小麦幼胚离体培养育种技术研究

利用小麦幼胚离体培养技术进行了育种试验,结果表明,烟台地区适宜外植体（幼胚）的有效胚龄期１４～２０ｄ最适胚龄期１６ｄ,培养历期为１２０～１５０ｄ;幼胚盾片应向上放置２,４－Ｄ浓度大小随基因型不同而有差异,一般在１～４ｍｇ／Ｌ时分化率最高,选择分化率高的优良基因型是创造变异,选择变异的关键,采用本技术能够创造较多的再生群体,并能较常见育种提高３～５年选育出优良小麦品系。     

小麦幼胚离体培养研究概况

小麦幼胚离体培养研究概况何花榕，杨惠杰（福建省农科院稻麦研究所）近年来，随着生物技术的发展，利用体细胞组织进行离体培养的研究和应用发展迅速。在几种主要禾本科农作物中，小麦体细胞组织培养的成功虽然比玉米和水稻略晚，但据近几年的报道，用小麦未成熟胚、幼穗...     

小麦幼穗离体培养初步研究

小麦幼穗离体培养初步研究刘思衡，康水英，连秀叶，巫升鑫，郭玉春（福建农业大学农学系福州３５０００２）八十年代以来，我国小麦以幼胚、幼穗和成熟胚离体培养筛选拉赤霉病细胞突变体的研究日益增多，并逐渐形成生物技术育种的新体系（欧阳闻俊１９９０，吴志风等１９...     

小麦幼穗离体培养一步再生全苗影响因素的初步研究

以京花１号、晋２１４８、西安８号、豫麦３５号、豫麦１８号、豫麦２５号和Ａｌｏｎｄｖａｓ７个不同麦品种的幼穗进行离体培养,培养基与培养环境共分４种组合：①ＭＳ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ,照光１１ｈ／ｄ;②Ｎ６＋ＫＴ１ｍｇ／ＬＫ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ,照光１１ｈ／ｄ;③ＭＳ＋ＫＴ０．２ｍｇ／Ｌ＋２,４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ,照光１１ｈ／ｄ;④ＭＳ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ,     

不同培养基及激素配比对小麦幼胚离体培养的影响

为了建立一个适于优良小麦品种基因枪转化的高效组织培养体系,以2个冬性小麦品种京841和中麦9号为供试材料,探讨了不同培养基、不同激素配比对小麦幼胚离体培养的影响。结果表明,在MS、N6B5MS、B5和L34种培养基中,L3培养基的出愈率及分化率最高,两品种平均出愈率达到88.9%,分化率达到36.6%;以L3为基本分化培养基,同时添加ZT3mg/L和NAA1mg/L配比对愈伤组织诱导分化的效果最好,分化率平均达到55.9%。     

四川小麦幼胚脱分化特性研究

本试验在N6分别附加2，4－D（简称培养基I）和2，4－D＋KT（简称培养基Ⅱ）二种培养基上，对四川小麦推广品种、育种品质以及农家品种共45个材料的幼胚脱分化特性进行了研究。结果表明：（1）不同品种（系）愈伤组织形成期明显不同。表现为平均半愈期变动于2．0－11．0d之间；全愈期变幅进一步增大，最早的系4．5d（大粒早），晚的30d尚未全愈。其中，44．4％的材料脱分化进程较为整齐一致。（3）参试材料间的愈伤组织诱导率平均变幅为65．63％－100．0％，其中，93．3％的材料愈伤组织诱导率高达90％以上。（3）胚性愈伤组织发生率平均变幅为0．00％－47．62％；多数材料在培养基间有波动，但其高低趋势具有相对一致性。（4）愈伤组织增殖能力在所试材料间差异明显，其中，愈伤组织产量最高者达245．50mg/胚（大粒早），最低者仅9．35mg/胚（繁六），50mg/胚以上的材料占17．8％。而培养基的作用则因材料而异，即一些材料在两种培养基上愈伤组织产量相当；另一些材料在培养基Ⅱ上明显高于培养基I上的愈伤组织产量。（5）所试的16日龄幼胚在离体培养下有胚发芽现象，胚发芽率因材料和培养基而异，其中最重者达75．81％（大粒早），最轻者为0．00％。但是绝大多数能通过使用无KT培养基得以有效控制。     

小麦幼穗离体培养一步再生全苗影响因素的初步研究

以京花 １ 号、晋 ２１４８、西安 ８ 号、豫麦 ３５ 号、豫麦 １８ 号、豫麦 ２５ 号和 Ａｌｏｎｄｖａｓ ７ 个不同小麦品种的幼穗进行离体培养,培养基与培养环境共分 ４ 种组合：① Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 １１ ｈ／ｄ;② Ｎ６＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 １１ ｈ／ｄ;③ Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ ０．２ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ２ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 １１ ｈ／ｄ;④ Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋ ２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ,照光 ２４ ｈ／ｄ。另在 Ｍ Ｓ＋ Ｋ Ｔ １ ｍ ｇ／ Ｌ＋２,４－ Ｄ ０．５ ｍ ｇ／ Ｌ 培养基中加入青霉素,使之成为含青霉素分别为 ５、１０、２０、４０、６０ 和 ８０ 万单位／ Ｌ 的系列培养基,以不含青霉素的培养基为对照,将豫麦 ２５ 号品种的幼穗分别培养于其中,照光 ２４ ｈ／ｄ。培养１０ 周后对各培养组合的材料进行观察统计。结果表明,组合处理①使 ７ 个小麦品种幼穗中的 ６ 个通过一步培养再生出全苗;在青霉素为 １０ 万单位／ Ｌ 的培养基中,豫麦 ２５ 号的幼穗也经一步培养再分化出全苗;而处理②、③、④均不能通过一步培养再分化出全苗。因此     

小麦幼穗离体培养过程中细胞分裂与分化的扫描电镜观察

对豫麦 2 5号小麦品种的幼穗及其幼穗离体培养中愈伤组织的形成、生长和根的再分化过程进行了扫描电镜观察 ,分析了幼穗及幼穗脱分化和再分化的细胞形态变化     

杂交水稻幼穗培养体胚发生的效果观察

利用籼粳型和籼籼型以及光温敏核不育型共5个组合杂交水稻的幼穗进行离体培养探讨杂交水稻的愈伤组织诱导和体细胞胚胎发生,除成功诱导出愈伤组织与体细胞胚外,在所试验材料研究中还显示出以下趋势:(1)籼粳型幼穗愈伤组织诱导率高于籼籼型,两者又都高于光温敏核不育型;(2)体细胞胚胎发生与愈伤组织的胚细胞生活力为关。材料之间胚性细胞生活力与体胚发生率呈籼梗型≥光温敏核不育型>籼籼型的趋势;(3)建立了体细胞无性系和获得大量体胚的培养程序,为进行两系杂交稻的有关基因导入等遗传操作提供了较理想的研究材料。此外,光温敏核不育系杂交后幼穗培养得到体胚尚属国内外首次报道。     

小麦幼胚培养基因型的筛选

为了筛选出小麦幼胚培养和转基因受体材料的优良基因型，以19个小麦品种的幼胚为材料，采用多种诱导和分化培养基进行组织培养，井于分化前对部分愈伤组织进行了冷冻、干燥和置于分化培养基上暗培养等物理处理，研究了基因型、培养基及二者的互作效应等因素对愈伤组织的诱导、分化和植株再生的影响。结果表明，不同基因型间差异显著。其中89(117)在组织培养时反应良好，幼胚愈伤组织的绿原基分化率和出苗率分别为83．3％和32．2％，显著高于19个品种的平均值72．5％和19．6％，立该品种幼胚的出愈率和再生苗生根率也很高，可作为幼胚培养和转基因受体材料的优良基因型；同时，基因型与分化培养基问存在显著的互作效应，如：89(117)、豫麦66和豫麦18—64的出苗率在培养基I、G和E上分别高达61．3％、52．8％和43．6％，而在培养基D、F和C上则只有13．3％、7．4％和21．4％。因此，在筛选优良基因型时应同时筛选出适合于该基因型的培养基。本试验中适于品种89(117)的培养基为：诱导培养基Ⅳ(激素组合为：2，4—D2mg/L ABA0．5mg/L)、继代培养基①(激素组合为：2，4—D 1mg/L ABA0．5mg／L KT lmg／L)和分化培养基A、B、G或I。研究结果还表明，光照分化培养前的干燥和冷冻处理对愈伤组织快速分化出苗有很大的促进作用。     

云南药用野生稻幼穗离体培养研究

药用野生稻由于结实率低、落粒性强,难以利用种子保存繁殖。为了进一步在育种中有效地利用药用野生稻抗虫、抗病、抗旱、分蘖力强等优良特性,本研究利用药用野生稻幼穗,通过离体培养方法获得植株再生苗。实验设计了10种不同生长调节剂浓度的愈伤诱导培养基,筛选出N6+2,4-D 2.0 mg/L+植物凝胶2.8 g/L+蔗糖30 g/L、pH值5.8是最适合愈伤诱导的培养基;设计了10种分化培养基,筛选出N6+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.3 mg/L+ZT 2.0mg/L+KT 3.0 mg/L+植物凝胶2.8 g/L+蔗糖30.0 g/L、pH值5.8最适合作分化的培养基。设计了10种生根培养基,1/2N6+NAA 0.2 mg/L+植物凝胶2.8 g/L+蔗糖15.0 g/L、pH值5.8最适合作生根培养基。研究发现用4℃低温对幼穗前处理,然后使用强弱光照交替进行预培养后再进行愈伤诱导,可获得较高的愈伤诱导率。     

外源添加物对小麦幼胚成苗质量的影响

为了提高小麦快速育种过程中幼胚成苗质量,以扬麦15号开花后8～16 d幼胚为材料,研究了不同外源添加物对小麦幼胚成苗质量的影响.结果表明,不同外源添加物对小麦幼胚成苗率、根系生长、茎粗等的影响存在显著差异.在1/2 MS培养基中添加0.5%的麦芽提取物(Malt extract)的幼胚苗生长质量最好,其中12～14 d幼胚经培养14 d后幼苗根系长达到16.3 cm,而且侧根多,幼苗健壮,成苗率可达到99.2%;添加0.1 mg/L NAA的次之;添加0.1 mg/L 2,4-D的幼胚苗生长缓慢,生根量显著低于对照,侧根少,成苗率低;添加0.1 mmol/L硝普钠(SNP,Sodium nitroprusside)后,虽然幼胚能够萌发,但幼胚苗根系短、发育缓慢、无侧根发生,随着SNP浓度的升高(0.5～1.0 mmol/L),则表现出抑制幼胚萌发,但其抑制效应可以通过添加0.1 mg/L GA解除.因此,在小麦快速育种过程中,幼胚成苗培养宜选用花后12～14 d的幼胚,并给培养基中添加0.5%的麦芽提取物.     

离体培养技术在甜菜远缘杂交育种中的应用

本文报导了离体培养技术在甜菜远缘杂交育种中的应用,探讨了影响离体再生植株诱导率的主要因素,包括外植体、培养基和杂交方式等。试验结果表明：外植体再生植株诱导率以远缘杂交胚（９５．８％）为最高,其次是生长点（６０．５％）、腋芽（５７．６％）、未授粉胚珠（４．７％）;４种培养基的再生植株诱导频率在６０％～９８％之间,其中珠３诱导率最高;杂交方式以正交（野生种×栽培种）远缘杂交胚的再生植株诱导率为最高,达９６％。不同来源试管苗的移栽成活率为５８．８％～８６．４％,不同来源再生植株性状存在明显差异。离体培养技术是快速提供甜菜育种素材的有效方法之一。     

木薯胚胎发育和幼胚离体培养的初步研究

以华南5号木薯为材料,观察木薯受精后胚胎的发育过程并对不同发育时期幼胚进行离体培养。结果表明:木薯受精卵早期处于休眠状态;授粉后12 d胚胎发育到多细胞原胚阶段;授粉后14 d发育到早期球形胚阶段;授粉后17 d发育到心形胚阶段;授粉后19 d发育到早期双子叶胚阶段。早期幼胚的萌发率较低,授粉后15 d的幼胚,在培养基MS+0.5 mg/L CuSO4+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+6%蔗糖上培养时,胚胎发育率为33.3%。中后期幼胚的萌发率较高,授粉后35 d的幼胚,在培养基MS+0.5 mg/L CuSO4+0.5 mg/L 6-BA+0.01 mg/LNAA+3%蔗糖上培养时,萌发率可达100%。胚性愈伤组织的培养,采用幼胚剥离培养。授粉后30 d的幼胚,在培养基MS+0.5 mg/L CuSO4+6 mg/L 2,4-D+3%蔗糖上培养时,出胚率达77.3%。     

小麦不同外植体离体培养与再生研究

为了研究小麦组织培养的影响因素,对6个小麦品种的幼胚、幼穗以及成熟胚进行组织培养,研究不同基因型、外植体以及培养基对愈伤组织诱导及分化再生的影响.结果表明,不同小麦品种幼胚、幼穗以及成熟胚愈伤组织诱导率均在90%以上,且差异不大,而分化率和再生率却表现出很大差异.总体来说,供试外植体幼胚再生率最高,幼穗次之,成熟胚最低.绵阳19幼胚再生率最高,为54%,其最佳激素培养基为MS KT 1.0 mg/L IAA 1.0 mg/L;其次为小偃107和小偃22的幼胚愈伤组织.幼穗愈伤组织中绵阳19愈伤组织再生率最高,为27.5%,其次为洛阳8716.成熟胚愈伤组织培养中陕354再生率最高,为25.1%,优于其幼穗愈伤组织,其次为绵阳19的成熟胚愈伤组织.     

椰子胚离体培养中的蔗糖效应

蔗糖在椰子胚离体培养中的作用非常重要。适当提高培养的蔗糖浓度对胚的生根、根的生长和芽的增粗效果都十分显著,蔗糖浓度为6%和8%的培养基均显著或极显著优于蔗糖浓度为2%的培养基。但是,蔗糖浓度的变化对胚的发芽率和芽的高度影响不大。