鹅胚胎体外培养的研究

以蛋重为 (12 4 .90± 0 .91) g(A组 )、(130 .30± 0 .99)g(B组 )、(134.5 6± 1.0 1) g(C组 )的豁鹅蛋壳作为代用蛋壳 ,将第 1次换壳后的鹅胚转移至其中进行孵化 ,记录孵化第 3～ 4 .5天和第 6 ,15 ,31天的活胚数 ,同时分析代用蛋壳大小对孵化效果的影响。结果表明 :在整个孵化过程中 ,C组代用蛋壳优于B组和A组 ,尤其在孵化中期 (第 6～ 15天 ) ,A组与C组对照差异显著 (P <0 .0 5 )。结果表明 ,在鹅胚体外操作中 ,第 2次换壳所用的代用蛋壳的大小以大于或等于(134.5 6± 1.0 1) g为宜。     

鸡胚胎体外操作技术的研究现状和进展（续）

5嵌合体鸡的生产　　嵌合体制作最早主要用于发育生物学、细胞遗传学等学科的理论研究。目前，禽类嵌合体的制作中作供体细胞用的囊胚层细胞(BC)和原生殖细胞(PGCs)可以代替受精卵和早期胚胎用于体外遗传操作，已成为禽类转基因研究的一个热点。同时，BC和PGCs还可以在体外进行培养和冷冻保存。基本原理是经过遗传操作的BC细胞或PGCs细胞作供体，嵌合到受体胚胎中。如果是嵌合在生殖细胞，则该嵌合体性成熟后可产生一定比例经过遗传操作的配子。　　有关鸡嵌合体方面的报道及鸡嵌合体制作方法、嵌合体的嵌合程度的判断以及怎样提高嵌…     

鸡胚胎操作技术

鸡胚胎操作技术＠刘旭光￥安徽农业大学畜牧水产学院鸡胚胎操作技术刘旭光（安徽农业大学畜牧水产学院合肥２３００３６）禽类在生殖解剖学构造和生殖生理学机能方面与哺乳动物差异很大〔１〕,因此禽类胚胎操作技术就成为一个不同于家畜胚胎生物技术的研究领域。禽类胚胎操作技...     

牛胚胎体外生产技术的简化研究

利用屠宰牛卵巢分离的卵母细胞，以卵裂率和囊胚发育率为标准，对牛胚胎体外生产过程进行了简化试验。结果显示：不加卵丘细胞的高密度卵母细胞体外成熟（１００￣２００枚／平皿）可代替加卵丘细胞的标准密度（５０枚／平皿）培养，其卵裂率（５７．６％比６２．５％）和囊胚发育率（２３．７％比２９．１％）没有显著差异（Ｐ〉０．０５），体外授精时间可从成熟培养后２２ｈ延长至２７ｈ，卵裂率和囊胚发育率均没有显著变化，卵母     

不同时期鸡胚胎体外培养的比较研究

试验采用代用蛋壳体外培养方法进行了不同时期鸡胚胎换蛋壳培养的研究。结果显示：体外受精卵体外培养发育率为10％。X期胚胎体外培养的孵化率为1．2％；孵化1日龄的胚胎体外培养的孵化率为7．9％；直接去1／4壳的鸡胚孵化率为3．7％；鸡胚胎换蛋壳以后，添加6～8札的稀蛋白对换壳鸡胚发育比较适宜。     

在代用蛋壳中孵化鸡胚

本实验将正常孵化７２ｈ的鸡胚转移到代用蛋壳内培养。鸡胚的存活率在第１０ｄ和第１８ｄ时分别是１００％和９０％（２３／２５）。孵化率为５２％（１３／２５）。     

鸡胚胎换蛋壳培养

鸡的卵子一般自卵巢排出15分钟以内在卵管漏斗部与精子结合,移入膨大部形成浓、稀蛋白后,到达峡部形成内外两层壳膜。在排卵后约4.5小时,受精卵在峡部开始卵裂,离开峡部前可达4—8细胞期。然后进入子宫部,水分增加,蛋壳形成。此时卵裂很活跃,受精卵在进入子宫部4小时内细胞数增至256个,当产出体外时卵裂细胞可多达     

鹌鹑胚胎的换壳培养

将25枚产后不到24 h的鹌鹑种蛋,作换壳培养试验。用25枚正常鹌鹑种蛋(对照组Ⅰ)和25枚鹌鹑无精蛋(对照组Ⅱ)作为对照,按常规方法孵化。结果:试验组有1羽鹌鹑正常出雏,孵化率迭4％。对照组Ⅰ有20羽鹌鹑孵出,孵化率为80％,对照组Ⅱ无鹌鹑孵出,无孤雌生殖现象发生。说明该试验具有可行性,它为今后实施胚胎移植和体外受精等试验作了准备。     

体外生产的牛胚胎超微结构的研究

利用两种常规体外培养系统研究了体外培养及不同培养条件对牛体外受精胚胎早期发育各时期超微结构的影响。结果显示：体外发育的牛胚胎在发育的各个时期（从原核期到囊胚）胞质中均含有丰富的脂滴，胚胎中特别是在桑椹胚及囊胚阶段可见到一些异常细胞。两系统下发育的胚胎中脂滴形态不同，从桑椹胚阶段开始，胚胎线粒体的发育在M199-BOEC-FCS培养系统中明显滞后于其在SOFaa-BSA培养系统中的对照。     

牛胚胎体外生产技术的简化研究

利用屠宰牛卵巢分离的卵母细胞，以卵裂率和囊胚发育率为标准，对牛胚胎体外生产过程进行了简化试验。结果显示：不加卵丘细胞的高密度卵母细胞体外成熟（１００～２００枚／平皿）可代替加卵丘细胞的标准密度（５０枚／平皿）培养，其卵裂率（５７．６％比６２．５％）和囊胚发育率（２３．７％比２９．１％）没有显著差异（Ｐ＞０．０５），体外授精时间可从成熟培养后２２ｈ延长至２７ｈ，卵裂率和囊胚发育率均没有显著变化，卵母细胞体外成熟后可以不经洗涤直接移入受精滴，原成熟培养皿内残留卵丘细胞再培养４８ｈ形成的单层细胞，可代替标准方法制作的单层小滴用于体外受精胚胎的共同培养，供胚胎发育培养的单层细胞使用多次不影响囊胚发育率，经简化的ＩＶＦ技术获得的胚胎非手术移入情期同步受体牛子宫角２～２．５个月后直检有５８．３％（７／１２）妊娠。我们认为，传统的牛胚胎体外生产技术经过简化可以提高生产效率，不会减少囊胚发育率和妊娠率，值得推广应用。     

Functional role of type VI collagen during early feather development of the chicken embryo in vitro

The regulatory function of type VI collagen during early feather development in embryonic chickens was investigated at the cellular and organ levels. Immunohistochemical studies of embryonic chicken skin showed that type VI collagen was distributed in spatial‐specific and temporal‐specific manners related to early feather development. To clarify the role of type VI collagen, we studied the feather development in intact, reconstituted and reconstituted gel skin cultures. When ethyl‐3,4‐dihydroxybenzoate (EDHB) was added to the medium of intact skin as an inhibitor of type VI collagen synthesis, the feather buds did not elongate and the number of neural cell adhesion molecule (NCAM)‐positive cells was reduced. However, the magnitudes of both suppressive effects of EDHB were reduced by the addition of liquid type VI collagen. Similar improvement was also observed in the reconstituted skin with liquid type VI collagen and in the reconstituted gel skin with solid type VI collagen at a low concentration. Moreover, type VI collagen promoted feather bud development in the absence of EDHB. However, a high concentration of solid type VI collagen in the reconstituted gel skin arrested the feather bud elongation, and antitype VI collagen antibodies caused feather buds to become longer and smaller in the reconstituted skin. At the cellular level, type VI collagen affected the proliferation, migration and NCAM expression of mesenchymal cells. These results suggest that type VI collagen regulates early feather development by controlling mesenchymal cell behavior.     

蛋鸡育种技术的研究现状

家禽产蛋量的遗传学研究大约始于1900年，早期蛋鸡育种主要是根据产蛋性能的表现值，估计其育种值。本世纪70年代末，育种学家们开始将家鸡血液的某些生化指标应用于蛋鸡的育种。经过大约10年的发展，人们开始热衷于现代分子生物技术的研究。到目前为止，分子生物技术已取得了飞速的发展，各种DNA标记的技术为加快蛋鸡的育种进展提供了可能。1蛋鸡常规育种方法　　在本世纪初，人们开始对家鸡产蛋量的研究大多属于孟德尔式的遗传学研究，即对产蛋量性状的绝对遗传效应进行分类研究。Gowell(PearlandSurface,1909)用个体选择的方法改良产…     

鸡断喙技术新改进

众所周知，鸡的互相啄食（啄癖、啄食癖）属于常见病，给养鸡业带来明显经济损失，引起鸡互相啄食的主要原因有：高度密养、光照过强、微气候差、非全价营养、换羽期、强制换羽期和遗传因素等。迄今，预防鸡互啄的最佳方法普遍认为是断喙。根据近年国外最近资料报道，仍以Lyon公司推荐的断喙术最受青睐。1断喙前对鸡和鸡舍的准备1．1　选择1天中最凉爽的时候断喙为宜。1．2　断喙前二天和后三天，推荐在鸡的饮水里添加维生素K（4g／L）和维生素C（20mg／L）。1．3　计划好一栋鸡舍的断喙不要超过2～5天。1．4　断喙所用刀片器具必须是完美…     

幼羔胚胎体外生产技术研究进展

幼羔胚胎体外生产技术(JIVET)是全球草食类动物繁殖技术中最先进的生物工程技术。国内外对幼羔经激素诱导后生产胚胎已作了许多研究,并取得一定的成果,本文就其研究进展作一综述。     

鹅副粘病毒对鸡胚及雏鸡致病性的初步研究

鹅副粘病毒是一种引起多种家禽疾病的病毒,通过人工感染鸡胚和雏鸡试验,其结果表明本病毒主要以呼吸系统、消化系统病变为主要临床症状和特征,并且可导致10日龄的鸡胚100％死亡,对雏鸡的致死率为85％。因此,可见其致死率高,广大养殖户应重视鹅副粘病毒的预防。     

鸡骨髓源树突状细胞的诱导分化及鉴定

为建立鸡骨髓源树突状细胞(Dcs)的体外培养和鉴定方法,本研究无菌抽取10日龄健康SPF雏鸡的骨髓,体外分离纯化骨髓细胞,将其培养于含有重组的人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和白细胞介素4 (rhIL4)的RPMI 1640营养液中,诱导培养鸡骨髓源DCs.采用显微镜观察其体外培养过程中的形态特征及流...     

季节对延边黄牛卵母细胞质量及体细胞核移植胚胎发育的影响

研究季节对延边黄牛卵巢质量和卵母细胞的数量、质量、体外成熟以及核移植重组胚发育的影响。持续1年采集延边黄牛卵巢,分级卵巢,抽取卵巢表面直径2～8mm的卵泡内的卵母细胞,收集后进行体外成熟和重组胚的体外培养。结果表明,1级卵巢的比例在春冬季时明显高于秋季（P〈0．05）,2级卵巢的比例在春夏季高于冬季（P〈0．05）,秋季的3级卵巢比例最高,与其他季节有显著差异（P〈0．05）;在秋冬季,平均每个卵巢拣出卵母细胞数高于春夏季（P〈0．05）,成熟率上,秋季显著高于春夏季（P〈0．05）,但与冬季并无差异且其他各组间无显著差异（P〉0．05）;卵裂率上,秋季与春季有差异（P〈0．05）,但与其他季节无显著差异（P〉0．05）,囊胚率上,各组之间均无显著差异（P〉0．05）。通过研究发现,季节对延边黄牛卵母细胞的可用回收数量及其质量都会产生影响且秋季为延边黄牛体细胞核移植实验最适合季节。     

Effect of heat-stress on bovine embryo development in vitro.

Chronic elevation of uterine temperature has long been known to increase embryo mortality in dairy cattle. Short-term elevation in temperature of mouse embryos to 43 degrees C (acute) has been shown to induce intracellular production of heat-shock proteins. In this study, in vitro development of bovine embryos was assessed during short-term (60 h) coculture with oviduct epithelial cells at 38.6 degrees C (T1), 40 degrees C (T2), 38.6 degrees C after a prior pulse treatment (20 min) at 43 degrees C with 5% CO2 (T3), or 38.6 degrees C after a prior pulse treatment (20 min) at 43 degrees C with 100% CO2 (T4). During incubation, embryos cocultured at 40 degrees C had a greater (P < .05) mean embryo development score at 36 h than embryos cocultured at 38.6 degrees C. At 60 h of incubation, embryo development scores were greater (P < .05) for embryos cultured at 38.6 degrees C than for those cocultured at 40 degrees C. The number of embryos hatched at 60 h was similar after coculture at 38.6 degrees C (T1) or a prior pulse treatment with 5% CO2 and 43 degrees C (T3), but the embryo development score at 60 h was greater (P < .05) for the pulse-treated embryos. Embryos in T4 had greater (P < .05) embryo development scores than did T1 embryos from 36 through 60 h. Pulse treatment (T4) resulted in a greater (P < .05) number of hatched embryos at 60 h than T1, T2, and T3. These results indicate a detrimental effect of a chronic elevation in temperature that was evident shortly after embryo hatching.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)