植物内生菌抗肿瘤活性产物研究进展

对近年来植物内生菌在抗肿瘤天然药物研究方面取得的进展进行综述,以期为抗肿瘤新药物的研发及内生菌资源的开发提供参考。     

一株四合木链格孢发酵产物的脂肪酸组分GC-MS分析

[目的]分析四合木链格孢发酵产物的脂肪酸组分。[方法]对四合木链格孢进行液体发酵培养,提取分离发酵产物中的脂肪酸,甲酯化处理后,利用GC-MS技术分别检测四合木链格孢发酵液和菌丝体中脂肪酸的组成。[结果]发酵液中检测出9种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸含量63.04%,主要为油酸28.41%,亚油酸24.17%,亚麻酸3.85%,饱和脂肪酸中的棕榈酸相对含量最高为26.19%,其次为硬脂酸5.15%。菌丝体检测出7种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸含量74.30%,主要为油酸30.87%,亚油酸31.57%,亚麻酸7.51%;饱和脂肪酸中的棕榈酸相对含量最高为16.85%,其次为硬脂酸5.76%。[结论]对四合木链格孢进行液体发酵培养能产生多种脂肪酸,可以开发作为利用微生物发酵生产脂肪酸的重要途径之一。     

一株烟曲霉抗植物病原菌活性次生代谢产物的研究

以一株烟曲霉属白花夹竹桃内生真菌为研究对象,对其抗植物病原菌活性的次生代谢产物进行了研究,共分离鉴定了6个化合物,分别是alternariol(1),4-acetylaminobutyric acid(2),monomethylsulochrin(3),succinic acid(4),cyclo-(Ala-Val)(5),homogentisic acid(6)。化合物1对白菜黑斑病菌、苹果腐烂病菌和葡萄炭疽病菌的抑制率分别为91.8%、89.1%和90.6%,大于阳性对照;对番茄灰霉病菌和黄瓜枯萎病菌的抑制率为86.6%和84.3%,与阳性对照相当;对供试的4种细菌都有很强的抑制作用,整体效果优于阳性对照。本研究为研制新型微生物来源的杀菌剂和植物病害的防治提供了理论依据。     

植物内生菌及其代谢产物抗虫活性研究进展

植物内生菌是一类可开发生物农药的新兴微生物资源。内生菌及其代谢产物的抗虫活性作为一种有可能替代化学农药的有效方法对环境和人类社会都有重要意义。对植物内生菌抗虫活性的研究进展及未来发展前景和存在的问题进行了综述和讨论。     

抑制肿瘤细胞活性的红树林植物内生真菌代谢产物研究进展

查阅了近10年国内外相关文献,从化学成分和生物活性两方面综述红树林内生真菌抑制肿瘤细胞活性代谢产物的研究进展,指出红树林内生真菌中分离得到的抑制肿瘤细胞活性代谢产物结构类型多样,主要包括生物碱、黄酮、苯并呋喃(吡喃)酮、有机酸、蒽醌、环二肽、聚酮和香豆素类。     

一株放线菌发酵产物抗肿瘤活性的研究

[目的]研究一株放线茵发酵产物的抗肿瘤活性。[方法]采用HepG2作为肿瘤细胞模型进行抗肿瘤活性检测。[结果]用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取发酵液离心后的沉淀和上清液,分别得到6个浸膏样品。发现用乙酸乙酯萃取上清液得到的5号样品抗肿瘤活性最高,在没有分离纯化的情况下G1 50达到0．76μg,／ml。对5号样品进行分离后得到物质A,在其浓度为10．00μg／ml时,对肿瘤细胞抑制率为26．50％。[结论]此株放线菌发酵产物具有高效抗肿瘤活性,可以进行深入研究。     

核桃内生菌研究Ⅱ 核桃内生菌G8发酵产物的抑菌活性研究

从核桃根部分离得到一株真菌,编号为G8.对其进行生物学观察,初步鉴定为葡萄壳小球孢菌,并进行了复侵染研究,确定其为核桃内生菌.对此菌株进行液体发酵,研究了其发酵液及其萃取物的抑菌活性.结果表明:①发酵液的提取物对28种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用,各萃取相粗提物在40 mg·mL-1时,乙酸乙酯萃取物的抑制效果最好,其次为正丁醇萃取物,萃余物最弱,但正丁醇萃取物对水稻纹枯、杨树溃疡、小麦雪腐病原菌的抑制率大于其他两相.②不同浓度的乙酸乙酯萃取物对11种病原真菌的活性试验表明,对苹果轮纹、苹果腐烂、小麦根腐和稻瘟4种病原菌的抑制率为100%,不同浓度对苜蓿炭疽、小麦赤霉、番茄早疫、苹果炭疽和玉米小斑5种病原菌的抑制率表现出极显著差异,对玉米大斑和辣椒疫霉2种病原菌的抑制率无显著差异.③乙酸乙酯萃取物对5种细菌的抑菌试验表明,其对蜡状芽孢杆菌和马铃薯芽孢杆菌2种细菌表现为抗药性,但不同浓度处理间差异不显著.     

一种内生菌发酵产物的提取及成分分析

[目的]对某一植物茎部分离出的毛壳属内生菌的液体发酵产物进行提取及成分分析,研究其是否产生新的活性次生代谢产物,为后续试验提供理论基础。[方法]将毛壳属内生菌接种于豆芽汁培养基中进行发酵,发酵结束后将菌液用乙酸乙酯萃取并制浸膏,获得浸膏核磁共振谱图,对浸膏进行柱层析及薄层层析分离。[结果]在粗浸膏谱图中获得原组分体系发生变化的信息。薄层层析获得2个谱带,经核磁共振结构分析,一个谱带的物质较纯,另一个谱带物质是混合物。[结论]内生菌液体发酵液的组成发生变化,在体系中出现新的组分。     

植物内生菌活性物质研究进展

植物内生菌是一种新的微生物资源,具有潜在的应用价值。近年来,从其体内寻找到的新的生物活性物质不但种类繁多,而且有许多是未开发的新物质,具有新型药物来源的巨大潜力,因而备受关注。本文对近年来从植物内生菌中发现的抗肿瘤、抗菌、抗病毒、杀虫、免疫抑制等活性化合物及其相应的产生菌研究进行了综述。     

植物内生菌活性成分研究进展

植物内生菌是一种新的微生物资源,近年来通过内生菌途径得到的活性物质不仅种类繁多,而且有许多未开发的新化舍物,其中一些化合物在抗菌、抗肿瘤、抗病毒等方面有较高的活性,特别是新近筛选出对心血管疾病、艾滋病病毒显示活性的内生菌,引起广大科学工作者的重视。介绍了植物内生菌的生物多样性、产活性物质的内生菌种类、活性筛选策略。     

植物内生菌农药活性研究进展

植物内生菌是一类新的资源微生物,具有潜在的应用价值。笔者综述了近年来具有农药活性的植物内生菌的研究进展,并对其应用前景进行了展望。     

一株植物内生菌的化感作用测定

采用培养皿培育法,检测加拿大一枝黄花内生黑曲霉CHH-S1发酵菌液对4种作物种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明,内生黑曲霉的发酵液能降低油菜、油麦菜和芝麻种子的发芽率,不同浓度的菌液可显著抑制4种受体植物籽苗的鲜重、根长和可溶性蛋白含量的增长,并表现出一定的浓度依赖性。油麦菜和芝麻籽苗内可溶性多糖含量受菌液刺激而增高,苋菜和油菜幼苗中的多糖含量则受到明显抑制作用。以上结果表明,加拿大一枝黄花的内生菌具有良好的化感作用。     

连翘内生菌的分离及对植物病原菌的抑菌活性测定

采用组织块分离法,从药用植物连翘的报、茎、叶中分离出内生菌136株,其中真菌71株,细菌42株,放线菌23株;以烟草赤星菌,苹果干腐病,棉立枯病菌,茄腐皮病镰孢霉,革燕麦镰孢霉5种植物病原菌作为靶标菌,测定了连翘内生菌的抗菌活性.结果表明连翘中有比较丰富的具有抗菌活性的内生菌,并初步筛选出了9株抗菌活性高的内生真菌、7株内生细菌和4株内生放线菌.     

风信子内生菌代谢产物的活性检测

对风信子内生菌代谢产物抑菌活性的检测结果表明：风信子内生菌的代谢产物对细菌和真菌均有一定的抑菌活性。其中发酵液提取物对枯草芽孢杆菌有一定的抑菌活性,对苹果干腐和烟草赤星的抑菌率分别是94．8％和93．8％,而菌体提取物对蜡状芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌都有较高的活性,对苹果干腐、烟草赤星和苹果轮纹的抑菌率均在80％以上。     

1株抗肿瘤银杏内生真菌的发酵条件及活性产物稳定性研究

对前期研究发现的1株分离自银杏树皮组织的具有良好的抗肿瘤活性内生真菌米曲霉菌(Aspergillus oryzae)YX-5菌株的发酵条件及活性产物稳定性进行研究。以发酵后的菌体干质量、粗提物质量和粗提物抗肿瘤活性为指标,对YX-5菌株的发酵温度、pH值、转速和发酵时间等条件进行优化。结果表明,最适宜的发酵条件为温度25℃、pH值7.0、摇床转速110 r/min、发酵时间7 d。以粗提物的抗肿瘤活性为指标,比较发酵液粗提物经热处理、酸碱处理、紫外照射和蛋白酶处理后的稳定性,发现YX-5菌株的活性产物在常温、中性和酸性环境中稳定性较好,对紫外线和蛋白酶有较强的抗性,但在超过100℃高温条件下或pH值超过9.0的碱性环境中稳定性较差。该菌株粗提物在自然条件下总体稳定性较高,不易发生变化,有利于活性成分分离工作的开展。     

一株具有抑菌活性的酸枣内生菌的分离

采用组织分离法和研磨涂布法筛菌以及对峙培养法进行抑菌试验,C-22-1菌株的发酵液经过反复萃取分离得到有抗菌活性的物质,以抑菌圈大小为指标对C-22-1菌株发酵条件中的碳源、氮源和发酵时间进行单因素优化。C-22-1菌株发酵液及其活性物质对7种人体常见致病菌抑菌活性测定显示,C-22-1菌株发酵液对白色葡萄球菌(Staphylococcus albus)的抑菌圈直径达29 mm,定性试验显示菌株C-22-1产皂苷类物质,单因素优化结果表明,菌株C-22-1的最佳碳源、氮源、时间分别是葡萄糖、酵母膏、8 d。初步确定C-22-1菌株可产抗菌活性物质为三萜皂苷。     

一株银杏内生炭角菌的抗氧化活性研究

采用正己烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇5种溶剂分别提取银杏内生炭角菌YX-28的子座粉末,测定各提取物中的总酚和总黄酮含量,并通过二苯基苦基苯肼(DPPH)和β-胡萝卜素/亚油酸模型评估其抗氧化活性,以期获得一种新型、高效、安全的抗氧化剂来源.结果表明提取物中总酚和总黄酮含量均与抗氧化活性存在正相关关系,甲醇提取物具有最高的总酚和总黄酮含量,分别为(54.51±1.05)mg·g-1(没食子酸当量)和(86.76±0.58)mg·g-1(芦丁当量).在β-胡萝卜素/亚油酸试验中,400 μg·L-1的YX-28甲醇粗提物具有72.90%的抑制活性,显著高于阳性对照二丁基羟基甲苯(BHT)和抗坏血酸(AsA);而在DPPH自由基清除试验中则显示中等活性.通过气相色谱-质谱联用法(GC/MS)分析鉴定了甲醇提取物中的41种物质,其占总提取物的64.65%.     

78株油樟内生真菌发酵产物的挥发性组分分析

【目的】检测78株油樟内生真菌(其中根内生真菌43株,茎内生真菌11株,叶内生真菌24株)代谢产物的组分。【方法】78株油樟内生真菌经PDA液体培养基摇床培养8 d后,取液体发酵产物,采用GC-MS法检测其乙醚提取液中的挥发性物质。【结果】多数油樟内生真菌均可产C10~C28之间的烷烃(二十烷最常见)和C16~C19脂肪酸及其对应的甲酯;55株内生真菌产烷基苯;35株内生真菌可产叔丁基苯酚的多种同分异构体;70株内生真菌发酵液中都检测到α-萜品醇,其中2株相对含量较高;5株内生真菌发酵产物中可以检测到黄樟油素;4株内生真菌发酵产物中可以同时检测到黄樟油素及桉叶油素。另有2株内生真菌的主要产物分别是蘑菇醇及苯乙酸。【结论】油樟内生真菌与油樟之间,内生真菌相互之间存在广泛的醇类物质共代谢;油樟内生真菌代谢产物对油樟植株具有促生、抗氧化、协助合成活性物质等作用;某些油樟内生真菌能够合成一些特殊产物,具有一定的开发利用价值。     

一株楸树内生真菌的鉴定及其发酵产物抗肿瘤特性研究

利用传统分类学方法、ITS序列测定和系统发育分析方法对一株分离自楸树抗肿瘤活性内生真菌FSNQ0023进行分类鉴定,并对其产物抗肿瘤活性及其细胞毒性进行了初步研究。结果表明,各种指标鉴定其为木霉属真菌(Trichoderma sp.)中的一种,该菌株经发酵培养120h,抗肿瘤活性最强;其对肝癌细胞HepG2的IC50约为正常肝细胞HL-7702的1/2;60℃处理2h后活性稳定。这些特性为活性产物的分离纯化提供了重要数据,也为抗肿瘤新药开发提供了依据。