大白菜根肿病人工接种鉴定方法比较

采用4种人工接种方法对大白菜根肿病进行苗期接种鉴定。结果表明,蘸根法的发病率与病情指数最高;菌土法随菌液浓度升高,发病率及病情指数均增加;浸芽法无论发病率还是病情指数均最低;注射法接种后50天调查的发病率及病情指数均明显高于30天的调查结果。注射法在4种接种方法中操作最简单,适合育种中对大量材料进行抗病性鉴定。     

塘泥土对油菜根肿病的影响

通过盆栽接种试验研究了塘泥土对油菜根肿病发生的影响,结果表明,添加塘泥能缓解稻田土中油菜根肿病的发病。在无病稻田土中添加塘泥,根肿菌休眠孢子接种浓度≤10~3个/g土时防效100%,根肿菌休眠孢子接种浓度为10~4个/g土和10~5个/g土时防治效果分别为50%和56%;在带病稻田土中加入塘泥也可以显著降低油菜根肿病发病率和病情指数,接种根肿菌休眠孢子0个/g土和105个/g土条件下防治效果分别为100.00%和40.43%。     

太阳热处理对小白菜根肿病防治效果的研究

为探讨太阳热处理对小白菜根肿病的防治效果,以超级小黄白为供试材料,测定太阳热处理前后的土壤理化性质、根肿菌休眠孢子数量、土壤微生物多样性及发病率和病情指数,评价太阳热处理对小白菜根肿病的影响。研究表明:经太阳热处理后土壤0~10 cm处pH由4.96提高至5.60,根肿菌休眠孢子的浓度由1.09×10⁶ g^-1减少至5.74×10⁵ g^-1。变性梯度凝胶电泳(DGGE)结果证明,太阳热处理提高了土壤细菌微生物多样性,其中0~10 cm处和10~20 cm处土壤细菌微生物群落的香浓维纳指数分别由1.51、0.91提高到1.98、1.53,0~10 cm处根肿病的发病率由87.10%降低到49.12%,病情指数由45.24降低到16.96,防治效果明显。本研究为太阳热处理在实际农业生产中的应用及对根肿病的防治提供了理论基础。     

甘蓝根肿病接种方法的研究

分别比较了菌土接种、蘸根接种对发病的影响,结果显示菌土接种的发病最严重;在接种浓度试验中,浓度越高,发病越重;对不同的根肿菌进行接种比较发现重庆涪陵地区的根肿菌比成都地区根肿菌致病性强,以涪陵地区的根肿菌作为菌源,验证了2个抗病材料99033,99037和2个感病材料99076,99046.并根据实践建立了一套新的田间单株病情分级标准.     

甘蓝根肿病接种方法的研究

分别比较了菌土接种、蘸根接种对发病的影响,结果显示菌土接种的发病最严重;在接种浓度试验中,浓度越高,发病越重;对不同的根肿菌进行接种比较发现重庆涪陵地区的根肿菌比成都地区根肿菌致病性强,以涪陵地区的根肿菌作为菌源,验证了2个抗病材料99033,99037和2个感病材料99076,99046。并根据实践建立了一套新的田间单株病情分级标准。     

江西省十字花科作物根肿病影响因子研究

[目的]近年来,根肿病在江西省呈现快速蔓延和加重发生的态势,危害蔬菜产业发展安全.研究十字花科作物根肿病影响因子,掌握病害发生的基本规律,有助于科学制定区域性根肿病治理对策.[方法]采用威廉士鉴别系统鉴定病原菌生理小种,研究病菌致病性分化对根肿病的影响.设置根肿病田间病圃,分期播种小白菜,分析气象因素对根肿病的影响.设计作物轮作试验并结合田间调查,探明轮作对根肿病的防控效果.通过田间与人工接种试验,研究混播对病情的影响.[结果]江西省根肿病菌小种种群增多,鉴定出1号、3号、4号、5号、8号、9号、12号、16号共8个生理小种,以9号为优势小种.不同小种对不同十字花科作物致病力表现差异,9号小种对甘蓝、油菜不致病,对大白菜、小白菜、紫菜薹等致病;4号小种对多数十字花科作物致病,但对萝卜致病力较弱.高温会影响病情严重度,低温则不利于根肿病发生,适宜根肿病发生的月平均气温在24℃左右.降雨量对根肿病情的影响无规律性变化,但适温条件下强降雨加重病情.与水稻、西瓜、玉米等进行短期轮作来调控根肿病毫无效果,多年甚至数十年水稻田改种小白菜依然能发生根肿病.病原菌为9号小种时,小白菜病情单播重于与油菜混播,油菜单播与混播均未发病;病原菌为4号小种时,小白菜、油菜单播与混播,各自根肿病均较重发生,病情未因播种方式改变而变化.[结论]江西省根肿病菌小种种群增多,不同小种对不同十字花科作物致病力表现差异.高温会影响病情严重度,低温则不利于根肿病发生.降雨量对根肿病情的影响无规律性变化,适温条件下强降雨加重病情.轮作对根肿病的控制效果十分有限.在特定条件下抗性不同的十字花科属种间作物混播似存在化感现象.     

球毛壳菌及其产生的鞘氨醇对油菜根肿病的室内生防作用

采用灌根接种法研究内生真菌球毛壳菌(Chaetomium globosum)对油菜根肿病的室内生防作用。结果表明,灌根接种球毛壳菌孢子悬浮液后,油菜体内的过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶的活性均明显提高。球毛壳菌孢子悬浮液灌根接种油菜根部后,根肿病的发病率和病情指数均明显降低,对油菜根肿病的防效为76.88%。通过极性梯度萃取、薄层层析和HPLC从球毛壳菌发酵液中分离纯化活性物质,经质谱鉴定为C16鞘氨醇和植物鞘氨醇。鞘氨醇对根肿菌休眠孢子的萌发有明显的抑制作用,其MIC值小于0.1μg/mL,表明球毛壳菌防治油菜根肿病的机制为诱导系统抗性和次生代谢产物拮抗病原菌2种机制。     

6-BA对大白菜根肿病发病率的影响

[目的]研究细胞分裂素与大白菜根肿病的关系,探讨大白菜根肿病的发病机理。[方法]从发病植株的肿瘤提取孢子,再提取孢子DNA进行PCR检测。将鉴定出的根肿菌孢子于播种期、发芽期以及发芽后21 d接种到三角瓶内的培养土中,于发芽期在培养土中添加0.08μmol/L 6-BA。从接菌植株长出的肿瘤提取孢子,对孢子进行电镜检验,并统计6-BA处理及对照的根肿病发病率。[结果]在三角瓶内,根肿菌可引起大白菜植株发病;添加0.08μmol/L 6-BA处理的根肿病发病率为100%,未加细胞分裂素处理的发病率为57%,前者肿瘤体积也明显大于后者。扫描电镜显示大白菜根肿菌休眠孢子的大小为1.5～4.3μm。[结论]6-BA能明显促进大白菜根肿病肿瘤的形成。     

白菜根肿病菌致病性因素研究

通过对2002年至2004年白菜根肿病主要影响因素研究,结果表明,土壤含水量为20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%时,白菜根肿病病情指数分别为0,1.5,10.5,28.6,26.9,19.8,2.9.对病田土壤中根肿病菌休眠孢子囊垂直分布测定,结果为0 cm土层平均含菌量为0.49×106～208.27×106个,10cm土层为83.85×106～1400.15 ×106个,20cm土层为5.1×102～28.7 ×102个,病田不同土层休眠孢子囊平均含量10 cm＞0cm＞20 cm.用0、10、20cm带菌土壤接种白菜,其根肿病病情指数分别为30.7,25.8,20.0,带菌烘干土样接种未发病.土壤酸碱度与田间根肿病发生有密切关系,pH值5.6～5.97,病株率为100%;pH值6.9～7.59,病株率45.68%～62.96%.病田晒垡60、40、20 d后接种白菜和甘蓝,其病情指数分别为0.47,4.4,38.2和0.2,1.2,24.8.对病根组织泡水和日晒5、10、15 d后接种白菜,其病株率分别为55.2%、79.2%、89.6%和85.7%、100%、100%;新鲜病根接种病株率为84.9%;无病土未发病.     

根肿菌侵染对大白菜叶绿素荧光参数和光合特性的影响

以大白菜抗根肿病自交系265和感根肿病自交系139为试材,采用室内根肿菌人工接种技术,研究根肿菌侵染对不同抗性大白菜叶片叶绿素荧光参数及光合特性的影响.结果表明,接菌3d,139In和265In根毛均有根肿菌侵染,且随着时间延长侵染率呈现先增加后减少的趋势,265In早期根毛侵染率明显低于139In,后期显著高于139...     

大白菜品种资源抗根肿病鉴定

为了解大白菜抗根肿病品种的抗性表现及为育种利用提供依据,本研究对国内外抗根肿病大白菜品种资源进行根肿病人工接种鉴定和分子标记鉴定。结果表明:94份接种青岛根肿病菌的鉴定品种中有74.46%为抗病品种,其中表现免疫或高抗的占鉴定品种的65.95%;65份接种2012年双龙根肿病菌的品种中12份表现抗病,占18.46%,其中表现高抗的有5份,占鉴定品种的7.69%;50份接种2013年双龙根肿菌的品种中表现抗病的仅有2份,占鉴定品种的4%;KBrH129J18R分子标记鉴定的86份品种中有56份出现抗病特征条带,占鉴定品种的65.12%,抗青岛根肿病菌的品种分子标记中大都有抗病条带出现。     

抗根肿病甘蓝型油菜新种质的创制及抗性评价

【目的】通过根肿病高抗白菜品种"康根51"与甘蓝型油菜种质进行杂交,创制获得对云南特定根肿病生理小种具有抗性的种质,为根肿病抗性育种奠定基础。【方法】采用染色体数目和PCR扩增对亲本和杂交后代进行分析,并采用田间抗性鉴定和室内人工接种鉴定相结合的方法进行抗性评价。【结果】染色体数目分析发现,"康根51"的染色体数目为20条,油菜10159染色体数目为38条,杂交F_1代材料染色体数目为29条,与预期结果相符。随着世代的增加,染色体数目逐渐趋于正常且自交结实正常。PCR扩增结果显示杂交后代具有双亲的互补带型,表明创制的种质为甘、白杂交后代种质。对不同世代的663份自交单株进行田间根肿病抗性初筛,29份材料发病率较低;以楚雄东瓜镇油菜发病根瘤上分离的休眠孢子为病原对田间初筛的种质进行室内抗性鉴定。R150和R322表现为高抗,发病率分别为6.7%和13.3%,病情指数分别为5.83和7.50;R072、R087等19份材料表现为抗病,发病率在13.3%～36.7%,病情指数在10.83～25.80,其余8份表现为感病或高感。相关性分析表明,油菜根肿病的病情指数与发病率呈显著正相关。【结论】获得对云南特定根肿病生理小种表现抗性的甘蓝型油菜新种质2份,可用于油菜根肿病抗病育种。     

不结球白菜根肿病抗性鉴定方法的研究

为了探索不结球白菜根肿病人工接种鉴定的最适方法,采用4种人工接种方法对不结球白菜根肿病进行接种鉴定,结果表明:2亿个孢子/mL的浓度在4种接种方法中效果均较好,适宜进行不结球白菜根肿病的接种;浸芽法中随着浸芽时间的延长,不结球白菜根肿病的发病率提高;利用子叶期和三叶一心时期进行3个时间的蘸根法接种,发现三叶一心时期蘸根3 h的发病率最高;相同条件下的灌根法优于菌土法,灌根法在4种接种方式中操作简单,适合在育种中对大批量材料进行抗性鉴定。     

十字花科根肿病研究现状及未来趋势

根肿病在很多地区蔓延,严重影响了菜农的经济收入,生物学家投入了大量的财力、物力来研究根肿病,并在根肿菌的分类、根肿菌的生理小种分化、病原菌检测技术、病原菌有效接种技术、病原菌的生活史及生物学特性、根肿菌的防治方面取得了很好的成就。本文对近几年根肿病的致病机理、生理小种鉴定、根肿菌的防治及培养技术前景等方面的研究进行概括,以期对根肿菌的进一步研究提供参考     

土壤环境因子对十字花科根肿病发生的影响

为十字花科根肿病的综合防控提供理论依据,以油菜黔油18号为试验材料,采用单因素试验研究土壤温度、含水量、pH和黏性等不同土壤环境因子对十字花科根肿病发生的影响。结果表明：十字花科根肿病的发生率与土壤温度、pH、含水量和黏性关系密切。根肿病最适发病的温度为25℃,其发病率和病情指数分别为71.25%和38.75;酸性土壤有利于病害发生,土壤pH 5.5～6.0时病情指数为30.69～37.64;病害发病率和严重度随土壤含水量增加而增加,土壤含水量为50%～60%时发病率为70%～80%,病情指数为37.22～46.67;土壤黏性大不利于透水,不加珍珠岩的白化泥处理根肿病发病率和病情指数均较其他处理高,分别为67.50%和35.0.     

土壤酸碱度与榨菜根肿病的关系分析

【目的】研究不同土壤(pH)酸碱度条件下榨菜根肿病发生的严重程度,探究土壤pH与榨菜根肿病的关系,为榨菜根肿病的防治提供理论依据。【方法】在重庆市涪陵区榨菜根肿病区采集土壤样品288份测定其pH,测定不同pH条件下根肿病菌休眠孢子萌发率、根肿病发病率及榨菜营养生长情况,研究土壤pH与榨菜根肿病间的关系。【结果】288份发病土样pH集中分布于4.00~7.00。根肿病菌休眠孢子的萌发率在pH 5.00~6.50时较高,均在50.00%以上,在pH 3.00、4.00、8.00、8.50、9.00和10.00时萌发率较低。温室盆栽试验结果显示,酸性环境下榨菜根肿病发病率显著高于碱性环境,在pH 4.50~6.50时榨菜根肿病发病严重,以pH 6.00时发病最严重,病情指数达84.22,在pH 8.00时不发生根肿病。不同pH条件下榨菜各生长指标测定结果显示,榨菜在pH 5.00~7.50时长势较好,在pH 6.50~7.00时长势最佳,在pH 4.00和8.00时生长受到抑制。【结论】土壤pH 4.50~6.50的弱酸性环境利于榨菜根肿病的发生,最适宜榨菜营养生长的pH为6.50~7.00。生产中可通过调节土壤pH,再配合其他防治措施以控制榨菜根肿病的发生。     

水介导十字花科作物根肿病的传播及其化学防治

以感病的大白菜品种为供试材料,采用漂浮育苗池水和人工接种不同菌量的芸薹根肿病菌(Plasmo-diophora brassicae Woronin)休眠孢子悬浮液,分析病菌在水和土壤环境中的致病性差异,观察病菌在不同含水量土壤中的传播距离、侵染程度和带菌水浇灌处理后的病情,并在水培育苗池中进行药剂筛选。结果表明:人工接种漂浮育苗有利于根肿病传播,且发病程度与接种的孢子悬浮液带菌量呈正相关,当以103、104、105、106、107个/g的菌量接种时,漂浮育苗植株的发病率分别为9.51%、19.88%、44.31%、63.65%、76.00%,传统旱育苗植株的发病率分别为5.33%、15.00%、20.67%、43.33%、45.00%;在土壤含水量为38%～115%的基质上种植大白菜苗,接种根肿病菌后均能发病,其中以土壤含水量为77%时植株的发病率最高,当植株距离病菌5cm时,植株发病率达20.43%,距离病菌10cm时,植株发病率达10.23%;在水培育苗池中分别施入375.0mg/L的百菌清WP、250.0mg/L的多菌灵WP、25.0mg/L的氰霜唑SC、125.0mg/L的氟啶胺SC和262.5mg/L的BAS651FSC,其防治效果分别达96.65%、94.19%、87.93%、80.18%和88.02%,但所用剂量的氟啶胺SC和BAS651FSC对大白菜苗有药害作用。     

基于LC-MS技术的代谢组学方法研究根肿菌对拟南芥代谢的影响

为探寻根肿菌侵染拟南芥后期寄主代谢的生物标志物,将罹患根肿病的油菜根切块进行组织培养,获得较为纯化的、单一的根肿菌接种体,与拟南芥种子在1/2MS培养基上共培养,利用液相色谱-质谱联用(LCMS)技术的非靶向代谢组学方法分析根肿菌侵染后期拟南芥根部代谢物差异。组织培养结果表明,根肿菌可以在愈伤组织中生长和繁殖;共培养结果显示45d后拟南芥侧根尖端肿大,显微观察显示根肿菌能完成侵染循环;代谢组数据PCA和PLS-DA分析结果显示试验组(接种根肿菌)和对照组(未接种根肿菌)明显分离;OPLSDA分析和t检验结果表明重要的差异代谢物包括油菜素内酯、类黄酮、木质素、萜类、甾体皂苷和磷脂等物质。提示这些物质可能在根肿菌侵染后期时拟南芥与根肿菌的相互作用中起重要作用。     

不同接种方式下番茄溃疡病病原菌的致病效果比较

番茄溃疡病（Bacterial canker of tomato）是目前国内外番茄生产上最严重的细菌病害之一。为建立准确有效的人工接种鉴定体系,本研究采用5种不同的人工接种方式（剪顶法、喷雾法、复叶柄注射法、茎顶端注射法和茎基部注射法）对番茄植株进行接种,比较和分析了接种后各群体植株起始发病时间、平均发病率、病情指数和平均死株率等指标。结果表明：剪顶法和茎部注射法接种病原菌致病效果最好,发病率达到100.0%,病情指数>75.0,但是剪顶法接种后植株死亡率很高,接种40d时死亡率高达96.7%,不利于后续的遗传分析及留种;进一步分析发现茎基部注射接种时病原菌在植株体内传播速度更快;用5份抗感性不同的番茄材料及2个遗传分离群体共计742株番茄进行茎基部注射接种,结果表明该法接种后可以准确区分番茄材料的抗感性。综上所述,本研究结果表明茎基部注射法接种适用于番茄材料抗溃疡病评价及遗传分析,为抗溃疡病番茄材料的筛选及抗性品种的培育提供了有力支撑。     

土壤pH值与十字花科作物根肿病相互关系研究

在江西省根肿病区采集106份样土测定土壤p H值,调查田间根肿病病情;结合人工接种与土壤p H值调节试验,研究土壤p H值与根肿病之间的关系。结果表明:土壤p H值分布区域主要在4.0~7.0,占所测土样的94.3%;田间根肿病情以土壤p H值4.5~6.5相对较重。人工接种试验土壤p H值与根肿病关系密切,适宜根肿病发生的土壤p H值区域为4.0~6.5,最适区域为4.5~5.5。调节土壤p H值至6.5以上,在相同背景条件下病情减轻。施用石灰调高土壤p H值,减轻或抑制根肿病发生。每667 m2石灰的适宜用量75~100 kg,用量过大,可导致作物生长不良。