三种拮抗菌生物处理对凤凰水蜜桃保鲜效果的系统研究

由于水蜜桃采后极易腐烂变质,延长其贮藏期成为当前的研究热点。鉴于使用化学保鲜剂对环境和人体存在危害,观测和比较了3种病原菌拮抗菌——罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii),季也蒙假丝酵母(Candida guilliermondii)和丝孢酵母(Trichosporonaquatile)对白花水蜜桃(Prunus persica)采后保鲜品质的影响。试验采取直接喷果的方式,果实处理后装入保鲜袋置于常温条件下(28~30℃),24 h后测量其生理指标。结果表明:罗伦隐球酵母保鲜效果最优,季也蒙假丝酵母保鲜效果其次,均好于丝孢酵母保鲜效果。由于这3种酵母菌作为工程菌容易获得,相对安全,因此,对凤凰水蜜桃而言,拮抗菌制剂作为相对有效且无污染的生物保鲜剂,适宜推广应用。     

3种拮抗酵母菌组合处理对水蜜桃贮藏品质的影响

研究3种拮抗酵母菌罗伦隐球酵母、喜橄榄假丝酵母及间型假丝酵母组合处理对水蜜桃采后常温（25～30℃）下贮藏品质的影响,为水蜜桃的贮藏保鲜提供新方法。以凤凰水蜜桃为试验材料,处理组分别使用喜橄榄假丝酵母菌悬浮液、间型假丝酵母菌悬浮液、罗伦隐球酵母+喜橄榄假丝酵母混合菌悬浮液、罗伦隐球酵母+间型假丝酵母混合菌悬浮液、罗伦隐球酵母+喜橄榄假丝酵母+间型假丝酵母混合菌悬浮液浸果,对照组不做处理,测定与贮藏品质相关的腐烂指数、失重率、硬度、可溶性固形物含量、呼吸强度、相对电导率、丙二醛（MDA）含量和可溶性蛋白含量等8项生理生化指标,试验期8 d。与对照组相比,喜橄榄假丝酵母组果实的失重率显著下降7.39个百分点;间型假丝酵母组果实的可溶性蛋白含量显著上升36.14%;罗伦隐球酵母+喜橄榄假丝酵母组果实的可溶性蛋白含量显著上升40.95%;罗伦隐球酵母+间型假丝酵母组果实的腐烂等级显著降低,硬度得到有效保持,呼吸强度显著下降68.36%,丙二醛含量显著下降28.28%;罗伦隐球酵母+喜橄榄假丝酵母+间型假丝酵母组果实丙二醛含量显著下降21.26%,可溶性蛋白含量显著上升37.33%;各处理组在抑...     

假丝酵母对柑橘采后绿霉病的抑制效果

从柑橘果实分离的假丝酵母Candidaspecis CWW-4菌株对贮藏柑橘绿霉病菌有抑制作用。试验结果表明,拮抗酵母菌生防效果与病原菌和绿霉菌的浓度以及接种时间有关,在25℃下当接种绿霉菌浓度为1×104个/mL时,1×108cfu/mL拮抗酵母能较好的抑制绿霉病的发生。假丝酵母先于病原菌24 h接种,5 d后可完全抑制绿霉病的发生。在4℃和25℃下,拮抗酵母菌接种1 d以后可在果实的伤口处快速繁殖,伤口处无论是否接种病原菌其数量都分别增加20倍和60倍以上。采用不同的处理液处理果实,发现假丝酵母悬浮液和培养原液对绿霉病菌有较好的抑制效果;培养滤液和热杀死液抑制效果差。25℃离体条件下,1×108cfu/mL假丝酵母悬浮液24 h能完全抑制绿霉菌孢子的萌发,培养滤液和热杀死液无抑制效果。NYDB1所含各组分的营养液都不同程度的降低假丝酵母对绿霉病菌的抑制效果。研究结果表明,假丝酵母Candidaspecis CWW-4菌株对柑橘绿霉病有很好的防治潜力,其抑制机制可能与营养竞争有关。     

黑曲霉和乳酸芽孢杆菌两段青贮对甘蔗尾叶营养价值的影响

【目的】探讨黑曲霉和乳酸芽孢杆菌两段青贮对甘蔗尾叶营养价值的影响,为甘蔗尾叶有效利用和青贮饲料研究提供参考依据。【方法】以新鲜甘蔗尾叶为原料,分有氧发酵和无氧青贮两段进行,试验设对照组、试验I组、试验II组和试验III组。有氧发酵阶段,对照组、试验I组、试验II组和试验III组每千克新鲜甘蔗尾叶分别喷洒100 mL无菌水、10 mL黑曲霉菌液(8.75×107CFU/mL,下同)+90 mL无菌水、20 mL黑曲霉菌液+80 mL无菌水、30 mL黑曲霉菌液+70 mL无菌水,在无菌室室温下有氧发酵48 h;厌氧发酵阶段,对照组每千克样品喷洒100 mL无菌水,3个试验组每千克样品均喷洒10 m L乳酸芽孢杆菌菌液(1.1×108CFU/mL)+90 mL无菌水,混匀后罐装密封,室温青贮45 d后取样分析其常规营养成分、康奈尔净碳水化合物—蛋白质体系(CNCPS)营养指标、蛋白组分及碳水化合物组分。【结果】试验I组和试验III组粗蛋白(CP)水平显著高于对照组(P0.05,下同);3个试验组的木质素(Lignin)含量均显著低于对照组;淀粉(Starch)含量以试验III组最高,显著高于对照组和试验I组。试验组CNCPS碳水化合物组分较对照组均有所改善,尤其是试验III组效果最明显,试验III组的总碳水化合物(CHO)、非结构性碳水化合物(NSC)、快速降解碳水化合物(CA)、中速降解碳水化合物(CB1)和缓慢降解碳水化合物(CB2)水平最高,均显著高于对照组、试验I组和试验II组;非蛋白氮(PA)和中速降解蛋白(PB2)在对照组与试验组间差异显著,各试验组的快速降解真蛋白(PB1)和慢速降解真蛋白(PB3)含量高于对照组,不可利用蛋白(PC)显著低于对照组,黑曲霉和乳酸芽孢杆菌两段青贮可提高甘蔗尾叶CNCPS蛋白品质。【结论】综合考虑青贮甘蔗尾叶CNCPS碳水化合物组分及蛋白组分,以试验III组(2.625×106CFU/g黑曲霉+1.1×106CFU/g乳酸芽孢杆菌两段青贮)对改善甘蔗尾叶营养价值效果最佳。     

5株海洋酵母的鉴定及耐盐性分析

从海南洋浦近海分离到5株海洋酵母,利用生理生化结合ITS序列分析,分别鉴定为解脂耶罗威亚酵母(Yarrowia lipolytica)、热带假丝酵母(Candida tropicalis)、红酵母(Rhodotorula sp.)、季也蒙毕赤酵母(Pichiaguilliermondii)、汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)。耐盐性分析表明,在NaCl浓度为3%时,5株酵母的生长均没有受到影响。     

产朊假丝酵母富硒条件的优化及发酵罐培养

用富硒产朊假丝酵母制备饲料添加剂饲喂家畜家禽可获得富硒农产品。为获取富硒产朊假丝酵母,以产朊假丝酵母为出发菌株,优化摇瓶培养条件(摇瓶装液量、接种量、亚硒酸钠添加量、添加时间和培养液初始p H),通过L₉(3⁴)正交试验,获得最佳发酵工艺,即：装液量为35 mL,初始p H为6.5,接种量8%,培养时间为12 h,亚硒酸钠添加量为15μg/mL,此时最终发酵液中总有机硒含量最高,为9 792.732μg/L,菌体有机硒含量为1 400.362μg/g。用获得的高生物量富硒产朊假丝酵母制作饲料添加剂,通过补料培养,获得生物量为19.128 g/L,发酵液中总有机硒量为10 089μg/L。     

产朊假丝酵母增殖发酵培养基的优化研究

[目的]对产朊假丝酵母培养基进行优化,以提高其产率.[方法l通过单因素试验,研究不同碳源、氮源、无机盐对产阮假丝酵母产量的影响,对产朊假丝酵母发酵培养基成分进行筛选和优化研究,在此基础上,利用响应曲面法对主要影响因素进行回归分析.[结果]获得最优的增值发酵培养基组成为蛋白胨36.32g/L,蔗糖76.17 g/L,磷酸二氢钾1.98 g/L,硫酸镁1.5 g/L,硫酸铵1 g/L.[结论]产朊假丝酵母在优化后的培养基下OD值可达0.916,菌体于重可达11.15 g/L,比对照组提高了2.08倍.     

产油微生物的筛选

采用苏丹黑B染色法、甲醇-氯仿法,从30份土壤样品中筛选到9株产油霉菌和4株产油酵母.经5.8S rDNA序列分析,9株产油霉菌分别为蓝状菌Talaromyces trachyspermus、嗜松青霉Penicillium pinophillum、青霉Pe.sp.、微紫青霉Pe.janthinellum、淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus、简青霉Pe.simplicissimum.、棘孢曲霉Aspergillus aculea-tus、木霉Trichoderma sp.、拟康宁木霉Tr.koningiopsis,4株产油酵母分别是毕赤酵母Pichia caribbica、假丝孢酵母Candida sp.、季也蒙酵母Meyerozyma guilliermondii和季也蒙毕赤酵母Pi.guilliermondii.通过摇瓶培养,测定了各菌株的产油量,结果表明:霉菌产油量最高的是嗜松青霉,产油量为26.4%;酵母产油量最高的是假丝孢酵母,产油量为44.3%.提取毕赤酵母的油脂,采用气相色谱-质谱联用分析,测得其油脂成分主要是14～20碳的短链脂肪酸.     

应用Excel规划求解研究啤酒糟发酵菌液最佳配比

[目的]研究啤酒糟发酵菌液的最佳配比。[方法]以热带假丝酵母、产朊假丝酵母、康宁木霉和绿色木霉为供试菌株,应用4组分单纯形重心设计与Excel的规划求解工具来研究啤酒糟发酵茵液的最佳配比。[结果]菌株之间的最佳配比为：康宁木霉种子液2．4ml、热带假丝酵母种子液2．6ml。[结论]该研究为啤酒糟的资源化和减轻环境污染提供了理论依据。     

不同菌株制备生物硒的比较研究

将酿酒酵母、假丝酵母、嗜热链球菌分别接种到含不同硒浓度的培养液中进行培养,测定各菌株的生物量及生物硒含量,筛选出生物硒合成能力强的菌株,并将其两两混合、最后完全混合培养,得到生物硒合成能力强的混合菌株。结果表明,3种菌株生物硒合成能力由弱到强分别为酿酒酵母(11.7533μg/mL)、嗜热链球菌(11.9890μg/mL)、假丝酵母(12.8973μg/mL);嗜热链球菌-酿酒酵母混合制备的复合菌株生物硒合成能力最强,生物硒含量最高达到15.8864μg/mL。     

马尾藻提取液对侧耳菌丝营养及生殖生长的影响

[目的]探究马尾藻提取液对侧耳生长的影响,为其开发利用提供依据。[方法]研究不同浓度马尾藻提取液对1株亚光1号侧耳菌丝生长及生殖生长的影响。[结果]稀释1 000倍的马尾藻提取液对亚光1号的菌丝生长有显著促进作用,菌丝生长速率达10.49 mm/d;对亚光1号的产量有显著促进作用,产量提高16.0%。[结论]稀释1 000倍的马尾藻提取液对供试菌株的营养生长及生殖生长都有显著的促进作用,能达到增产的效果。     

16种杀菌剂组合对核桃炭疽病和黑斑病的防控效果

2013年,调查了四川省石棉县核桃炭疽病和黑斑病发病情况,并选用4种杀菌剂(25%咪酰胺乳油、20%噻唑锌悬浮剂、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、100%链霉素可湿性粉剂)配成16种组合对核桃炭疽病与黑斑病进行田间防效试验。结果表明:7月中旬核桃炭疽病和黑斑病大面积暴发,果实发病较叶片快,至8月26日,核桃果实炭疽病和黑斑病病情指数分别为54.22和41.15,叶片的病情指数分别为35.08和32.54;25%咪酰胺乳油1 000倍液+70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1 000倍液对叶片黑斑病防效最佳;25%咪酰胺乳油500倍液+70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1 000倍液对果实炭疽病和黑斑病的防效最佳;20%噻唑锌悬浮剂400倍液+70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1 000倍液对叶片炭疽病的防效最佳;100%链霉素可湿性粉剂3 000倍液+70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1 000倍液、25%咪酰胺乳油1 000倍液+70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1 000倍液和20%噻唑锌悬浮剂1 000倍液+70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1 000倍液都能较好地提高保果率和增产率。     

25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂防治温室白粉虱的田间药效试验

为了明确25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂对温室白粉虱的防治效果,2013年以常用药剂25％噻虫嗪水分散粒剂和5％高效氯氟氰菊酯微乳剂为药剂对照,在夏春秋甘蓝上测定了25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂2500倍液、2000倍液和1500倍液对温室白粉虱的田间防治效果。结果表明：在试验剂量条件下,25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂对温室白粉虱具有较好的防治效果,且持效期长,对温室白粉虱的天敌种类和数量以及甘蓝生长等均无不良影响。其中,施用1500倍液防效最好,试验期内的防效始终＞药剂对照,施药后第7 d防效为86.97％;施用2000倍液防效次之,除施药后第1 d外,其他时段的防效均＞药剂对照且与施用1500倍液防效差异不显著。生产上推荐25％噻虫胺＆#183;高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂施用浓度为2000～1500倍液,折合有效成分用量为93.75～112.5 g/hm2。     

血根碱抗水霉菌体外活性研究

采用测OD值和琼脂稀释法,以孔雀石绿、氯化钠作为对照,分别进行了3种药物对水霉菌孢子和菌丝的体外抑菌活性研究,其中血根碱以2%DMSO(二甲亚砜)为溶剂,孔雀石绿和NaCl均以水为溶剂。结果表明:血根碱对水霉孢子的MIC80为200μg/mL,对菌丝的MIC为256μg/mL;孔雀石绿对水霉菌孢子的MIC80为6μg/mL,对菌丝的MIC为12μg/mL;氯化钠对水霉菌孢子的MIC80为15 000μg/mL,对菌丝的MIC为20 000μg/mL,说明血根碱具有开发为抗水霉菌药物应用于渔药领域的前景。     

1亿孢子/ML枯草芽孢杆菌水剂防治番茄青枯病田间药效试验

为探讨枯草芽孢杆菌防治番茄青枯病的效果,进行枯草芽孢杆菌水剂防治番茄青枯病田间药效试验。方法:选取1亿孢子/ML枯草芽孢杆菌水剂300倍液、400倍液、500倍药液,在番茄青枯病发病前灌根施药。结果:对番茄青枯病的防效分别为91.29%、88.06%、84.41%,300倍处理与400倍处理的防效有显著差异,300、400倍与500倍处理的防效均有极显著差异。     

中药复方对奶牛隐性乳房炎病原菌的体外抑菌试验

取10头隐性乳房炎患牛乳汁,采用北京亚临床乳房炎快速诊断液(BMT试剂),对泌乳黑白花奶牛的乳汁进行了病原菌分离鉴定,结果共分离出金黄色葡萄球菌、乳房链球菌和大肠杆菌3种病原菌。将蒲公英、王不留行等中药水煎、去渣、浓缩制成相当于2g/mL的生药液,然后稀释为1.5,1.0,0.5g/mL3种质量浓度,用优质定性滤纸制成相应浓度的药敏片进行中药体外抑菌试验,结果表明,该中药对以上3种病原菌均有明显的抑制作用。     

有机肥料适宜种子生长的配比和敏感点的研究——以免水资源综合利用型生态厕所最终产物为例

[目的]根据种子发芽指数随肥料稀释比和培养时间变化规律,研究有机肥料适宜种子生长的配比范围和敏感点。[方法]利用豆秸秆和木屑形成体积比1∶1作为生态厕所反应基质处理人粪便,对得到的有机肥料添加不同量的蒸馏水制成不同配比的肥料浸提液。将黄瓜、白菜、油菜种子放入含有不同肥料浸提液配比的培养皿,然后置于培养箱中培养244、86、0 h,进行种子发芽试验。[结果]结果表明:在培养48 h内,黄瓜、油麦菜种子生长表现出不同的肥料浸提液配比范围,其配比范围分别为1∶(14.17~34.37)和1∶(24.34~41.26)。由于肥料对白菜种子的毒性较大,没有表现出适宜生长范围。黄瓜、白菜、油麦菜3种种子生长对肥料浸提液的敏感点分别为1∶22.301、∶20.90和1∶33.80。[结论]该研究为进一步应用免水资源综合利用型生态厕所最终产物提供了依据。     

高比活木聚糖酶XYN-W及其突变体在酵母中的高效表达

将来源于瘤胃真菌Neocallimastix frontalis的高比活木聚糖酶基因xyn-w整合到毕赤酵母表达载体pPIC9上,通过电击转化得到重组转化子。SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明,木聚糖酶基因xyn-w得到了高效分泌表达,在5 L发酵罐中木聚糖酶蛋白表达量达到1 mg/mL,酶活性达到13 000 IU以上。XYN-W 的C端57个氨基酸序列为连接序列和锚定区域,利用PCR方法将此段序列去除,得到截短的木聚糖酶序列xyn-m。用相同方法构建高效表达XYN-M蛋白的毕赤酵母工程菌株,表达产物经纯化后进行酶学性质测定, 结果表明, 其比活为19 856.6 IU/mg, Kcat值为4 433.8 s-1,与纯化的XYN-W蛋白(比活性13 795.3 IU/mg、Kcat值2 717.1 s-1)相比,分别提高了43.9%和63.2％。     

新疆小麦黑胚病主要病原菌的室内药效试验

[目的]为防治新疆小麦黑胚病提供理论依据。[方法]采取纸碟法,选择爱苗、世高和适乐时等市场常见农药,对新疆小麦黑胚病主要病原菌小麦根腐离蠕孢和细链格孢进行室内药效测定。[结果]小麦根腐离蠕孢和细链格孢在放有爱苗、适乐时、烯唑醇和世高的平板上生长均受到不同程度的抑制,在放有三唑酮、阿米西达、甲基硫菌灵、代森锰锌和多菌灵.硫磺的平板上基本不受抑制。供试农药对小麦根腐离蠕孢的抑菌效果顺序为1 000倍爱苗>4 000倍世高>1 000倍适乐时>1 000倍烯唑醇,对细链格孢的为1 000倍爱苗>3 000倍世高>1 000倍适乐时>2 500倍烯唑醇。爱苗1 000倍液在2种病原菌平板上的平均抑菌圈直径最大。[结论]爱苗、世高和适乐时对小麦黑胚病的2种主要病原菌均有良好的抑制效果。综合考虑,10%世高水分散粒剂是生产中防治小麦黑胚病的理想药剂。     

桃中多菌灵残留动态和最终残留分析

采用高效液相色谱(HPLC)测定桃中多菌灵的残留量,并探讨了不同用药模式下多菌灵在桃中的残留动态和最终残留量.结果表明,多菌灵稀释1000倍用药残留动态方程为C=4.648e-0.153 t,半衰期4.54 d;稀释500倍用药残留量动态方程为C=7.079e-0.104 t,半衰期6.70 d.最终残留显示,果皮中多菌灵含量均高于果肉中的含量,未清洗果皮的多菌灵含量高于清洗果皮的含量.