提取方法对类球红细菌辅酶Q10抗氧化活性的影响

为研究不同提取方法和菌体浓度对类球红细菌辅酶Q10抗氧化活性的影响,测试了酶法辅助超声波法、超声波法、研磨法和纳米磨法对类球红细菌辅酶Q10的收率的影响。结果表明:同酶法辅助超声波法、超声波法和研磨法相比,纳米磨法提取类球红细菌辅酶Q10的收率最高。类球红细菌辅酶Q10具有一定的抗氧化能力,且与菌体浓度呈量效关系。纳米磨法、酶法辅助超声波法、超声波法和研磨法从类球红细菌提取的辅酶Q10均具有清除DPPH自由能力、抗脂质过氧化能力和还原能力,纳米磨法最好。固液比为1:10时,纳米磨法提取的辅酶Q10对DPPH自由基的清除率为(0.160±0.006)μmol Trolox·g-1,对脂质过氧化作用的抑制率为(56.4±2.4)%,还原力为0.563±0.020。     

辅酶Q10产生菌的筛选及产物的定量检测

为了从实验室保存的酵母菌株中筛选产生辅酶Q10的菌株,采用麦芽汁培养酵母菌,皂化法萃取菌体中的辅酶Q10,可见光比色法和高压液相色谱法测定酵母菌中的辅酶Q10的含量。结果表明:筛选出2株较高产量的辅酶Q10产生菌,热带假丝酵母(C.tropicalis(cast).Berkhout)B021产量为7.420 mg/L、粟酒酵母(Schizosaccheromyces pombe Lindner)B147产量为7.488 mg/L。     

高产辅酶Q_(10)光合细菌的筛选及鉴定

对池塘污泥中富集分离的5株光合细菌产生的辅酶Q10(CoQ10)进行定性定量分析,筛出CoQ10产量较高的菌株P1,并对其进行系统鉴定。菌株P1为革兰氏阴性菌,杆状,菌体大小为(0.5~0.8)μm×(1.0~1.9)μm;适合光照厌氧培养,适宜生长温度为28~36℃,适宜pH为7.0~7.5;菌体含有细菌叶绿素a和类胡萝卜素;多种有机化合物均可作为光合作用的电子供体和碳源,蛋白胨和硫酸铵是其生长的较好氮源。16S rDNA序列系统发育分析表明,菌株P1在系统进化树上与GenBank序列号为AB167544的沼泽红假单胞菌菌株聚为一类,初步确定菌株P1为沼泽红假单胞菌。沼泽红假单胞菌P1菌株CoQ10产量较高,在19 mg/L左右,至少能稳定传代10次。     

自体诱导物对类球红细菌饥饿存活的影响

类球红细菌的cer群体感应系统可能对其饥饿存活存在影响。在实验中加入与类球红细菌自体诱导物结构相似的外源信号分子,通过测定总菌数和活菌数变化研究了它对类球红细菌饥饿存活影响。证实在类球红细菌中存在的群体感应调节系统对不同生长阶段转入饥饿培养的细菌存在调控,对生长到对数期转入饥饿培养的细菌调控能力较强,可以在饥饿环境下保持较高活菌数。     

糙米辅酶Q_(10)含量的分析

采用高效液相色谱法(HPLC)对糙米中辅酶Q10的含量进行测定,并对测定技术进行了优化.用该技术分析研究了100个水稻品种(含恢复系和种质资源)的辅酶Q10含量,其含量范围为0.30±0.03～5.36 ±0.04 mg·kg-1,品种之间糙米辅酶Q10含量差异极显著.辅酶Q10含量最高的为恢复系4B233(5.36±0.04 mg·kg-1),是最低含量的178.67倍.     

烟草细胞培养生产辅酶Q10的动力学研究

烟草细胞培养是获得辅酶Q10的一条有效途径。在黄花烟草细胞株培养过程中,对生物量、总糖、辅酶Q10的含量进行监测,建立起在烟草细胞悬浮培养过程中细胞生长、蔗糖消耗、辅酶Q10生成的动力学方程模型,各方程曲线与实验点拟合较好,相关系数均达到99%以上。     

日本开发出“恢复疲劳大米”

据《读卖新闻》报道，日本农业生物资源研究所的门胁光一等人通过基因重组技术，开发出了一种含有恢复疲劳功能的化学物质辅酶Q10的新型大米。辅酶Q10能促进人体细胞快速而有效地产生能量，同时也保护线粒体不受自由基的侵害。但是随着年龄的增加，人体内合成的辅酶Q10含量会不断地减少。大米和小麦里虽含有构造类似的辅酶Q9，但并不含有对人体有益的Q10。门胁等人将生成辅酶10的酵素基因从细菌中取出，导人大米的基因之中。     

敌敌畏及1株高效降解菌对草莓叶际微生物群落结构的影响

为明确敌敌畏及1株高效降解菌(类球红细菌)对草莓叶际微生物群落结构的影响,采用非培养研究方法(PLFA法)对其进行了研究.结果表明:喷敌敌畏处理第1天PLFA含量显著下降,低于对照和其他处理;第3天PLFA含量显著上升,高于对照与其他处理;第7天PLFA含量与处理当天(0 d)无显著差异.喷敌敌畏加类球红细菌处理,第1天和第3天PLFA含量均显著高于对照,第7天PLFA含量与处理当天(0 d)无显著差异.PLFA含量主成分分析表明,喷敌敌畏处理与喷敌敌畏后再喷类球红细菌、喷水处理及对照之间均相距较远.敌敌畏对草莓叶际微生物群落结构产生一定的影响,类球红细菌通过降解作用改变敌敌畏的浓度而影响叶际微生物PLFA含量,高浓度的敌敌畏抑制了微生物的生长,使PLFA含量显著降低,而低浓度敌敌畏促进微生物的生长,使PLFA含量显著升高.     

RP-HPLC法测定辅酶Q_（10）含量及其透光率的日变化分析（英文）

[目的]建立高效液相色谱法测定辅酶Q10的含量。[方法]采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定辅酶Q10的含量,并采用紫外分光光度计法对其透光率的日变化进行了分析。[结果]辅酶Q10在RP-HPLC操作条件下分离度良好,在40～300μg/ml范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9999）;最低检测限为0.4ng;平均回收率为97.44%（n=3）。RP-HPLC方法的系统适应性良好,回收率和精密度均满足分析要求。[结论]该方法简便、准确、重现性好,可用于辅酶Q10的质量控制,但应注意避光操作。     

天冬氨酸族氨基酸对沼泽红假单胞菌J001辅酶Q_(10)合成的影响(英文)

[目的]探讨天冬氨酸族氨基酸对沼泽红假单胞菌J001辅酶Q10合成的影响。[方法]通过在对数生长末期添加天冬氨酸族氨基酸来考察了其对沼泽红假单胞菌辅酶Q10合成的影响,以期为微生物发酵法获得大批量天然辅酶Q10的培养基优化和菌种的遗传改造提供依据。[结果]蛋氨酸的添加量与辅酶Q10合成呈正相关,蛋氨酸添加量达125mg/L时,辅酶Q10产量达最大值23.8mg/L,比对照提高20.2%;添加低浓度的赖氨酸、苏氨酸、异亮氨酸对辅酶Q10的合成没有影响,但高浓度(赖氨酸浓度达500mg/L以上、苏氨酸400mg/L以上、异亮氨酸400mg/L以上)时,辅酶Q10的合成受到抑制,说明该菌株天冬氨酸激酶受到赖氨酸、苏氨酸以及异亮氨酸的反馈抑制或阻遏而不利于蛋氨酸的合成,进而减少辅酶Q10的产量。[结论]可通过菌种遗传改造获得抗赖氨酸、苏氨酸以及异亮氨酸结构类似物的反馈调节型和赖氨酸、苏氨酸以及异亮氨酸营养缺陷型突变体来提高辅酶Q10的产量。     

天冬氨酸族氨基酸对沼泽红假单胞菌J001辅酶Q10合成的影响（英文）

[目的]探讨天冬氨酸族氨基酸对沼泽红假单胞菌J001辅酶Q10合成的影响。[方法]通过在对数生长末期添加天冬氨酸族氨基酸来考察了其对沼泽红假单胞菌辅酶Q10合成的影响,以期为微生物发酵法获得大批量天然辅酶Q10的培养基优化和菌种的遗传改造提供依据。[结果]蛋氨酸的添加量与辅酶Q10合成呈正相关,蛋氨酸添加量达125mg/L时,辅酶Q10产量达最大值23.8mg/L,比对照提高20.2%;添加低浓度的赖氨酸、苏氨酸、异亮氨酸对辅酶Q10的合成没有影响,但高浓度(赖氨酸浓度达500mg/L以上、苏氨酸400mg/L以上、异亮氨酸400mg/L以上)时,辅酶Q10的合成受到抑制,说明该菌株天冬氨酸激酶受到赖氨酸、苏氨酸以及异亮氨酸的反馈抑制或阻遏而不利于蛋氨酸的合成,进而减少辅酶Q10的产量。[结论]可通过菌种遗传改造获得抗赖氨酸、苏氨酸以及异亮氨酸结构类似物的反馈调节型和赖氨酸、苏氨酸以及异亮氨酸营养缺陷型突变体来提高辅酶Q10的产量。     

几个烟草品种辅酶Q10含量的比较

研究了6个烟草品种(中烟98、中烟99、中烟100、心叶烟、NC89、K326)的叶片和根系中的辅酶Q10含量.结果表明:在烟草幼苗叶片中,以中烟98辅酶Q10含量最高,NC89 次之,心叶烟最低;在烟草幼苗根系中,以中烟99辅酶Q10含量最高,NC89和心叶烟次之,K326最低;中烟99、中烟100、K326、NC89、心叶烟等5个品种的根系辅酶Q10 含量均明显高于其叶片中辅酶Q10的含量.     

天冬氨酸族氨基酸对沼泽红假单胞菌J001辅酶Q10合成的影响

[目的]探讨天冬氨酸族氨基酸对沼泽红假单胞菌J001辅酶Q10合成的影响.[方法]通过在对数生长末期添加天冬氨酸族氨基酸来考察了其对沼泽红假单胞菌辅酶Q10合成的影响,以期为微生物发酵法获得大批量天然辅酶Q10的培养基优化和菌种的遗传改造提供依据.[结果]蛋氨酸的添加量与辅酶Q10合成呈正相关,蛋氨酸添加量达125 mg/L时,辅酶Q10产量达最大值23.8 mg/L,比对照提高20.2%;添加低浓度的赖氨酸、苏氨酸、异亮氨酸对辅酶Q10的合成没有影响,但高浓度(赖氨酸浓度达500 mg/L以上、苏氨酸400 mg/L以上、异亮氨酸400 mg/L以上)时,辅酶Q10的合成受到抑制,说明该菌株天冬氨酸激酶受到赖氨酸、苏氨酸以及异亮氨酸的反馈抑制或阻遏而不利于蛋氨酸的合成,进而减少辅酶Q10的产量.[结论]可通过菌种遗传改造获得抗赖氨酸、苏氨酸以及异亮氨酸结构类似物的反馈调节型和赖氨酸、苏氨酸以及异亮氨酸营养缺陷型突变体来提高辅酶Q10的产量.     

RP-HPLC法测定辅酶Q10含量及其透光率的日变化分析

[目的]建立高效液相色谱法测定辅酶Q10的含量。[方法]采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定辅酶Q10的含量,并采用紫外分光光度计法对其透光率的日变化进行了分析。[结果]辅酶Q10在RP-HPLC操作条件下分离度良好,在40~300μg/ml范围内与峰面积线性关系良好（r=0.999 9）;最低检测限为0.4 ng;平均回收率为97.44%（n=3）。RP-HPLC方法的系统适应性良好,回收率和精密度均满足分析要求。[结论]该方法简便、准确、重现性好,可用于辅酶Q10的质量控制,但应注意避光操作。     

富含辅酶Q10红曲固态发酵工艺的优化

【目的】以籼米为原料,优化富含辅酶Q10红曲的固态发酵工艺。【方法】采用Box-Benhnken试验设计和响应面分析法,以影响红曲色价和辅酶Q10含量的4个关键固态发酵条件(初始pH、接种量、籼米初始含水率、亚油酸添加量)为自变量,以红曲色价和辅酶Q10含量为响应值对上述4个关键发酵条件参数进行优化,并在此基础上探讨红曲分段控温发酵策略。【结果】初始pH、接种量、亚油酸添加量对红曲色价和辅酶Q10影响显著(P0.05),而籼米初始含水率对红曲色价和辅酶Q10影响不显著(P0.05),优化确定的红曲最佳发酵条件为:初始pH6.0,红曲霉接种量12%,籼米初始含水率50%,亚油酸添加量64mg/kg。辅酶Q10红曲固态发酵的温度控制策略为:30℃6d→34℃5d→28℃4d。【结论】在最佳发酵工艺条件下,所制红曲的色价、辅酶Q10含量分别为4 521.69U/g和387.23mg/kg,较优化前分别提高38.10%和80.01%。     

类球红细菌对草莓敌敌畏残留的降解效果

测定了不同浓度类球红细菌对大棚草莓上敌敌畏的降解效果.结果表明,类球红细菌能有效降低草莓上敌敌畏的残留量;缩短草莓上敌敌畏的安全间隔期,使用适宜浓度为1×108 CFU/mL.在此浓度下,草莓上喷施稀释1 000倍的77.5％敌敌畏乳油,类球红细菌第1天的降解率超过50％,第7天达到97％,残留量仅为0.19 mg/kg,低于国家标准(GB 2763-2005)规定的蔬菜水果中敌敌畏小于0.2 mg/kg的标准,对照组为1.76 mg/kg,高于国家标准8～10倍.     

碱蓬中辅酶Q10的提取分离

[目的]为碱蓬中辅酶Q10的提取分离和工业化生产提供科学依据。[方法]用10%KOH-甲醇的醇碱皂化法从碱蓬中提取辅酶Q10,并用硅胶柱层析,经无水乙醇重结晶后,得黄色结晶。用熔点测定法和薄层层析法对黄色结晶进行定性鉴定,用HPLC法和Craven氏颜色试验法对其进行定量测定。[结果]无水乙醇重结晶后得到的晶体,其熔点为48.6~50.3℃,在碱性条件下,加入氰基乙酸乙脂后,生成了蓝色化合物,证明该结晶是辅酶Q10。用Craven氏颜色试验法测得碱蓬干粉中辅酶Q10的含量约为63.3μg/g,精制辅酶Q10结晶的纯度为93.2%。用HPLC法测得的辅酶Q10含量约为63.1μg/g。两种定量分析方法存在良好的线性关系。[结论]碱蓬是获取辅酶Q10的良好材料,有很好的开发前景。     

诱变育种推理选育类球红细菌CoQ10高产菌株正突变库的研究

以类球红细菌NM-FZ-47为出发菌株,采用紫外线和NTG2种诱变,利用叠氮钠、对羟基苯甲酸、罗红霉素及卡那霉素等抗性筛选因子,实现快速推理选育辅酶Q_(10)高产菌株,成功构建了2个正突变库,并从库中筛选出产量提高15%以上的6株辅酶Q_(10)突变株UV-LH-37、UV-NaN3-44、NTG-LH-28、NTG-NaN3-17、NTG-PHB-54、NTG-LN-67,作为进一步基因组改组育种的出发菌株。     

国际传真

<正>日本研发出“恢复疲劳大米”据日本《读卖新闻》报道,日本农业生物资源研究所的门胁光一等人通过基因重组技术,开发出了一种含有恢复疲劳功能的化学物质辅酶Q10的新型大米。辅酶Q10能促进人体细胞快速而有效地产生能量,同时也保护腺体不受自由基的侵害。但是随着年龄的增加,人体内合成的辅酶Q10含量会不断地减少。大米和小麦里虽含有构造类似的辅酶Q9,但并不含有对人体有益的     

NC89烟草悬浮细胞生产辅酶Q10的条件优化

研究了NC89烟草悬浮细胞的最佳培养方案,为进一步提高辅酶Q10的产量提供理论依据.通过单因素试验和正交试验考察了培养基种类、蔗糖浓度、接种量、转速、pH值和装液量对烟草细胞生长及辅酶Q10合成的影响.结果表明:接种量对细胞的生长及辅酶Q10合成的影响作用极显著;蔗糖浓度对二者的影响均不显著,优选蔗糖浓度为20g·L-1;装液量对辅酶Q10合成的作用显著,而对细胞生长作用不显著;优选转速为110r·min<-1>,pH值为6.2.可见,适于NC89烟草细胞生长及辅酶Q<,10>合成的优选培养条件为White基本培养基,附加蔗糖20g·L-1,装液量为20mL(100mL三角瓶),接种量75g·L-1,初始pH值为6.2,摇床转速为110r·min-1.在该条件下细胞产量和辅酶Q10含量分别为16.653g·L-1和14.780mg·L-1.