中的128份仍为琼扩阳性,传贫病马注苗后的血清5份均呈琼扩阳性;免疫马血清37份则全部转为阴性反应。65℃水浴15分钟后,免疫马血清补反抗体完全丧失反应活性,而传贫病马血清仍可呈阳性反应。用65℃水浴15分钟处理补反阳性血清,结果传贫病马血清40份、强毒接种马血清2份的补反仍保持阳性;免疫马血清42份则均转为阴性。     

检测马传贫强毒感染马与弱毒疫苗免疫马外周血病毒抗原的研究

从马传贫强毒急性感染马的外周血白细胞、血浆、血清中可检出马传贫病毒抗原;从亚急性感染马外周血的白细胞、血浆中可检出马传贫病毒抗原;从无症状慢性马外周血的白细胞中偶尔能检出马传贫病毒抗原。对9匹马传贫驴白细胞弱毒疫苗免疫马连续跟踪3个月,从外周血的白细胞、血浆、血清中均未检出马传贫病毒抗原。