化学杀虫剂对绿僵菌胞外蛋白酶和几丁质酶活性的影响

研究了几种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)胞外蛋白酶和几丁质酶活性的影响。结果表明,化学杀虫剂对绿僵菌的胞外蛋白酶和几丁质酶活性影响较大,供试的12株金龟子绿僵菌大部分菌株的胞外蛋白酶和几丁质酶活性均明显降低,仅有Ma202、Ma207菌株的胞外蛋白酶和几丁质酶活性略有提高。     

金龟子绿僵菌与杀虫剂对黄曲条跳甲联合毒力测定和保护酶活性影响

用浓度为1.0×10⁸个孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421分别与不同浓度阿维菌素、苏云金杆菌、鱼藤酮和印楝素混配处理黄曲条跳甲，室内进行了联合毒力测定和3种保护酶（SOD、POD和CAT）活性的测定。结果显示，金龟子绿僵菌与低浓度阿维菌素、苏云金杆菌和鱼藤酮混合处理黄曲条跳甲都有增效作用，其中1.0×10⁸个孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421与浓度为1.92×10⁸ IU/L苏云金杆菌混配效果最好，协同毒力指数达165.0，其次为与浓度0.01 mg/L阿维菌素混配，协同毒力指数为96.0；保护酶活性测定结果显示，120 h内各处理酶活性均出现一定规律变化，1.0×10⁸个孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421与1.92×10⁸ IU/L苏云金杆菌混配处理后3种酶活性最大值均高于其他所有混合处理中最大值，SOD、POD和CAT活性分别在混配后24、120和24 h达到高峰，且显著高于对照，即SOD活性值为190.270 U/g鲜重、POD活性值为1573.333 U/g鲜重、...     

金龟子绿僵菌对小菜蛾的室内毒力测定

[目的]采用浸叶法和浸虫法测定金龟子绿僵菌在不同浓度下对小菜蛾的室内毒力。[方法]以小菜蛾3龄幼虫为供试虫源,用浸叶法和浸虫法研究金龟子绿僵菌在2种侵染途径下对小菜蛾的室内毒力,并对感染反应的时间与剂量效应作综合分析。[结果]在2种方法处理下。10^5～10^9个孢子／ml浓度的金龟子绿僵菌孢悬液对小菜蛾均有杀伤作用,同一浓度下浸虫法优于浸叶法。在浸叶法中,金龟子绿僵菌对小菜蛾第3天的LD。对数剂量为15．48,第8天的加。对数剂量为11．93;在浸虫法中,金龟子绿僵菌对小菜蛾第3天的凹。对数剂量为9．25,第8天的蛾．对数剂量为8．73。10^9个孢子／ml金龟子绿僵菌处理的小菜蛾在第8天校正死亡率达到92．86％,其￡％为1．95d。[结论]该研究为田间应用金龟子绿僵菌防治小菜蛾提供理论依据。     

6种杀菌剂对金龟子绿僵菌孢子萌发的影响

测定了6种杀菌剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发的抑制作用。结果表明,不同杀菌剂对金龟子绿僵菌的抑制作用不同,且随着杀菌剂浓度的下降而减小。其中以腈菌唑的抑制效果最弱,除Ma103菌株外,对其他菌株抑制率均低于35%。代森锌对Ma202,Ma201和Ma203菌株的平均抑制率都较小。其他几种杀菌剂都明显抑制绿僵菌大部分菌株分生孢子的萌发,特别是百菌清和甲基托布津对Ma103,Ma205,Ma207和Ma208菌株的平均抑制率都为100%。2种药剂也强烈抑制其他菌株分生孢子的萌发。因此,应该尽量避免百菌清和甲基托布津与金龟子绿僵菌同时同地使用,否则会明显影响金龟子绿僵菌制剂的应用效果。     

椰心叶甲高毒力绿僵菌菌株筛选及分子鉴定

为获得高毒力绿僵菌菌株用于防治棕榈科植物害虫椰心叶甲的菌剂,从椰心叶甲为害严重的地区采集椰心叶甲僵虫,分离到16株疑似绿僵菌菌株。测定上述菌株对椰心叶甲成虫和四龄幼虫的致病力,从中筛选2株毒力较高的菌株CM1601和HK1304。CM1601对成虫和四龄幼虫的LT50分别为4.1、3.9 d,HK1304为4.4、4.2 d。经进一步毒力试验发现,菌株CM1601和HK1304对椰心叶甲的毒性随着孢子浓度的增加而上升,当浓度分别上升到1.0×10~8、2.5×10~8孢子/mL时,菌株对椰心叶甲致病力达到峰值。通过对菌株CM1601和HK1304的ITS序列及系统发育树分析,鉴定两菌株分别为金龟子绿僵菌和金龟子绿僵菌蝗变种。研究筛选得到的高致病力绿僵菌菌株为椰心叶甲的生物防治提供了基础材料。     

金龟子绿僵菌对马铃薯田小云斑鳃金龟子的生物防治潜力评价

小云斑鳃金龟(Polyphylla laticolla laticollis Lewis)是近年来云南省危害马铃薯块茎的地下害虫之一,发生危害严重。本试验在室内测定了从棕色金龟子(Holotrichia titanis Reitter)幼虫体上分离的金龟子绿僵菌[Metarhizium anisopliaeMetschnikoff (Sorokin)] MA0107对小云斑鳃金龟(P. laticolla laticollis Lewis)幼虫的毒力,并用时间-剂量-死亡率模型进行了模拟分析,同时对该菌种在土壤中的宿存能力进行了测定。结果表明,该绿僵菌菌株对小云斑鳃金龟幼虫具有较强的毒力,剂量效应参数为0.74;该绿僵菌分生孢子在土壤中的宿存量随接种后时间的延续而下降,每克土壤中的成菌落数的对数与处理后的天数成线性相关关系,其有效杀虫成分的分生孢子在土中的半衰期为17天。由此在马铃薯整个生育期内,在土壤中施放该菌种防治小云斑鳃金龟幼虫时,放菌次数应为2～3次。     

金龟子绿僵菌CQMa421与4种新烟碱类农药混配对西花蓟马毒力的增效作用

采用叶管药膜法测定了金龟子绿僵菌CQMa421与新烟碱类农药噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫脒按照有效成分比(1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1)混配对西花蓟马的室内毒力。结果表明，4种新烟碱类杀虫剂的24和48 h毒力为噻虫胺>噻虫嗪>啶虫脒>吡虫啉，均高于金龟子绿僵菌CQMa421。绿僵菌与噻虫嗪和吡虫啉分别以1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1的比例混配均具有显著的增效作用，绿僵菌与噻虫胺和啶虫脒以9∶1、7∶3的比例混配亦具有良好的增效作用。绿僵菌与新烟碱类农药混配有助于提高对西花蓟马的室内毒力，为治理西花蓟马对新烟碱类杀虫剂抗性提供理论依据。     

4种微生物杀虫剂对甜菜夜蛾的室内毒力及田间防效评价

本研究采用浸渍法测定4种微生物杀虫剂对甜菜夜蛾的室内毒力,并进行防治大葱甜菜夜蛾的田间药效试验。室内测定结果表明,4种微生物杀虫剂对甜菜夜蛾的毒力顺序为:甜菜夜蛾核型多角体病毒金龟子绿僵菌CQMa421苏云金杆菌球孢白僵菌,其中甜菜夜蛾核型多角体病毒、金龟子绿僵菌CQMa421对甜菜夜蛾的室内毒力较高,LC_(50)值分别为11. 145、128. 249 mg/L。田间试验结果表明,666. 7m~280亿孢子/毫升金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂用量50、60 m L,16 000 IU/mg苏云金杆菌可湿性粉剂用量80、100 g,300亿PIB/克甜菜夜蛾核型多角体病毒水分散粒剂用量3. 5、5. 0 g,药后10 d的校正防效均可达90%以上,持效性较好。     

金龟子绿僵菌致病的分子机理研究进展

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)是一类重要的昆虫病原真菌,在害虫生物防治中起着重要作用.与化学农药相比,昆虫病原真菌开发的真菌杀虫剂作用时间持久、无环境污染、对非靶标生物安全,但存在致死时间长,杀虫效率低,防效不稳定等缺点,严重阻碍了真菌杀虫剂的广泛应用,为解决这一问题,从分子水平揭示昆虫病原真菌的致病机理尤为重要.从分子水平阐述了金龟子绿僵菌对寄主的识别与粘附、绿僵菌侵染寄主过程中附着胞的形成、绿僵菌对寄主体壁的穿透机制和绿僵菌进入寄主血淋巴后的适应机制.     

金龟子绿僵菌生物学特性及其对草地贪夜蛾的侵染

【目的】探究金龟子绿僵菌（Metarhizium anisopliae,ZKJGL）生长发育所需要的营养条件以及对草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）幼虫的侵染力,为草地贪夜蛾生物防治研究以及生防菌剂的开发提供参考。【方法】室内测定温度、光周期、pH以及氮源、碳源对金龟子绿僵菌菌株ZKJGL菌丝生长和产孢的影响,并测定其对草地贪夜蛾2龄幼虫的活性。【结果】金龟子绿僵菌ZKJGL菌丝生长和产孢的适宜温度为20～25℃、pH=7、全黑暗条件,对碳源和氮源要求不高,麦芽糖、酵母膏或蛋白胨的利用率较好。孢子浓度为5×10⁸cfu/mL的金龟子绿僵菌ZKJGL菌株侵染草地贪夜蛾后累计死亡率达77.78%,LC₅₀为4.406×10⁶cfu/mL,LT₅₀少于4 d。【结论】金龟子绿僵菌ZKJGL易于培养,对营养条件、光照要求不高,对草地贪夜蛾的幼虫具有较强的致病力,可作为优良菌株进一步研发生物农药应用于防治草地贪夜蛾。     

金龟子绿僵菌CQMa421与其他药剂混用防治玉米草地贪夜蛾试验初报

[目的]探究真菌杀虫剂金龟子绿僵菌CQMa421与其他药剂混用对玉米草地贪夜蛾的防治效果.[方法]试验共设5个处理组,分别为金龟子绿僵菌CQMa42180mL、金龟子绿僵菌CQMa42130mL+5.7％甲维盐7g(-30％)、金龟子绿僵菌CQMa42115mL+5.7％甲维盐9g(-10％)、5.7％甲维盐10g和空...     

金龟子绿僵菌对果蝇的生防效果

为了筛选出强致病力的绿僵菌资源,采用单因素试验测定了云南不同生境来源金龟子绿僵菌菌株对黑腹果蝇的致病力。结果表明:来源于不同生境的6株金龟子绿僵菌菌株对果蝇均有致病力,但其致病力大小具有较大差异,半数致死时间(LT50)为3~6d。其中,来源于香格里拉、兰坪和楚雄的菌株其致病力较强,尤以菌株MAX-2的致病力最强,其LT50为3d,具有较大的推广应用潜力。构建了以黑腹果蝇为靶标昆虫的强致病力金龟子绿僵菌资源筛选模式。     

绿僵菌ACCC30104菌株的分子鉴定

通过测定原定名为金龟子绿僵菌小孢变种的ACCC30104菌株的ITS1-5.8S-ITS2 rDNA区域序列,为该菌株正确归属提供了重要的分子依据.依据形态学和分子生物学的证据可将该菌株重新鉴定为金龟子绿僵菌鳞鳃金龟变种.     

高毒力杀蝗绿僵菌的紫外线诱变选育

以金龟子绿僵菌M105复壮菌株M1053为出发菌株,通过紫外线诱变选育,获得Pr1酶活是出发菌株1.36倍的诱变株M105-52。经测定,诱变株的遗传性能稳定,紫外线抗性和杀蝗毒力均有显著提高。     

金龟子绿僵菌选择性培养基的筛选

通过对不同培养基配方、不同抑菌剂及不同浓度条件下的金龟子绿僵菌及几种杂菌的生长速率和成菌落数的测定,筛选出对金龟子绿僵菌生长有利而对其他杂菌起明显抑制作用的选择性培养基.     

两种虫生真菌对棉铃虫的致病力试验

以两种虫生真菌对棉铃虫进行了室内毒力测定,结果表明:球孢白僵菌种以浓度较低的5S031处理对棉铃虫的校正死亡率和僵虫率最高,分别达到82.7%和71.7%,并和其他处理之间差异显著;金龟子绿僵菌的三个处理均比白僵菌的校正死亡率和僵虫率低.     

绿僵菌菌株的分离及对椰心叶甲的毒力测定

采用土壤分离法和僵虫分离法,获得12株不同来源的绿僵菌。通过对这12株绿僵菌采用2级筛选法进行室内毒力测定,最终确定LA3菌株对椰心叶甲的毒力相对最高,为防治椰心叶甲的优势种。     

绿僵菌对茄二十八星瓢虫的毒力测定

用培养的金龟子绿僵菌对二十八星瓢虫幼虫进行毒力试验,并对死亡的成虫取样、制片、观察,结果是孢子浓度为1×108孢子/ml时,绿僵菌对不同龄期幼虫的毒杀作用明显,而成虫对高浓度绿僵菌更敏感。组织切片观察表明,绿僵菌主要通过孢子接触寄主表皮来感染成虫,感染后的虫体出现一系列组织病理变化,菌丝侵染各种组织器官,肌肉组织、中肠、马氏管、消化道等遭到破坏,脂肪组织崩解,虫体内有大量菌丝和孢子。     

金龟子绿僵菌中苦马豆素的分离与鉴定

探求从金龟子绿僵菌中分离苦马豆素的有效方法,提高苦马豆素产量及降低苦马豆素生产成本。采用超声波处理、过滤、离心、索氏抽提、萃取、离子交换色谱、吸附柱色谱及减压升华等方法,从菌丝体中分离苦马豆素,以薄层色谱、气相色谱及熔点测定法对分离产物进行鉴定分析,气相色谱法测定金龟子绿僵菌干燥菌丝体中苦马豆素的含量。结果分离到白色针状结晶3.15 mg,经薄层色谱、熔点测定及气相色谱鉴定分析,确定分离到的结晶为苦马豆素,提取率为21μg/g。气相色谱法测定金龟子绿僵菌干燥菌丝体中苦马豆素的含量为2.26 mg/g。     

金龟子绿僵菌CQMa4及球孢白僵菌对茶叶毛股沟臀叶甲的田间防治效果

为茶叶生产中毛股沟臀叶甲的防治提供参考,采用不同剂量的400亿个孢子/g球孢白僵菌水分散粒剂和80亿孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂进行田间试验,评价球孢白僵菌和金龟子绿僵菌CQMa421对毛股沟臀叶甲的田间防治效果。结果表明：球孢白僵菌和金龟子绿僵菌CQMa421均对毛股沟臀叶甲有一定防治效果,其防效为83.94%～90.63%。其中,140 g/667m²的金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂的防效最高,为90.63%,推荐在4月下旬和5月上旬,成虫为羽化前施用。