人参悬浮细胞低温保存的研究

在人参悬浮细胞培养物的低温保存中,逐级冷冻比直接冷冻的细胞存活率高。使用混合保护剂比单独使用保护剂的效果更佳。低温保存的时间影响细胞存活率,但随时间的延长而趋于稳定。经低温保存的人参悬浮细胞,快速解冻比室温解冻的植板率高,混合冰冻保护剂处理比单一冰冻保护剂处理的植板率高。     

籼稻绿芽悬浮细胞原生质体再生成株

采用籼稻Hu-18绿芽为外植体,在N6附加2 mg/L 2,4-D的培养基上诱导愈伤组织。加20 d后转人AA 培养基进行悬浮培养。继代培养45 d左右形成了分裂旺盛的胚性细胞悬浮系。即从绿芽诱导至胚性细胞悬浮系的建立仅用了65 d左右。继代后前6 d,细胞干重几乎每2 d增加1倍,而培养液的渗透压及pH 值迅速下降。取继代后4 d的悬浮细胞游离原生质体,产率为8.74X10⁶/g鲜重。纯化后的原生质体在KPR培养基中进行琼脂糖包埋培养,原生质体植扳率为12.0％ 。将20 d后的小愈伤组织(0.1 mm)转入 N6附加0.5 mg/L 2,4- D、1 mg/ L BA、1 mg/L KT、0.3 mg/L ZT的培养基上增殖,待长成直径2～3 mm 左右时,用N₆附加1 mg/L BA,1 mg/L KT,0.3 mg/L ZT的培养基进行分化培养, 5 d后同时出现芽根生长,最终再生成绿色植株,绿苗分化率为3.5株/10000个原生质体。     

荔枝胚性悬浮培养物的建立,保持和优化原生质体分离的研究

将松散颗粒状的荔枝胚性愈伤组织转入液体培养基,２－３周后即可建立起优质的悬浮培养物,长时间悬浮培养后,荔权胚性悬浮培养物的生长势和分化能力下降,但液体培养基＋固体培养基交替培养可使其保持稳定良好的状态。材料来源,继代时间,酶液浓度,酶液渗透压和高渗预处理对胚性悬浮培养物的原生质体分离均有明显影响。     

龙眼胚性悬浮细胞原生质体培养及其体胚发生再生植株

以“红核子”、“东壁”、“十二月龙眼”等龙眼品种的胚性悬浮细胞为起始材料分离原生质体,采用液体浅层培养、包埋悬浮培养等方式,进行原生质体培养与植株再生研究。研究结果表明,海藻酸钙包埋悬浮振荡培养(50r/min)是龙眼悬浮细胞原生质体培养的适宜培养方式,在含有多种生长调节剂的改良MS培养基(MP6)上,再生小克隆的形成频率可高达5%;采用龙眼胚性愈伤组织体胚诱导、成熟和萌发的优化方案,原生质体再生小克隆分化子叶形胚状体的频率达100%,萌发植株的频率一般大于45%。      

橡胶树PR107原生质体的分离和培养研究

以橡胶树PR107花药愈伤组织建立的胚性悬浮细胞为材料,进行原生质体的酶解分离和培养研究。结果表明：在酶组合为纤维素酶1.5 %+果胶酶0.15 %+离析酶0.5 %的酶解处理下,继代培养第6天、直径小于0.5 mm悬浮细胞团获得最高产量的原生质体,达到2.2×107个/mL PCV;原生质体在看护培养基上培养1周后观察到细胞开始发生分裂,培养2周后细胞分裂形成含8-10个细胞的小细胞团。看护培养45 d后原生质体持续分裂并发育成肉眼可见的小愈伤组织。     

橡胶树原生质体培养研究进展

原生质体培养植株再生体系的建立,可为利用生物技术对橡胶树育种进行品种改良提供良好的受体系统.综述橡胶树原生质体培养的研究进展,并分析影响橡胶树原生质体再生的主要因素:(1)原生质体分离的起始材料;(2)原生质体的分离和纯化;(3)培养基成分;(4)培养方法;(5)品种基因型.     

苎麻组织培养和原生质体培养的研究

本文对苎麻组织培养进行了较为系统的研究,并在此基础上进行了原生质体培养。结果表明:在以苎麻品种浏阳大叶绿的子叶为材料,在含CPA1.0mg/l、KT0.5mg/l的MSB脱分化培养基培养和继代,可以得到高质量、高分化潜力的愈伤组织。悬浮培养可制得良好的悬浮系。其游离得到的原生质体,以海藻酸钠包埋漂浮方式培养在KM_8P培养基中得到愈伤组织。愈伤组织在BA2.0mg/l的MSB培养基上分化可再生完整植株。     

建立高质量马铃薯细胞悬浮培养物的研究

以马铃薯四倍体栽培品种甘农薯２号、布尔班克（Ｒｕｓｓｅｔ Ｂｕｒｂａｎｋ）的块茎和茎段两种外植体为材料,进行了愈伤组织诱导和继代培养、细胞悬浮培养物的建立及其继代培养的研究。结果表明：选取良好的愈伤组织经１～３次继代培养后进行细胞悬浮培养,培养物每５ｄ继代一次,继代时新旧培养基体积按３：１配置,能获得较高质量的培养物。在悬浮培养及继代培养过程中,用高浓度蔗糖溶液或蒸馏水调节该培养液的渗透压,以及采用与愈伤组织固体培养基成分相同的细胞悬浮培养基和悬浮继代培养基,可有效地控制悬浮细胞的质壁分离和破碎现象,有助于建立高质量的细胞悬浮培养物。     

枇杷细胞悬浮培养生产熊果酸的调控

以枇杷悬浮培养细胞的生长量及熊果酸（UA）的含量为考察指标,从蔗糖浓度、装液量、pH值、接种量、温度、光照强度、摇床转速、激素等开展培养参数的筛选。结果表明：接种量8 g/100 mL,pH6.0,蔗糖30 g/L,25 ℃,白炽灯400 lx,转速130 r/min,装液量130 mL/250 mL,MS+NAA 0.5 mg/L,15 d收获,细胞鲜重是起始的3.577倍,UA含量为34.993 mg/g DW,是自然界枇杷叶的约3.5倍。     

甘薯叶肉和细胞悬浮原生质体植株再生

甘薯叶肉和细胞悬浮原生质体植株再生ＴａｔｓｕｒｏＭｕｒａｔａ等通过原生质体融合而实现的甘薯体细胞杂交是克服各种杂交不亲合这些天然障碍的一个可行的方法。尽管以往做过许多工作，迄今仍未有从叶柄原生质体获得植株再生的令人信服并且可重复的证据。最近，有人报道...     

石牌广藿香的细胞悬浮培养

以石牌广藿香无菌苗幼嫩叶片为外植体,通过愈伤组织诱导和培养、筛选及细胞的液体培养,在含0.05 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L KT的MS液体培养基中获得了分散性良好的悬浮细胞,建立了广藿香细胞悬浮培养体系.研究培养基中植物生长调节剂、继代培养时间等因素对细胞生长、分化的影响.结果表明:0.05 mg/L2,4-D和0.5 mg/L KT能促进细胞的快速生长,而0.5～1.0 mg/L BA促进细胞的分化;以继代培养时间为15～18 d细胞进行接种,接种量8 g/100 mL时,悬浮细胞到达最大生长量,细胞鲜重最高达到511.2 g/L.     

茶悬浮培养细胞玻璃化超低温保存研究

为保存具有稳定代谢能力的优良茶细胞系,本文对茶叶悬浮培养细胞玻璃化法超低温保存进行了初步研究。结果表明:预培养以4d最佳,60%PVS2冰浴装载以20min最好,100%PVS2冰浴脱水处理60min最优,40℃复温解冻细胞存活率最高,采用这些参数进行完整试验的细胞存活率达到76%,初步建立了茶悬浮培养细胞玻璃化超低温保存的冷冻程序。     

大麦悬浮细胞抗酸铝特性的研究

以对酸铝敏感的大麦品种“早熟3号”的幼胚为外植体，建立胚性悬浮细胞系。比较了不同PH值和Al3＋浓度（0，10，30，50PPm）对细胞生长的影响，表明A13＋对细胞具有明显的毒害作用，浓度越高，毒性越大。50PPmA13＋也许是大麦悬浮细胞系的致死浓度．另一方面，细胞具有自我调节和改变培养液微环境PH值的能力，以缓解A13＋的毒害。     

花生叶片原生质体游离和培养因子的研究

花生叶片酶解分离原生质体试验表明,植株的苗龄和叶龄对原生质体产量有很大的影响,苗龄１５～２０ｄ的顶部刚平展幼叶是获得高产原生质体的最佳材料。酶浓度和酶解时间是影响原生质体游离和培养的重要因素。通过相关和回归分析,选择较低的酶浓度,较短的酶解时间,并对原生质体产量影响不大的酶处理方法,是原生质体培养成功的关键因子之一。     

苎麻不同来源原生质体的分离和培养的比较研究

比较了苎麻子叶与子叶悬浮细胞两种材料的原生质体在分离和培养时的差异。取真叶初露期的绿色子叶，用３％纤维素酶、０．５％离析酶的０．６Ｍ甘露醇混合溶液处理５小时，原生质体产量可达５×１０￣６个／ｇｆｒ·ｗｔ，但其原生质体以海藻酸钠包埋方式培养在附加２，４—Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ、ＫＴ０．５ｍｇ／ＬＫＭ＿８Ｐ培养基上，原生质体仅发生二次分裂；子叶悬浮细胞只有在纤维素酶４．５％，离析酶０．８％、半纤维素酶０．８％的０．５５Ｍ甘露醇混合液中处理１１小理，原生质体才达最大程度释放，每克悬浮细胞可得原生质体２×１０￣６个，但其原生质体易于诱导分裂，在与前者相同的培养条件下，５０天左右可形成肉眼可见的小愈伤组织，该愈伤组织经过扩增，在不同的培养基上可诱导芽、根的分化，从而形成完整植株。     

甘蓝型油菜原生质体培养及植株再生的研究

从5个不同甘蓝型油菜品种（系）的下胚轴分离得到游离原生质体，以改良KM8p原生质体培养基作液体浅层暗培养。结果表明，低温（15℃）暗处理培养无菌苗的下胚轴原生质体活力达92．1％，培养7d后的细菌分裂频率达26．2％。分化培养基附加5mg/L 6-BA，再生频率可达17．6％。利用这一培养体系，5个油菜品种均获得再生植株。     

显齿蛇葡萄细胞悬浮培养研究

研究了显齿蛇葡萄细胞悬浮培养的基本条件,同时测定了悬浮液中二氢杨梅素的含量。确定了细胞悬浮培养的基本条件是:取继代培养4代之后的愈伤组织接种,以12.5 g/L的接种量接种在附加6-BA(2.0 m g/L),2,4-D(1.0 m g/L),NAA(0.5 m g/L)的M S培养基上,添加100 m l/L的椰子汁,起始pH 5.8,110 r/m in,光照强度为250~350 Lx,光照培养12h/d,25±1℃下培养6 d。经过优化培养之后的悬浮液中二氢杨梅素含量为0.829 g/mL。