土生空团菌(Cenococcum geophilum Fr.)的菌种鉴定及其遗传多样性的初步分析

 【目的】鉴定外生菌根真菌土生空团菌（Cenococcum geophilum Fr.（Cg））菌种，分析土生空团菌的遗传多样性，探讨影响土生空团菌遗传分化的因素。【方法】采用形态特征结合PCR方法，从分离自6种寄主植物的27个中国菌株和来自法国的5个Cg菌株中鉴定出20个Cg菌株。利用PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）和随机扩增片断多态性DNA（RAPD）两种分子标记方法对这20个Cg菌株进行遗传多样性分析。【结果】PCR-RFLP方法以通用引物ITS1和ITS4对20个Cg菌株的核糖体DNA转录间隔区（ITS）进行了PCR扩增，扩增产物用3种内切酶（EcoRⅠ、HinfⅠ和MboⅠ）酶切，酶切图谱显示菌株间有明显差异。RAPD方法用经过筛选的随机引物（5'-CGCACCGCAC-3'）对20个菌株的基因组DNA进行PCR扩增，扩增产物的片段大小在300～2 000 bp范围之间，共产生19个多态性位点。根据电泳图谱上DNA带的数目、位置及强度进行数值化，用聚类分析软件计算菌株间的遗传距离和遗传相似性，根据遗传距离构建20个菌株的系统聚类图。【结论】来源于不同寄主及地域的20株Cg有着较丰富的遗传多样性；地理环境和寄主对Cg遗传多样性的影响不大。     

土生空团菌(Cenococcum geophilumFr.)菌丝体纯培养条件的初步研究

土生空团菌(Cenococcum geophilum Fr.)是自然界最为常见的外生菌根真菌之一.通过对其菌丝体营养生理特性的研究,报道了不同培养基,碳、氮源和pH值对于土生空团菌菌丝体生长的影响.结果表明:(1)从供试的培养基来看,MRD为最适培养基;(2)该菌在供试的C源中以葡萄糖和蔗糖利用较好;(3)N源的利用以硝酸钾效果最佳,而且该菌种也能够利用有机态的氮(即蛋白胨);(4)土生空团菌菌丝体对pH值的适应范围较广.     

大青山油松人工林地根际土壤理化因子对土生空团菌分布的影响

[目的]为明确菌根与根际土壤环境的互作关系.[方法]以大青山油松人工林为研究对象,探讨大青山油松人工林地根际土壤理化因子对土生空团菌分布的影响.[结果]油松人工林地阴坡中部位根际土壤有机质、全氮、速效氮、速效磷、速效钾含量均高于阴坡下部、阴坡上部,而土生空团菌主要分布在油松人工林地阴坡中部样地.[结论]油松人工林地根际土壤理化因子对土生空团菌分布具有一定的影响.     

土生空团菌（Cenococcum geophilum Fr.）菌丝体纯培养条件的初步研究菌丝

土生空团菌(Cenococcum geophilum Fr.)是自然界最为常见的外生菌根真菌之一。通过对其菌丝体营养生理特性的研究，报道了不同培养基，碳、氮源和pH值对于土生空团菌菌丝体生长的影响。结果表明：(1)从供试的培养基来看，MRD为最适培养基；(2)该菌在供试的C源中以葡萄糖和蔗糖利用较好；(3)N源的利用以硝酸钾效果最佳，而且该菌种也能够利用有机态的氮(即蛋白胨)；（4)土生空团菌菌丝体对pH值的适应范围较广。     

耐乙草胺促生菌筛选及其对玉米幼苗的促生效应

分离筛选具有耐乙草胺特性的促生菌株,并对其进行菌种鉴定,可为推进多功能微生物菌剂的研发提供可行性方案和理论依据。本研究利用不同浓度乙草胺的改良培养基筛选出具有高耐乙草胺能力的菌株,测试其在不同培养基条件下的促生作用,并通过促发芽试验和盆栽试验验证可行性。结果表明：菌株JL7与JL16为高耐乙草胺且具有较强促生能力的根际促生菌,两株菌对乙草胺的最大抗性浓度达700 mg·L-1。JL7的溶磷能力高达223.21 mg·L-1,产IAA（吲哚乙酸）量达82.40 mg·L-1。经鉴定JL7菌株为肠杆菌属（Enterbacter sp.）,JL16菌株为醋菌属（Acetobacter sp.）。促发芽试验结果表明,施入JL7与JL16菌株72 h后发芽率分别较对照提高9.42、3.84个百分点,且JL16菌株对芽长与根长有显著的促生作用,较对照增加52.53%、23.22%。盆栽试验中,JL7与JL16的添加对株高、茎粗、根直径、根长等植株形态指标均表现为促进作用,并证实菌株JL7、JL16在土壤中仍对乙草胺具有耐受性。两种耐乙草胺菌株在促生方面具有显著效果,这为后期微生物改良土壤和开发新型...     

有机磷农药广谱降解菌A1A18菌株(Brevundimonas sp.)的筛选、鉴定与降解特性分析

从宁夏有机磷农药污染土壤中筛选对毒死蜱、氧化乐果和水胺硫磷等3种常用有机磷农药残留具有降解能力的菌株,确定其降解能力的代际稳定性及其对土壤中有机磷农药的降解特性。采用选择培养法和牛津杯法筛选目标菌株,依据细菌形态学特征、生理生化反应及分子测序结果进行分类鉴定,气相色谱法检测液体培养环境和土壤中有机磷农药的残留量。结果表明:分离、筛选获得1株有机磷农药广谱降解菌A1A18菌株,鉴定为短波单胞菌属(Brevundimonas sp.);在液体培养环境中,A1A18菌株对毒死蜱、氧化乐果和水胺硫磷3种有机磷农药的降解率分别为45.82%、9.52%和13.96%;经10代培养,确定该菌株对3种有机磷农药的降解能力具有很好的遗传稳定性。在有机磷原药质量分数为1.0 mg·kg~(-1)干土的土壤中施用A1A18菌株,降解菌初始数量密度为0.2×10~8 CFU·g~(-1)干土,施药后第21天,土壤中毒死蜱和水胺硫磷的降解率分别达到88.81%和87.75%,较对照提高16.24%和24.62%;施药后第7天,土壤中氧化乐果降解率达86.19%,较对照提高12.69%。短波单胞菌A1A18菌株能促进土壤中毒死蜱、氧化乐果和水胺硫磷的降解,具有较好的田间应用潜力。     

纤维素分解菌群的分离和筛选

滤纸平板法结合摇床接着筛选到２个纤维分解能力较强的混合菌Ｍ１和Ｍ２。在以纤维素为碳源的培养液中２８℃振荡培养４ｄ，滤纸纤维素失重率分别达５７．５３％和５４．９２％，未经处理的稻草秆纤维素失重率为３８．８２％和３６．２１％，膨化稻草比稻草秆易分解，纤维素降解率可达６８．８３％和６０．０２％，经初步鉴定，Ｍ１由木霉Ｆ１和芽胞杆菌Ｂａ组成，Ｍ２由木霉Ｆ２和芽孢杆菌Ｂａ组成，实验结果表明，由真菌，细菌组成     

胡萝卜田高效低毒低残留除草剂的筛选

在内蒙古察右中旗进行了两年胡萝卜田除草剂筛选试验,结果表明,供试几种苗前土壤处理除草剂中,田普在用水量900.00 l/hm2时比用水量600.00 l/hm2时的除草效果好,株防效和鲜重防效高达90.79%和93.66%,且具有增产作用;田普的防效好于氟乐灵防效;金超尔和农得锄的防效较差;滨农99对胡萝卜有药害。几种用于苗期喷雾防除禾本科杂草的药剂中收乐通和精禾草克对禾本科杂草的防效最高;其次是精稳杀得;威霸株防效较差。     

醋菌纤维素高产菌株筛选和菌物鉴定

从150份自然材料中分离得到26个产纤维素菌株.其中,Ax-1、Ac- Ⅱ两高产菌株初步鉴定为巴氏醋杆菌木醋亚种(Acetobacter pasteutinus Subsp. Xylinum)和汉森醋杆菌(A. Hansenii).该二菌株在28℃ 4～5d静态培养中,从50g/L蔗糖(或葡萄糖)培养液中产出14g/L或16g/L纤维素,并初步测试了该纤维素的基本特性.     

优质棉品系的筛选及其配套技术的研究

在把通用旋转组合设计引用到品系或品种的筛选、评比方面作了一次尝试。建立了以皮棉产量、早熟性和净产值为目标的多元回归方程。通过电子计算机的模拟寻优,在欲选的四个优质棉品系中以6088的综合农艺性状为最好,并相应确定了为达到上述综合目标应采取的配套农艺措施。     

导入外源DNA的大豆根瘤菌22—10基因工程菌株的构建与分析

通过三亲本杂交,分别将紫云英根瘤菌7635R的基因文库和慢生型大豆根瘤菌22-10的基因文库引入到慢生型大豆根瘤菌22-10中,获得了大量的含有外源DNA片段的转移接合子。以结瘤试验作选择标准,从中筛选到3株具有较高固氮效率的基因工程菌株HN5-1、HN5-2和HN22-2。采用反向杂交,将接合子HN5-2中的外源重组质粒转回到大肠杆菌中,提取质粒作EcoRI酶切。表明pLAFR1质粒载体上携带有大约20 kb大小的DNA片段。实验还证明,在含有从根瘤菌转移而来的pLAFR1质粒的大肠杆菌细胞中,常伴随有辅助性质粒pRK2013的存在,用四环素和卡那霉素两种选择性抗性可淘汰其中的pRK2013质粒而仅保留有来自根瘤菌的pLAFR1重组质粒。     

冀育蛋鸡优秀配套组合的筛选

对国内育成的几个主要轻型蛋鸡纯系组配的19个二系及三系杂交组合试验结果,用方差分析和裂区资料方差分析(2×3×3)结果表明,三系组合具有更大的开发潜力。其中冀K系作第一父系的自别型组合与非自别型(全快羽系)组合间生产性能无显著差异(P>0.05),值得重点推广应用。     

导入外源DNA片段的花生根瘤菌高效基因工程菌株的构建

以柯斯质粒ｐＬＡＦＲ１为载体先构建快生型花生根瘤菌８５－７菌株总ＤＮＡ的基因文库。在协助质粒ｐＲＫ２０１３帮助下用此基因文库分别同菌株８５－７和另一株慢生型花生根瘤菌菌株Ｃ０２－５作三亲本杂交。转移接合子接种沙培条件下生长的花生，通过结瘤试验初筛选和复筛选，共筛选出３株工程菌ＨＮ１１，ＨＮ１２（以８５－７为受体）和ＨＮ１３（以Ｃ０２－５为受体）。其每植株根瘤的固氮酶活分别比出发菌株的提高３０２％（     

适于半干旱草场飞施NPZn复(混)配粒肥筛选及其增产效果的研究

连续三年在吉林省白城地区前郭、大安两县草场上,通过NPZn三因素五水平最优回归设计试验,筛选出羊草高产、经济效益显著的NPZn合理用量及比例,然后在长山化肥厂加工成复合粒肥,用于大面积草场飞施作业。结果表明,以尿素、重过磷酸钙.硫酸锌单质混配的粉肥人工施入.适宜的养分用量N为6～8kg/亩,P_2O_5 6～9kg/亩,Zn 0.4kg/亩。其比例为1:1:0.06,可得干草223～295 kg/亩,每公斤粉配肥可增干草 8～13kg.用单质肥料加工造粒的NPZn三元复合肥.飞机作业,每亩施入20～25kg,每公斤复合粒肥增干草10.4kg以上。纯收益5～5.57元,大大提高了工效,是草原现代化施肥的可行措施.