响应面法优化巴西虫草发酵培养基的研究

利用响应面法优化巴西虫草(Cordyceps brasiliensis)液态发酵培养基。在预备实验的基础上,采用Plankett-Burman设计对影响巴西虫草菌丝体产量的液态发酵培养基组分进行了筛选,确定主要影响因子为葡萄糖和牛肉膏。再用最陡爬坡实验逼近以上2个因素的最大响应区域。最后通过中心组合设计和响应面分析法,确定了主要影响因子的浓度。优化后的培养基组成为:葡萄糖4.46g/100mL,可溶性淀粉2g/100mL,蚕蛹粉4g/100mL,牛肉膏2.93g/100mL,KH2PO40.1g/100mL和MgSO4·7H2O0.15g/100mL。     

一株黄瓜枯萎病拮抗菌的鉴定及发酵培养基的优化

采用形态观察和生理生化特性检测方法,结合16SrRNA基因序列分析,将一株黄瓜枯萎病拮抗菌株KC24鉴定为类芽孢杆菌,并对其进行了抑菌谱测试。结果表明:KC24能拮抗多种植物病原菌,具有广谱抗菌活性,利用响应面法对其产芽孢发酵培养基进行了优化,优化后的发酵液中芽孢数量达13.5×108 cfu·mL~(-1),比优化前提高了107.7%。最优产孢培养基配方为玉米粉20g,豆粕5g,KNO_32.0g,KH_2PO_4 2.59g,NaCl 1.0g,(NH_4)_2SO_4 2.04g,Fe_SO_40.009 1g,MgSO_4·7H_2O 1g,H_2O 1L,pH 7.0。     

内生解淀粉芽孢杆菌X-278发酵条件的优化

以内生解淀粉芽孢杆菌为试材,采用单因素和正交实验,通过比较发酵液的生物量及其对棉花黄萎病菌的抑菌活性,对内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)X-278液体发酵条件进行了优化。结果表明:内生解淀粉芽孢杆菌X-278培养基各组分的最佳配比为葡萄糖1.5%、花生饼粉2%、硫酸铵0.5%、碳酸钙0.1%、硫酸镁0.5%、氯化钠0.5%;最佳发酵培养条件为初始pH 7,培养温度34℃,转速180r/min,种龄为24h,装液量150mL/500mL三角瓶,接种量2%,发酵时间为72h。优化后的发酵液中活菌数量达到1.5×1010 CFU/mL,对棉花黄萎病菌的抑菌圈直径为33.4mm。     

生物源杀菌剂及其与戊唑醇复配对苹果主要炭疽菌的室内活性评价分析

苹果免套袋生产已经成为苹果产业转型升级的必然趋势，然而去袋后，主要由胶孢刺盘孢和尖孢刺盘孢侵染引起的苹果炭疽病会引发烂果、落果，严重影响苹果产量和品质，且面临果面农药残留的问题。为此，筛选可用于防控上述病害的生物源杀菌剂至关重要。采用菌丝生长速率法首先测定了8种生物源杀菌剂对2种病菌菌丝生长的抑制效果，结果表明，50亿cfu/g多粘类芽孢杆菌、100亿cfu/g枯草芽孢杆菌、300亿cfu/g解淀粉芽孢杆菌对2种病菌菌丝生长的抑制效果较好，对胶孢刺盘孢的EC₅₀值分别为1.489×10^-5、5.911×10^-1、1.717×10^-5μg/mL，对尖孢刺盘孢的EC₅₀值分别为2.810×10^-4、1.302×10^-1、1.110×10^-2μg/mL。进而分析了上述药剂与常用化学药剂43%戊唑醇的最佳复配比，结果表明，100亿cfu/g枯草芽孢杆菌与43%戊唑醇按1∶1比例复配时，对胶孢刺盘孢的抑制效果最好，增效比为...     

响应面法优化解淀粉芽孢杆菌D1产抗菌素培养基研究

以1株解淀粉芽孢杆菌为出发茵,采用Box-Behnken试验及响应面分析相结合的方法对其产抗菌素的发酵培养基进行优化.结果表明:最佳培养基配方为C源淀粉1.88％,N源牛肉膏1.76％,酵母膏0.74％,KH2 PO4 0.25％,K2HPO4 0.1％,(NH4)2SO4 0.08％.通过优化产抗菌素培养基,抗菌素的抑菌圈直径由优化前的19.2 mm提高到优化后的27.2 mm,提高了41.7％.     

抗番茄灰霉病菌的内生短短芽孢杆菌W4菌株发酵条件优化

为提高内生短短芽孢杆菌（Brevibacillus brevis）W4 菌株发酵液对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）的抑菌活性，采用单因素试验与正交试验设计相结合，优化发酵培养基及发酵条件。结果表明，最佳发酵培养基为蛋白胨 2.0%、果糖 1.0%、NaCl 0.25%；最佳发酵条件为初始pH 8.0、接种种龄20 h、接种量5%、装液量50 mL（250 mL 三角瓶）、发酵温度35 ℃、摇床转速150 r·min^-1、发酵时间24 h。产生的发酵液稀释25 倍对番茄灰霉病菌的抑制率达92.8%，比未经优化得到的发酵液提高26.9 个百分点。通过培养基和发酵条件优化，显著提高了短短芽孢杆菌W4 发酵液活性，为进一步提取分离抗番茄灰霉病菌的活性成分奠定了基础。     

裂褶菌的鉴定及液体发酵技术优化

以采集到的裂褶菌标本为试材,采用正交实验和响应面优化试验,研究了裂褶菌液体发酵工艺,以期获得适于工厂化生产的液体发酵工艺技术。结果表明：该菌PCR产物长度为615 bp,结合ITS序列比对确定该菌株为裂褶菌(Schizophyllum commune);以得到的菌种为研究对象进行液体发酵试验,以菌丝干质量为标准,通过正交实验确定了裂褶菌液体菌种发酵的最优培养基配方为可溶性淀粉30 g·L^-1,牛肉膏8 g·L^-1,KH₂PO₄ 0.75 g·L^-1,MgSO₄ 0.25 g·L^-1,pH自然;通过单因素筛选、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验得出最佳培养条件为温度26℃,装液量109 mL,初始pH 6.3。结合正交实验和响应面优化试验后,培养的菌丝球密度大、大小适宜、活力强,适合作为菌种进行工厂化栽培。     

抗辣椒疫病枯草芽孢杆菌BS18液体发酵条件的研究

初步探讨了抗辣椒疫病芽孢杆菌BS18的发酵条件,通过培养条件优化及正交试验得出最佳培养基配方:即牛肉膏 蛋白胨3%,麦芽糖0.5%,NaCl 0.1%,(NH4)2SO40.5%;最佳培养条件为:起始pH值7.0～7.5、250 mL三角瓶装液量30 mL、接种量0.5 mL、摇瓶速度130 r/min、温度30℃.在此条件下培养BS18菌株48 h,其无菌发酵液对辣椒疫霉病菌抑菌圈直径达2.85 cm.     

以豆渣为原料培养白灵菇菌丝体的研究

以豆渣为主要原料,应用正交试验法对白灵菇液体发酵最佳培养基及发酵工艺条件进行了研究.结果表明,白灵菇液体发酵最佳培养基配方为葡萄糖2%、MgSO4·7H2O0.05%、 KH2PO40.15%、豆渣7%,并用浓度为1.5%的洗豆渣水替代水.适宜的工艺为发酵时间5d,装液量80mL于20OmL三角瓶,发酵温度25℃.     

响应面法优化灵芝AM21菌株液体深层发酵培养基配方

为了提高灵芝(Ganoderma lucidum)AM21菌株菌丝产灵芝三萜的能力,采用响应面法对其液体发酵培养基配方进行优化.首先采用Plackett- Burman设计法对影响菌丝体三萜含量的9个相关因素进行筛选,确定主要影响因子为豆粕粉和山药,然后用最陡爬坡试验逼近2个主要因素的最大响应区域,并通过中心组合设计和响应面分析,确定主要影响因子的最佳浓度.优化后的培养基组成为1.84％豆粕粉,1％玉米粉,1％葡萄糖,0.92％山药,0.5％酵母粉,0.1％麸皮,0.1％ KH2 PO4,0.1％ MgSO4·7H2O,0.01％ VB1.使用该培养基生产的灵芝菌丝体中三萜含量较使用基础发酵培养基生产的高29.13％.     

不同条件对枯草芽孢杆菌菌剂有效活菌数的影响

为了探究不同p H和温度条对枯草芽孢杆菌有效活菌数的影响,本试验共设置了3、5、7、9、11五个p H梯度和20℃、30℃、40℃、50℃、60℃五个温度梯度,并测定其有效活菌数。同时对枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌进行了拮抗实验。结果表明在p H为3~7时,本试验所使用的枯草芽孢杆菌其有效活菌数生长旺盛;当温度在20~40℃之间时,其有效活菌数存活率可达到90%以上,且本试验所使用的枯草芽孢杆菌会和巨大芽孢杆菌产生拮抗作用。     

生物制剂对温室大棚有机黄瓜白粉病的防治效果

比较了枯草芽孢杆菌可湿性粉剂(1×109 cfu/g)和氨基寡糖素对有机黄瓜白粉病的防治效果。试验结果表明,在黄瓜白粉病发病较轻时,连续喷施枯草芽孢杆菌可湿性粉剂200倍液和氨基寡糖素700倍液能较好地控制白粉病的发生,防治效果分别达到87.2%~90.7%和52.5%~91.5%。建议在有机黄瓜未发生白粉病或白粉病病情指数小于10的情况下应用生物制剂进行防控。     

不同浓度枯草芽孢杆菌水剂对黄瓜枯萎病的防治效果

采用田间试验方法，研究不同浓度枯草芽孢杆菌水剂（AS）对黄瓜枯萎病的田间防治效果及对黄瓜生长和产量的影响。两年试验结果表明，8.3×109 cfu?L-1枯草芽孢杆菌AS对黄瓜枯萎病的防治效果最好，分别为81.8%和77.5%，明显高于5.0×109 cfu?L-1和3.1×109 cfu?L-1枯草芽孢杆菌AS的防治效果，但与50%多菌灵可湿性粉剂（WP）处理无显著差异|枯草芽孢杆菌AS对黄瓜生长无不良影响且具有一定的增产效果，与清水处理相比，2008年和2009年8.3×109 cfu?L-1枯草芽孢杆菌AS处理的增产率分别为5.8%和10.0%。     

复合功能性基质对甜瓜生长及果实品质的影响

以甜瓜品种西州蜜25 号为试材，以草炭、蛭石、珍珠岩（体积比2∶1∶1）为基础基质，将2 倍或4 倍Hoagland 营养液、 保水剂、枯草芽孢杆菌等混配成不同复合功能性基质，探究营养液浓度、保水剂和枯草芽孢杆菌混配对甜瓜生长发育及果实 品质的影响。结果表明，与仅添加2 倍和4 倍营养液肥料的处理（T1、T5）相比，营养液、保水剂和枯草芽孢杆菌三者混 配的基质（T4、T8）均可显著增加甜瓜植株的生物量，提高叶片叶绿素含量、光合作用和单果质量，促进果实可溶性蛋白 和可溶性糖含量积累，降低果实硝态氮和可滴定酸含量。由多因素方差分析结果可以看出，保水剂对增加叶片叶绿素含量、 提高水分利用效率、增加单果质量和果实可溶性糖含量、降低硝态氮含量效果最明显；枯草芽孢杆菌对增加植株生物量、促 进光合作用、提高果实可溶性蛋白及降低可滴定酸含量效果最明显。所有处理中，4 倍营养液条件下与保水剂和枯草芽孢杆 菌混配（T8）的处理效果最优。为此，在甜瓜基质栽培生产中，推荐选用以草炭、蛭石、珍珠岩（体积比2∶1∶1）为基质， 混配含有4 倍营养液、保水剂（8 mL · L^-1）和枯草芽孢杆菌（2 g · L^-1）的复合功能性基质。     

生防菌剂与生物有机肥复配对黄瓜抗病促生效果的研究

以"津优二号"保护地黄瓜为试材,研究了枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、淡紫拟青霉、粉红粘帚霉等生防菌与生物有机肥复配对黄瓜形态指标、产量和蔓枯病发病率的影响。结果表明:各种复配组合都能够增加黄瓜的叶面积、株高、茎粗、茎节数,提高产量,增强抗病性。但以粉红粘帚霉67-1+有机肥复配效果最好,能增产19.33%,对蔓枯病的防治效果达到92%。     

三角紫叶酢浆草的组织培养

以三角紫叶酢浆草(Qralis triangularis Subeg.triang)的叶片、叶柄为外植体进行组织快繁研究.通过正交试验设计并结合方差分析,探讨了三角紫叶酢浆草离体培养的最佳外植体及培养基,其试验结果表明:(1)叶片为最佳外植体,以叶片为外植体,MS 6-BA 1.0 mg/L NAA0.2 mg/L 蔗糖30g/L 琼脂0.9%为愈伤诱导的最佳培养基,其诱导率为93.3%.(2)生根培养中以1/2 MS NAA 0.2 mg/L 蔗糖30g/L十琼脂0.8%为最好,生根率93.8%.     

密度和施肥量对辣椒新品系ZJ1-12产量和经济效益的影响

为探索辣椒新品系ZJ1-12的高产优化农艺措施,运用4因素(完全实施)5水平的二次正交旋转回归设计研究了密度、氮、磷、钾肥对辣椒新品系ZJ1-12产量和经济效益的影响。结果表明:各因子表现正向增加作用,作用大小排序为密度>K20>N>P2O5肥用量。单产达156.93kg/667m2以上的优化农艺措施为密度10235～10813株/667m2,纯N量13.525～14.855kg/667m2,P2O58.232～9.748kg/667m2,K2010.875～12.6kg/667m2。当最高产量为278.84kg/667m2时,纯收益高达4149.04元/667m2。     

枯草芽孢杆菌(AMCC100001)对油菜生长的影响研究

以食用菌栽培后的菌渣为原料,经高温发酵后加入不同浓度的枯草芽孢杆菌(AMCC100001)制剂,制成有机肥施入土壤中,同时以纯土壤栽培为对照,研究了对油菜生长状况以及油菜品质的影响。结果表明,加入中等浓度的枯草芽孢杆菌制剂的菌渣有机肥有效促进了油菜的地上部分和地下部分的生长,显著改善了油菜营养品质。     

红汁乳菇液体深层发酵培养基的筛选

采用均匀设计法优化红汁乳菇液体深层发酵培养基。结果表明，最佳培养基配方是：蔗糖34g]L，废糖蜜13mL／L，麸皮36g／L，玉米粗粉20g／L，KH2PO43g／L，菌丝体最大生物量达18．087g/L。