西洋参的胚状体发生与植株再生

用通过低温阶段的西洋参(panaxquinquefolium L.)种胚,先在MS+24—D(0.5—2.0mg/l)+CA(500—2000mg/l)的培养基上诱导出愈伤组织,继代培养2代,在胚性愈伤组织上发生胚状体,然后接在y2MS+6—BA0.5mg/L培养基上成长为绿色小苗,经过壮苗培养6个月,主根直径0.4厘米,盆栽成活。     

橡胶树PR107原生质体的分离和培养研究

以橡胶树PR107花药愈伤组织建立的胚性悬浮细胞为材料,进行原生质体的酶解分离和培养研究。结果表明：在酶组合为纤维素酶1.5 %+果胶酶0.15 %+离析酶0.5 %的酶解处理下,继代培养第6天、直径小于0.5 mm悬浮细胞团获得最高产量的原生质体,达到2.2×107个/mL PCV;原生质体在看护培养基上培养1周后观察到细胞开始发生分裂,培养2周后细胞分裂形成含8-10个细胞的小细胞团。看护培养45 d后原生质体持续分裂并发育成肉眼可见的小愈伤组织。     

大豆花粉离体培养获得愈伤组织

大豆花穗置低温(7°—8℃)冷处理5、8、10、12天,取花药置培养皿中,用盖玻片压出花粉粒,去掉残渣,加入液体培养基。基本培养基是改良的B_5,参照高国楠原生质体培养基附加糖、椰乳、水解酪蛋白等有机物,0.05—0.2mg/l 2.4—D,0 1～0.5mg/l Zeatin,0.5—1mg/l NAA。20天后见花粉分裂,30天见细胞团,40—50天形成肉眼可见的愈伤组织。分裂的花粉最后达接种时培养皿中花粉的60—70％以上。活体观察花粉分裂大致有多细胞型和游离核型。将直径2mm大小的愈伤组织转至固体培养基继代增殖而获得大量愈伤组织。分化培养获得根,未见芽的分化。     

2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生

进行了无核白、红地球2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究。通过葡萄品系无核白、红地球叶片和叶柄外植体的愈伤组织的诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生。结果表明:(1)愈伤组织诱导以MS+BA5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L培养基最佳,诱导率为35%;同一葡萄品种的叶片与叶柄诱导愈伤组织的频率基本相同,而红地球外植体诱导愈伤组织的频率高于无核白;(2)不定芽的诱导再生以1/2MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+CH500mg/L+蔗糖30g/L培养基最佳,平均诱导率达35.4%;叶柄来源的愈伤组织诱导不定芽的频率高于叶片愈伤组织;(3)根系的诱导以1/2MS+KT0.5mg/L+IBA1.0mg/L+AC2g/L+蔗糖15g/L培养基最佳,无核白和红地球来源的不定芽诱导生根频率基本相同,都在80%以上。     

组织与细胞培养在麦类作物抗病育种中的应用

为了尽快获得有价值的抗病材料,近年来日益广泛地采用植物细胞选择的方法.这是一种用细胞和原生质体大量再生植株的最有效的培养技术.其育种的作用原理是通过胚和愈伤组织的培养导致嵌合植株的再生.为缩小愈伤组织用量,有时将其安排在选择性的原生质体培养基上.将原生质体放在含有细菌Pseudomonas syringae和真菌Alternaria alternata滤液的选择性培养基上,终于研制出了烟草品种CaMcyH的愈伤组织.用这种选择到的愈伤组织曾获得了抗某些病原体的嵌合植株,经研究,证实其确系愈伤组织的后代.     

海马齿再生体系的优化及GUS基因的转化

以海马齿无菌实生小苗的叶片为外植体,对不同激素浓度和组合以及不同pH值等培养条件进行实验比较.结果表明:适于愈伤组织诱导的培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖3%,诱导率达100%;适于芽分化的培养基为MS+NAA 3.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,分化率达到77.4%;诱导愈伤组织形成培养基的最适pH值为4.5,而诱导愈伤组织分化培养基的最适pH值为5.0.以小苗叶片为外植体材料和农杆菌介导的方法进行GUS基因的转化,组织化学染色检测发现共培养2 d后的外植体中有蓝色斑点产生,在转化2个月后的外植体上形成的愈伤组织也存在点状的蓝色斑点.说明GUS基因已转入海马齿外植体中.     

甜菜组织培养与植株再生体系的建立

本研究以甜菜品种"甘糖7号"叶柄为外植体,通过诱导愈伤组织、愈伤组织分化不定芽、芽生根和移栽等步骤建立一套甜菜组织培养与植株再生体系。结果表明,诱导甜菜叶柄愈伤组织的最佳培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率达88.2%;诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,分化率仅为9.4%;生根培养基为MS+0.1 mg/L NAA,生根率达33.3%。甜菜再生苗移栽至蛭石中,保温保湿7~10 d后,成活率可达90%以上。本研究结果将对糖料作物甜菜抗逆遗传改良及其基因工程育种具有推动作用。     

亚麻花药培养高频率的植株再生

本文主要研究亚麻花药培养的诱导培养基组成成份的效果,目的是提高愈伤组织的诱导和植株再生的效率.花药接种于改良的MS培养基上(培养基添加了五种不同配比的植物激素).培养基中含有2mg/L2.4-D和1mg/LBAP比相同成分培养基中含有1mg/LNAA和2mg/L6-BA(CK),愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率有显著提高.在五个处理的盐酸硫胺素的实验中,改良的MS培养基含有10mg/L盐酸硫胺素比含有2.4mg/L盐酸硫胺素愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率显著提高.在麦芽糖的五个处理中以培养基中含有6%或9%的麦芽糖,总的植株再生频率最高.蔗糖的浓度主要影响愈伤组织再生苗的百分率,总的植株再生效率、花粉植株的频率以及花粉植株染色体自然加倍的频率.本研究获得的单倍体品系已被应用于育种程序中.     

橡胶树组织养

用Nitsch及Nitsch培养基添加吲哚乙酸,细胞激动素和1p.p.m2.4—D,在pH5.~5条件下培养GT_1无性系实生苗茎切片,所获愈伤组织生长良好。从新的绿色愈伤组织切片看出:橡胶状粒子已经形成。应用分化愈伤组织的同一培养基也形成了根。     

硼对大豆愈伤组织的细胞结构及形态的影响

硼是植物生长发育必需的微量元素之一,对维持植物细胞壁与细胞膜的结构和功能发挥起着重要的作用.在对大豆愈伤组织诱导培养技术成熟的基础上,研究高浓度的硼对大豆愈伤组织的细胞结构和细胞形态的影响,探讨组织培养中硼对愈伤组织诱导与再生的调节作用采用植物组织培养的方法,在硼酸含馈不同的培养基上诱导大豆下胚轴产生愈伤组织,并进行继代培养试验结果表明:下胚轴在硼酸浓度大于70 mg·L-1的培养基上诱导20 d后.一些新生的愈伤组织结构疏松,细胞分散,细胞间的正常连接无法形成.把这些结构疏松的愈伤组织在正常的培养基MS+2,4-D0.4 mg·I-1上进行继代试验,发现细胞仍具有分裂能力,新生的愈伤组织细胞结构更加松散,单细胞的数日增多,并凡细胞的形态也符异.     

大豆（Glycinemax）原生质体培养与分化

试验56份大豆栽培品种。采用幼荚子叶、无菌苗下胚轴和子叶、幼胚悬浮培养细胞作原生质体游离材料。苗期子叶和下胚轴用酶液:1％Hemicellulase HP150,0.4％Cellulase R—10,0.1％Pectolyase Y—23;幼荚子叶用1％Cellulasc R—10,1％Hemicellulase HP150,0.5％Pectinase;悬浮培养细胞用1％Cellulase R—10,0.2％Pectolyase Y—23,2％Driselase游离,4种材料均获得大量原生质体。原生质体培养基均为K8P,分化培养基为MS、B5,培养基中的激素试用了2.4—D,2.4.5—T,NAAIAA、ZT、KT、BA、zip和毒莠定等不同配合和浓度。结果有12份品种的幼荚子叶。下胚轴和苗期子叶的原生质体形成愈伤组织、有不同类型的根分化和绿点出现,分化培养基B5+0.1-0.2mg/l 2.4.5-T+1-1.5mg/l·BA较好。     

荔枝"妃子笑"品种花药培养及其体胚发生

以荔枝(LitchichinesisSonn.)品种“妃子笑”为试材,研究其花药离体培养及植株再生的影响因素。结果表明,荔枝花药在MS 2,4-D2mg/L NAA0.2mg/L以及含50g/L蔗糖的培养基上诱导胚性愈伤组织效果较好,把胚性愈伤组织转移到MS BA1mg/L NAA0.5mg/L,谷氨酰胺500mg/L,蔗糖50g/L分化培养基上培养1个月后,体胚大量萌发,再将成熟体胚转移到附加500mg/L谷氨酰胺的MS无激素培养基上,培养1￣2个月后,能再生成完整植株。     

桂竹香花器离体培养的研究

以桂竹香花柄，花瓣，花丝为外植体，研究不同激素对诱导愈伤组织和不定芽的影响，研究结果表明，4种外植体均能形成愈伤组织，但愈伤组织的发生率，发生部位及形态等表现差异，花柄愈伤组织继代MS＋2，4－D＋BA培养基，可分化产生不定芽，出芽率78％－82％，再生小苗在1／2MS＋NAA 0．5mg/L培养基中生根形成再生植株。     

甘蔗（甘蔗属热带种）叶鞘离体培养中的愈伤组织诱导和绿苗分化

甘蔗叶鞘外植体在外加不同生长调节剂(IAA、NAA和2，4—D)，加或不加椰乳的改良MS培养基上培养诱导愈伤组织。结果表明，本研究添加伪不同生长素中，只有NAA和2，4—D能诱导出愈伤组织，其中，各种供试浓度2，4—D诱导愈伤组织助效果都比相应浓度NAA的诱导效果好。经过10天的培养，在不同供试浓度中，3mg／L2，4—D诱导甘蔗品种Isd16和无性系1327—86分别形成具有再生能力的乳白色愈伤组织和谈绿色愈伤组织最多。Img/LBA 0.1mg/LIBA和1mg/LBA 0.5mg/L NAA从这两组生长调节剂使愈伤组织分化绿苗的效果最好。甘蔗无性系1327-86比品种Isd16分化出比较浓密但个体小的绿苗。     

马铃薯极早熟品种东农303再生系统的筛选

以马铃薯品种东农 30 3的脱毒试管苗为供试材料 ,进行了 5种培养基对试管苗茎段愈伤组织诱导和植株再生影响的试验。结果表明 :不同的培养基表现出不同的诱导效果 ,愈伤组织诱导的最佳培养基是 2号培养基 (MS + 0 0 1mg/LNAA + 3mg/LBA) ,愈伤率是 90 4 %。植株再生的最佳培养基是 5号培养基 (MS + 2 2 5mg/LBA + 5 0mg/LGA3) ,再生率是 98 3%。     

用未成熟胚离体培养法获得四倍体大燕麦与六倍体裸燕麦杂种植株的研究初报

用 1/ 2 MS培养基和 1/ 2 MS培养基 +2 mg/ L 2 ,4 _ D两种培养基 ,对 12～ 15d的四倍体大燕麦×六倍体裸燕麦的杂种幼胚进行离体培养。结果在 1/ 2 MS培养基上培养的 14个幼胚获得 8棵植株 ,植株产生率 57.1% ;在 1/ 2 MS+2 mg/ L 2 ,4 _ D培养基上培养的 14个幼胚获得 3棵幼苗和 9块愈伤组织 ,植株产生率 2 1.4 % ,出愈率 6 4 .3% ,愈伤块经一次继代培养后 ,转移于不加任何激素的幼苗分化培养基上 ,分化出 31棵植株。     

玉米幼胚培养及植株再生的研究

以不同玉米自交系幼胚为外植体,研究不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导、6-BA浓度对愈伤组织分化和6-BA与NAA配合使用对试管苗生根的影响。结果表明:不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导率影响差异不明显,但对胚性率诱导有明显影响,其诱导最佳培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+脯氨酸500 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+谷氨酰胺200 mg/L+PP₃₃₃ 2 mg/L;试管苗生根的最佳培养基是1/2 MS+6-BA0.5 mg/L+NAA2.0 mg/L+PP₃₃₃ 2.0 mg/L+活性炭0.2%。     

Cu^2＋浓度对啤酒大麦幼胚组织培养与植株再生的影响

为了提高大麦幼胚胚性愈伤组织和植株再生频率,本试验以引进的4个啤酒大麦品种为材料,在诱导、分化与生根培养基上分别进行了不同浓度Cu2+处理.结果表明,MS诱导培养基中增加Cu2+浓度对啤酒大麦愈伤组织的诱导无明显影响,但对胚性愈伤组织的形成有明显的促进作用;在分化与生根培养基中不同浓度Cu2+处理的各品种再生率也存在显著差异,都表现为在5.0～10.0μmol@L-1的浓度下明显提高了出愈率和再生率,而且每个胚性愈伤组织的平均再生率也有显著提高.通过切片技术证明Cu2+浓度主要影响胚性愈伤组织的发生.供试品种在出愈率和再生率上也存在一定的差异,同时Cu2+浓度和基因型之间表现出正互作效应.     

柑桔细胞悬浮培养及再生植株的研究

取锦橙(Citrus sinensis Osbeck)试管实生苗下胚轴切段诱导愈伤组织,继代培养,再以该愈伤组织制备悬浮细胞系。在附加KT(0.75mg/L)和2,4—D(0.5mg/L)的MS液体培养基中悬浮单细胞能正常分裂和生长,形成多细胞团和愈伤组织,在MT添加BA(1.5mg/L)和IAA(0.5mg/L)的固体培养基上能进一步诱导小芽并形成完整小植株。文中还探讨了建立悬浮培养细胞系的最适蔗糖浓度以及单细胞悬浮培养过程的细胞密度和培养液的pH值变化情况。     

‘黄天霸’百合花器官愈伤组织诱导及植株再生

以‘黄天霸’百合花器官为外植体,采用正交试验,进行愈伤组织诱导及再分化研究,获得再生植株。结果表明,‘黄天霸’百合花器官的不同部位,其分化能力不同,出愈率由高到低依次是花丝>花柱>子房>花瓣>花药,花丝是较适宜诱导产生愈伤组织的外植体。花丝愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.3 mg/L 2,4-D,出愈率为69.56％,适宜愈伤组织增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;适宜芽分化的培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+0.6 mg/L NAA,芽诱导率达100％;最适生根培养基为MS+0.1 mg/L NAA,生根率达100％;试管苗移栽于草炭 ∶ 蛭石 ∶ 珍珠岩 ∶ 园土 ∶ 河沙=2 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1的基质中,成活率达92％。