响应面法优化灵芝发酵培养基及发酵活性成分分析

以灵芝液体发酵菌丝量和胞外多糖含量为评价指标,确定灵芝菌液体发酵最优培养基配方,分析了菌丝体和发酵液中的活性成分。结果表明,灵芝液体发酵最优配方为黄豆粉添加量1.63%,葡萄糖添加量2.33%,可溶性淀粉添加量3%,磷酸二氢钾添加量0.1%,硫酸镁添加量0.05%,VB_1添加量50 mg/L,菌丝体干质量最高达1.94 g/100 mL;发酵液中的胞外多糖质量浓度为431 mg/100 mL;菌丝体胞内多糖质量分数达15.37%,总三萜质量分数达1.36%,蛋白质质量分数为22.93%,多酚质量分数为1.91%。     

舞茸菌丝体与胞外多糖液体培养基的优化

以舞茸(Grifola frondosa)LT菌株为材料,研究培养基营养成分对其菌丝体和胞外多糖的影响。通过单因素实验确定葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾及维生素B1为最适宜的碳源、氮源、无机盐和生长因子。多因素正交实验进一步优化上述组分的浓度,确定舞茸菌丝体最适宜的发酵培养基配方为:10%豆芽汁200 mL,葡萄糖20 g/L、蛋白胨5 g/L、磷酸二氢钾4 g/L、维生素B130 mg/L,pH 7.0;胞外多糖最适宜的发酵培养基配方为:10%豆芽汁200 mL,葡萄糖20 g/L、蛋白胨3 g/L、磷酸二氢钾4 g/L、维生素B130 mg/L,pH 7.0。研究为进一步开展舞茸菌丝体和胞外多糖液体发酵与利用提供了理论参考。     

拟康氏木霉产胞外多糖发酵培养基及培养条件的研究

以生物量和胞外多糖产量为指标,采用单因素和正交试验对摇瓶培养的拟康氏木霉(Tricho-dermapseudokoning)的液态发酵条件进行优化。优化后的拟康氏木霉发酵控制参数为:最佳培养基配方为麦麸30g/L,玉米粉30g/L,葡萄糖7.5g/L,KH2PO41g/L;发酵培养时间为6d;培养基的初始pH值为5.0～6.0;发酵温度为30±1℃。最佳培养条件下菌丝干重及胞外多糖的产量分别5.272g/L、0.622g/L。     

两种真姬菇摇瓶发酵产生菌丝体及 胞外多糖研究

采用摇瓶培养法对2种真姬菇的发酵工艺进行研究,结果表明：真姬菇Ⅰ、Ⅱ发酵生产菌丝体及胞外多糖的碳源是葡萄糖,氮源是酵母膏;液体发酵培养基是葡萄糖3%、酵母膏 0.4%、vitB1 10mg/100ml、KH₂PO₄ 0.1%、MgSO₄ 0.1%,pH值为6.0;液体发酵的优化条件是初始pH 6.0~7.0,振荡速度110~130r/min,培养温度25~28℃,装液量150ml/250ml。2种真姬菇菌丝体及胞外多糖产量较高,真姬菇Ⅰ菌丝体干重、胞外多糖产量分别是 3.92、8.83 mg /ml;真姬菇ⅠⅠ菌丝体干重、胞外多糖产量分别是3.25、7.69 mg /ml,即真姬菇Ⅰ摇瓶发酵菌丝体干重、胞外多糖产量高于真姬菇Ⅱ。     

胞外多糖研究

 采用摇瓶培养法对2种真姬菇的发酵工艺进行研究,结果表明：真姬菇Ⅰ、Ⅱ发酵生产菌丝体及胞外多糖的碳源是葡萄糖,氮源是酵母膏;液体发酵培养基是葡萄糖3%、酵母膏 0.4%、vitB1 10mg/100ml、KH₂PO₄ 0.1%、MgSO₄ 0.1%,pH值为6.0;液体发酵的优化条件是初始pH 6.0~7.0,振荡速度110~130r/min,培养温度25~28℃,装液量150ml/250ml。2种真姬菇菌丝体及胞外多糖产量较高,真姬菇Ⅰ菌丝体干重、胞外多糖产量分别是 3.92、8.83 mg /ml;真姬菇ⅠⅠ菌丝体干重、胞外多糖产量分别是3.25、7.69 mg /ml,即真姬菇Ⅰ摇瓶发酵菌丝体干重、胞外多糖产量高于真姬菇Ⅱ。     

一株野生肺形侧耳的分离培养与鉴定

本研究是以野外采集的一株野生肺形侧耳(Pleurotus pulmonarius)菌株为研究材料,对其子实体进行组织分离、培养菌种。本试验通过对菌株进行分子鉴定,并对7个母种培养基配方、6个原种培养基配方和8个栽培种培养基配方菌丝生长及出菇品质的影响进行了研究。结果表明,经分子鉴定,获得的野生菌株为肺形侧耳;7个母种培养基配方中,以配方2 (马铃薯200 g,琼脂20 g,蔗糖20 g)的生长速度和菌丝密度最好;6个原种培养料中,以配方4 (棉籽壳78%,麦麸20%,蔗糖1%,石膏1%)为最佳配方;根据菌丝长势、出菇情况、产量和品质等指标,栽培种培养料中以配方1 (棉籽壳88%,麦麸10%,石灰1%,石膏1%)为最佳配方。该研究结果为野生肺形侧耳的人工驯化栽培研究和优质食用菌产品的生产提供了理论参考依据。     

不同浓度碳源和氮源对灰树花胞外多糖液体发酵产量的影响

以灰树花(Grifola frondosa)BUAGF-02 菌株为材料,研究葡萄糖和蛋白胨浓度对液体发酵产多糖的影响。研究以可溶性淀粉、葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨等基础发酵培养基,碳源试验葡萄糖浓度分别为5、10、15、20、25 g/L,氮源试验蛋白胨浓度为1、1.5、2、2.5、3 g/L,25℃、170 r/min 振荡培养10 天,离心收集发酵液和菌丝体,采用醇沉法收集多糖,菌丝体和多糖烘干后称重。葡萄糖浓度在20 g/L 时,胞外多糖产量最高,达到0.3 g/100 mL;其浓度25 g/L时菌丝体干重最高,为1.82 g/100 mL。蛋白胨浓度3 g/L时,胞外多糖产量最高,为0.2 g/100 mL;其浓度2.5 g/L 菌丝体干重最高,为1.26 g/100 mL。研究为进一步开展灰树花胞外多糖液体发酵与利用提供了参考。     

食用菌菌糠再利用技术研究

为了解决食用菌产业发展中的菌糠再利用技术问题，对不同菌糠的营养成分含量进行分析，对菌糠替代部分木屑、棉籽壳和麦麸栽培食用菌的效果，以及施用菌糠有机肥对脐橙产量和品质的影响进行试验。结果表明，菌糠可替代木屑、棉籽壳和麦麸作为培养料，栽培秀珍菇、金福菇和鲍鱼菇的生物效率分别达到64.95%、84.65%和70.49%，与CK差异不显著；施用菌糠有机肥的脐橙平均产量比CK增加5.54kg/株，达到极显著差异，并可提高脐橙的品质，改良果园土壤的结构。研究结果显示，食用菌菌糠的再利用技术对提高农业资源的有效循环利用具有重要的实践指导意义。     

发酵床腐殖质代料培养大球盖菇菌丝的适合性评价

发酵床腐殖质是现代化畜牧养殖业中产生的废弃物,为避免造成环境污染,必须多方式加以资源化再利用。本研究以不同比例的发酵床腐殖质作为培养大球盖菇菌丝的主要基质原料,比较其菌丝形态和生长速度,对发酵床腐殖质代料培养大球盖菇菌丝的适合性进行评价。结果表明：完全替代麦麸用料组（处理Ⅰ）的菌丝由于生长细弱、稀疏,不适宜作为替代料配方使用;完全替代木屑用料组（处理Ⅱ）菌丝生长缓慢;有添加麦麸的其他配方,菌丝均洁白、较浓密,菌丝生长情况与CK组相当。鉴于相同的菌丝生长情况,可继续优化发酵床腐殖质的替代应用方法,选择最佳替代比例进行大球盖菇菌丝培养。     

红托竹荪液体菌种发酵条件配方优化研究

红托竹荪是贵州特色珍稀食用菌,为解决红托竹荪菌种生长缓慢的问题,特开展红托竹荪液体菌种发酵条件暨配方优化研究,通过对红托竹荪液体培养基中的碳源,氮源及培养时间进行单因素分析,以产生的菌丝体干重为评价指标,确定红托竹荪的最佳碳源、氮源和培养时间;在此基础上,通过正交优化试验,确定红托竹荪菌丝体液体最佳发酵条件为:蛋白胨0...     

Optimization of Submerged Fermentation Conditions for Intracellular Polysaccharide of Pleurotus tuber-regium

[Objective]A submerged fermentation medium of Pleurotus tuber-regium was developed for efficient production of polysaccharide and biomass. [Methods] By employing single factor experiment and orthogonal design,the effects of carbohydrate and nitrogen sources and cations on the Pleurotus tuber-regium fermentation were investigated with the intracellular and extracellular polysaccharides as indices. [Results]Glucose was found to be the optimal carbohydrate source,favorable for cell growth,metabolite production of extracellular polysaccharide( EPS) and intracellular polysaccharide( IPS),the yield of polysaccharides per unit biomass. Yeast extract as nitrogen sources was suitable for the cell growth,mycelial biomass and the yield of extracellular polysaccharide. The type of cations source also affects polysaccharide production,and EDTA performed best in promoting cell growth and metabolites accumulation. Under the optimized conditions,the production of biomass,intracellular polysaccharide,extracellular polysaccharide,the yield of total polysaccharide and dried cell biomass was 3. 34 g / L,1. 92 g / L, 80. 34 mg / g,8. 13% and 23. 62 g / L,respectively. [Conclusions]The optimized conditions for submerged fermentation of Pleurotus tuber-regium provided scientific basis for the cultivation of Pleurotus tuber-regium.     

酱油中主要抗氧化成分的分析研究

酱油中含有丰富的抗氧化物质,对脂质过氧化有抑制作用,可以减少自由基对机体的损害。对市场中8种酱油海天特级金标生抽、金狮一品鲜、老才臣生抽和老抽、李锦记天成一味、精选老抽、金标生抽、锦珍生抽的抗氧化特性进行了比较研究。进一步采用浓缩去除盐分、沉淀蛋白、去除多糖等方法,分析研究除去蛋白质和多糖后酱油的抗氧化性变化。结果表明,不同种酱油抗氧化性的差别较大;沉淀蛋白后酱油抗氧化能力有明显减弱,而去除多糖处理后抗氧化能力减弱不明显,由此提示蛋白质对酱油的抗氧化能力贡献较大。     

杏鲍菇菌丝体水溶性多糖提取条件的优化

以多糖得率为测定指标,通过单因素和L9(34)正交试验,对杏鲍菇菌丝体水溶性多糖的提取条件进行了研究。结果表明,杏鲍菇菌丝体水溶性多糖的提取条件为:料水比1∶40,提取温度80℃,提取时间4 h。在此条件下,水溶性多糖得率为8.27%。     

大豆分离蛋白溶解性的影响因素研究

以大豆分离蛋白为原料,重点探讨了几种外部因素对大豆分离蛋白溶解度的影响。结果表明,大豆分离蛋白的溶解性与pH值、加热温度、离子浓度、多糖和表面活性剂等因素密切相关。因此,在大豆分离蛋白的提取、加工和应用中应该考虑这些因素。     

一种有效的菊花总RNA提取方法

菊花组织或器官中含有大量的酚类、多糖、蛋白质等次生代谢物质,影响了菊花总RNA的提取质量。本研究用改良TRIZOL法提取菊花不同器官总RNA,并用凝胶电泳、紫外分光光度计对提取的总RNA质量和完整性进行检测,并对叶片总RNA进行反转录,通过RT-PCR扩增了菊花管家基因Actin的部分片断。结果表明,采用改良TRIZOL法提取的RNA条带清晰、完整性好、质量高,其中A260/A280比值在2.08~2.19。通过RT-PCR从叶片中扩增出了目的基因cDNA片断。该方法是一种快速、有效的提取菊花总RNA的方法;该方法适用于根、茎、叶、花等器官或组织总RNA的提取,可作为菊花不同组织和器官总RNA提取的通用方法。     

盆栽草莓基质筛选试验初报

试验目的为筛选出最佳盆栽无土草莓基质,适应盆栽草莓工厂化生产的技术体系,为相关园艺植物无土栽培技术研究和工厂化生产提供实践和理论依据。用河沙、珍珠岩、煤渣和草炭不同比例的11种组合为处理,试种品种为丰香,进行单因素随机区组试验,研究不同基质配方对盆栽草莓的生长结果影响。结果表明不同处理的生长结果指标差异显著。利用加权平均数的评价,筛选出三个较好的盆栽草莓基质配方:草炭:煤渣(体积比1:1),珍珠岩:煤渣(1:1)和珍珠岩:河沙:煤渣(1:1:1)。     

真姬菇与凤尾菇融合菌株筛选鉴定及营养成分分析

本研究以漆酶为筛选目标,根据出发菌株凤尾菇与白玉菇漆酶活性的差异,采用RB-PDA平板显色技术与分子标记相结合的方法快速、高效地筛选出具有漆酶活性的凤尾菇与白玉菇融合菌株IV19C,采用常规方法对白玉菇与凤尾菇融合菌株IV19C进行了营养成分分析及安全性评价。结果表明,融合菌株IV19C与两个出发菌株不同,水分含量（90.0%）与两出发菌株无明显差异,IV19C灰分含量（9.81%）、蛋白质含量（36.0%）,明显高于凤尾菇;粗纤维含量（18.3%）、粗脂肪含量（2.50%）高于白玉菇,含有七种必需氨基酸,谷氨酸和天冬氨酸含量丰富,但缺乏色氨酸;该样品急性毒性试验结果为MTD>15 g/kg体重,根据急性毒性剂量分级属无毒。以上实验结果说明融合菌株IV19C营养丰富,食用安全,有良好的开发应用前景。     

不同保鲜膜对平菇保鲜效果的影响

为比较不同保鲜膜对平菇保鲜效果的影响,分别以低密度聚乙烯(LDPE)膜、高密度聚乙烯(HDPE)膜和聚氯乙烯(PVC)膜为包装材料,在模拟超市冷鲜货架温湿度条件[温度约(14±1)℃,贮藏环境相对湿度约85%]下,研究3种不同保鲜膜对平菇的保鲜效果。结果表明：与LDPE膜相比,HDPE 膜和PVC 膜能降低平菇的采后失重率,维持包装内较高的CO₂体积分数和较低的O₂体积分数;在贮藏的前4天,HDPE膜和PVC膜包装的平菇感官分值与LDPE膜包装平菇无显著差异(P>0.05);但贮藏4天后,HDPE 膜和PVC膜包装的平菇其感官分值明显低于LDPE膜,且呼吸强度及细胞膜透性也显著高于LDPE膜(P<0.05)。3种不同保鲜膜以LDPE膜对平菇的保鲜效果最佳。     

春兰基因组DNA提取方法的研究

本文以春兰(Cymbidiumgoeringii(Rchb.f.)Rchb.f.)为研究试材,对植物基因组DNA提取方法中的若干影响因子诸如药品、试剂配制方法、DNA取材部位、蛋白质去除次数、DNA析出时间、提取样品水浴时间等进行了比较分析,试图找出春兰基因组DNA提取的最佳方法。结果表明:采用进口的CTAB提取效果比国产的CTAB要好,特别适用于花药的提取,蛋白质去除效果很好;SDS提取缓冲液配制方法很重要,不同的SDS缓冲液配制方法,其提取效果差异较大。春兰花苞的DNA提取得率较叶片高,但是叶片DNA的纯度则相反,叶片较花苞高。在提取花苞基因组DNA过程中,增加氯仿/异戊醇抽提次数,对去除DNA中蛋白质、多糖及其它杂质有一定的作用,但是对DNA的损失也是很明显的。从实验效果来看,氯仿/异戊醇抽提次数以2次为宜。提取基因组DNA在异丙醇沉淀时,采取挑取絮状沉淀的方法,也可减少蛋白质、多糖等其它杂质的影响,从而提高DNA纯度。无论是叶片还是花苞材料,采用异丙醇沉淀5min,一般析出的以核酸基因组DNA为主,蛋白质为次,核酸析出量在80%以上。继续沉淀(15min)的产物中DNA含量明显较低,而且沉淀的纯度相对不高,因此异丙醇沉淀时间可以缩短到10min之内以提高DNA的纯度。使用CTAB法提取DNA时,水浴时间至少需要30min,过短的水浴时间会造成DNA得率的下降,同时过长的水浴时间,如超过1h,则可能会引起DNA的降解,或者最后产物中增加其他杂质,因此,适宜的水浴时间当为40￣60min。     

火龙果总DNA提取方法比较研究

摘要：火龙果组织中含有多糖及其他次生代谢物质,因而难以提取高质量的DNA。本试验以火龙果嫩茎为材料,进行多种DNA提取方法比较研究,并通过琼脂糖凝胶电泳对所提取的DNA样品进行检测,结果表明,改良CTAB法和微量CTAB法均可用于火龙果DNA提取,尤其是微量CTAB法,提取的DNA纯度较为理想,能满足后续分子生物学研究的要求。