柔嫩艾美耳球虫感染对鸡肠炎沙门氏菌感染的增强作用

本试验对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染对肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)感染的影响进行了研究。实验结果表明:肠炎沙门氏菌和柔嫩艾美耳球虫的相互作用显著;在球虫感染后第4,10,14d 时,柔嫩艾美耳虫球虫感染可显著地(P<0.01)增加盲肠内容物中肠炎沙门氏菌数量。肠炎沙门氏菌和柔嫩艾美耳球虫之间协同作用与肠炎沙门氏菌的感染量大小和感染后的时间显著相关(P<0.01)。柔嫩艾美耳球虫感染并没有显著地提高肝脏、脾脏中肠炎沙门氏菌的阳性率。不同感染量的肠炎沙门氏菌感染对鸡盲肠的球虫病变记分显著影响.     

磺胺喹恶啉在肉鸡体内的代谢动力学

选用高效液相色谱(HPLC)法,研究了磺胺喹恶啉在肉鸡体内的动力学过程。结果表明:肉鸡(8—9周龄)单剂量内服SQ 溶液后,血药经时过程符合一级吸收二室模型。主要的动力学参数(均值)如下:吸收相半衰期(t_(1/2)Ka)为1.27(hr),分布相半衰期(t_(1/2)α)为2.10(hr),消除相半衰期为11.71(hr),曲线下面积(AUC)为206.267(mg%·hr),达峰时间(Tmax)为3.75(hr),峰浓度(Cmax)为12.65mg%,有效浓度维持时间(Tcp(th-er))为14.52(hr)。根据单剂量给药参数,计算出多剂量给药参数,提出了相应的治疗方案。     

柔嫩艾美耳球虫感染对鸡肠炎沙门氏菌感染复发的影响

本研究揭示了柔嫩艾美耳球虫感染可以引起鸡肠炎沙门氏菌感染的复发。复发的主要表现为盲肠内容物的肠炎沙门氏菌阳性率和数量再次显著地升高;肠炎沙门氏菌在盲肠中的滞留时间显著延长。这种复发与肠炎沙门氏菌的初始感染量及球虫感染时间有关。肝脏和脾脏阳性率无显著变化。     

安徽部分地区鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊的分离与鉴定

为获得纯种柔嫩艾美耳球虫虫株,从安徽省巢湖市、霍邱县、定远县3个地区患球虫病的鸡场采集3株混合球虫,培养至孢子化,分离单卵囊接种1～7日龄的雏鸡,感染后7～12 d,收集卵囊,然后通过生物学特性和PCR方法进行虫种鉴定。结果显示,3个地区的单卵囊感染成功率分别为50%、57%和29%,各虫株经生物学特性和PCR鉴定均为柔嫩艾美耳球虫。研究表明:1.0%琼脂单卵囊分离法简便且成功率较高,利用特异性引物PCR鉴定虫株,为纯种地方株的研究奠定了基础。     

鸡柔嫩艾美耳球虫病流行病学研究进展

从球虫的感染、拥挤效应、营养学因素、宿主免疫力、应激因素、抗球虫药以及与其他疾病混合感染等几个方面 ,概述了影响鸡柔嫩艾美耳球虫病发生和流行的各种因素 ,旨在为球虫病的防治提供科学依据。     

表面活性素体外抗球虫作用研究

[目的]探讨表面活性素体外抗鸡柔嫩艾美耳球虫的效果。[方法]实验前将柔嫩艾美耳球虫活化,配成2.5×106/ml细胞悬液加入细胞培养板,实验组各孔分别加入不同浓度表面活性素,对照组加入等量MEM,采用定量法作柔嫩艾美耳球虫生长曲线,观察其增长速率。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,观察表面活性素对柔嫩艾美耳球虫成活率的影响,用乳酸脱氢酶(LDH)测定法测定表面活性素对柔嫩艾美耳球虫的损伤。[结果]在5 mg/ml表面活性素作用下其20~120 h增殖率为0,5 mg/ml表面活性素可使其破裂。[结论]表面活性素具有较强的抗柔嫩艾美耳球虫作用,有可能成为预防的理想药物。     

毒害艾美耳球虫早熟株致病性与繁殖力的研究

为选育制备弱毒疫苗所需的毒害艾美耳球虫(Eimeria.necatrix)早熟株,以临床表现、平均增重、相对增重率、小肠病变记分、血便记分、死亡率、每克粪便中的卵囊数(OPG)、卵囊总产量和每个卵囊的繁殖能力为指标,研究了E.necatrix早熟株与亲本株的致病性和繁殖力。结果表明该早熟株与其亲本株相比,早熟株的致病性降低了,接种相同剂量时早熟株平均增重、相对增重率高于亲本株,病变记分、血便记分和死亡率均低于亲本株;早熟株产卵高峰提前,繁殖力下降至亲本株的55%左右,符合球虫早熟疫苗株的特性。     

复方中药制剂“球宁”对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡红细胞免疫功能的影响

用青蒿、常山等组成复方中药制剂“球宁”,并对其进行超微粉碎加工成微粉制剂。按不同比例添加与饲料中,饲喂人工感染柔嫩艾美耳球虫的雏鸡,以磺胺喹啉钠为对照,在感染后8d剖杀,检测血浆中红细胞C3b受体(RBC-CR1)花环率和免疫复合物(RBC-IC)花环率,以观察“球宁”及其微粉制剂对人工感染柔嫩艾美耳球虫的雏鸡的红细胞免疫功能的影响。结果,粗粉组(2%)、微粉组(2%)、微粉组(1%)三组的红细胞C3b受体花环形成率比阳性对照组有明显提高(p<0.05);红细胞免疫复合物(RBC-IC)花环形成率比阳性对照组有所降低(p<0.01)。说明所试药物能改善红细胞的免疫粘附功能,显著降低血浆中免疫复合物的含量,降低球虫病对机体的损伤。     

Expression of Chicken Toll-Like Receptors and Signal Adaptors in Spleen and Cecum of Young Chickens Infected with Eimeria tenella

Toll-like receptors （TLRs） are a group of highly conserved molecules which initiate the innate immune response to pathogens by recognizing structural motifs of microbes. Understanding the changes in chicken Toll-like receptors （ChTLRs） and signal adaptors expression that occur with Eimeria tenella infection will help to elucidate the molecular basis of immune control of coccidiosis caused by Eimeria. The present study detected the dynamic changes in the expression of ChTLRs and associated signal adaptors in the spleen and cecum ofE. tenella-infected chickens during the early stage of infection. The results showed that the expression peak for ChTLRs, MyD88 and TRIF occurred at 12 h post-infection （hpi）, ChTLR3, ChTLRI 5 and MyD88 mRNA expression in the spleen ofE. tenella infected chickens were significantly higher （P〈0.05） than that of negative control chickens, and there were similar tendencies of these molecules expression in the cecum and spleen of E. tenella-infected chickens. The expression of MyD88 was upregnlated at four time points in the cecum of E. tenella-infected chickens. The results of this study indicate that ChTLR3, ChTLR15 and MyD88 play a role in young chickens infected with E. tenella.     

鸡毒害艾美尔球虫早熟株的免疫原性研究

为制备早熟弱毒疫苗提供虫株和理论依据,对选育的毒害艾美尔球虫早熟株(P8)和亲本株(P0)的免疫原性进行了研究。试验分别用P0和P8,以每只鸡300个孢子化卵囊免疫7日龄雏鸡,免疫后14 d,分别以每只鸡1×104和10×104个P0孢子化的卵囊进行攻毒,以OPG、平均每只鸡的卵囊产量,卵囊减少率、相对增重率、病变记分减少率为指标。结果表明:(1)攻毒后每只1×104个P0孢子化的卵囊时,P8、P0免疫攻毒组的卵囊减少率分别为75.59%、84.66%;(2)攻毒后每只10×104个P0孢子化的卵囊时,P8、P0免疫攻毒组病变记分降低率分别为81.46%、76.66%。表明P8株的免疫原性与P0无明显变化,均有保护力,符合早熟株免疫原性保持不变的特点。     

柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)小配子发育超微结构的观察

利用透射电镜对柔嫩艾美耳球虫小配子发育的超微结构进行了观察 小配子母细胞和大配子母细胞于相邻的宿主细胞内相伴产生 ,系由末代裂殖子侵入后 ,长大变圆而形成 小配子的形成为直接分化型 首先细胞核分裂为多个 ,随后细胞核向周边移动 ,随之近核处限制膜外突 ,临近处限制膜下陷 中心粒在核上方形成并发育为基粒、鞭毛中的微管和附着微管 ,早期形成的小配子仍与小配子母细胞的残体相连 成熟小配子与残体分离 ,外型呈香蕉状 ,外被单位膜 ,内有一电子结构十分致密的细胞核 ,核头端侧面有一个巨大线粒体 ,小配子有鞭毛 2根 ,每根鞭毛内有微管 ,为 9+2结构 ,附着微管至少 6根 ,这些微管均起始于基粒     

柔嫩艾美耳球虫（Eimeria ternlla）小配子发育超微结构的观察

利用透射电镜对柔嫩艾美耳球虫小配子发育的超微结构进行了观察。小配子母细胞和大配子母细胞于相邻的宿主细胞内相伴产生,系由末代裂殖子侵入后,长大变圆而形成。小配子的形成为直接分化型。首化细胞核分裂为多个,随后细胞核向周边移动,随之近核处限制膜外突,临近外限制膜下陷。中心粒在核上方形成半并发育为基粒、鞭毛中的微管和附着微管,早期形成的小配子仍与小配子母细胞的残体相连。成熟小配子与残体分离,外型呈香蕉状,外被单位膜,内有一电子结构＋分致密的细胞核,核实端侧面有一个巨大线粒体,小配子有鞭毛2根,每根鞭毛内有微管,为9＋2结构,附着微管至少6根,这些微管起始于基粒。     

全球刹抗鸡艾美球虫试验

球虫是寄生性原虫,种类多,分布广,对畜禽特别是对鸡的危害严重。球虫对长期使用抗球虫药物易产生耐药性,因此,通过试验筛选高效低残留而稳定的抗球虫药物,对畜禽食品安全和畜禽养殖生产具有重要意义。     

柔嫩艾美尔球虫库尔勒株免疫原性初步研究

本实验采用单卵囊分离技术,得到1株柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella),对该株E.tenella的免疫原性做了初步研究,分别用100个卵囊/只,1,000个卵囊/只,10,000个卵囊/只的剂量免疫,以100,000个卵囊/只的剂量攻毒,结果显示,1000个卵囊/只的剂量免疫效果最好。     

毒害艾美耳球虫早熟株致病性与繁殖力的研究

为选育制备弱毒疫苗所需的毒害艾美耳球虫(E.necatrix)早熟株,以临床表现、平均增重、相对增重率、小肠病变记分、血便记分、死亡率、每克粪便中的卵囊数(OPG)、卵囊总产量和每个卵囊的繁殖能力为指标,研究了E.necatrix早熟株与亲本株的致病性和繁殖力。结果表明该早熟株与其亲本株相比,早熟株的致病性降低了,接种相同剂量时早熟株平均增重、相对增重率高于亲本株,病变记分、血便记分和死亡率均低于亲本株;早熟株产卵高峰提前,繁殖力下降至亲本株的55%左右,符合球虫早熟疫苗株的特性。     

转基因柔嫩艾美耳球虫对生态环境的影响

【目的】从表达M2e-EYFP融合蛋白转基因柔嫩艾美耳球虫的稳定性,及其在环境中的传播能力、竞争能力和存活能力方面,分析转基因球虫对生态环境的潜在风险。【方法】稳定性试验包括:转基因球虫感染非靶动物,观察临床症状和卵囊产出情况;转基因球虫继代繁殖,检测荧光率;转基因球虫与毒害艾美耳球虫混合感染,PCR检测卵囊中的外源基因。传播能力试验主要是分析感染鸡和不感染同居鸡的卵囊产量和荧光率。竞争性试验则是用不同混合比例的2种球虫感染鸡,检测卵囊产量和荧光率;存活能力试验是用不同处理方式的卵囊感染鸡,检测卵囊是否产出以分析卵囊存活能力。【结果】转基因球虫不感染小鼠和家鸽,与野生型柔嫩艾美耳球虫宿主特异性相同;连续繁殖传17代后外源基因稳定表达。与毒害艾美耳球虫混合寄生时在异种球虫体内未检测出外源基因。传播能力试验中,46d攻毒时转基因球虫感染与不感染同居组的卵囊产量差异不显著,但与不感染对照组相比均显著减少,且1∶1感染和不感染同居组卵囊荧光率检测结果维持在51.6%67.9%。竟争性试验中,攻毒时各比例感染组卵囊产量均极显著少于不感染攻毒对照组,荧光率检测结果各比例组变化幅动不大,且1∶1组哨兵鸡卵囊荧光率检测结果为41.2%61%。存活能力试验,转基因球虫与野生型球虫在夏季室温条件下均不能存活90d,且与其他不同方式处理的卵囊外界存活时间接近。【结论】说明转基因球虫具有良好的稳定性,在环境中的传播能力、竞争能力和存活能力未呈现显著优于野生球虫的趋势。     

两种鸡艾美耳球虫冰箱保存后的毒力观察

鸡艾美耳球虫（柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫）卵囊分成两部分处理,一部分常规冰箱保存6个月,到期后增殖1次;另一部分每月繁殖1次,为新鲜对照虫株。之后,进行致病性试验。结果显示：冰箱保存6个月后,虫株毒力明显下降,仅增殖1次不能达到新鲜虫株毒力水平。如果两种球虫卵囊冰箱保存6个月后,用于试验研究前需至少继代繁殖2次。     

腹水症肉鸡的血液学变化的研究

本文对腹水症肉鸡的血液学变化、腹水的理化性质及其有无细菌等进行了研究。研究结果表明，腹水症肉鸡的红细胞、血红蛋白、红细胞压容、平均红细胞体积及异嗜性粒细胞均增多，与健康肉鸡相比较，其差异性显著；腹腔内的腹水是漏出液而不是渗出液，细菌学检查呈阴性，这说明该病可能不是细菌感染所引起。     

亚硝基谷胱甘肽对鸡球虫脱囊的影响

为了解胆酸盐浓度、作用时间两种因素对亚硝基谷胱甘肽——GSNO处理鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊脱囊的影响,试验采用L9(34)正交试验方法,通过镜检子孢子脱囊率来确定鸡球虫卵囊经GSNO处理后体外脱囊的最佳条件。结果表明,在胆酸盐浓度为0.75%,作用时间为2 h时,GSNO处理孢子化卵囊的脱囊率最高。     

柔嫩艾美尔球虫的分离及病理学观察

采用单卵囊感染技术,从鸡球虫混合种中分离出1株柔嫩艾美尔球虫(E im eria tenella)。并对该株柔嫩艾美尔球虫的病理学做了进一步研究。利用柔嫩艾美尔球虫的寄生部位、肉眼病变、临床症状等生物学特性进行鉴定,并做回归动物实验,用此球虫卵囊100,000个感染雏鸡。取8天后明显病理变化的盲肠组织,采用石蜡切片技术,进行病理学观察。结果表明,在盲肠肠绒毛上皮、肠腺及肌层都有虫体寄生,并且有明显的出血病变。