柑桔高效离体再生系统研究

研究了植物激素、刻伤、放置方式等因子对广柑子叶和上胚轴切段离体再生的影响 ,建立了一个高效的再生系统 .该系统的最佳条件是 :采用实生苗子叶和上胚轴茎段作为外植体 ,MS无机盐 B5维生素 5%蔗糖 0 .8%琼脂 7.5mg/ L BA 1mg/ L NAA(p H5.7)作为不定梢诱导培养基 ;子叶沿中间纵切为二 ,同时在非切面部分横向刻伤 ,切面朝下与培养基表面接触放置 ;上胚轴则切成 0 .5～0 .8cm长的切段 ,横放于培养基上 .培养条件为恒温 (2 6± 1)℃ ,首先在黑暗下培养 15d,而后转移至16 / 8h光 /暗周期下 ,共经过 70 d培养 ,95%子叶外植体均能发生不定梢 ,平均每个外植体上发生不定梢数为 11.11个 ,96 %的上胚轴切段能发生不定梢 ,平均每个外植体上发生不定梢数为 5个 .这一系统再生频率高 ,操作简便 ,适用于广柑的遗传转化     

花椰菜再生体系的优化

以子叶和上胚轴为外植体,研究了不同激素浓度下花椰菜离体培养的再生体系.结果表明,上胚轴作为外植体时不定芽分化率较高,在不加IAA或添加0.5 mg/L IAA的培养基上均能达到100%,最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA.子叶作为外植体时不定芽分化率低,最高为40%.     

银白杨下胚轴高频离体再生体系的建立和优化

【目的】建立银白杨(Populus alba)下胚轴高频再生体系,为银白杨遗传转化和推广利用奠定基础。【方法】以银白杨下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导形成不定芽,探讨苗龄、接种方式及不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖质量浓度等对银白杨下胚轴不定芽分化和生根的影响。【结果】适宜银白杨下胚轴不定芽分化的最佳培养基为:MS+AgNO33.5 mg/L+蔗糖35 g/L+琼脂6.0 g/L+IBA 0.3 mg/L+TDZ 1.5 mg/L,用该培养基培养银白杨下胚轴外植体,其分化率为98.63%,平均每个外植体形成的不定芽为23.81个。银白杨下胚轴外植体不定芽未经愈伤组织而直接产生于下胚轴的表皮或近表皮等表层细胞。3~7 d苗龄银白杨下胚轴诱导不定芽分化能力无显著差异,诱导率均达到95%以上,7 d后随着苗龄的增加,不定芽分化、诱导能力快速下降,苗龄为11 d时不定芽分化率只有52.28%。不同切段下胚轴不定芽再生能力由强到弱表现为:上部切段(靠近子叶端的下胚轴部分)>中部切段>下部切段。以正插(形态学下端插入培养基)方式接种的外植体不定芽再生能力显著大于反插(形态学上端插入培养基)和平放的。【结论】优化了银白杨的组织培养体系,初步找到了影响银白杨下胚轴诱导分化及植株再生的主要因子。     

小白菜再生培养基中适宜激素浓度的筛选

以子叶盘和下胚轴切段为外植体，研究了小白菜再生培养基中不同激素及其浓度水平对外植体产生愈伤、不定芽和根的影响。结果表明，小白菜子叶盘的再生频率较下胚轴的高。较适宜的愈伤组织诱导培养基为MSB 2，4-D0.1mg/L AgNO35.0mg/L，诱导频率为28.3％，较适宜的不定芽诱导培养基为NSB 6-BA4.0mg/L IAA0.1mg/L AgNO35.0mg/L，诱导频率为94.1％，较适宜的生根培养基为MSB IAA0.15mg/L，生根率为95.0％。     

基于BA/IAA的麻风树离体再生体系的研究

以麻风树无菌苗下胚轴、子叶和叶柄为外植体,在含有不同浓度的BA和IAA MS培养基上进行麻风树再生芽的研究.结果表明,最佳外植体为下胚轴;最佳不定芽诱导培养基为MS＋1.0 mg/L BA＋2.0 mg/L IAA,不定芽诱导率达100%;最佳不定根诱导培养基为MS＋1.0 mg/L IAA,生根率达100%.     

青州蜜桃、冬桃成熟胚子叶再生不定植株的研究

以青州蜜桃、冬桃成熟胚子叶为外植体 ,研究了利用子叶再生不定梢的适宜培养基。两个品种的子叶在 1 / 2MS附加BA 1 0mg/L和NAA 0 .2mg/L的培养基上获得了最高不定梢再生率。青州蜜桃和冬桃子叶的不定梢最高再生率分别是 6 6 .7%和 5 6 .2 %。不定梢在WPM +BA 2mg/L +IBA 0 .0 1mg/L +GA 0 .5mg/L培养基上增殖培养后 ,转移到 1 / 2MS +IBA 0 .5mg/L +蔗糖 2 0g/L诱导生根 ,两个品种的生根率都在 90 %以上     

芝麻菜愈伤组织诱导及植株再生*

 以芝麻菜(Eruca sativa Mill)无菌苗的下胚轴、子叶和子叶柄作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对其愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,分别以MS+0.8mg／L 2,4-D,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.1mg／L 6-BA,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.2mg／L 6-BA为下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织诱导培养基时,效果较好,出愈率依次为86.3%,78.2%,97.6%;将下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织分别转移到分化培养基MS+3.0mg／L 6-BA+0.1mg／L　NAA,MS+3.0 mg／L 6-BA+0.2mg／L NAA上再生不定芽,效果最佳,不定芽再生频率分别为72.7%,63.6%,69.2%。将不定芽切下转移至1／2 MS+0.5mg／L IBA培养基上诱导生根,生根率达81％以上。     

Establishing an in vitro regeneration system from hypoeotyls of Chrysanthemum lavandulifolium

以甘菊下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导不定芽分化,建立了甘菊下胚轴高效再生体系,为甘菊遗传转化体系的建立奠定了基础。结果表明：将甘菊种子播种于MS培养基上,置于黑暗条件下培养7d可以迅速获得大量下胚轴;下胚轴在MS＋1．0mg／L2,4-D＋0,5mtg／L6-BA的培养基上培养15d后,愈伤组织形成率最高为86．66％,愈伤组织呈淡黄色,大小一致;将愈伤组织转接到MS培养基中培养30d左右即可分化不定芽,不定芽分化率达25．50％,平均每个外植体产生不定芽数目为4．25个;不定芽在添加0．1ing／LNAA的1／2MS培养基中培养15d后,生根率达到100％。生根试管苗出瓶后,经过适宜培养,均可以获得健壮的开花植株。     

甘菊下胚轴离体再生体系的建立

以甘菊下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导不定芽分化,建立了甘菊下胚轴高效再生体系,为甘菊遗传转化体系的建立奠定了基础。结果表明:将甘菊种子播种于MS培养基上,置于黑暗条件下培养7 d可以迅速获得大量下胚轴;下胚轴在MS+1.0 mg/L 2, 4-D+0.5 mg/L 6-BA的培养基上培养15 d后,愈伤组织形成率最高为8666%,愈伤组织呈淡黄色,大小一致;将愈伤组织转接到MS培养基中培养30 d左右即可分化不定芽,不定芽分化率达25.50%,平均每个外植体产生不定芽数目为4.25个;不定芽在添加0.1 mg/L NAA的1/2 MS培养基中培养15 d后,生根率达到100%。生根试管苗出瓶后,经过适宜培养,均可以获得健壮的开花植株。      

甜瓜叶片高效再生体系的建立

为了建立高效稳定的甜瓜植株再生体系,为甜瓜的转基因技术提供受体材料,以薄皮甜瓜品种"西甜一号"叶片为外植体,通过器官发生途径诱导形成不定芽,研究了不同的激素组合、外植体放置方式、暗培养时间等条件对其再生的影响。结果表明,以新梢顶端展开的第2~3片叶在MS 6-BA1.0 mg/L的诱导培养基上,外植体远轴面向下接触培养基,直接转入正常光周期下培养再生频率可达100%,平均每个外植体上可诱导出11株健壮植株。在MS 6-BA 0.05 mg/L不定芽伸长培养基上,分化的不定芽(丛)能够伸长。在1/2MS IAA 0.2 mg/L的生根培养基上无根苗生根,生根率可达100%。     

落葵的组织培养与植株再生

以落葵子叶和下胚轴为外植体，在MS基本培养基中添加不同浓度激素培养。结果表明，下胚轴经1－4mg/l6-BA，2mg/l6－BA＋0．1－2．0mg/l2，4－D激素处理，可产生愈伤组织，而子叶却不能。下胚轴愈伤组织在2mg/l6－BA＋0．1mg/lNAA处理下芽分化最好。在芽的继代培养中，4．0mg/l6－BA＋0．1mg/lNAA处理最佳，平均每个外植体可分化4个芽。在1／2MS＋0．3mg/lNAA培养基中生根质量高。再生小植株成活率达90％左右。     

抗病南瓜种质482-2离体再生体系研究

以抗病南瓜种质482-2的种子为材料,通过组织培养,研究并建立了离体再生体系,结果表明:南瓜种子无菌萌发后,分别以子叶、下胚轴和胚根为外植体进行诱导培养,子叶可直接分化出不定芽,下胚轴和胚根可产生愈伤组织、但很难进一步分化出不定芽,子叶分化出的不定芽经生根培养能获得完整植株;南瓜种子无菌萌发的适宜培养基为琼脂胨,子叶诱导不定芽的适宜培养基为MS 6-BA1.0 mg/L,不定芽生根的适宜培养基为MS IBA0.2 mg/L.     

珍稀植物香果树植株再生体系的建立

通过不定芽直接再生和经愈伤组织诱导器官发生两种途径,建立了香果树快速、高频率发生的植株再生体系,探讨了不同外植体（幼叶切块、茎段、叶柄和根）、叶片放置方式、植物生长调节剂和培养条件对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响.香果树愈伤组织诱导器官发生结果表明:不同外植体在MS附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L 2,4-D的培养基上愈伤组织诱导率均为100%,其中叶片外植体叶面向下放置效果最好;愈伤组织在MS添加0.5 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA的培养基上不定芽的分化率为94.35%.香果树不定芽直接再生结果显示:叶片外植体在MS添加6-BA或ZT的培养基上,不定芽直接再生率均高达100%,其中在MS附加2.0 mg/L 6-BA培养基上,产生的不定芽数目多,生长旺盛;附加1.0 mg/L ZT 培养基上,不定芽数目多达56.67个/cm[[sup]]2[[/sup]],但生长较弱.黑暗预培养有利于香果树叶片外植体不定芽的再生.两种途径得到的不定芽转到1/2 MS培养基上均可生根,生根率达100%,附加1.0 mg/L 的IBA和0.5%的活性炭有利于再生植株根的生长.      

杂种枫香组织培养再生研究

目的枫香具有适应性强、生长速度快、观赏价值高等特点,既可以作为用材树种又可以作为优良的园林绿化树种。北美枫香能够与中国枫香杂交并可产生有杂种优势的后代,但是杂种枫香的快速繁殖技术和遗传转化体系还有待完善。方法本研究以北美枫香为母本,中国枫香为父本进行杂交,选用子一代杂种枫香的子叶、子叶节以及下胚轴为外植体材料建立高效的组培再生体系,并对3种外植体的分化能力进行比较。结果(1) 子叶和子叶节外植体最佳芽诱导培养基为0.2 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA的WPM培养基,而下胚轴外植体最佳芽诱导培养基为0.1 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA的WPM培养基。(2)3种外植体在0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.8 mg/L GA不加琼脂的WPM芽伸长液体培养基中获得最高的平均不定芽诱导数。(3)不定芽在2.0 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA的WPM培养基中生根,生根率达到100%。(4)不定芽生根培养2个月后长为完整植株,移栽成活率在90%以上。结论(1) 杂种枫香3种外植体的分化能力依次为:子叶节>子叶>下胚轴,其中子叶节的分化能力显著高于子叶和下胚轴。(2)TDZ能够有效促进不定芽的诱导,GA对不定芽的伸长具有显著的影响。(3)杂种枫香外植体在固体培养基中获得了最高的不定芽诱导率,在液体培养基中获得了最高不定芽平均数量,而且液体培养中未出现玻璃化。本研究为杂种枫香新品种的快速繁育以及遗传转化体系的建立奠定了良好的基础。      

车前不定芽直接诱导及再生体系的建立

[目的]建立车前高效离体植株再生体系,为车前快速扩繁奠定基础。[方法]以车前无菌苗的下胚轴和子叶为外植体,以MS为基本培养基,研究了6-BA、NAA不同配比的培养基对车前下胚轴和子叶不定芽诱导的影响。[结果]MS培养基添加6-BA2 mg/L,5～7d的下胚轴不经过愈伤组织诱导阶段便可直接形成不定芽,不定芽诱导率为80%,每个外植体可产生7～8个不定芽。培养基中添加NAA促进不定根的分化,但影响不定芽的诱导。6-BA与NAA配合使用时,外植体易分化愈伤组织。在添加NAA的MS培养基上,再生苗诱导生根频率为100%。将再生植株移栽于盆土中,可获得100%存活率,且生长良好。[结论]6-BA促进车前下胚轴直接分化不定芽,而NAA则影响不定芽的诱导,在不定芽诱导培养基中应避免添加NAA。     

菜薹组织培养和植株再生研究

对6个菜薹品种的4种不同外植体进行了组织培养和植株再生研究，结果表明，子叶与茎尖中以分化不定芽，而下胚轴和幼根只能形成愈伤组织及不定根；在MS BA2mg/L NAA1mg/L ABA0.5mg/L AgNO34mg/L培养基上，子叶的不定芽分化频率最高（23．3％），而在MS＋BA1mg/L KT1mg/L NAA0.2mg/L培养基上，茎尖繁殖系统为1．66，快速繁殖效果较为理想，结果还表明，菜薹不同品种间的组织培养能力存在明显差异。     

新疆紫草愈伤组织诱导及植株再生研究

以新疆紫草根、下胚轴、子叶、真叶为外植体,MS附加各种激素进行愈伤组织诱导及其分化、植株再生研究。研究结果表明:①根、胚轴、子叶、真叶的平均出愈率差异不大,但出愈速度差异明显;子叶出愈快,愈伤生长量最大;不定芽分化率依次为下胚轴>根>真叶>子叶。②诱导脱分化的效应KT优于6-BA;降低2,4-D浓度有利于愈伤组织的增殖。激素与外植体有互作效应。③真叶在MS NAA0.5 mg/L KT0.4 mg/L的培养基上能直接形成丛生芽。④不定芽在MS IAA0.5 mg/L KT1.0 mg/L培养基中生根率为83.3%;由此建立了新疆紫草再生体系。⑤不同外植体均可诱导出红色愈伤,颜色深浅依次为真叶>子叶>胚轴>根,且激素可以调控不同外植体愈伤红色的程度;同时红色愈伤能分化产生红色不定根。利用进一步优化的体系可进行快繁并提取愈伤组织中的紫草素。     

银合欢组织培养研究初报

以银合欢(Leucaena leucocephla(Lamarck)de Wit)无菌实生苗子叶和胚轴切段为外植体,以MS为基本培养基,研究不同BA和NAA浓度组合对银合欢组织培养效果的影响。结果表明:愈伤组织诱导培养中,以子叶的培养反应性最好,其愈伤组织诱导率在各种组合中都达到100%,其中以附加0.1 mg/L NAA和2.5-7.0 mg/L BA效果最好;胚轴在添加0.1 mg/L NAA及3.0-4.5 mg/L BA的MS培养基上培养时愈伤组织诱导率较高。子叶愈伤组织在MS+3.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA的培养基中培养时芽分化率只有6.7%;胚轴愈伤组织则未能实现芽的分化。     

扶芳藤不定芽再生体系的建立

以扶芳藤无芽茎段和下胚轴为外植体,建立了稳定高效的不定芽再生体系。MS＋6-BA 1.5 mg/L＋IBA0.1 mg/L对诱导无芽茎段产生不定芽最为有利,再生率为82.6%。以下胚轴为外植体时,预培养50 d更有利于不定芽的诱导,中浓度的6-BA（1.3 mg/L和1.5 mg/L）对直接分化产生不定芽有利,培养基MS＋6-BA1.5 mg/L＋NAA0.1 mg/L上不定芽再生率最高,达到95.7%。以绵白糖和蔗糖为碳源均能达到较好的再生效果（80%以上）,以葡萄糖为碳源时再生率虽然高达100%,但玻璃化严重。生根培养基以1/2 MS＋IAA（0.7 mg/L）最好,生根率高达92.9%,经驯化后移栽成活率在90%以上。     

基于BA/IAA的麻风树离体再生体系的研究

以麻风树无菌苗下胚轴、子叶和叶柄为外植体, 在含有不同浓度的BA 和 IAA MS培养基上进行麻风树再生芽的研究. 结果表明, 最佳外植体为下胚轴; 最佳不定芽诱导培养基为MS+1.0 mg/L BA+2.0 mg/L IAA, 不定芽诱导率达100%; 最佳不定根诱导培养基为MS+1.0 mg/L IAA, 生根率达100%.