用菌体凝集抑制试验诊断羊伪结核病

将羊伪结核棒状杆菌用吐温－８０等化学试剂进行处理，使菌体分散的单个细胞均匀地悬浮于溶媒中。制备为抗原。然后用其与已知的阳性及阴性血清进行试验，探讨诊断羊伪结核病的快速、简便方法，即菌体凝集抑制试验．结果，供治疗试验用的３０只羊在人工接种伪结核棒状杆菌后的第２～１３周，有２８只羊的血清一直呈现非凝集或沙粒状凝集，即阳性反应；２只羊的血清一直呈现絮状凝集即阴性反应。该期间的患羊检出率为９３％。而由屠宰场采集的未感染伪结核棒状杆菌的１０３只羊的血清均呈现絮状凝集、无一出现非特异性即假阴性反应。     

用菌体凝集抑制试验诊断羊伪结核病

将羊伪结核棒状杆菌用吐温－８０等化学试剂进行处理，使菌体分散的单个细胞均匀地悬浮于溶媒中，制备为抗原。然后用其与已知的阳性及阴性血清进行试验，探讨诊断羊伪结核病的快速、简便方法，即菌体凝集抑制试验。结果，供治疗试验用的３０只羊在人工接种伪结核棒状杆菌后的第２￣１３周，有２８只羊的血清一直呈现非凝集或沙粒状凝集，即阳性反应；２只羊的血清一直呈现絮状凝集阴性反应。该期间的患羊检出率为９３％。而由屠宰场     

羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定及ELISA检测方法的建立

从疑似山羊干酪性淋巴结炎羊的肩前淋巴结脓肿内分离到2株菌,经鉴定均为羊伪结核棒状杆菌。利用羊伪结核棒状杆菌标准菌株(ATCC19410株)制成外毒素作为检测抗原,通过酶标抗体、阳性血清、外毒素抗原最适浓度的选择试验,确定适当的抗原、抗体和酶标抗体稀释浓度,建立了间接ELISA方法用于检测抗体。用建立的ELISA方法检测100份待检羊血清,其中阳性血清4份,阳性检出率为4％。     

猪伪狂犬病高免血清的制作与初步应用

用伪狂犬病抗体阴性健康猪,以不同剂量、间隔一定时间、多次免疫接种伪狂犬病强毒S株,制备伪狂犬病病毒高免血清,试验表明,用本方法制备的伪狂犬病病毒高免血清特异性强、抗体效价高达256倍以上,完全符合诊断用血清标准要求.并将高免血清在中和试验、ELISA、免疫胶体金等进行了对比试验.     

山羊伪结核棒状杆菌抗体在初乳中的转移与产后10月龄山羊的抗体状况

关于抗伪结核棒状杆菌(Syn.C.Ovis)抗体从成年奶山羊的初乳转移给它们的羔羊、小羊血清中抗体的存留以及伪结核棒状杆菌的感染时间几乎无人报道。Burrell(1981)检验了64只成年山羊群中的23只小山羊。有10只小山羊溶血抑制试验呈阳性反应。除一头外其余都小于8周龄,同时它们的母亲血清反应都呈阳性。仅有两头约6月龄小山羊在临床上表现干酪性淋巴结炎。Burrell(1980)也检验了吮过自然感染母羊乳汁羔羊的血清样品,在6只羔羊血清中见有抗伪结核棒状杆菌毒素的抗体。小山羊和血清反应阳性山羊所生的羔羊血清中的抗毒素证明是初乳中     

细胞壁抗原用于布氏杆菌病诊断试验的研究

用培养的布氏杆菌菌体，通过超声波裂解、反复离心制备出布氏杆菌细胞壁抗原。将细胞壁抗原作1：128稀释，用作牛种布氏杆菌酶联免疫吸附试验（ELISA)的抗原；将布氏杆菌细胞壁抗原作1：32稀释，用作平板凝集试验抗原；把细胞壁抗原作1：16稀释用作试管凝集试验抗原，分别建立了牛布氏杆菌ELISA试验、平板凝集试验和试管凝集试验。用这3种方法，检测已知200份平板凝集试验阴性血清，5份平板凝集试验阳性血清。结果5份阳性血清在平板凝集试验、试管凝集试验和ELISA试验中均为阳性；200份阴性血清在平板凝集试验和试管凝集试验中均为阴性，在ELISA试验中有1份为阳性?试验证明，细胞壁抗原，既能用于传统的平板凝集试验和试管凝集试验，又能用于ELISA试验。     

检测猪细小病毒血清抗体乳胶凝集试验方法的建立及初步应用

将猪细小病毒在IBRS-2细胞上同步培养增殖,待出现细胞病变后,反复冻融,收获病毒液,用甲醛灭活。随后用经硫酸胺沉淀、透析后浓缩的细小病毒液进行方阵滴定,选择致敏乳胶的最佳条件,制成细小病毒乳胶凝集试验（LAT）抗原。抗原与细小病毒阳性血清反应出现肉眼可见的凝集颗粒,而与生理盐水、PBS、犊牛血清、猪瘟、衣原体、口蹄疫、伪狂犬病、弓形体及萎缩性鼻炎等阳性血清不出现凝集现象。用所建立的细小病毒乳胶凝集试验（LAT）与血凝抑制试验检测了203份猪血清,其中血凝抑制抗体阳性为161份,阴性为42份,阳性率为79.31％;乳胶凝集抗体阳性为150份,阴性为53份,阳性率为73.89％,两种方法阳性符合率为93.16％,经统计学检验P＞0.05,两者差异不显著。结果表明,乳胶凝集试验可以作为临床上大量血样进行血凝抑制试验前的初筛,具有简便、准确的优点,在检测细小病毒（PPV）抗体上具有较好的应用前景。     

乳胶凝集法诊断猪钩端螺旋体的研究

自赤峰不同地区中,小型养猪场,个体养猪户采集２０４头份育肥猪血清,１１０头份健康猪血清,用乳胶凝集试验诊断猪钩端螺旋体病,将生长良好的黄疸出血型钩端螺旋体培养物经离心,酸沉淀或过滤浓缩１００,经适当处理,制成致敏原,分别同待检血清,正常血清,生理盐水进行反应,以待检血清出现“”以上凝集,对照不凝集判为阳性,通过试验,凝集的阳性复合率为８３．９％￣９７．９％。     

伪结核棒状杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

为建立伪结核棒状杆菌(Cp)血清抗体间接ELISA检测方法,以热灭活处理的不同的浓度Cp菌株作为固相抗原包被酶标板,用不同封闭液封闭,设置不同的封闭时间,再用不同稀释度的待检血清和不同稀释度的酶标二抗与之反应,以此优化间接ELISA反应条件,确定阳性临界值。对间接ELISA方法的特异性和重复性进行试验,并在此基础上对采集的临床样本进行检测。结果显示,最佳抗原包被量为OD600 nm=0.084的菌悬液100μL,10 g/L BSA封闭时间2 h,一抗血清稀释度为1∶400,酶标二抗的稀释度为1∶5 000,血清阴阳性的OD450 nm值临界值为0.352。该方法仅对Cp阳性血清呈特异性反应,与6种常见病原阳性血清均无交叉反应,特异性较强。批内试验和批间试验的变异系数均小于9.5%,重复性较好。敏感性试验结果表明,当伪结核标准阳性血清进行1∶1 280稀释时检测仍为阳性,敏感性较强。用该方法对10份经细菌分离鉴定为阳性的血清进行Cp抗体检测,结果均为阳性。用建立的方法对临床随机采集的423份血清进行检测,结果显示阳性率为35%。研究建立的抗体间接ELISA方法为Cp抗体检测及血清学调查奠定了基础。     

间接ELISA检测猪伪狂犬病血清抗体

用猪肾传代细胞IBRS－2增殖猪伪狂犬病病毒（PRV）鄂A株，病毒培养上清液经硫酸铵沉淀、聚乙二醇（Mr20000）浓缩后作为包被抗原。用纯化的猪血清IgG免疫家兔，HRP村记撮的兔抗猪IgG，制备出高效价的酶标抗体，酶标抗体工作浓度为1：50000；经各种条件的选择，建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接ELISA。所建立的间接ELISA抗原包被浓度为39.2mg/L，血清最佳稀释度为1：20，与猪细小病毒、猪、O型口蹄疫、猪衣原体标准阳性血清呈阴性反应，与标准阴性血清和临床未感染PRV的猪血清呈阴性反应；与猪伪狂犬病标准阳性血清、免疫猪血清和临床发病猪血清呈明显的阳性反应；与美国进口的PRV抗体检测ELISA诊断试剂盒检测结果比较，45份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100％。表明建立的间接ELISA具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点，可用于猪伪狂犬病血清抗体的定性和定量检测。