包装方式对黄羽肉鸡液氮速冻降温速率的影响

液氮速冻是近年来快速发展起来的肉与肉制品速冻方式,为促进液氮速冻技术在黄羽肉鸡屠宰加工生产中的应用,试验对不同包装方式黄羽肉鸡胴体液氮速冻的降温曲线、降温速率、液氮速冻肉鸡的品质进行了测定分析。结果显示:在-70℃箱式液氮速冻条件下,所有包装形式的肉鸡胴体在开始冷冻过程,会呈现先升温,再下降,经过最大冰晶形成区的温度带后,快速降温到-18℃;无包装、普通包装和贴体包装肉鸡达到和通过-1℃→-5℃的时间差异显著(P0.05);无包装样品冻结速率显著优于其他2种包装样品。无包装肉鸡在液氮速冻时冻结损失率显著高于带包装肉鸡,贴体包装的滴水损失率高于普通包装肉鸡,但蒸煮损失率优于普通包装肉鸡。综合冻结损失和鸡肉品质,贴体包装优于其他两种包装形式。     

不同粪菌悬液处理方式对猪粪菌移植过程中细菌活性及活菌组成的影响

旨在探究不同粪菌液处理方法对其菌群活性及存活菌群物种组成的影响,为猪粪菌移植(FMT)的优化应用提供参考。本研究共设置7个试验组制备粪菌液:静置制备新鲜粪菌液组(FS)、静置制备粪菌液于-80℃冷冻1周组(FFS)、离心制备新鲜粪菌液组(FC)、离心制备粪菌液于-80℃冷冻1周组(FFC)、液氮冷冻粪便24 h静置制备粪菌液组(NS)、甘油+液氮冷冻粪便24 h静置制备粪菌液组(GNS)和液氮冷冻粪便24 h静置制备粪菌液于-80℃冷冻1周组(NFS),在37℃厌氧培养箱中平板培养48 h后,进行菌落计数。从FS、 FFS、FC和FFC 4组中根据菌落形态随机挑取87个单菌落纯化后进行16S rRNA基因全长测序。结果表明,静置和离心两种方法制备新鲜粪菌液时,粪菌活性存在显著差异,离心组显著低于静置组(P0.05)。但冷冻粪便使用静置和离心两种方法制备的菌悬液,其粪菌活性无显著差异(P0.05)。无论是静置还是离心方法制备粪菌液,新鲜和冷冻两种不同处理方式下的粪菌活性均无显著差异(P0.05),且对活菌的组成也无显著影响。使用静置法制备粪菌液时,FS、NS、GNS和NFS组间粪菌活性无显著差异(P0.05)。综上表明,静置方法制备粪菌液时,超低温冷冻保存对粪菌活性及其活菌组成均无显著影响,这为大样本、长距离猪粪菌移植技术的应用提供了重要试验参考。     

胚胎分割技术在肉牛繁育中的研究与应用

本试验采用弗莱维赫肉牛和日本和牛作为供体,本地黄牛为受体,进行同期发情和超数排卵,共得到可用胚胎234枚,分为4个处理:新鲜全胚113枚、新鲜双半胚55枚、冷冻全胚56枚和冷冻双半胚10枚,进行移植。结果表明,新鲜双半胚的妊娠率为65.45%,略高于新鲜全胚移植的妊娠率(63.72%),差异不显著(P＞0.05)。冷冻双半胚产犊率为20.00%,低于冷冻全胚移植的妊娠率(39.29%),差异不显著(P＞0.05),而冷冻组的妊娠率均显著低于新鲜组(P＜0.05)。新鲜双半胚的产犊率为95.56%,双犊率为35.55%,犊牛存活率为72.09%。新鲜全胚组的产犊率为63.16%,显著低于新鲜双半胚组(P＜0.05),但犊牛存活率却显著高于新鲜半胚组(90.00%和72.09%)(P＜0.05)。此外,全胚与双半胚移植后产生的犊牛初生重之间并无显著差异(P＞0.05)。     

冷冻温度对鹿细管精液降温速率和精子复苏率的影响

试验旨在探讨冷冻温度对鹿细管精液降温速率和精子复苏率的影响.采用3×6试验设计,分为6组,每组同时冷冻3只鹿精液;利用简易冷冻装置,通过调节液氮面与冷冻面之间距离的方法控制精液冷冻温度,测定不同冷冻温度对精液降温速率和精子复苏率变化.结果显示,A组降温速率为57.6℃/min,显著高于其他各组(P<0.05);C组液氮...     

不同浓度防冻剂和投液氮温度对牛体外受精胚胎冷冻效果的影响

比较了3种不同浓度的甘油（1.4,1.0,0.7mol/L）和投液氮温度（-25℃、-30℃和-35℃）对牛体外受精胚胎冷冻效果的影响。结果发现,最终投液氮温度为-25℃时,胚胎冻后存活率以1.4mol/L甘油组为最高,同1.0mol/L甘油组相比,差异显著（78.5%vs 64.5%,P〈0.05）;与0.7mol/L甘油组相比,差异极显著（78.5%vs53.5%,P〈0.01）。以1.0mol/L的甘油冷冻,-30℃投液氮的效果优于-25℃的,它们之间冻后胚胎的孵化率差异显著（77.1%vs 64.5%,P〈0.05）。用0.7mol/L甘油冷冻,投液氮温度以-30℃的为最好,冻后胚胎的孵化率（73.3%）极显著（P〈0.01）高于-25℃的（53.5%）。用1.4mol/L甘油冷冻,以-25℃投液氮为最好,冻后胚胎的孵化率（78.5%）显著（P〈0.05）高于-35℃的（65.7%）。结果表明,不同的甘油浓度和投液氮温度对牛体外受精胚胎的冷冻效果有显著的影响。     

2种稀释液对公猪精液冷冻保存效果的影响

试验为探究2种不同冷冻稀释液对公猪精液稀释冷冻效果的影响。试验采用手握法采集同一头公猪精液,将采集的精液分为2组,进行液氮熏蒸制作细管冻精,分别使用Ⅰ号冷冻稀释液和Ⅱ号冷冻稀释液对猪精液进行冷冻保存,24 h后检测2种冷冻稀释液细管冻精的活力。结果显示,Ⅰ号冷冻稀释液冷冻解冻后的精子活力显著高于Ⅱ号冷冻稀释液(P0.05),同一种稀释液距液氮面5 cm进行熏蒸冷冻的效果较距液氮面4 cm冷冻效果好,但差异不显著(P0.05)。研究表明,利用Ⅰ号冷冻稀释液在距液氮面5 cm处进行液氮熏蒸冷冻可获得较好的公猪冷冻精液。     

白藜芦醇对山羊冷冻精子质膜、DNA完整性和温度耐受性的影响

试验旨在研究白藜芦醇对山羊冷冻精子质膜、DNA完整性和温度耐受性的影响。采用假阴道法采集8只云上黑山羊精液,用含不同浓度(0、0.1、1、10和20μmol//L)白藜芦醇的Optidyl稀释液稀释后进行细管分装,对照组不添加白藜芦醇。在5℃平衡4 h后,将细管于液氮蒸气中预冻10 min,最后在液氮中保存30 d。37℃水浴解冻后,采用低渗耐受性试验检测质膜完整性和温度耐受性,精子染色质扩散法检测DNA碎片率等指标。结果显示,10μmol/L白藜芦醇冷冻组精子弯尾率显著高于其他各处理组(P0.05),而其他各冷冻组之间无显著性差异(P0.05);10μmol/L白藜芦醇冷冻组精子DNA碎片率极显著高于鲜精组(P0.01),极显著低于未添加白藜芦醇冷冻组(P0.01)。温度耐受性试验结果表明,不同浓度白藜芦醇冷冻组精子37℃水浴1 h后的精子弯尾率以10μmol/L冷冻组最高,与其他各冷冻组间差异极显著(P0.01);精子弯尾率随着孵育时间的延长而呈逐步下降的趋势,当孵育4 h时,10μmol/L白藜芦醇冷冻组精子弯尾率与对照组无显著差异(P0.05)。透射电镜结果表明,10μmol/L白藜芦醇组精子质膜完整率显著高于不添加白藜芦醇对照组(P0.05)。上述结果表明,在冷冻稀释液中添加白藜芦醇可显著改善山羊冻精质膜状态、DNA完整率和温度耐受性,其最佳作用浓度为10μmol/L,但白藜芦醇是否能改善山羊冻精的人工授精效果还有待进一步研究。     

几种冷冻条件对牛体外受精卵发育率的影响

试验比较了乙二醇 (EG)、丙二醇 (PG)、二甲基亚砜 (DMSO)、甘油 (G)和不同的投液氮温度 (- 33℃或 - 4 0℃ )对牛体外受精卵冷冻后发育率的影响。结果 :投液氮温度无论是 - 33℃或 - 4 0℃ ,均以 1.5 mol/ L EG的冷冻效果为最好 ,与 1.5 mol/ L PG相比 ,受精卵的发育率差异显著 (39.7% vs19.2 % ;4 7.8% vs2 4 .7% ,P <0 .0 5 ) ;同 1.5mol/ L DMSO和 1.5 mol/ L G相比 ,受精卵的发育率差异极显著 (39.7% vs 16 .1% or 13.3% ;4 7.8% vs 19.2 % or17.3% ,P <0 .0 1)。 - 4 0℃投液氮 ,受精卵冷冻后的发育率略高于 - 33℃ ,但差异不显著 (P >0 .0 5 )。以 2 5 % EG 2 5 % PG作为细胞外玻璃化溶液对牛体外受精卵进行冷冻 ,冷冻后受精卵的发育率达 5 8.9% ,高于用 1.5 mol/ L EG冷冻在 - 4 0℃投液氮这一处理 (47.8% ) ,但无统计学上差异 (P >0 .0 5 )。然而 ,试验组冷冻后受精卵的发育率均极显著低于对照组 (80 .6 8% ,P <0 .0 1)。结果表明 ,投液氮温度以 - 4 0℃为较好 ,防冻剂以 EG的冷冻效果为最佳。玻璃化冷冻法完全可以应用于冷冻牛体外受精卵     

小型猪微粒植皮的研究

本实验利用琥珀酸脱氢酶法定量研究了液氮冷冻贮存法对15头小型猪皮肤活力的影响,并从临床和组织学的角度比较了自体微粒皮(自体组)、自体微粒皮—新鲜同种异体皮(新鲜组)和自体微粒皮—冷冻同种异体皮(液氮组)三种植皮方法的效果。 皮肤在液氮中贮存5天后活力为新鲜皮肤的82.46％(P<0.05);贮存180天后活力为新鲜皮肤的44.7％,与贮存21天后的活力(52.03％)无显著差异(P>0.05)。自体组、新鲜组和液氮组创口愈合时间分别为31.08±2.72、37±11.5和25.12±5.66天,与对照组(52±7.02天)差异均极显著(P<0.01);液氮组与自体组差异显著(P<0.05),与新鲜组比较差异极显著(P<0.01);新鲜组与自体组无显著差异(P>0.05)。 液氮组异体皮的排斥反应较新鲜组出现晚且反应较轻;新鲜组血中淋巴细胞和嗜酸性白细胞的增加、组织中淋巴细胞的浸润与排斥反应相平行,液氮组淋巴细胞和嗜酸性白细胞的变化不明显。     

牛精液保存和质量评定

前言精液可以在-196℃的液氮中保存,解冻后仍具有较高的受精能力。尽管如此,冷冻—解冻后的精液中仍有不少精子死亡和失去活力。因此,为了获得较高的受精率,输精剂量一定要高于新鲜精液。卵黄或牛奶是牛冷冻精液稀释液的基本成分。试验发现与甘油类似的其他冷冻保护剂的     

钌红对玻璃化冷冻牛卵母细胞线粒体Ca2+的调控研究

玻璃化冷冻会严重损伤哺乳动物卵母细胞的线粒体功能,进而极大地限制了其解冻后的发育能力。为此,本试验设置3个钌红（RR）处理组,即牛卵母细胞用含0.5、1、2 μmol／L RR的玻璃化冷冻液进行冷冻,解冻后放入含0.5、1、2 μmol／L RR的体外成熟液中继续培养0.5 h,同时,新鲜卵母细胞一部分不进行冷冻,一部分用不含RR的冷冻液进行玻璃化冷冻,分别作为新鲜对照组和玻璃化冷冻对照组,然后共检测5组牛卵母细胞线粒体Ca²⁺水平、ATP含量及孤雌激活后胚胎的发育能力,进而研究RR对玻璃化冷冻牛卵母细胞线粒体Ca²⁺水平的调控作用。结果显示：①玻璃化冷冻显著提高了牛卵母细胞中线粒体Ca²⁺水平（P＜0.05）,而2 μmol／L RR处理组线粒体Ca²⁺水平显著低于冷冻对照组（P＜0.05）,但与新鲜组相比无显著差异（P＞0.05）;②玻璃化冷冻显著降低了牛卵母细胞中ATP含量（P＜0.05）,2 μmol／L RR处理组卵母细胞中ATP含量显著高于冷冻对照组及0.5、1 μmol/L RR处理组（P＜0.05）;③玻璃化冷冻对照组卵裂率、囊胚率显著低于新鲜对照组（P＜0.05）,1 μmol／L处理组卵裂率、囊胚率与新鲜对照组相比无显著差异（P＞0.05）。综上所述,RR处理能显著抑制解冻后牛卵母细胞线粒体Ca²⁺流入,保护线粒体功能,提高其发育能力。本试验结果为正向调控玻璃化冷冻卵母细胞线粒体Ca²⁺水平,进而提高其发育能力,促进玻璃化冷冻卵母细胞的广泛应用提供了参考依据。     

不同冷冻速率对鸡囊胚细胞冷冻效果的影响

为探究不同冷冻速率对鸡囊胚细胞冷冻效果的影响,使用胚胎冷冻仪分步冷冻,比较不同步骤中不同冷冻速率冷冻后,细胞二乙酸荧光素(FDA)染色活率(简称活率)和培养24 h后细胞贴壁率(简称贴壁率)。结果表明:第1步冷冻,-0.7℃/min组活率最高(0.846),但与-0.5℃和~1℃/min组差异不显著(P0.05)。-1℃/min组贴壁率最高(59.1%),且与各组间差异均极显著(P0.01)。第2步冷冻,投入液氮前不同温度,-75℃组活率最高(0.530),但与-35℃、-55℃组差异不显著(P0.05);-35℃组贴壁率最高(36.6%),且与各组间差异极显著(P0.01)。因此,鸡BCs使用胚胎冷冻仪进行分步冷冻,以-1℃/min的速率降温至-7℃保持10 min,继续以同样速率降温至-35℃投入液氮保存,解冻后不仅可以获得较好的活率,而且培养后可以获得较高的贴壁率。     

如何控制冷冻精液储存容器中液氮的污染

液氮是以空气为原料经液氮机制冷成液化空气 ,再经分离成液氮。液氮的温度为 - 196℃。当液氮与室温接触时 ,由于温差 ,液氮开始气化 ,因此液氮需保存在专用容器中。液氮是冷冻和保存精液的理想低温剂 ,国际上冷冻精液的制做和保存主要使用的是液氮。在液氮里并不是所有的细菌都已死亡 ,有些细菌在液氮中同样可以长期存活 ,甚至可以繁殖。检测表明 ,新鲜液氮中细菌数 18～ 2 4 0个 /ｍｌ,液氮罐存放的液氮里细菌数 110～ 90 0 0个 /ｍｌ,可见液氮罐中存放的液氮细菌数大大高于新鲜液氮。其污染源一方面来自空气 ,另一方面来自液氮罐 ,冻精站…     

液氮蒸汽熏蒸时间对犬精子冷冻效果的影响

本试验研究了0.5 m L细管冷冻保存犬精液过程中液氮熏蒸时间对精子冷冻效果的影响。试验分为5组,将精液细管置于液氮液面上方2 cm处,分别熏蒸0 min(直接投入液氮)、1 min、2 min、4 min、8 min。解冻后通过活率、活力、畸形率及顶体完整率对精子进行评估。结果:液氮蒸汽熏蒸0 min和1 min组精子活率和活力显著低于其它各组(P0.05)。与直接投入液氮相比,在液氮蒸汽中预冷冻超过2 min能够提高精子顶体完整率(P0.05)。本试验表明在使用0.5 m L细管冷冻犬精子时,液氮熏蒸时间在4~8 min较为适宜。     

不同粪菌悬液处理方式对猪粪菌移植过程中细菌活性及活菌组成的影响

旨在探究不同粪菌液处理方法对其菌群活性及存活菌群物种组成的影响,为猪粪菌移植（FMT）的优化应用提供参考。本研究共设置7个试验组制备粪菌液：静置制备新鲜粪菌液组（FS）、静置制备粪菌液于-80℃冷冻1周组（FFS）、离心制备新鲜粪菌液组（FC）、离心制备粪菌液于-80℃冷冻1周组（FFC）、液氮冷冻粪便24 h静置制备粪菌液组（NS）、甘油+液氮冷冻粪便24 h静置制备粪菌液组（GNS）和液氮冷冻粪便24 h静置制备粪菌液于-80℃冷冻1周组（NFS）,在37℃厌氧培养箱中平板培养48 h后,进行菌落计数。从FS、FFS、FC和FFC 4组中根据菌落形态随机挑取87个单菌落纯化后进行16S rRNA基因全长测序。结果表明,静置和离心两种方法制备新鲜粪菌液时,粪菌活性存在显著差异,离心组显著低于静置组（P<0.05）。但冷冻粪便使用静置和离心两种方法制备的菌悬液,其粪菌活性无显著差异（P>0.05）。无论是静置还是离心方法制备粪菌液,新鲜和冷冻两种不同处理方式下的粪菌活性均无显著差异（P>0.05）,且对活菌的组成也无显著影响。使用静置法制备粪菌液时,FS、NS、GNS和NFS组间粪菌活性无显著差异（P>0.05）。综上表明,静置方法制备粪菌液时,超低温冷冻保存对粪菌活性及其活菌组成均无显著影响,这为大样本、长距离猪粪菌移植技术的应用提供了重要试验参考。     

冷冻方式对新鲜桑椹营养活性成分和硬度的影响

比较了普通冷冻(-20℃)、快速冷冻(-80℃)、急速冷冻(液氮浸渍,-196℃)3种冷冻方式及冷冻前采用氯化钙溶液预处理对新鲜桑椹营养活性成分含量和硬度的影响程度,明确适合桑椹保鲜的冷冻方式。与普通冷冻方式相比,采用快速或急速冷冻方式能有效降低桑椹在解冻过程中的汁液流失率。经不同方式冷冻后桑椹在解冻过程中,含有的花青素、总酚和维生素C均会不同程度损失,其中花青素和维生素C的损失程度在不同冷冻方式处理组间差异不显著。采用5 g/L氯化钙溶液进行预处理能显著减少冷冻桑椹中原果胶的损失,并且快速冷冻或急速冷冻处理组桑椹中的可溶性果胶含量显著高于普通冷冻处理组的桑椹。经扫描电子显微镜观察,快速冷冻和急速冷冻处理组桑椹的组织细胞结构与新鲜桑椹相近,说明冷冻前采用氯化钙溶液预处理能在一定程度上维持桑椹细胞结构的稳定性。研究结果表明,与普通冷冻方式相比,采用快速冷冻和急速冷冻对维持桑椹的硬度与减少汁液流失具有一定作用;冷冻前采用氯化钙溶液预处理能显著降低桑椹中的原果胶损失。生产中对新鲜桑椹的贮藏,适宜采用氯化钙溶液预处理结合快速冷冻或急速冷冻的方式。     

不同冷冻方法对犬细管精液冷冻效果的影响

通过采集6头德国牧羊犬共计24份细管分装精液,分别采用液氮熏蒸法和程序冷冻法进行冷冻,检测解冻后精子的活力、动力学参数、顶体完整率和质膜完整率来比较不同冷冻方法的冷冻效果。结果显示:采用程序冷冻法冷冻后的精子活力(P0.01)、质膜完整率(P0.01)和顶体完整率(P0.05)极显著或显著高于液氮熏蒸法,程序冷冻法解冻后精子动力学参数(平均路径速率、直线速率和曲线速率)高于液氮熏蒸法。结果表明:程序冷冻法优于液氮熏蒸法的冷冻效果。     

饲粮中添加鸽肉对大鼠伤口愈合的影响

试验旨在研究鸽肉对创伤大鼠伤口愈合的影响。将建模成功的60只SD大鼠随机分成3个组,每组20只。对照组饲喂基础饲粮,试验A组饲喂基础饲粮+20%鸽肉,试验B组饲喂基础饲粮+30%鸽肉。试验期28 d。致伤后第3、7、14天,描绘伤口形状,计算创面的愈合率,同时取伤口附近皮肤标本,石蜡包埋处理切片,HE染色,进行组织病理学观察;第14天进行采血分离血清,测定胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)和血小板源生长因子(PDGF)的含量;记录大鼠伤口愈合天数。结果表明:与对照组相比,添加30%鸽肉组的大鼠在第7天、第14天的伤口愈合率明显高于对照组(P0.05),并且添加20%和30%鸽肉组的伤口愈合时间显著低于对照组(P0.05),添加20%和30%鸽肉第14天肉芽组织、血管增生明显,并且添加30%鸽肉组IGF-1R和PDGF含量显著高于对照组。综上所述,饲喂鸽肉有促进大鼠伤口愈合的效果。     

冷冻保存对猪耳成纤维细胞H19和IGF2R基因DNA甲基化和基因表达的影响

为探索冷冻保存对猪体细胞H19和IGF2R基因DNA甲基化的影响,本研究以梅山猪耳成纤维细胞为材料,采用亚硫酸氢盐测序和RT-PCR技术,检测了新鲜和冷冻保存细胞中H19和IGF2R基因的DNA甲基化状态和表达量,并对甲基化相关基因的表达水平进行分析。结果表明:冷冻组中H19基因DMR1和DMR3的甲基化率极显著高于新鲜组(P0.01),H19基因DMR2表现为去甲基化,极显著低于新鲜组中的甲基化率(P0.01),且该基因表达量极显著高于新鲜组(P0.01);冷冻组IGF2R基因DMR2表现为超甲基化,冷冻组极显著高于新鲜组中的甲基化率(P0.01),但IGF2R基因表达量无显著差异(P0.05);冷冻组中DNMT3A和DNMT1的基因表达量极显著高于新鲜组(P0.01),DNMT3B基因表达量则无显著差异(P0.05)。本实验条件下,冷冻保存影响了H19和IGF2R基因甲基化控制区的DNA甲基化状态,从而影响了该基因的表达水平。     

延边黄牛及其导入1/4利木赞血牛的比较研究（Ⅰ）——对增重效果和血液指标的研究

选择延边黄牛(公牛)、含有1/4利木赞血的延边黄牛(公牛)及其去势牛(公牛)各4头,分别设为对照组、试验1组和试验2组进行试验.经过160 d的育肥试验,试验1组、试验2组和对照组的日增重分别为1.10,1.03,0.91 kg,试验1组显著高于对照组(P＜0.05);饲料报酬分别为4.70,5.02和5.68,对照组显著高于试验1组(P＜0.05);体尺的测定结果表明,试验末期试验1组体长、体高、胸围、尻长明显高于试验2组(P＜0.05);胸深和腰角宽试验1组极显著高于试验2组(P＜0.01);试验l组的体高极显著高于对照组(P＜0.01);腰角宽和尻长试验1组显著高于对照组(P＜0.05).血液指标的测定结果表明:总胆固醇含量对照组最高,与试验1组相比差异显著(P＜0.05);GPT含量试验2组和对照组低于试验1组,且差异显著(P＜0.05);GOT含量试验1组和对照组高于试验2组,差异极显著(P＜0.01);其他各项指标组间差异不显著(P＞0.05),且均在正常范围之内.