鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系的研究——Ⅴ.有丝分裂原诱导的T调节细胞对EB病毒感染鼻咽癌病人和EB病毒血清学阳性者外周血单个核细胞的影响

本文探讨了鼻咽癌病人、IgA/VCA阳性和阴性健康成人外周血单个核细胞(PBMC)经PHA和ConA诱导后对EB病毒(EBV)感染自身PBMC早期变化的影响.结果显示:PHA诱导细胞对EBV感染自身PBMC后的EBV核抗原(EBNA)阳性细胞数和~3H-TdR掺入量均有抑制作用,但对Ig分泌多数有促进趋势,特别是     

EB病毒抗原诱导的T_8细胞在鼻咽癌病人及EB病毒血清学阳性者中的变化和作用

用EB病毒抗原从鼻咽癌病人、IgA/VCA阳性和阴性健康者的外周血单个核细胞体外诱导产生T_8细胞,并观察其对EB病毒活化自身B细胞的作用.结果显示,三组人的外周血单个核细胞经EB病毒抗原诱导     

鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系的研究——Ⅰ.从EB病毒与机体细胞免疫反应的关系探讨鼻咽癌病人及其患病风险者免疫学变化的几个问题

本文为对鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系研究的阶段性小结,主要观察分析了鼻咽癌病人、VCA/IgA阳性者与阴性者EB病毒引起的T调节细胞与B细胞的变化.(1)VCA/IgA阴性者、阳性者与NPC病人的EBV相关抗体(EA/IgA、VCA/IgA、VCA/IgG)的阳性率和GMT是由低至高的关系,T调节细胞的数量是:T_4自高向低、T_8自低向高呈交叉发展。(2)体外感染EBV的PBMC的变化。前期     

鼻咽癌病人的EB病毒特异性T细胞免疫反应变化

体外培养的已感染 ER 病毒的正常人和鼻咽癌患者的外周血淋巴细胞经再次用 EB 病毒剌激后,可出现 EB 病毒特异性 T 细胞的杀伤作用,表现为转化细胞团的退变。本文观察 VCA-IgA 阴性和阳性正常人各11例和20例,以及 VCA-IgA阳性鼻咽癌病人11例(分别称为阴性组、阳性组和 NPC 组)的 EB 病毒特异性 T 细胞免疫反应转化,所有受试标本都出现了淋巴细胞转化,出现的平均时间三组分别是5.91、8.10和4.73d,转化孔分别是90.74%、93.4%和97.17%;而出现大部分退变的例数分别为2/11、20/20和4/11,孔数分别为16/95(16.84%)、172/177(97.18%)和44/98(44.90%);出现退变的平均时间三组分别为18.25、18.30和26.67d,大部分退变出现的平均时间阳性组和 NPC 组分别为19.05和28.25d(阴性组2例,分别为25和30d)。NPC 组和各组的差别显著。结果表明鼻咽癌患者这种 EB 病毒特异性 T 细胞细胞免疫功能是下降的。     

猪γ干扰素的表达及抗病毒活性研究

利用RT-PCR技术从有丝分裂原刀豆素(ConA)诱导的长白猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出猪γ干扰素的成熟肽基因(mPolFN-γ),并将其亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-mPoIFN-γ.经PCR、酶切及测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS-PAG...     

肝癌患者外周血HBV DNA 与T细胞亚群、NK细胞活性关系的研究

目的:探讨肝癌患者外周血中HBV DNA与T细胞亚群、NK细胞活性的关系.方法: 选择肝癌90例,应用PCR技术和流式细胞术分别检测外周血中HBV DNA和T细胞亚群、NK细胞活性.结果: 外周血HBV 5项标志物均阴性的30例肝癌患者中16例 HBV DNA 阳性,阳性率53%.肝癌患者与正常对照组比较,CD4、CD8和NK细胞活性显著降低,但HBV DNA 阳性者比阴性者降低更明显,两者差异有显著性(P＜0.05).结论:T细胞亚群及NK细胞活性影响HBV的致癌作用.     

流式细胞术检测海洛因成瘾者外周血T细胞亚群的变化

目的 :观察海洛因成瘾者外周血 T细胞亚群的变化。方法 :用流式细胞术检测 5 0例海洛因成瘾者 (成瘾者 )和 5 0例正常人(对照组 )外周血 T细胞亚群的数目。结果 :海洛因成瘾者外周血 CD3+、CD4+、CD8+细胞数明显低于正常人 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 ) ,CD 4+/CD8+比值显著低于正常人 ( P<0 .0 1 )。结论 :海洛因成瘾者机体细胞免疫功能处于抑制状态。     

体外诱导猪脾细胞产生白细胞介素2的初步研究

报导了用猪脾淋巴细胞制备白细胞介素2(interleukin 2,IL_2)的方法.用不同来源的植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)作为刺激剂,研究体外诱导猪脾细胞产生IL_2的最适条件.采用IL_2依赖T细胞株(FI_2)的增殖反应3H—TdR掺入法进行IL_2的活性测定.结果表明,诱导IL_2产生的最适条件是:脾细胞悬液浓度为5×10~6个细胞/ml,PHA(国产)的刺激浓度是350μg/ml,培养时间以48小时为宜,用相同剂量的PHA刺激猪脾细胞,Difco产的PHA—P诱导IL_2产生的效果优于国产PHA:在培养液中加入2—巯基乙醇(2—mercaptoethanol,2—ME)未见IL_2的活性增高.     

石鲽外周血细胞的培养及染色体制备条件的探讨

以石鲽(Kareius bicoloratus)为试验材料研究探讨其外周血细胞培养及染色体制备的条件方法。用RPMI1640全血培养基进行培养,从血液保存时间、刺激源PHA(植物血球凝集素)和ConA(刀豆蛋白A)等方面对外周血淋巴细胞的培养及其染色体制备条件进行探讨,建立较成熟的石鲽外周血淋巴细胞培养及染色体制备的方法。结果表明:血液于4℃保存3d后用全血培养基进行培养,细胞仍可正常生长;在16℃培养温度下,ConA和PHA两种刺激源均能促进石鲽外周血淋巴细胞的分裂增殖,培养时间以72h最好;从培养的血细胞形态和白细胞数目来看,以ConA为刺激源的作用效果好于以PHA为刺激源的作用效果;5ml培养基中加入0.2ml全血,16℃下用终浓度为0.1mg/ml的ConA为刺激源培养72h,在结束培养前4h加入终浓度0.6μg/ml秋水仙素,0.075mol/L的氯化钾低渗35min可获得较好的染色体分裂相。     

鼻咽癌病人及其患病风险者EB病毒与机体细胞免疫反应关系的研究——Ⅲ.鼻咽癌病人与不同IgA/VCA抗体滴度者外周血单个核细胞对EB病毒感染的早期免疫反应变化

为探讨鼻咽癌(NPC)病人与不同IgA/VCA抗体滴度者对EB病毒(EBV)的免疫反应功能变化关系,本文用EBV体外感染人外周血单个核细胞(PBMC)早期反应综合检测观察系统,测定了NPC病人,IgA/VCA高滴度者、低滴度者和阴性者的PBMC体外感染EBV时的早期反应变化.结果发现,NPC组的EBV核抗原     

低水平孕酮的早期先兆流产孕妇T细胞亚群的变化

目的通过检测早期先兆流产孕妇外周血孕酮、T细胞亚群及NK细胞的水平,探讨孕酮偏低的先兆流产患者机体的细胞免疫功能。方法采用免疫化学发光技术检测外周血孕酮的含量;同时采用流式细胞仪检测60例孕酮偏低的早期先兆流产患者(实验组)以及30例健康妊娠者(对照组)外周血T细胞亚群及NK细胞水平。结果实验组的孕酮含量比对照组有显著性降低(P<0.01);实验组与对照组比较CD3、CD8百分率和CD4/CD8比值没有明显改变,无统计学意义(P>0.05);实验组的CD4比对照组有所增高(P<0.05),而NK细胞百分率则明显降低,均具有统计学意义(P<0.05)。结论孕酮水平偏低的早期先兆流产患者中存在T细胞亚群分化失衡,机体免疫细胞的改变,可能导致免疫功能的紊乱,因此调节内分泌免疫系统对保胎具有一定的作用。     

胚胎造血干Sca-l+细胞向肝细胞分化的研究

目的 探讨胚胎造血干细胞抗原阳性(Sca-l ) 细胞亚群在合适的体外诱导体系下向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性.方法 免疫磁性分离法分离Sca-l 细胞,相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR法检测细胞白蛋白(ALB)、转甲状腺蛋白mRNA水平表达,免疫组织化学法检测AFP和CK8/18蛋白水平的表达,以及检测细胞糖原染色和尿素合成功能.结果 免疫磁性分离法分离Sca-l 细胞能达到(85.57±1.66)%的纯度(P<0.01),对分离前后细胞活力的影响小(P<0.05).随着诱导分化时间延长,细胞形态明显向肝细胞变化,AFP表达消失、CK8/18蛋白表达升高,ALB、转甲状腺蛋白mRNA表达升高,且细胞糖原染色和尿素合成功能增强,逐渐向成熟肝细胞转化.结论 免疫磁性分离法能够分离出较高纯度的胚胎造血干Sca-1 细胞,并能够向肝脏细胞分化.     

ConA与PHA在猪染色体制备中的比较

以13/17罗伯逊易位纯合子猪[2n=36,XY或XX,rob(13;17)]、杂合子猪[2n=37,XY或XX,rob(13;17)]、正常猪为实验材料,用刀豆素A(ConA)和植物血球凝集素(PHA)两种不同的刺激源刺激外周血淋巴细胞来制备染色体,并对两种刺激源的最佳使用浓度进行了研究:ConA的最佳浓度为:0.2 mg/ml,PHA的最佳浓度为:1 mg/ml,二者同样在最佳浓度时,ConA的制片效果显著优于PHA,t检验结果为:t0.05(18)=2.101＜t=2.135＜t0.01(18)=2.878.     

凤仙根尖细胞有丝分裂同步化诱导

为了简易快速地获得大量凤仙有丝分裂中期染色体,采用羟基脲和氟乐灵结合的双阻断法对凤仙根尖进行处理,诱导根尖细胞有丝分裂中期同步化.结果表明,以1.25 mmol/L羟基脲处理16 h,1 μmol/L氟乐灵处理4 h,细胞有丝分裂中期指数可达60%以上.有丝分裂正常,未见染色体畸变现象.     

乌苏里江唇（魚骨）(Hemibarbus labeo Pallas)的细胞遗传学分析

采用体内注射PHA和秋水仙素、肾细胞短期培养、常规空气干燥方法,制备乌苏里江唇(魚骨)的染色体。对其肾细胞染色体数目统计分析结果表明,乌苏里江唇(魚骨)的染色体数染色体组有50条染色体,8对中部着丝点染色体(m),8对亚中部着丝点染色体(sm),9对端部着丝点染色体和亚端部着丝点染色体(st,t),其染色体臂数(NF)...     

细胞色素P450酶系与苦皮藤素V对昆虫选择毒性的关系研究

研究了细胞色素 P4 5 0含量及 NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性与苦皮藤素 对粘虫(Mythimna separata)和小地老虎 (Agrotisypsilon)选择毒性的关系。结果表明 ,对照组小地老虎中肠细胞色素 P4 5 0含量及 NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性均显著高于粘虫。苦皮藤素 处理后 ,小地老虎和粘虫中肠细胞色素P4 5 0含量均显著高于对照 ,粘虫中毒抽搐期及失水期中肠细胞色素 P4 5 0含量分别比对照升高 1 .4 6和 2 .2 6倍 ,NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性分别比对照升高 1 .2 6和 2 .5 6倍 ;处理组小地老虎中肠细胞色素 P4 5 0含量比对照升高 0 .39倍 ,NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性略高于对照。由此认为 ,中肠细胞色素 P4 5 0含量及NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性与苦皮藤素 对粘虫和小地老虎产生选择毒杀活性有着重要的关系。并且苦皮藤素 对细胞色素 P4 5 0酶系具有一定的诱导作用 ,但对不同昆虫以及同一种昆虫中 P4 5 0酶系的不同组分诱导作用不同     

中药合剂对雏鸡免疫功能的影响

研究了中药合剂对雏鸡免疫功能及干扰素产生的影响。检测了试验组和对照组28,30,34,41,48,55日龄雏鸡血液T淋巴细胞对丝裂原ConA刺激的反应性;CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群及CD4+/CD8+T淋巴细胞比值;ND抗体效价及胸腺、脾脏和法氏囊指数。结果表明,34~41日龄时中药合剂组雏鸡血液T淋巴细胞对丝裂原ConA刺激的反应性明显高于对照组(P<0.05);CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群无明显变化,30~34日龄时能明显提高CD4+/CD8+淋巴细胞亚群比值(P<0.05);34~41日龄时试验组雏鸡HI抗体效价显著高于对照组(P<0.05);可使胸腺、脾脏和法氏囊指数增加,41日龄时法氏囊指数明显高于对照组(P<0.05);中药合剂对IFN具有明显的诱生作用(P<0.01),与NDV诱生组水平相当;同时可明显促进NDV对IFN的诱生(P<0.01)。结果显示中药合剂具有增强机体免疫功能及诱生IFN的能力,为该中药合剂抗NDV提供了理论依据。     

4种洗洁精对蚕豆根尖细胞的遗传损伤

采用蚕豆根尖细胞微核技术,研究4种洗洁精的细胞遗传学效应。结果表明,处理组细胞中出现了多种染色体异常。洗洁精均可诱导微核的产生,处理组微核率明显高于对照组,4种洗洁精毒性大小排列如下:LB>CH>QQ>DP。经不同含量洗洁精处理后微核率和有丝分裂指数与对照差异显著。在一定含量范围内,微核率随洗洁精含量的升高而提高,达到一定含量后,微核率反而有下降的趋势。低含量洗洁精可促进蚕豆根尖细胞有丝分裂,高含量洗洁精抑制有丝分裂。     

胚胎造血干Sca-1^＋细胞向肝细胞分化的研究

目的探讨胚胎造血干细胞抗原阳性(Sca-1~ )细胞亚群在合适的体外诱导体系下向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性。方法免疫磁性分离法分离Sca-1~ 细胞,相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR法检测细胞白蛋白(ALB)、转甲状腺蛋白mRNA水平表达,免疫组织化学法检测AFP和CK8/18蛋白水平的表达,以及检测细胞糖原染色和尿素合成功能。结果免疫磁性分离法分离Sca-1~ 细胞能达到(85.57±1.66)%的纯度(P<0.01),对分离前后细胞活力的影响小(P<0.05)。随着诱导分化时间延长,细胞形态明显向肝细胞变化,AFP表达消失、CK8/18蛋白表达升高,ALB、转甲状腺蛋白mRNA表达升高,且细胞糖原染色和尿素合成功能增强,逐渐向成熟肝细胞转化。结论免疫磁性分离法能够分离出较高纯度的胚胎造血干Sca-1~ 细胞,并能够向肝脏细胞分化。     

甲状腺功能正常的Graves眼病患者的外周T细胞亚群及甲状腺自身抗体的检测与分析

目的：观察甲状腺功能正常的Graves眼病(EGO)的发病机制及诊断指标。方法：Graves眼病组(GO组，n=44)、Graves眼病甲状腺功能正常组(EGO组．n=16)及正常人对照组(n=20)．均采用SAP法检测外周血T细胞总数(CD3)、辅助性T细胞(CD4)和抑制性T细胞(CD8)，采用荧光免疫分析法检测甲状腺微粒体抗体(TmAb)和甲状腺球蛋白抗体(TgAb)，采用酶联免疫法检测TSH受体抗体(TSAb)。比较三组外周血T细胞亚群及甲状腺自身抗体水平。结果：GO组和EGO组的CD3,CD4、CD4／CD8均升高．CD8均下降，TSAb、TgAb、TmAb阳性率也均升高，与对照比较差异有显著性，但GO组和EGO组差异无显著性。结论：T细胞亚群的比例失调．可能是甲功正常的Graves眼病的发病机制之一；甲状腺自身抗体的存在可能是甲功正常的Graves眼病关键的诊断指标之一。