再谈对虾肝胰腺坏死病的病理和防治

1993、1994连续二年,我国发生养殖对虾大面积病害。虾的死因之一是对虾染患爆发性肝胰腺坏死病。病虾的最初症状是在肝胰腺下部以及两侧呈弥散状白色包膜增生。约在之后的10—15天内,白膜迅速不断向上部扩展、增厚。肝胰腺本体先萎缩后肿胀。肝体由正常青褐色逐渐转暗红色(中期)。直至死亡时,肝胰体呈黄色,严重糜烂,一触则散。对虾临近死亡期的另一典型特症是在虾的头甲壳内侧,可见诸     

对虾肝胰腺坏死病的病理与防治

患病对虾最初的症状是在对虾的肝胰腺两侧白色包膜呈弥散状增生,在15天左右的时间内白膜增生不断扩展、增厚,虾的肝胰腺本体先萎缩后肿胀,肝体由正常的青褐色逐渐转暗红色(中期),直至死亡时变为粉黄色。肝胰腺严重糜烂,一触即散,呈水体状。死亡期另一典型特征,在虾的头甲壳内侧可见许     

虾蟹混养中河蟹肝胰腺坏死原因及预防控制措施

正近几年来,由于小龙虾市场走俏,在江苏的很多地区,养殖户在蟹塘内套养小龙虾,形成了以蟹为主、以虾为辅的池塘化虾蟹混养模式,虽然取得了可观的经济效益,但也造成近两年来河蟹、小龙虾的大规模发病,养殖风险越来越大。就洪泽当地来说,虾蟹混养的塘口这两年河蟹发病趋势越来越明显,虾蟹发病的时间也越来越形成了季节性提前,造成很大的经济损失。     

卵巢发育过程中河蟹肝胰腺消化酶活力的变化

研究了河蟹卵巢发育过程中肝胰腺的5种消化酶活力的变化。测定结果表明：随着卵巢发育的逐渐成熟,河蟹肝胰腺中的胃蛋白酶、类胰蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶活力变化都是先升后降,Ⅲ2期达到峰值,其中淀粉酶比活力较高,平均高达152．855U／mg蛋白,脂肪酶比活力极低,平均仅为0．020U／mg蛋白。肝胰腺消化酶活力的大小和变化与河蟹卵巢发育过程中的营养需要和物质转换密切相关。     

异常天气条件下河蟹肝胰腺坏死综合征致病因素分析与防控对策

<正>中华绒螯蟹,俗称河蟹、大闸蟹,是江苏省淡水渔业中最具特色与影响力的主导支柱产业。随着河蟹养殖集约化程度的提高,近年来,河蟹肝胰腺坏死综合征(又称"河蟹肝胰腺白化病",俗称河蟹"水瘪子"病)已成为行业内最为关注的热点及难点病害问题之一,该病在一龄蟹种培育期及成蟹养殖阶段均有出现,集中暴发于成蟹养殖中期,对产业危害较大。     

河蟹肝坏死症状及流行情况

入夏以来，江苏泗阳县境内及洪泽湖周边养蟹池发生大面积河蟹肝坏死疾病，给养蟹业造成巨大的经济损失，对此，我们进行了大量的调查和分析，现将初步了解情况报告如下：一、症状与病变外观病蟹体表污物较多，体色变暗，壳薄壳软；内观肠内无物，肠壁较薄、鳃丝变黑或水肿，肝脏病变，早期呈黄、白点状相间，如散黄鸡蛋，镜检有油滴状分散物，中期颜色变白、呈臭豆腐状，后期腐烂化水，呈透明胶水状。病蟹食欲不振，上岸，严重时绝食，中午都上岸。二、流行情况该病１９９９年偶见，２０００年开始流行，２００１年大面积流行，泗阳县境内及…     

急性肝胰腺坏死病试验方法的研究进展

正对虾的急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND)是近年来出现的一种新型致命性、细菌性疾病,该病最初被称为早期病死综合征(EMS)和急性肝胰腺坏死综合征(AHPND)[1]。国内外对该疾病的发生、流行病学、病原学、耐药性、易感物种、临床体征、组织病理学、预防、治疗和诊断等重要信息做了大量研究,使人们更进一步认识了该疾病。该文主要从目前已开展的AHPND病     

急性肝胰腺坏死病病原菌毒力的初步研究

近年来,致病性副溶血弧菌引起的急性肝胰腺坏死病的致死率较高,从病程上分为急性和亚急性两类。本试验选取来自江苏不同地区的引发急性、亚急性的6株致病性副溶血弧菌,通过攻毒试验验证其毒力强弱,并通过多位点序列分型进行菌株分型研究。攻毒试验结果显示,菌株SHY1669、SHY1776、SHY1777、SHY1833攻毒试验组的对虾死亡率显著高于菌株SHY1673、SHY1697(P<0.05)。利用多位点序列分型技术进行分型研究,菌株SHY1669、SHY1673、SHY1697、SHY1776、SHY1777、SHY1833分型结果为ST452、ST882、ST415、ST114、ST919、ST2355,其中ST2355为新序列型,其余均为已知序列型,且与ST1743同源性最高。系统发育树分析显示,急性与亚急性菌株在进化方面未表现出显著差异,急性菌株主要出现在亚洲地区,而亚急性菌株出现在北美洲和亚洲等地区。本研究结果表明,不同致病性副溶血弧菌在毒力方面存在强弱之分,但在多位点序列分型中未表现出亲缘关系的差异。     

赤点石斑鱼病毒性神经坏死症的组织病理和电镜观察

用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测患病赤点石斑鱼苗，呈Beta诺达病毒阳性。光学显微镜下观察到病鱼的脑、视网膜、脊髓有空泡．在脑部，空泡主要分布在端脑、间脑和小脑。受感染的细胞明显收缩、致密变化和嗜碱性。包涵体常为圆形，大小不一。透射电镜下，在感染细胞的细胞质可观察到含有病毒粒子的致密体。病毒粒子呈等面体，无外膜，直径为25～28nm，随机分布在细胞质或在致密体内排列成品格状。致密体大小不一。偶尔观察到较大致密体的外膜已破裂，病毒粒子被释放到细胞质。     

刺参养殖池塘底泥理化指标和细菌数量变化的检测

通过检测刺参养殖池塘底泥的6项理化指标和8类细菌数量,研究了山东省莱州刺参养殖池塘底质的周年变化规律。实验结果显示,底泥的pH值和氧化还原电位变化趋势相同,变化范围分别为(7.15±0.40)~(7.80±0.21)和(42.8±85.5)~(-351.0±61.5)mV。硫化物的变化趋势与pH值和氧化还原电位相反,其含量变化范围为(47.66±47.01)~(496.12±418.57)μg/g(干重)。总氮、总磷和有机碳含量变化范围分别为(457.42±103.40)~(865.83±187.85)、(166.83±17.12)~(241.32±27.21)μg/g和0.27%±0.08%~0.37%±0.10%。异养细菌、弧菌和芽孢杆菌数量的变化范围分别为(3.27±5.55)×105~(6.41±8.48)×106、(5.39±4.32)×103~(1.62±2.01)×105和(1.31±1.57)×104~(7.57±1.66)×104 CFU/g。氨化细菌、反硝化细菌和亚硝化细菌数量的变化范围分别为(6.80±1.16)×105~(1.31±1.64)×107个/g、(2.67±2.48)×103~(5.11±5.88)×104个/g和(8.08±8.99)×10~(1.45±1.73)×103个/g,氨化细菌和反硝化细菌在1年内的变化趋势相同。硫还原细菌和硫氧化细菌数量的变化范围分别为(5.62±5.53)×102~(7.22±5.52)×104个/g和(6.50±5.17)×101~(1.00±1.16)×104个/g,两种细菌数量在一年内的变化趋势相反。研究表明,底泥的氧化还原电位与硫氧化细菌数量呈显著正相关(P0.05),硫化物含量分别与芽孢杆菌、反硝化细菌、氨化细菌及硫还原细菌的数量呈极显著正相关(P0.01),有机碳含量与硫还原细菌的数量呈显著正相关(P0.05)。刺参养殖池塘底泥的多项理化指标和细菌数量之间显著相关,关系复杂。     

鲤在阿维菌素胁迫下肝胰腺组织的转录组分析

为了探究阿维菌素胁迫对鲤机体的响应机制,在水温(22±2.0)℃,将体质量(150±30)g的鲤(Cyprinus carpio)分别暴露在阿维菌素浓度0μg·L^-1(对照组)、1.5μg·L^-1和3.0μg·L^-1下5 d,采用转录组学测序分析方法,探究阿维菌素胁迫对鲤肝胰腺转录组学的影响,解析其对鲤的分子毒理机制。通过对所得基因的功能注释发现,被注释的差异基因主要与结合、催化和代谢等功能有关。KEGG通路富集分析结果显示,差异表达基因在药物代谢-细胞色素P450、药物代谢-其他酶、淀粉和蔗糖代谢等通路中显著富集,涉及药物代谢、氨基酸代谢、碳水化合物代谢、脂质代谢以及辅助因子和维生素的代谢等多个代谢过程。这些功能基因和预测通路为理解阿维菌素胁迫鲤体内解毒和免疫系统奠定了基础。本研究获得的转录组数据可为深入研究鱼类应对杀虫剂污染物的分子机制提供丰富的基因资源。     

氨氮胁迫对中华绒螯蟹免疫指标及肝胰腺组织结构的影响

以中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)为研究对象,蟹初始体质量为(71.25±1.13)g。设计对照组(不额外添加氨氮,水中本底氨氮质量浓度约为1 mg/L)、低浓度组(10 mg/L NH4Cl)、中浓度组(50 mg/L NH4Cl)、高浓度组(100 mg/L NH4Cl)4种不同的氨氮质量浓度,分别于胁迫的第1天、3天、5天、15天抽取血淋巴进行相关免疫指标测定,并观察氨氮胁迫15 d后对肝胰腺组织结构的影响。结果表明:(1)3个处理组的血细胞密度(DHC)在胁迫初期(第1天和第3天)均显著低于对照组(P<0.05);在胁迫第5天,各组血细胞密度均升至最高;但至第15天时,高浓度组的DHC下降,显著低于对照组(P<0.05)。低浓度的氨氮胁迫在短期内可促进超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,高浓度的氨氮胁迫却抑制其活性;随胁迫时间延长,SOD活性变化趋势与DHC相似,CAT活性在胁迫第5天时出现显著下降(P<0.05),且3个氨氮处理组显著低于对照组(P<0.05),而第15天时各组之间差异不显著。丙二醛(MDA)含量随胁迫时间延长而不断增加,不同浓度的氨氮胁迫使MDA增加速度不同,浓度越高,MDA在体内累积量越大;(2)与对照组相比,3个氨氮处理组的中华绒螯蟹在遭受氨氮胁迫15 d后,其肝胰腺B细胞数量均减少,转运泡体积明显增大,细胞核增大且数量增多;而且在高浓度组中,中华绒螯蟹的部分肝小管基膜破裂、细胞结构模糊,少量细胞核解体。结论认为,随着氨氮胁迫浓度的增加和胁迫时间的延长,中华绒螯蟹DHC逐渐下降,MDA含量逐渐增加,机体非特异性免疫防御系统遭到损伤,同时机体细胞和组织受到伤害甚至出现死亡。研究结果从免疫学与形态学的角度阐明了氨氮胁迫对中华绒螯蟹的毒害机制。     

急性肝胰腺坏死病(AHPND)诊断方法的研究进展

<正>急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND)是近年来出现的一种新型疾病,它已导致亚洲和南美许多国家的对虾大面积死亡。该病最初被称为早期死亡综合征(early mortality syndrome,EMS)和急性肝胰腺坏死综合征(acute hepatopancreatic necrosis syndrome,AHPNS),后来正式改名为AHPND(FAO,2013)。这种细菌性疾病暴发最先导致了中国、越南、马来西亚、泰国、墨西哥、菲律宾和南美洲     

不同生长时期红螯螯虾肌肉和肝胰腺内氨基酸和脂肪酸变化分析

为了研究不同生长时期红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)肌肉和肝胰腺内脂肪酸和氨基酸的动态变化,选取90 d (第二性征未发育)、140 d (第二性征发育成熟)和180 d (性腺发育成熟)的红螯螯虾,分别测定其肌肉和肝胰腺内氨基酸和脂肪酸的含量。结果显示,90 d红螯螯虾肌肉中的必需氨基酸总量显著高于其他2个时期(P<0.05);而红螯螯虾肝胰腺内必需氨基酸总量和非必需氨基酸总量均随着日龄增加而逐渐下降。比较不同生长时期肌肉中脂肪酸含量发现,随着日龄增长,饱和脂肪酸(SFA)含量呈下降趋势;而单不饱和脂肪酸(MUFA)含量呈先上升后下降的变化趋势,140 d含量最高[(25.69±0.42)%];多不饱和脂肪酸(PUFA)含量呈上升的变化趋势。肝胰腺中SFA含量在 3个生长时期内无显著性差异(P>0.05),MUFA含量呈先上升后下降的变化趋势,140 d含量最高[(37.44±0.59)%],而PUFA含量变化与MUFA正好相反。营养价值评估结果显示,180 d (可上市销售)的红螯螯虾肌肉内必需氨基酸指数(49.96%)高于联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)评分模式(31.50%)和全鸡蛋蛋白质模式(43.10%),是较为理想的优质食物蛋白源。由上可知,在不同生长时期,肌肉和肝胰腺中的氨基酸、脂肪酸的主要消耗不同,研究结果对了解不同生长时期红螯螯虾营养需求、开发红螯螯虾配合饲料提供了参考依据。     

中国明对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)和池塘水体中弧菌的检测分析

近年来,对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)在全球范围内暴发,给对虾养殖业造成了严重的损失。为了进一步掌握中国明对虾AHPND的暴发与池塘水体中弧菌数量的关系,本文采用套式PCR法以及TCBS选择培养基法,分别对2018年4—9月采集的样品进行AHPND致病基因检测和池塘水体中弧菌数量的分析。套式PCR检测结果显示,7、8月AHPND检出率较高,分别达到15.6%、25.0%,其他月份未有阳性样品检出;TCBS选择培养基结果显示,在调水、控料等措施之下,4月至9月期间各虾池的弧菌数量控制在0～8.6×10~3 cfu·mL~(-1)之内,其中7、8月达到高峰。另外,将本次试验中发现的TCBS黑色弧菌菌落,进行16S rRNA菌落PCR并测序,运用Mega 6软件中的Neighbor-Joining法构建系统进化树,结果显示其与溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)亲缘关系较近。本文针对该病的基本情况,结合近几年国内外的研究进展,提出了一些防控措施,为进一步控制该病害的发生提供了依据。     

中华绒螯蟹肝胰腺白化症组织病理变化

采用常规石蜡切片技术和透射电镜技术,对患有肝胰腺白化症的中华绒螯蟹病变组织和细胞进行观察。发现病蟹肝胰腺、鳃、肌肉等组织细胞发生了不同程度的病变,其病理特征为肝细胞水肿、变性、坏死,细胞中脂肪颗粒锐减,线粒体水肿、嵴消失、形成空泡,内质网、溶酶体解体成小泡。鳃组织增厚,上皮细胞微绒毛排列疏松、不规则,部分线粒体嵴消失,出现膜性退化。坏死的肝细胞和鳃上皮细胞中出现细菌颗粒。肌细胞的病变主要表现为细胞核固缩,肌丝松驰、水肿、断裂、肌质网溶解形成小泡。中华绒螯蟹具有重要生理功能的肝胰腺、鳃组织发生了严重病变,使其功能损伤,不耐运输;而肌肉的松驰、肝胰腺脂肪的锐减影响了中华绒螯蟹的品质。同时,病变组织和细胞中未见病毒等生物病原,表明该病为非生物性疾病。图2表0参12     

大口黑鲈生态塘微生态及水理化指标变化分析

为探究7—9月大口黑鲈生态养殖池塘微生物与水质理化指标的变化及关系,采用高通量测序法测定天津某大口黑鲈生态养殖池塘7—9月的微生物群落结构,并对养殖区和微生态区表层水理化指标进行监测。试验结果显示,该池塘微生物多样性在7—9月发生变化,底泥微生物α多样性始终高于水样和毛刷。各样本中优势菌均包含变形菌门;水体中蓝细菌门在9月发展为优势物种;毛刷样本各月份优势菌不同,9月时厚壁菌门比例最高。水体理化指标在7—9月发生变化,养殖和微生态区水体氨氮含量均在8月达到最高值,9月时两区域的总氮、正磷酸盐、高锰酸盐指数、固体悬浮物质量浓度、pH和总碱度最高。相关性分析表明：微生态区水体中硝态氮含量与毛刷中根瘤菌科丰度显著负相关;养殖区和生态区水中亚硝态氮含量分别与底泥中红杆菌科和毛刷中Norank＿o＿＿norank＿c＿＿Nitrospira丰度显著负相关(P<0.05)。研究结果可为大口黑鲈7—9月生态池塘水质及微生物的调控和二者相关的后续研究及修复水质功能菌的筛选提供参考。     

凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病致病菌的分离鉴定、药敏特性及其组织病理学观察

为查明上海市奉贤区某对虾养殖场疑似患急性肝胰腺坏死病的凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）的病原菌,本研究从患病凡纳滨对虾肝胰腺组织分离纯化到1株优势菌FHBX-1,并通过人工回归感染试验确定其致病性,利用VITEK-2全自动微生物鉴定仪和16S rRNA、热休克蛋白HSP60基因序列分析进行综合鉴定,并检测其毒力基因。同时采用K-B纸片扩散法检测病原菌的药物敏感性并通过石蜡切片观察患病凡纳滨对虾肝胰腺组织的病理特征。结果显示：菌株FHBX-1经生理生化特征测定、16S rRNA和热休克蛋白HSP60基因序列分析,综合鉴定为副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）,且携带了急性肝胰腺坏死病相关的毒力基因pirA^VP、pirB^VP,未携带副溶血弧菌临床主要毒力基因耐热直接溶血毒素tdh和相对耐热直接溶血毒素trh基因。人工回归感染试验结果显示,凡纳滨对虾在菌液浓度为1.0×10⁶ CFU/mL浸泡感染试验组,7 d内累计死亡率为80%,患病凡纳滨对虾具有肝胰腺颜色变白、萎缩变小,胃肠变...