黄茂甲营和三七总皂营中主要有效成分 抗PC 12细胞氧化损伤的配伍研究

目的探索黄茂甲葺和三七总皂葺中主要有效成分人参皂葺Rgl、人参皂葺Rbl、三七皂葺R1抗CoCh 诱导的PC12细胞氧化损伤的有效配伍剂量、方法采用CoCh诱导PC12细胞氧化损伤模型,以细胞乳酸脱氢酶 (LDH)漏出率为指标,研究4种有效成分对PC12细胞氧化损伤的有效机制浓度〔在此基础上按UH*(8s)均匀设计实 验,确定4种有效成分的有效配伍剂量〔结果4种有效成分都能抑制CoCI,诱导的PC12细胞LDH的漏出,与损伤组 相比差异有统计学意义(P<0.05 )、且随着药物浓度的增加,对LDH漏出率的抑制作用增强、黄茂甲葺和人参皂葺Rbl 在50 }e,mol儿,人参皂葺Rgl和三七皂葺R1在100 }e,mol儿浓度时LDH漏出抑制率约为80%} UH*(8s)均匀设计实验 多元逐步回归分析得:4种有效成分的8个不同浓度配伍都能抑制CoCI,诱导的PC12细胞LDH的释放,与损伤组相 比差异有统计学意义(P<0.05 )〔人参皂葺Rgl 50 }e,mol儿、黄茂甲葺0.781 25 }e,mol儿、人参皂葺Rbl和三七皂葺R1 各1.562 5 }e,mol/L配伍时抗PC12细胞氧化损伤的效应最强〔结论人参皂葺Rgl 50 }e,mol/L、黄茂甲葺0.781 25 }e,mol儿、人参皂葺Rbl和三七皂葺R1各1.562 5 }e,mol儿配伍组方为抗PC 12细胞氧化损伤的有效配伍剂量〔     

金华火腿粗肽液对PC12细胞氧化损伤的保护作用

[目的]本文旨在研究金华火腿粗肽液对过氧化氢诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)氧化损伤的保护作用。[方法]以金华火腿粗肽液为研究对象,建立PC12细胞过氧化氢损伤模型,测定不同质量浓度(200和400μg·m L~(-1))粗肽液对氧化损伤细胞的存活率和细胞中丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)渗漏率及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响。[结果]经过尺寸排阻色谱分离的金华火腿粗肽液CPC,显著提高了受损细胞的存活率,同时提升了细胞中的CAT、SOD和GSH-Px酶活性,降低了细胞中MDA含量和LDH渗漏率,其中以400μg·m L~(-1)粗肽液处理组效果最显著。[结论]金华火腿粗肽液对过氧化氢引起的PC12细胞损伤具有保护作用。     

梓醇调控自噬和凋亡促进 H2O2 诱导的 PC12 细胞存活

探讨梓醇对过氧化氢(H_2O_2)诱导的PC12细胞氧化损伤后调控凋亡和自噬相关分子的机制,采用0.01 mmol,0.1 mmol,1 mmol的梓醇预处理PC12细胞2h后,再用250μmol/L H_2O_2损伤细胞12h.MTT法检测细胞存活率,设置梓醇低、中、高3个剂量组(0.01 mmol,0.1 mmol,1 mmol),自噬抑制剂3MA阳性对照组,阴性对照组,H_2O_2诱导的PC12细胞损伤模型组,采用荧光单标检测LC3Ⅱ的表达,Western blot检测凋亡和自噬相关蛋白Bcl2/Bax,LC3Ⅱ/Ⅰ和Cleaved-caspase 3的表达情况.结果显示,梓醇呈剂量依赖性地提高了H_2O_2诱导的PC12细胞的存活,并对H_2O_2诱导的PC12细胞的LC3Ⅱ/Ⅰ,Bcl2/Bax升高蛋白水平表达,降低了Cleaved-caspase 3的表达;随着梓醇浓度的增加,Cleaved-caspase 3的表达减少,而LC3Ⅱ/Ⅰ和Bcl2/Bax的表达在升高.得出梓醇通过恢复凋亡和自噬相关蛋白Bcl2/Bax,LC3Ⅱ/Ⅰ的平衡能够保护PC12细胞免于H_2O_2诱导的氧化损伤.     

金耳子实体不同提取物的抗氧化性和对PC12细胞氧化损伤的保护作用

采用不同极性的溶剂对金耳子实体进行连续提取分离,利用化学发光法和H2O2诱导PC12细胞氧化损伤保护模型,对提取得到的氯仿相、乙酸乙酯相、乙醇相等部位进行体外抗氧化活性和氧化损伤保护作用的测定.结果表明:氯仿相具有较强的抗氧化活性,三种提取部位对H2O2自由基的清除作用均高于对超氧自由基的清除作用;乙醇相对由H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用最强,且呈现明显的浓度依赖性.金耳子实体的氯仿相是其抗氧化活性的主要有效部位,乙醇相是保护PC12细胞氧化损伤的主要有效部位.     

荷叶总黄酮对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

为了探讨荷叶总黄酮对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用及机制,建立以H_2O_2诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)为氧化应激损伤模型,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测正常细胞的存活率与损伤程度,用试剂盒测定不同浓度荷叶总黄酮对H_2O_2刺激PC12细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力、丙二醛(MDA)、蛋白质羰基含量的影响并检测Caspase-3活力的变化;Real Time PCR检测胞浆内Bcl-2与Bax的基因mRNA的表达。结果表明荷叶总黄酮能显著提高H_2O_2损伤的PC12细胞存活率,显著减少H_2O_2刺激的PC12细胞中MDA与蛋白质羰基的生成,显著提高CAT活性,但对提高SOD活性不显著。PC12细胞损伤可增加凋亡相关蛋白Bax mRNA的表达,加入荷叶总黄酮后有降低作用;同时H_2O_2使Bcl-2 mRNA的表达降低,加入荷叶总黄酮后有提高作用。荷叶总黄酮在给药浓度较低的情况下,对H_2O_2损伤的PC12细胞发挥着明显的保护作用,其作用机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡有关。     

鹿骨胶水解物抗氧化活性及对H2O2损伤PC12细胞保护作用的研究

[目的]研究鹿骨胶水解物的抗氧化活性及其对H_2O_2损伤PC12细胞的保护作用。[方法]采用热水抽提法对脱脂脱钙的鹿骨进行蛋白提取,用胃蛋白酶和胰蛋白酶进行双酶酶解得鹿骨胶水解物。以DPPH、·OH自由基清除能力测定鹿骨胶水解物的体外抗氧化活性。利用H_2O_2损伤PC12细胞的模型,探究鹿骨胶水解物(HDBG)对氧化损伤PC12细胞的保护作用。[结果]鹿骨胶水解物具有良好的抗氧化活性,对DPPH自由基和·OH均有一定的清除能力,IC_(50)值分别为10.05和4.76 mg/mL。鹿骨胶水解物对正常PC12具有明显的增殖作用,对H_2O_2诱导损伤的PC12细胞具有显著的保护作用,且呈剂量依赖关系。在250、750和1 500μg/mL时,细胞活力分别53.79%、73.16%和82.43%。[结论]鹿骨胶水解物具有良好的抗氧化活性,对H_2O_2损伤PC12细胞具有保护作用。     

地鳖肽对C2C12细胞氧化损伤的保护作用

【目的】探讨地鳖肽对过氧化氢诱导的C2C12细胞氧化损伤的保护作用。【方法】体外培养C2C12细胞,H_2O_2处理细胞造成氧化损伤,叔丁基对苯二酚及地鳖肽处理细胞24h;采用MTT、分光光度计、免疫荧光、Western Blot、RT-PCR法分别检测细胞活力、抗氧化酶活力及过氧化物、Nrf2核移位及相关因子基因表达。【结果】与对照组相比,H_2O_2组对C2C12细胞的损伤明显;与H_2O_2组相比,地鳖肽能够显著缓解C2C12细胞活力的降低,提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶活力及其基因表达,抑制脂质过氧化物MDA的产生,地鳖肽促进Nrf2核移位以及Nrf2和HO-1蛋白表达,地鳖肽促进抗氧化通路关键因子Nrf2及其下游抗氧化酶基因表达上调;地鳖肽作用效果与叔丁基对苯二酚一致。【结论】在细胞氧化损伤状态下,地鳖肽可能通过激活Nrf2-ARE信号通路,提高抗氧化酶活力及上调其基因表达实现其抗氧化保护作用。     

扇贝多肽对H2O2损伤HaCaT细胞的保护作用

[目的]建立H2O2诱导HaCaT细胞氧化应激损伤的体外模型,探讨扇贝多肽(PCF)对H2O2损伤HaCaT细胞的保护作用及其作用机制。[方法]采用不同浓度的H2O2(50、100、200、300、500μmol/L)作用HaCaT细胞12 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率;用不同浓度(1.42、2.84、5.68 mmol/L)的PCF分别处理细胞12 h后,加入H2O2(300μmol/L)继续作用12 h,采用CCK-8法检测细胞活力,采用酶生化法法测定细胞上清液中LDH活性以及细胞质中GSH-Px、T-AOC和CAT水平。[结果]与正常组相比,50~500μmol/L浓度的H2O2依赖性地引起HaCaT细胞氧化损伤,300μmol/L的H2O2使存活率降低到56%(P0.01);与模型组相比,不同浓度的PCF均可保护H2O2诱导的氧化损伤,增加细胞存活率,降低细胞LDH的释放量,提高GSH-Px、T-AOC和CAT含量,增强细胞抗氧化作用。[结论]扇贝多肽能对抗H2O2诱导的氧化应激,对细胞受损具有保护作用,其机制可能与提高抗氧化酶活力有关。     

细胞松弛素H对MPP~+诱导PC12细胞凋亡的保护作用

以500μmol·L-1甲基苯基吡啶离子(MPP+)制备帕金森病(PD)细胞模型,MTT法测定细胞存活率,比色法测定LDH释放量;AO/EB染色法、透射电镜法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪分析细胞凋亡比率并测定ROS含量,探讨青皮内生菌(Phomopsis sp.)固体发酵产物细胞松弛素H(CyH)对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。结果表明:①CyH与MPP+同时加药(0.05~0.20μmol·L-1)、先加药(0.002 5~0.010 0μmol·L-1)和后加药(0.01~0.20μmol·L-1)均能使PC12细胞存活率显著增加,LDH释放率显著下降;②流式细胞仪测定表明CyH能够降低MPP+诱导的PC12细胞凋亡率(P0.001);透射电镜和AO/EB染色也显示细胞形态的改善;③CyH能显著抑制MPP+升高ROS含量的作用(P0.05)。说明CyH能抑制MPP+诱导的PC12细胞损伤和凋亡,这可能与其减少细胞内ROS含量有关。     

乳清蛋白抗氧化肽对H_2O_2所致人胚肺成纤维细胞MRC-5过氧化损伤的保护作用

【目的】探讨纯化后的乳清蛋白抗氧化肽P4对人胚肺成纤维细胞(human lung fibroblast)MRC-5过氧化损伤的保护作用及可能的作用机制。【方法】采用H2O2诱导建立细胞氧化损伤模型,应用四唑蓝快速比色法(MTT法)检测细胞存活率,通过检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,来确定P4对过氧化损伤MRC-5细胞的保护作用,并利用电镜观察细胞形态学变化。【结果】1mmol·L-1H2O2孵育24h可显著诱导MRC-5细胞损伤,使细胞存活力下降到22.47%,细胞经不同浓度的抗氧化肽P4(4、20、100μg·mL-1)与H2O2共孵育后,特别是100μg·mL-1(高剂量组)抗氧化肽P4可使细胞存活率达到44.77%。同时,提高乳清蛋白抗氧化肽P4的浓度,可促进受损的MRC-5细胞修复,提高了SOD、CAT、GSH-Px酶活性,降低MDA含量。扫描电镜和透射电镜观察结果也表明,一定浓度的乳清抗氧化肽对MRC-5细胞具有保护作用。【结论】乳清抗氧化肽通过拮抗H2O2而对MRC-5的过氧化损伤具有保护作用。     

茶多酚对过氧化氢诱导鹅小肠上皮细胞氧化损伤的保护作用

试验旨在探讨茶多酚(TP)对过氧化氢(H_2O_2)引起鹅小肠上皮细胞的损伤作用。选取25～26胚龄马岗鹅胚为试验材料,通过酶消化法作原代鹅小肠上皮细胞分离与体外培养;采用不同浓度H_2O_2诱导细胞建立氧化应激损伤细胞模型,茶多酚预处理细胞氧化应激损伤干预;采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,比色法检测细胞中丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果表明,成功获得鹅小肠上皮细胞;与对照组相比,400μmol·L~(-1)H_2O_2作用鹅小肠上皮细胞2 h,细胞出现明显损伤,细胞存活率显著降低(P0.05),而不同浓度茶多酚显著提高细胞存活率(P0.05);其中100μg·mL~(-1)茶多酚提前干预10 h明显改善H_2O_2导致的鹅小肠上皮细胞存活率下降(P0.05);抑制H_2O_2诱导的胞内脂质过氧化产物MDA和糖酵解酶LDH产生,且抑制H_2O_2导致的抗氧化酶系SOD和GSH-Px活性降低(P0.05)。研究结果表明,在鹅小肠上皮细胞中,茶多酚可能通过降低脂质过氧化和细胞损伤程度及提高抗氧化酶活性,实现对H_2O_2引起细胞氧化应激损伤保护作用。     

白藜芦醇对兔成纤维细胞氧化应激损伤的保护作用研究

为探讨白藜芦醇对成纤维细胞氧化应激损伤的保护作用,试验以兔成纤维细胞为研究对象,采用不同浓度的过氧化氢刺激兔成纤维细胞以建立氧化应激模型.通过CCK试剂盒(Cell Counting Kit)法检测白藜芦醇对兔成纤维细胞增殖的影响,以及检测分析白藜芦醇保护兔成纤维细胞免受过氧化氢损伤的效果.结果表明:用浓度为500μmol/L的过氧化氢刺激兔成纤维细胞,成功建立氧化应激模型.高浓度(100μmol/L及以上)白藜芦醇处理细胞24 h后会对活细胞产生损伤作用,细胞存活率显著降低.用50μmol/L浓度的白藜芦醇预处理氧化应激损伤模型后,由过氧化氢引起的细胞存活率下降得到显著改善.在一定浓度范围内,白藜芦醇可以减轻过氧化氢诱导产生的氧化应激损伤,在抵御细胞氧化应激损伤方面有保护的作用.     

黑骨藤对PC12细胞氧化损伤的保护研究

[目的]研究黑骨藤提取物对H2O2诱导的PC12氧化损伤的保护作用。[方法]使用H2O2氧化压力诱导PC12出现氧化损伤,检测黑骨藤乙醇提取物对PC12细胞的保护作用。[结果]与模型对照组相比,黑骨藤乙醇提取物浓度在16~128μg/mL时,能显著提高PC12细胞的存活率,呈典型的量效关系。[结论]黑骨藤乙醇提取物具有抗氧化损伤作用。     

儿茶素单体对3T3-L1细胞损伤的保护与修复作用

探讨了4种儿茶素单体对Na2S2O4诱导的3T3-L1细胞缺氧损伤和H2O2诱导的细胞氧化损伤的保护与修复作用。体外培养3T3-L1细胞,利用Na2S2O4诱导细胞缺氧损伤和H2O2诱导细胞氧化损伤,采用先加入诱导剂后加入儿茶素单体和先加入儿茶素单体后加入诱导剂两种处理方式,MTT法检测3T3-L1细胞存活率的变化。结果表明,先加入诱导剂可严重损伤3T3-L1细胞,再加入4种儿茶素单体均能对3T3-L1细胞进行修复,显著地提高细胞的存活率;而先加入4种儿茶素单体再加入诱导剂,细胞受损程度则显著降低,表明4种儿茶素单体对3T3-L1细胞缺氧或氧化损伤都具有较好的保护与修复作用。     

桑黄醇提物抗氧化和保护神经细胞损伤的研究

采用化学发光法和H2O2氧化损伤PC12细胞的模型,研究了8种桑黄子实体醇提物体外抗氧化活性及对神经细胞氧化损伤保护的作用.结果表明:8种醇提物均有良好的抗自由基活性,其中PB-10抗氧化活性最高,对超氧阴离子清除率的IC50为3.76 μg/mL,对H2O2清除率的IC50为4.24 μg/mL.样品在10 μg/mL时对H2O2氧化损伤后的PC12细胞有较好的保护修复作用,其中PB-10活性最好,在10 μg/mL时修复率为(72.5±0.3)%,150 μg/mL时达到(90.7±3.6)%,且醇提物的抗氧化和氧化损伤保护作用均与样品中的黄酮含量成正相关关系.     

药用真菌脂溶性提取物对PC12细胞氧化应激损伤保护作用的研究

利用PCI2细胞氧化应激损伤模型,对6种药用真菌的49个脂溶性提取物进行筛选,研究表明,灵芝等药用真菌均具有氧化应激保护作用,其中桑黄和北虫草活性显著.29个样品在5～150 mg/L对PC12氧化应激损伤的保护作用呈剂量依赖性增长.药用真菌脂溶性提取物对PC12细胞氧化应激损伤保护作用与药用真菌的种类密切相关,并且药用真菌的不同菌株对PC12细胞氧化应激损伤保护作用也是不同的.     

高良姜提取物对PC12细胞的神经保护作用

通过建立H2O2介导的PC12细胞损伤模型;采用MTT法检测细胞存活率,利用荧光显微镜观察细胞形态;检测细胞中乳酸脱氢酶漏出率,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GGSH-Px)活性,评价高良姜提取物对H2O2介导的PC12细胞损伤的保护作用。结果表明,高良姜提取物能明显降低细胞内乳酸脱氢酶漏出率,降低细胞内MDA含量,提高SOD和GGSH-Px的活性,且具有浓度依赖性,由此推断,高良姜提取物对H2O2介导的PC12细胞损伤有明显保护作用。     

核桃粕多酚对HepG2细胞氧化损伤保护作用的研究（英文）

为了研究核桃粕多酚对H₂O₂诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用，以核桃粕为原料，采用超声辅助法在真空条件下提取多酚，HPD-100型大孔树脂纯化多酚，并对核桃粕多酚体外抗氧化活性进行测定；用CCK-8法测定不同浓度核桃粕多酚对HepG2细胞的毒性作用，以770μmol/L的H₂O₂诱导HepG2细胞建立氧化应激模型，通过测定HepG2氧化损伤细胞中MDA含量、SOD活力、GSH的含量的变化情况，研究在12.5、25、50μg/mL无毒性作用浓度下核桃粕多酚对HepG2细胞氧化损伤的保护作用。结果显示，纯化后的核桃粕多酚含量为77.53%；在同一浓度范围内，核桃粕多酚对DPPH自由基清除率与VC相比无显著差异；核桃粕多酚能使受氧化损伤的HepG2细胞内MDA含量明显减少,并且能提高受氧化损伤细胞内SOD活力以及GSH含量。综上所述，核桃粕多酚含量丰富，具有良好的体外抗氧化活性，对HepG2细胞的氧化损伤具有保护作用。     

肉苁蓉提取物对H_2O_2致兔肾小管上皮细胞损伤的影响

通过体外培养兔肾小管上皮细胞,研究H_2O_2对细胞增殖作用及肉苁蓉提取物对H_2O_2致肾小管上皮细胞损伤的影响。通过细胞形态观察,采用MTT法测定H_2O_2对兔肾小管上皮细胞增殖作用的影响及肉苁蓉水提、醇提物2、20、200mg·L-1三个剂量组的保护作用,测定细胞LDH释放量。结果表明,随着H_2O_2浓度的增加,形态改变的细胞数量逐渐增多,贴壁细胞数量逐渐减少,细胞增殖抑制率越大,细胞LDH释放量越多,呈浓度依赖性,肉苁蓉醇提物和水提物高浓度组能够显著降低H_2O_2对兔肾小管上皮细胞增殖的抑制作用(P0.01),肉苁蓉醇提物和水提物的高、中、低剂量组均能使H_2O_2作用后兔肾小管上皮细胞LDH释放量极显著低于模型组LDH的释放量(P0.01),结果呈浓度依赖性。H_2O_2对兔肾小管上皮细胞增殖具有不同程度的影响,肉苁蓉对H_2O_2致兔肾小管上皮细胞损伤具有保护作用。     

多巴胺对PC12细胞活性的影响及三七皂苷-Rg1的保护作用

采用细胞化学及生物化学方法研究了三七皂苷-Rg1时多巴胺引起的PC12细胞损伤的保护作用。结果表明：三七皂苷-Rg1对PCl2细胞损伤有明显的改善作用，可显著提高PC12细胞的增殖活性。同时降低培养上清中乳酸脱氢酶的释放量夏细胞内凋亡蛋白Bax的表达，这提示三七皂苷-Rg1对神经系统由于多巴胺氧化引起的损伤有明显的治疗和保护作用。