烟草黑胫病生防菌的筛选鉴定及其防效

从毒鹅膏菌(Amanita phalloides)栖生土壤中分离筛选烟草疫霉(Phytophthora parasitica var. nicotianae)拮抗菌株,通过盆栽试验考察拮抗菌株对烟草黑胫病的防效。结果表明：从毒鹅膏菌栖生土壤中分离筛选的DE4–5菌株对烟草疫霉的抑菌率达78.22%;DE4–5具有广谱抗真菌活性;依据DE4–5的形态和生化特征初步判断为假单胞菌属(Pseudomonas),结合16S rDNA保守序列及辅助gyrA基因片段序列分析,确定DE4–5为亚麻假单胞菌,定名为Pseudomonas lini DE4–5;生物活性测定显示,菌株DE4–5具有解磷和解钾能力,产IAA、蛋白酶、纤维素酶和脲酶;盆栽试验结果表明,菌株DE4–5预防组与治疗组的烟草黑胫病发病率分别为24.79%和39.24%,病情指数分别为26.31%和29.37%,防效分别达到69.14%和63.98%。     

烟草黑胫病拮抗细菌的筛选及其发酵条件优化

为获得对烟草黑胫病有较强生防效果的拮抗细菌,从四川省凉山州5个县(市)烟草种植田地采集10份土壤样品,通过稀释平板法分离得到112株细菌。采用平板对峙法获得39株对烟草黑胫病病原菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)拮抗效果较好的细菌。选取拮抗效果最好的GC-38菌株进行进一步研究,结果显示,菌株GC-38对烟草黑胫病病菌抑制率为81.81%,经鉴定菌株GC-38为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliauefaciens)。优化后得到其最佳发酵条件:碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,pH值为9.0,温度在30~35℃范围内。可见,GC-38菌株对烟草黑胫病有明显的拮抗作用,是具有较大开发潜能的生防菌株。     

烟草黑胫病拮抗菌的筛选鉴定及其发酵工艺优化

【目的】为筛选出对烟草黑胫病具有拮抗作用的细菌菌株,为烟草黑胫病的生物防治及生物农药的开发提供理论依据。【方法】采用平板对峙法筛选对烟草黑胫病有明显抑制作用的细菌菌株,结合形态观察、生理生化特征及分子生物学特征对该菌株进行鉴定,并利用菌饼法对该菌株的培养工艺进行优化。【结果】筛选出的菌株D1为革兰氏阳性菌、短杆状、产孢,且生理生化特征及16S rRNA基因序列与解淀粉芽孢杆菌具有极高的相似性(97%),因此确认菌株D1为解淀粉芽孢杆菌。筛选的最优培养基为PD液体培养基,最优碳源为蔗糖、氮源为蛋白胨、无机盐为氯化钙,最优配比为蔗糖20%、蛋白胨10%和CaCl_2 10%;最佳培养条件为pH 7~8、培养时间42 h和装瓶量30%。【结论】筛选得到的目的菌株通过发酵培养对烟草黑胫病有明显的抑制作用,可作为生防菌开发利用。     

烟草黑胫病拮抗细菌的分离、鉴定及发酵条件优化

【目的】从美洲大蠊肠道筛选获得对烟草黑胫病病原菌具有拮抗作用的拮抗菌株,明确拮抗菌株的分类地位、优化其发酵条件及测定其对烟草黑胫病的室内防治效果,为烟草黑胫病的生物防治提供菌种资源。【方法】以美洲大蠊肠道为材料,利用稀释涂布平板法及平板对峙法筛选对烟草黑胫病具有拮抗作用的菌株,根据形态特征、生理生化、16S rDNA和...     

紫花苜蓿根腐病生防菌的筛选、鉴定及发酵条件优化

【目的】筛选获得对紫花苜蓿根腐病病原菌具有拮抗作用的菌株,并对其发酵条件进行优化,为紫花苜蓿根腐病生物防治提供菌株资源。【方法】以青藏高原的紫花苜蓿根际土壤为研究对象,以紫花苜蓿根腐病5种病原菌为靶标,利用稀释涂布法分离细菌;利用平板对峙法筛选对苜蓿根腐病病原菌具有拮抗作用的菌株;利用平板对峙法和菌丝生长速率法测定拮抗菌株对5种苜蓿根腐病病原菌的抑菌活性;通过形态学观察、生理生化测定和16S r DNA序列分析确定拮抗菌株的分类地位;利用单因素试验和正交试验对拮抗菌株发酵条件进行优化。【结果】从紫花苜蓿根际土壤中共分离纯化出92株细菌,从中筛选出16株对供试病原菌具有较强拮抗作用的菌株,其中菌株LJ3-1的抑菌效果最强,且具有广谱抑菌活性。对菌株LJ3-1发酵滤液的抑菌活性测定结果显示,其发酵滤液对供试病原菌的抑制率为44.9%～77.4%。结合菌落形态特征、生理生化测定和16S rDNA序列分析结果,将菌株LJ3-1鉴定为枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）。对菌株LJ3-1的发酵条件优化结果显示,其最适发酵培养基组分为3%葡萄糖、1%酵母浸粉和0.5%NaCl;最适发...     

烟草黑胫病生防菌LG-3的分离鉴定及防效研究

采用平板对峙法,从河南省许昌市健康烟草根际土壤中筛选得到35株烟草黑胫病的拮抗菌。通过防效试验,获得1株对烟草黑胫病防效较好的菌株LG-3,经鉴定,LG-3为烟草节杆菌(Arthrobacter nicotianae),经毒理分析,该菌为实际无毒菌种。首次报道了烟草节杆菌作为生防菌对烟草黑胫病致病菌具有拮抗作用,对烟草苗期黑胫病的防效可达85.59%。     

烟草黑胫病拮抗细菌的筛选及鉴定

从毕节8个县市种植烟草的田地采集土壤样品122份,共分离到细菌菌株630株,经平板对峙培养初筛到31株对烟草疫霉有拮抗作用的菌株,再次筛选表明5株细菌菌株在室内有较强的拮抗作用.通过形态特征观察、生理生化特征测定及16SrDNA序列分析,鉴定拮抗细菌1107为芽孢杆菌属短小芽孢杆菌,7403、1205、1601、5801为芽孢杆菌属.     

采用生防菌YN48早期防控烟草黑胫病

为了有效地防治烟草黑胫病,解决过度使用化学药剂带来的诸多不良影响,采用不同浓度的烟草内生菌——解淀粉芽孢杆菌YN48菌株于苗期和大田相结合防治烟草黑胫病。结果表明:在苗期喷施500倍(5.1×10^{(7 )}CFU/mL)YN48菌液3次,移栽后10 d和30 d再各喷淋1次,移栽后20、31、41、51、61、71、81、92 d对黑胫病的防治效果分别达100.00%、92.50%、96.26%、96.87%、85.89%、80.71%、70.93%、65.74%,且烟叶的产量和产值可分别提高9.91%和13.07%,展现出早期喷淋内生菌YN48具有很好的防治烟草黑胫病的潜力。     

采用生防菌YN48早期防控烟草黑胫病

为了有效地防治烟草黑胫病,解决过度使用化学药剂带来的诸多不良影响,采用不同浓度的烟草内生菌——解淀粉芽孢杆菌YN48菌株于苗期和大田相结合防治烟草黑胫病。结果表明:在苗期喷施500倍(5.1×10~(7 )CFU/mL)YN48菌液3次,移栽后10 d和30 d再各喷淋1次,移栽后20、31、41、51、61、71、81、92 d对黑胫病的防治效果分别达100.00%、92.50%、96.26%、96.87%、85.89%、80.71%、70.93%、65.74%,且烟叶的产量和产值可分别提高9.91%和13.07%,展现出早期喷淋内生菌YN48具有很好的防治烟草黑胫病的潜力。     

烟草黑胫病拮抗菌HZ15的发酵条件优化

采用平板对峙法研究了烟草黑胫病菌的拮抗菌铜绿假单胞菌HZ15菌株对烟草疫霉的抑菌活性;以HZ15菌株发酵液的细菌浓度即在波长600 nm处的OD值为指标,采用单因素试验和正交试验对HZ15菌株的基础发酵培养基和发酵条件进行了优化。结果表明:HZ15菌株的发酵培养以YSP培养基(其组分为蛋白胨10 g/L、酵母膏5 g/L、蔗糖20 g/L、蒸馏水1 L)为最适的基础培养基,以蔗糖为最佳碳源,以蛋白胨为最佳氮源;最佳发酵条件为pH 7、温度36℃、光照时间12 h/d、发酵时间48 h、装液量40 mL/250 mL、转速220 r/min、接菌量2.5%。优化后的培养基和发酵条件提高了HZ15菌株的培养效率,节约了发酵成本。     

烟草黑胫病拮抗菌HZ15的发酵条件优化

采用平板对峙法研究了烟草黑胫病菌的拮抗菌铜绿假单胞菌HZ15菌株对烟草疫霉的抑菌活性;以HZ15菌株发酵液的细菌浓度即在波长600 nm处的OD值为指标,采用单因素试验和正交试验对HZ15菌株的基础发酵培养基和发酵条件进行了优化.结果表明:HZ15菌株的发酵培养以YSP培养基(其组分为蛋白胨10 g/L、酵母膏5 g/...     

一株马铃薯黑痣病生防菌的筛选及发酵条件优化

采用平板对峙法从土壤中筛选并鉴定一株马铃薯黑痣病的生防菌,并对该菌株发酵培养基和发酵条件进行了优化。结果显示,H13菌株的最优培养基组成:胰蛋白胨10 g/L,酵母提取物5 g/L,氯化钠10 g/L,葡萄糖8 g/L,蔗糖6 g/L,干酪素6 g/L,硫酸镁1 g/L;最佳培养条件为初始pH 7.2,发酵时间35 h,接种量300μL种子液,转速180 r/min,发酵温度28℃。     

烟草青枯病生防菌黑曲霉发酵条件优化研究

以烟草青枯菌Ralstonia solanacearum 为指示菌袁黑曲霉Aspergillus niger 对其的抑菌圈直径为响应值袁 运用单因素试验尧Plackett-Burman渊PB冤设计尧Box-Behnken渊BBD冤设计及响应面Response Surface Methodology渊RSM冤 分析将分离并鉴定的黑曲霉菌株的液体发酵条件进行了优化遥通过单因素试验确定麦芽糖和麦麸分别为最适碳源 和氮源袁通过Plackett- Burman 设计对培养基中相关影响因素的效应进行评价袁并筛选出有显著正效应的MgSO4及 有显著负效应的CaCl2和吐温80 等3 个因素袁使用最陡爬坡路径逼近最大抑菌圈直径袁最后用BBD 设计及RSM 分 析确定了主要影响因素的最佳条件遥结果显示袁经过优化的培养基组分为麦芽糖25.00 g/L尧MgSO4 0.38 g/L尧K2HPO4 0.10 g/L尧KCl 0.50 g/L尧CaCl2 0.05g/L尧FeSO4 0.20 g/L尧麦麸8.50 g/L尧酵母膏1.50 g/L尧吐温80 0.46 mL/L遥采用滤纸片扩 散法检测优化后的发酵液抗菌活性袁抑菌圈直径为37.49(依0.34) mm袁比未经优化测得的抑菌圈直径24.79(依0.72) mm 增大了51.23%遥     

烟草疫霉生防菌的筛选及鉴定

为了筛选对烟草疫霉菌具有拮抗作用的生防放线菌菌株,从烟草黑胫病病田采集健康烟株的根际土样,采用稀释涂布分离法与对峙培养法筛选得到32株对烟草黑胫病具有拮抗作用的放线菌菌株,其中编号为F-7的菌株对烟草疫霉菌的抑制作用最强且效果稳定,抑菌率为83.11%;经形态学观察、生理生化测定以及16S rDNA基因序列分析,将该菌株鉴定为波卓链霉菌;通过光学显微镜观察,F-7菌株对烟草疫霉菌丝生长和孢子萌发都具有显著的拮抗作用。     

烟草黑胫病生防茵筛选及防效初探

为筛选出烟草黑胫病生防菌,探索烟草黑胫病有效防治方法;采集了云南省9个地州29个县的141个采集土样,采用土壤稀释平板法进行微生物分离和平板对峙培养法进行筛选：分离筛选出280个对黑胫病菌有拮抗作用的菌株,其中抑菌半径大于17mm的拮抗菌有19株。盆栽和田间防效试验表明,以HJ01912表现最好,田间防效达到73．8％;综合以上结果得出：各生防菌株对黑胫病均表现一定的防效,有些生防菌田间防效与化学药剂相当,能有效控制烟草黑胫病。     

烟草黑胫病粗毒素高产培养条件的筛选

烟草黑胫病粗提毒素对烟草叶组织有明显的损伤作用,同一叶片不同部位对粗毒素的敏感性相似,不同生理年龄烟叶以及同一生理年龄不同品种的烟叶对毒素的敏感性不同。高压灭菌法和抽滤灭菌法所得到粗提毒素无明显差异。土豆６００ｇ／ Ｌ,糖５０ｇ／ Ｌ,硫酸铵３ｇ／ Ｌ,硫酸镁０．８ｇ／ Ｌ,培养时间２４ｄ 为最佳的粗毒素高产培养条件。菌丝干重与毒素产量高低无线性相关关系。     

1株生防菌的鉴定及其发酵条件优化

对草莓灰霉病菌具有较强拮抗活性的生防菌株F11进行分类学鉴定和抑菌效果评价,并采用正交试验和单因素试验对该菌株发酵配方和发酵条件进行优化,以期提高该菌株的发酵效率。结果表明,F11菌株对水稻稻瘟病菌、核盘菌等12种常见病原菌抑制率均达79.88%以上,表现出高效、广谱的抑菌特性,可作为植物病害生物防治的潜在资源。经菌落形态观察、生理生化测定、16S rRNA及gyrB基因测序分析,确定菌株F11为解淀粉芽孢杆菌(Bacillues amyloliqufaciens)。通过L_(16)(4~3×2°)正交试验优化,确定该菌株适宜的发酵培养基配方为:3.00_g/L牛肉膏、10.00 g/L蛋白胨、5.00 g/L NaCl、3.00 g/L葡萄糖、2.00 g/L MgCl_2。单因素试验结果进一步表明,基于优化配方,菌株F11培养的适宜初始pH为7.0、温度为30℃、振荡速率为150 r/min;平板计数显示,上述培养条件下活菌数为4.67×10~9 CFU/mL。     

2种生防菌及其复配剂对烟草黑胫病的防治效果

为寻求防治效果更好的生防菌来防治烟草黑胫病,以红花大金元为试材,设置了CK(清水)、T1(孢子数为2亿个/g的木霉菌可湿性粉剂)、T2(芽孢数为1000亿个/g的枯草芽孢杆菌可湿性粉剂)、T3(木霉菌可湿性粉剂+枯草芽孢杆菌可湿性粉剂)、T4(72％甲霜·锰锌可湿性粉剂)5个处理的田间试验和温室盆栽试验,调查各药剂对烟...     

荷花腐败病生防菌的筛选及鉴定

[目的]筛选对荷花腐败病菌有较强拮抗作用的生防菌,为荷花的健康生产及荷花腐败病的有效控制提供参考.[方法]采用抑菌圈法和对峙培养法从106株供试拮抗细菌中筛选对荷花腐败病菌有较强拮抗作用的生防菌,经形态学、生理生化和分子鉴定确定生防菌分类地位,通过与其他6种作物病原真菌的对峙培养了解生防菌的抑菌谱,并通过田间小区试验明确生防菌的田间防治效果.[结果]从供试的106株测试菌株中筛选获得4株对荷花腐败病菌具有拮抗效果的生防菌,其中以DR1菌株的拮抗效果最佳,抑菌带宽为9.8 mm.DR1菌株的拮抗谱较宽,对供试6种植物病原真菌均具有良好的抑制活性.田间防效试验结果表明,DR1菌株对荷花腐败病的平均防效为41.83%.根据16SrDNA和gyrB基因序列分析结果并其结合生理生化特征,将DR1菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).[结论]解淀粉芽孢杆菌的拮抗活性、耐热性和抗逆性强,且有较宽的抗菌谱,在荷花病害防治中具有较好的开发应用前景.