猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒的RT-PCR鉴别诊断

猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）为套式病毒目冠状病毒科、冠状病毒属的病毒，引起猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）。该病是一种猪肠道传染病，以水泻、呕吐和脱水为特征，各种年龄的猪均易感染，哺乳仔猪、架子猪或育肥猪的发病率可达100％，尤其是哺乳仔猪受害最严重，该病主要发生于冬季，夏季也可发生。猪传染性胃肠炎病毒（porcine transmissible gastroenteritis virus，TGEV）为套式病毒目冠状病毒科、冠状病毒属的病毒，是猪传染性胃肠炎（porcine transmissible gastroenteritis，TGE）的主要病原。该病是一种急性、高度接触性传染病，以呕吐、严重腹泻、脱水为特征的传染病，对新生仔猪具有高度致死率。虽然不同年龄的猪对这种病毒均易感，但5周龄以上的猪死亡率较低，多成僵猪，使养猪饲料报酬降低。     

2种猪冠状病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用

【目的】建立一种可同时检测2种猪冠状病毒即猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的双重RT-PCR检测方法并进行临床应用。【方法】对TGEV和PEDV的单项RT-PCR方法分别进行条件优化后对2种病毒的双重RT-PCR进行条件优化并进行特异性与敏感性试验,然后用单项RT-PCR方法和双重RT-PCR对临床样品进行比较检测。【结果】双重RT-PCR检测方法的PEDV与TGEV的检测敏感度分别为59、49copies/μL,该方法对当前常见猪源RNA病毒的检测结果都为阴性。该方法对2013—2016年18个猪场的235份仔猪腹泻样品的检测结果显示,PEDV和TGEV的个体阳性率分别为73.6%和2.1%,与单项RTPCR方法检测结果无显著性(P0.05)差异,临床样品中PEDV的猪场阳性率与个体阳性率都极显著(P0.01)高于TGEV。【结论】建立了一种有较高灵敏性与特异性的PEDV与TGEV的双重RT-PCR检测方法,近年来猪传染性腹泻样品中PEDV检出率极显著高于TGEV。     

猪传染性胃肠炎

猪传染性胃肠炎是猪传染性胃肠炎病毒引起的，临床以呕吐、暖泻为主要特征的高度传染性消化系统传染病。各种年龄猪都可发病，新生仔猪病死率最高。     

猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻的区别

从病原、流行特点、临床表现、病理剖检、实验室诊断等方面介绍了猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻之间的区别,以供参考。     

猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒混合感染的调查

本试验通过RT-PCR方法对113份疑似病料进行了检测,用以调查猪群中猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病痛毒混合感染情况.实验结果表明:34份样品表现为猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒混合感染,占样品总数的29.2%.     

一例猪流行性腹泻病毒与猪传染性胃肠炎病毒混合感染的诊断与思考

2019年8月初,河南省遂平县某规模化猪场产房仔猪出现严重的腹泻、呕吐现象,最终因脱水而死亡。为探究猪群发病原因,对发病严重猪群进行临床解剖,结合分子生物学诊断技术,最终确诊为猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒混合感染所致。经过紧急疫苗接种、实施其他防控措施,2周后疫情得到有效控制,仔猪腹泻情况不再发生。     

鸡传染性法氏囊炎病毒的分离与提纯

取接种4周龄雏鸡的法氏囊,经匀浆,高速离心,超速离心,CsCI 密度梯度离心,可获得纯化的鸡法氏囊炎病毒(IBDV)条带。通过电子显微镜观察,说明 IBDV 呈球状,直径约60nm,无囊膜,其浮力密度为1.32g/ml。本试验所分离的病毒粒子的平均含量为957μg/ml,病毒有活力,并具有抗原的特异性。     

冬季严防猪腹泻

严冬季节,猪腹泻现象时有发生,给养殖户造成一定的经济损失.在此提醒养户们要注意严防冠状病毒引起的猪腹泻.引起猪腹泻的冠状病毒,主要有猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻;前者是由猪传染性胃肠炎病毒引起以呕吐为主的传染病.临床上各种年龄的猪都易感染,但以10日龄以内的乳猪发病率和死亡率最高,可高达100%.     

禽传染性支气管炎——肾变病型病毒的分离和初步鉴定

从发病雏鸡的肾脏中分离到一株禽传染性支气管炎——肾变病型〔AvianInfectious Bronchitis(IB)——Nephrosis Form〕病毒。经盲传三代接种鸡胚后,出现典型的侏儒胚病变。该病毒能被乙醚、氯仿灭活,经56℃30分钟后被灭活,但能抵抗 pH2 30分钟。在电子显微镜下,病毒粒子直径为103nm,有19nm 宽的囊膜,囊膜上有典型的球状突起呈花冠状。病毒粒子内部有一典型的马蹄型结构     

内蒙古猪瘟流行病学调查及猪瘟病毒的分离

对内蒙古部分地区猪场进行了猪瘟流行病学调查，发现我区在较大范围内以非典型的猪瘟为主，发病多见于3月龄以下的仔猪，且以局部流行为主，母猪多呈隐性感染，部分母猪表现出繁殖障碍；个别地区仍有发病率和致死率较高的急性典型猪瘟，发病猪场不同程度上存在免疫程序不合理和免疫抑制性疾病。在此基础上对疑似病例进行了病理学检测和兔体交互免疫试验进行确诊，并对猪瘟野毒进行了分离。本研究不仅为内蒙古地区进一步作好猪瘟的防制提供了理论依据，而且为猪瘟野毒分子生物学的研究打下了基础。     

抗猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体的研制及应用

将纯化的猜传染性胃肠炎病毒免疫 BALB/C 小白鼠后,取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞在 PEG 存在下进行融合,HAT-1640培养液筛选,并用 ELISA 间接法检测阳性克隆。通过有限稀释法进行三次克隆化后,获得了二株稳定分泌抗 TGEV 的单克隆抗体杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞染色体皆在95条以上;其分泌抗体均属 IgG_1亚类。通过阻断试验证明其作用的特异性。对该单抗在诊断上的初步应用作了探讨。     

抗猪瘟病毒单克隆抗体的研究——猪瘟病毒抗原的提纯

本文介绍了用 PEG 和蔗糖密度梯度区带离心纯化猪瘟病毒的方法和步骤。先用 PEG 沉淀浓缩猪瘟兔化弱毒感染的牛睾丸细胞培养液,再经蔗糖密度梯度区带离心,出现4条区带,其中病毒感染力最强的位于Ⅱ带,其次为Ⅰ带,蛋白质含量多为0.14～0.19毫克/毫升和0.21～0.12毫克/毫升。电镜检查可见带有膜囊的病毒粒子,SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳显示Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ带均各出现一条明显蓝色条带外,在它前后侧还隐约可见一条浅带。用这些方法浓缩提纯兔化猪瘟弱毒效果较好,且较简便易行。     

山西省折带黄毒蛾核型多角体病毒观察

１９８９年，从山西省太谷县采集到的折带黄毒蛾核型多角体病毒（ＮＰＶ）材料经电镜观察，其多角体为三角形，四边形或不规则形。包涵体内的病毒粒子为双粒包埋类型。     

兔出血热病毒单克隆抗体的研究

本文应用杂交瘤技术,将兔出血热病毒免疫的 BALB/C 小白鼠脾细胞与骨髓瘤细胞 SP_2/O 在PEG 存在下进行融合。杂交瘤细胞经 HAT 筛选,用间接 ELISA 法检测相应的阳性抗体。经三次克隆化及三个多月的传代扩大培养,获4株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,编号为84、83、44、19,其腹水滴度为1:1×10~(-5),1:1×10~(-4),1:1×10~(-5)及1:1×10~(-4)。经分类测定其免疫球蛋白均属于 IgG。亚类测定除44号属 IgG_(2a)外,其他均属 IgG_1。从阻断试验看,单抗的作用能被兔特异性抗血清所阻断,则证明84号腹水具有抗兔出血热病毒的特异性。应用 ELISA 法测定非标记抗体间对抗原的反应增值,说明83与44号间的反应增值很低,可能是识别同一个抗原决定簇,而84及19号则分别识别其他两个不同的抗原决定簇。同时也讨论了单克隆抗体发展的远景。     

水稻簇矮病毒的提纯及其性质

 采用差速离心和蔗糖密度梯度离心，可获得水稻簇矮病毒（RBSV）提纯制剂。提纯制剂经紫外扫描，呈典型的核蛋白吸收曲线，A260/240=1.18，A260/280=1.61。在电镜下观察提纯病毒，可见大量比较均一的球状粒体，直径为60.0nm。病毒粒体有双层衣壳，蛋白亚基清晰可辨。通过免疫扩散和免疫电镜试验，病毒粒体与自制的RBSV抗血清有明显的血清学反应，而这种抗血清与水稻矮缩病毒(RDV)、水稻瘤矮病毒(RGDV)不起反应。提纯病毒制剂以苯酚-甲基苯酚-SDS方法提取核酸。将其注射到介体昆虫内，具有侵染性。核酸制品有典型的核酸紫外吸收曲线，A260/228=2.27，A260/280=2.02。根据核酸在不同离子强度下对RNase的稳定性等的测定，表明其核酸属双链RNA。根据紫外吸收测定，RNA在RBSV粒体中的含量为17.5%-20.1%。用聚丙烯酰胺凝胶电泳，其RNA的总分子量为16.66×10#+(6)d，含组分分子量为2.70、2.30、1.90、1.70、1.68、1.50、1.38、1.20、1.10、0.60、0.35、和0.25(× 10#+6)。这些结果表明，RBSV是植物呼肠弧病毒亚组Ⅰ的一个新成员。     

抗鸡新城病毒高免卵黄IgG的研制与应用

本文报导了抗鸡新城病毒高免卵黄IgG的研制方法:选用健康母鸡数只,用新城Ⅰ系经基础免疫、强化免疫和超强化免疫后获得高效价的鸡蛋,从卵黄中粗提卵黄IgG,进一步纯化。卵黄IgG对人工发病的鸡新城疫和自然发病的鸡进行治疗,收到了显著的疗效,治愈率为77—91.2％,在治疗家禽病毒性传染病方面提供了一种新的生物制剂。特异性卵黄IgG来源广泛,制备简单,成本低廉,给治疗家禽病毒性传染病开辟了广阔的前景。