水晶冰菜总黄酮大孔树脂纯化工艺及体外降糖活性研究

为考察水晶冰菜总黄酮大孔树脂纯化静态和动态吸附解吸效果,同时探究水晶冰菜作为天然降血糖药物的潜力,对水晶冰菜总黄酮粗提物(以下简称粗提物)进行大孔树脂纯化,以吸附率和解吸率为指标,对6种不同极性大孔树脂(D101、AB-8、NKA-9、HPD-100、X-5、S-8)进行筛选,再通过静态与动态吸附与解吸试验,探讨粗提物质量浓度、pH值、洗脱液体积分数、上样流速与上样体积、洗脱流速与洗脱体积对水晶冰菜总黄酮大孔树脂纯化的影响;在此基础上,以对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制率为评价指标,阿卡波糖为对照,考察纯化前后体外降糖活性变化。结果表明,D101型大孔树脂吸附和解吸效果较好。当粗提物质量浓度0.30 g·L~(-1)、pH值4、上样流速60 mL·h~(-1)、上样体积56 mL、洗脱液为体积分数80%乙醇溶液、洗脱液pH值6、洗脱流速60 mL·h~(-1)、洗脱体积128 mL时,通过D101型大孔树脂纯化后水晶冰菜总黄酮纯度为57.67%,较粗提物提高了2.98倍。水晶冰菜总黄酮通过抑制α-葡萄糖苷酶活性和α-淀粉酶活性发挥不同程度的降血糖作用,粗提物、纯化物和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果均显著高于对α-淀粉酶活性的抑制效果,其中纯化物对2种酶活性的抑制效果与阿卡波糖相比无显著性差异,但显著高于粗提物。     

丁香总黄酮抗氧化活性研究

以2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)对照品、槲皮素对照品和丁香(Eugenia caryophyllata Thunb.)挥发油为对照,对丁香总黄酮还原力、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·自由基)能力进行了评价。结果表明,丁香总黄酮有较好的抗氧化活性,其还原力略低于阳性对照BHT而高于丁香挥发油,清除DPPH·自由基能力则随浓度增大明显增强,浓度达到0.15、0.20 mg/mL时,其DPPH·自由基清除率分别超过丁香挥发油和阳性对照BHT。     

冰菜多酚的提取优化及抗氧化和抑菌活性研究

以冰菜为材料,优化冰菜中多酚的提取方法,并测定多酚提取物的抗氧化能力和抑菌活性。结果表明,冰菜多酚的最优提取条件为：乙醇体积分数为60%,料液比1∶10(g:mL),提取温度80℃,提取时间120min,此条件下多酚提取率为1.42%。冰菜多酚提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基和羟基自由基的清除率随多酚质量浓度的增加而增加,当多酚提取物质量浓度为0.10 mg/mL时,对DPPH自由基和羟基自由基的清除率最大,分别为64.19%和88.10%。另外,冰菜多酚提取物对大肠杆菌的抑制作用明显,当提取物质量浓度为3 mg/mL时,抑菌圈直径为12 mm。     

苦菜和蒲公英中总黄酮含量及其抗氧化活性分析

为加强苦菜和蒲公英的进一步开发利用,研究了乙醇浓度、料液比和提取时间对苦菜和蒲公英总黄酮得率以及不同浓度提取物对苦菜和蒲公英抗氧化活性的影响。结果表明：苦菜和蒲公英总黄酮提取的最优化条件为提取液乙醇的浓度为60％,料液比为1：30,超声提取时间为0．5h,总黄酮得率分别为6．44％和17．56％。苦菜和蒲公英提取物对DPPH自由基清除率随样品提取物浓度的增大而升高,在浓度为9．6rag·mL^-1时,苦菜和蒲公英提取物的DPPH自由基清除率都达到最大,分别为76．47％和80．39％。     

商洛蕨菜总黄酮体外抗氧化活性研究

以2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)为阳性对照,利用紫外-可见分光光度计测定不同浓度梯度的蕨菜总黄酮样品溶液来探究其对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(O^-₂·)的清除能力以及总还原力,探究商洛野生蕨菜总黄酮的抗氧化活性。当样品溶液浓度达到4.0 mg/mL时,对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子的清除率分别达到55.34%、71.30%、81.00%,总还原力的吸光度为0.735。试验结果表明,商洛野生蕨菜总黄酮具有较强的体外抗氧化活性,其抗氧化活性的强弱与其质量浓度呈正相关关系,在试验浓度范围内,总黄酮的抗氧化活性低于BHT。     

冰菜多糖提取物的抗氧化性及抑菌活性研究

本研究以冰菜为原料，利用超声波辅助法提取冰菜多糖提取物并测定其含量，还测定了冰菜多糖提取物的抗氧化能力和抑菌活性。结果表明，冰菜提取物中多糖含量为11.21%。冰菜多糖提取物对羟基自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、亚硝酸根离子均有较好的清除效果。但冰菜多糖提取物总还原能力明显低于维生素C。在一定添加量范围内，冰菜多糖提取物对动物油和植物油的抗氧化能力随浓度成正相关。此外，冰菜多糖提取物对大肠杆菌、枯草杆菌具有抑菌活性，且对枯草杆菌的抑菌能力强于对大肠杆菌的抑菌能力。本研究结果表明冰菜多糖提取物具有一定的抗氧化能力和抑菌活性。     

山莓茎皮总黄酮的提取及其抗氧化活性

为有效开发和利用山莓资源,采用正交试验法筛选山莓茎皮中总黄酮的最佳提取条件,分光光度法测定总黄酮含量,并测定其黄酮提取液对ABTS和DPPH自由基的清除效果。结果表明:山莓茎皮总黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度60%、料液比1∶30、回流温度80℃、提取时间4h。在此条件下,山莓茎皮中总黄酮含量可达28.811mg/g。山莓茎皮黄酮提取液对ABTS和DPPH自由基清除率达50%时,IC50值均低于合成抗氧化剂BHT的IC50值,说明山莓茎皮黄酮提取液具有较强的抗氧化活性,可成为一种天然抗氧化剂。     

超声波法提取牡荆总黄酮的工艺及其抗氧化活性的研究

[目的]研究牡荆总黄酮的最佳提取工艺及其抗氧化活性。[方法]以牡荆叶片为材料,采用单因素和正交试验研究乙醇浓度、固液比、超声时间及超声功率对总黄酮提取率的影响,在此基础上对提取工艺进行优化;以大鼠肝匀浆为材料,测定牡荆总黄酮的抗氧化活性。[结果]各因素对总黄酮提取率的影响由大到小依次为：乙醇浓度〉超声时间〉固液比〉超声功率,当乙醇浓度为30%、固液比为1∶10-1∶20、超声时间为30-60 m in、超声功率为600 W时,总黄酮提取率较高;优化后的提取工艺为：乙醇浓度40%,固液比1∶20,超声时间60 m in,超声功率600 W,此条件下总黄酮提取率为5.886%。[结论]牡荆总黄酮具有较强的抗氧化活性,且在0-0.125 5范围内具有较好的量效关系。     

吴茱萸中总黄酮的提取及其抗氧化活性研究

以芸香科吴茱萸属植物吴茱萸(Evodia rutaecarpa)为原料,吴茱萸总黄酮的含量为指标,在单因素试验的基础上,采用正交设计法优化总黄酮的提取工艺。所得最佳提取工艺为乙醇体积分数70%、固液比1∶50、提取时间40 min、提取温度65℃,在此条件下总黄酮得率为8.82%。DPPH·自由基清除试验评价吴茱萸总黄酮体外抗氧化活性表明,吴茱萸总黄酮具有良好的抗氧化活性。     

超声波协同酶法提取黄山贡菊总黄酮及其抗氧化活性

[目的]黄山贡菊总黄酮(total flavonoids from Huangshan Gongju,HGTF)提取工艺优化和抗氧化活性测定。[方法]以HGTF提取率为指标,采用单因素和正交试验优化超声波协同酶法提取HGTF工艺。通过自由基清除试验评价HGTF的抗氧化活性。[结果]HGTF的最佳提取条件为酶解时间20 min、复合酶质量分数0.1%、纤维素酶和果胶酶配比1∶1、乙醇浓度60%、料液比1∶20(g∶mL)、超声时间40 min、超声功率280 W、超声温度50℃,HGTF提取率为2.78%。抗氧化活性试验结果表明,HGTF溶液对DPPH·、·OH和O₂·^-的清除率较高,分别为90.47%(0.05 mg/mL)、73.44%(0.10 mg/mL)和78.73%(0.10 mg/mL)。[结论]复合酶解后超声波提取HGTF条件温和、提取率高。该研究为HGTF的应用提供参考依据。     

小粒咖啡果皮总黄酮提取工艺优化及其体外抗氧化活性分析

[目的]优化咖啡果皮总黄酮的超声波辅助提取工艺条件,并分析其体外抗氧化活性,为咖啡果皮的综合利用提供理论基础.[方法]以小粒咖啡果皮为原料、乙醇溶液为提取剂,在单因素试验的基础上,以乙醇体积分数、料液比、超声波时间和超声波温度4个因素为自变量,咖啡果皮总黄酮提取率为响应值,采用Box-Behnken试验设计方法,研究各自变量及其交互作用对咖啡果皮总黄酮提取率的影响,确定最佳提取工艺,并比较咖啡果皮总黄酮和L-抗坏血酸的抗氧化活性.[结果]4个因素对咖啡果皮总黄酮提取率的影响排序为超声波时间>料液比>乙醇体积分数>超声波温度,其中乙醇体积分数、料液比和超声波时间对总黄酮提取率有极显著影响(P<0.01),超声波时间与超声波温度的交互作用对总黄酮提取率有显著影响(P<0.05).咖啡果皮总黄酮提取工艺条件经优化后为:乙醇体积分数41%、料液比1:46(g/mL)、超声波时间44 min、超声波温度60℃,在此条件下,得到的实际提取率(6.99±0.02)%与预测值(7.02%)的相对误差小.咖啡果皮总黄酮对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基有一定的清除能力,其半清除浓度(IC50)分别为3.93和297.23μg/mL,清除能力分别是L-抗坏血酸的61%和17%.咖啡果皮总黄酮具有一定还原力,还原力随质量浓度增加而增强.[结论]响应面法优化超声波辅助提取咖啡果皮总黄酮工艺切实可行,建立的回归模型拟合度和重现性较好,提取的总黄酮具有一定抗氧化能力.咖啡果皮可作为一种天然抗氧化剂来源在食品、医药等方面进行开发利用.     

达乌里胡枝子黄酮抗氧化活性研究

【目的】探讨达乌里胡枝子黄酮(Lespedeza davurica flavonoids,LDF)的体外抗氧化作用。【方法】分别采用Fenton反应法、邻苯三酚自氧化法和碘-硫代硫酸钠滴定法,测定达乌里胡枝子黄酮对羟自由基、超氧阴离子的清除作用及对猪油、菜油、亚油酸氧化酸败的抑制作用。【结果】达乌里胡枝子黄酮对羟自由基、超氧阴离子有较强的清除作用,在一定范围内,清除效果随质量浓度的升高而加强。当添加的达乌里胡枝子黄酮的质量浓度为1.0mg/mL时,其对羟自由基的清除作用达到最大,为97.44%;当质量浓度为0.48mg/mL时,其对超氧阴离子的清除作用最大,可达97.89%;达乌里胡枝子黄酮对猪油、菜油、亚油酸也有极强的抗氧化作用,能够极显著地抑制猪油、菜油过氧化值(POV)的升高(P<0.01)和亚油酸的氧化(P<0.01),这种抑制效果随着达乌里胡枝子黄酮质量浓度的升高而增大。【结论】达乌里胡枝子黄酮具有显著的抗氧化活性,其药用价值值得关注。     

橘渣中类黄酮物质提取及抗氧化活性

采用乙醇提取法从橘渣中提取类黄酮物质,通过正交试验,确定最适提取工艺条件为:乙醇浓度75%、提取温度55 ℃、提取时间4 h、料液比1 g:20 mL.在此条件下,类黄酮得率为0.91%.同时,以类黄酮物质对DPPH自由基、超氧阴离子自由基的清除率作为考察指标,研究其体外抗氧化活性,结果表明它对DPPH自由基和超氧阴离子均有较好的清除效果,呈明显的剂量-效应关系,对DPPH自由基的清除效果更好.     

甜叶菊叶中总黄酮的提取及其抗氧化活性测定

【目的】以甜叶菊为原料,研究甜叶菊叶中总黄酮的最优提取工艺条件,并对甜叶菊叶中总黄酮的抗氧化活性进行测定.【方法】通过单因素试验,研究了超声提取时间、固液比、超声提取温度、乙醇浓度(V/V)对甜叶菊叶总黄酮的提取量的影响,并采用正交试验确定了甜叶菊叶总黄酮最佳提取工艺.【结果】在超声提取时间60 min、固液比1∶20、超声提取温度70℃、乙醇浓度70%(V/V)的工艺条件下,甜叶菊叶的总黄酮提取量为6.672 mg/g,IC_(50)相应为25.031、28.677 mg/L,分别是VC的1.28、1.13倍.【结论】试验所得方法简单易行,总黄酮提取量较高;所提取的甜叶菊叶总黄酮具有清除·OH和O~(2-)·的能力.     

菠萝蜜种子中总黄酮的提取工艺及其抗氧化性研究

采用四因素三水平正交试验设计优化了菠萝蜜种子中总黄酮的提取工艺。结果表明,在水浴条件下,4个因素对菠萝蜜种子粉的总黄酮提取率的影响大小为:乙醇浓度料液比提取温度提取时间。其中,乙醇浓度对总黄酮提取率影响极显著,料液比、提取温度、提取时间对总黄酮提取率影响显著。水浴条件下的最佳提取工艺为:70%乙醇,60℃水浴提取50 min,料液比1∶20 g/m L,菠萝蜜种子中总黄酮提取率达到3.30%。采用DPPH法和水杨酸法测定菠萝蜜种子中总黄酮粗提液的抗氧化活性,结果表明,总黄酮粗提液浓度在0.6 mg/m L时两种测定方法中自由基的清除率均超过90%,具有较强的抗氧化活性。实际生产中,菠萝蜜种子可作为抗氧化剂的原料来源。     

青胡桃总黄酮含量测定及抗氧化活性分析

[目的]对不同产地青胡桃中总黄酮含量进行测定,并对青胡桃抗氧化活性进行研究,为其作为天然抗氧化剂的开发和利用提供科学依据.[方法]通过紫外—可见分光光度法对贵州省10个县(区)的青胡桃中总黄酮含量进行测定比较;并以赫章县青胡桃为试验材料,采用DPPH法和ABTS法对青胡桃不同溶剂萃取物的抗氧化活性进行综合评价.[结果]在青胡桃总黄酮含量测定方法中,芦丁质量浓度在0.5~4.0 mg/mL内线性良好,平均回收率为97.47%,相对标准偏差(RSD)为1.26%(n=9);不同地区青胡桃中总黄酮平均含量差异不明显,贵州省胡桃最主要产地赫章县的青胡桃总黄酮平均含量为9.51%.青胡桃的80%乙醇提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和水萃取物中总黄酮含量分别为286.59、89.04、108.48和173.67 mg/g,4种萃取物均有清除DPPH自由基和ABTS自由基的作用,且随萃取物质量浓度的增加而逐渐增强,抗氧化能力排序为80%乙醇提取物>水萃取物>乙酸乙酯萃取物>石油醚萃取物.[结论]建立的青胡桃总黄酮含量测定方法简单、快速、便捷,其线性、稳定性、精密度、重复性和回收率良好.青胡桃具有较强的抗氧化活性,可作为天然抗氧化剂进行开发,具有较好的功能性食品和药品开发前景.     

雁门苦荞黄酮的分离提取、稳定性及抗氧化活性研究

以雁门苦荞为研究对象,采用Box-Behnken响应面分析法,对苦荞黄酮提取工艺进行优化,并探索其稳定性和抗氧化活性。结果表明:苦荞黄酮提取最佳工艺参数为乙醇质量分数77%、料液比40∶1、温度50℃和浸提液pH值5.6,总黄酮提取率为93.342%。同时,苦荞黄酮在pH 3~7范围内能稳定存在,温度、光照和金属离子(K+、Na+、Fe2+、Fe3+和Mg2+)对其影响作用小。当黄酮浓度为0.4g·L~(-1)时,对·DPPH和·OH清除率分别为83.70%和82.49%,并且其还原性随着浓度的增加而提高,表明雁门苦荞黄酮具有好的抗氧化活性。     

松栎柱锈菌春孢子总黄酮提取及抗氧化活性

为了确定松栎柱锈菌春孢子总黄酮超声辅助提取的最佳工艺条件,探索并评价松栎柱锈菌春孢子总黄酮的体外抗氧化活性,使用乙醇溶液提取总黄酮,采用亚硝酸钠-硝酸铝法测定该菌春孢子总黄酮芦丁当量。在单因素探索试验的基础上,通过响应面优化法得出最佳提取工艺条件。采用抗坏血酸(Vc)做阳性对照,对所得松栎柱锈菌春孢子总黄酮进行总抗氧化能力、总还原力以及清除二苯代苦味酰基(DPPH·)、清除羟基自由基(·OH)、清除超氧阴离子(O2-·)活性的测定与评价。研究结果表明:1)松栎柱锈菌春孢子总黄酮最优提取工艺条件:提取温度65℃,料液比1:120,提取时间38min,提取液乙醇体积分数60%,在该提取条件下总黄酮得率为1.382%,与预测值1.416%相差2.46%。2)松栎柱锈菌春孢子总黄酮具有较高的抗氧化能力,其总抗氧化能力与Vc相当。3)该菌春孢子总黄酮还原力高于Vc,量效关系比Vc更明显。4)该菌春孢子总黄酮与Vc对DPPH·的半抑制率(IC₅₀)分别为0.0492和0.0335mg/mL,对DPPH·清除能力低于Vc但是量效关系明显。5)该菌春孢子总黄酮对·OH清除作用显著,IC₅₀仅为0.0129mg/mL,质量浓度为0.0235mg/mL时清除率就能达到84.94%,清除能力远强于Vc。6)尚未查清该菌春孢子总黄酮提取液中对黄嘌呤酶氧化法的干扰因素,无法得知对O2-·的清除能力。利用响应面法得到了可靠的提取工艺,通过对比评价试验表明,该菌春孢子总黄酮具有很好的体外抗氧化活性,为锈菌开发利用和转变森林有害生物防治理念提供科学依据。      

冰叶日中花对NaCl胁迫的生理响应

为探索冰叶日中花(Mesembryanthemum crystallinum L.)耐盐的生理机制,在本研究中,经0(CK)、200(T1)、400(T2)和800(T3)mmol/L NaCl处理后,在1、3、5、10、15d检测冰叶日中花幼苗的相对电导率、脯氨酸含量、可溶性糖含量、H2O2含量、过氧化氢酶(CAT)活性、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性等生理指标。结果表明:(1)T1处理对冰叶日中花没有显著影响,T2处理对其生长产生了抑制,T3处理则使植株严重萎蔫,并在处理5d后死亡;(2)随着NaCl胁迫的延长,T1和T2处理下相对电导率呈现先增大后减小的趋势,T3处理则导致相对电导率持续增大直至幼苗死亡;(3)NaCl胁迫显著增加了叶片脯氨酸、可溶性糖含量,且与NaCl浓度呈正相关,并在胁迫第1天急剧增加,而后呈现出下降的趋势;(4)H2O2含量随胁迫时间的延长持续增加,且与NaCl处理浓度呈正相关;(5)T1和T2处理后CAT和APX活性呈现先增大后减小的趋势,但T3处理引起酶活的持续下降。以上结果说明冰叶日中花可快速响应盐胁迫,迅速提高其体内渗透调节物质含量,及抗氧化系统的活性,从而表现出极强的耐盐性。