一种猪圆环病毒Ⅱ型ELISA检测试剂盒的临床应用

本研究通过采用猪圆环病毒2-dCap-ELISA抗体检测试剂盒,对河北、山西两地共441份猪血清样品进行检测发现：河北保定地区349份血清样品中阳性样品为306份,感染率为87.68%;山西地区92份血清样品中阳性样品为77份,感染率为83.7%。与标准的间接免疫荧光检测法进行比较,发现相对于标准IFA,该ELISA检测试剂盒的诊断敏感性为95.48%(383/398),诊断特异性为93.02%(40/43),总符合率为95.24%。由此表明该试剂盒是一种简便、快速、灵敏、适于大规模临床应用的猪圆环病毒2型抗体检测试剂盒。     

河北部分地区猪圆环病毒2型ELISA检测与分析

为分析河北部分地区不同猪场、不同阶段猪圆环病毒病2型(PCV-2)的感染情况。采集血清样品248份,采用PCV抗体诊断试剂盒(PCV-2-ELISA)检测其抗体水平及其阳性率。结果显示,采集的248份血清样品中,PCV-2抗体阳性216份,阳性率为87.1%,其中断奶仔猪PCV-2抗体阳性率为93.9%,后备猪PCV-2抗体阳性率88.0%,经产母猪PCV-2抗体阳性率84.1%;1～3胎母猪PCV-2抗体阳性率最高,分别为94.1%、91.3%、90.9%;4～6胎母猪PCV-2抗体阳性率分别为87.9%、84.2%、75.0%。该地区PCV-2感染率较高,免疫效果较差,该研究为该地区的猪PCV-2的防控提供研究基础。     

猪圆环病毒2型免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测试剂盒的研制及应用

本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验（Immunoperoxidase monolayer assay,IPMA）,用于猪圆环病毒2型血清抗体检测,通过对IPMA反应条件的优化,组装了诊断试剂盒。研究结果表明,用IPMA检测猪圆环病毒2型人工感染猪血清,于感染后3周抗体阳转,第3周～10周抗体阳性检出率为92.8%（52/56）,对照组猪血清抗体检测均为阴性（33/33）。试剂盒在-20℃稳定保存18个月与其他几种猪病毒参考血清无交叉反应,与用重组蛋白抗原建立的rcELISA符合率为89.2%。对来自黑龙江、吉林、河北、上海、内蒙古、云南、江西等地猪场健康成年猪血清480份和发病猪血清424份进行了检测,抗体检出率分别为91.7%和79.2%,表明我国猪群中猪圆环病毒2型污染相当严重。该试剂盒的研制为我国PCV2流行病学调查和疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。     

猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用

以大肠杆菌原核表达系统表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白为抗原,建立猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法,优化ELISA反应条件,研制猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒。与商品化试剂盒相比,该检测试剂盒敏感性、特异性和符合率分别为95.12%、92.86%和94.55%;同时与猪圆环病毒1型（PCV1）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）等多种病毒阳性血清无交叉反应。试剂盒具有较好的重复性,在-20 ℃至少可保存1年以上,将其应用于临床血清样品的检测,结果安徽、广东、广西采样猪场的PCV2阳性率分别为100%、48.39%、100%。     

陕西省部分猪场5种疫病抗体及病原的检测

为调查2019年陕西省规模化猪场中口蹄疫(FMD)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪瘟(CSF)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病(PR)的免疫状况及病原感染情况,采用间接ELISA对送检的20 233份血清样品进行抗体检测,采用PCR/RT-PCR方法对送检的1 633份病料样品进行病原检测。结果表明,检测口蹄疫抗体的5 154份血清样品中(4 089份免疫血清,1 065份未免疫血清),免疫抗体阳性率为76.69%,感染率为42.25%;检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的6 259份血清样品中(5 516份免疫血清,743份未免疫血清),免疫抗体阳性率为85.06%,感染率为28.26%;检测猪瘟抗体的5 165份血清样品中(4 881份免疫血清,284份未免疫血清),免疫抗体阳性率为88.10%,感染率为47.89%;检测伪狂犬病病毒gB抗体的3 142份血清样品中(2 810份免疫血清,332份未免疫血清),免疫抗体阳性率为84.23%,感染率为21.69%;检测猪圆环病毒2型抗体的513份血清样品中(420份免疫血清,93份未免疫血清),免疫抗体阳性率为95%,感染率为88.17%。检测猪瘟病毒的328份病料中,阳性率为9.45%;检测猪圆环病毒2型的218份病料中,阳性率为14.23%;检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的654份病料中,阳性率为10.86%;检测伪狂犬病病毒的144份病料中,阳性率为2.78%;检测口蹄疫病毒的226份病料中,阳性率为0.44%。通过对5种常见病原和抗体的检测,为陕西省猪场常见疫病的防控提供了基础资料。     

合肥地区猪圆环病毒Ⅱ型感染的血清学调查

采用酶联免疫吸附试验对合肥地区6个规模化猪场的320份血清样品进行猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)血清抗体的检测。结果显示:(1)6个猪场均有抗体阳性猪存在,阳性感染率分别为12.50%、8.89%、24.00%、7.69%、12.00%、13.33。(2)被检猪场中种猪的PCV2抗体阳性率为18.24%,总阳性率为13.75%。     

规模猪场主要疫病抗体水平检测及分析

2010年10月,笔者在宁海县某规模化猪场对种猪、肉猪群随机抽检血清样品179份,进行了猪瘟（HC）、口蹄疫（FMD）、蓝耳病（PRRS）和猪圆环病毒2型（PCV2）等疫病的抗体检测,现将检测结果报告如下。 1材料和方法 1．1检测试剂盒猪瘟正向血凝诊断试剂、猪口蹄疫0型正向血凝诊断试剂均购自中国农科院兰州兽医研究所;蓝耳病抗体检测试剂盒为法国LSI公司生产;猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒为武汉科前动物生物制品有限责任公司生产。     

PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及其应用

建立了一种检测猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验法（IPMA），并组装成PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒。对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验，并与国外IDEXX ELISA试剂盒进行了比较。结果显示，用该试剂盒检测PRRSV人工接种猪血清样品，第1周抗体阳性检出率为50％，从第2周起抗体阳性检出率均为100％，而对照组猪血清抗体检测均为阴性。该试剂盒重复性好，-20℃保存18个月稳定，与其他病毒参考血清无交叉反应，与国外IDEXX ELISA试剂盒的符合率为83．3%。用该试剂盒对采自黑龙江、吉林、辽宁、河北、上海等地13个猪场的520份正常猪血清样品进行了抗体检测，结果，4个猪场阳性率高达90％以上，仅有2个猪场为阴性，其余猪场阳性率为10％～57%。     

福建莆田地区猪圆环病毒病的血清学调查

为了解莆田地区猪圆环病毒病的流行状况,2013—2014年间在莆田笏石、埭头、灵川、仙游地区等部分养猪场(户)共采集了322份未经PCV2疫苗免疫的猪血清样本,采用ELISA(酶联免疫吸附试验)方法对送检血清样品进行PCV2抗体水平检测。结果表明,322份被检血清中检出117份阳性血清,总阳性率为36.33%,其中以6~12周龄的小猪感染率最高,阳性率为55.56%。说明猪圆环病毒病在莆田市多数猪场中存在。     

辽宁省猪圆环病毒2型血清学调查与分析

为了解辽宁省猪圆环病毒2型（PCV2）感染情况，对来自辽宁省14个市的59个规模化商品猪场的734份血清、17个种猪场的329份血清、45户农村散养户的146份血清，采用ELISA（酶联免疫吸附试验）方法进行PCV2抗体检测。结果显示，59个规模化猪场中有51个为阳性，阳性率86.4%（51/59），其734份样品中有351份为阳性，样品阳性率为47.8%（351/734）；17个种猪场中有15个为阳性，阳性率为88.2%（15/17），其种猪群样品阳性率为47.6%（81/170），仔猪群样品阳性率为29.6%（47/159）；45户散养户中有23户为阳性，阳性率为51.1%（23/45），检测的146份样品有58份阳性，样品阳性率39.7%（58/146）。可见，PCV2在辽宁省各地的感染已经很普遍，并且种猪群感染率高于仔猪群，规模场的感染率高于农村散养户。     

绵羊肺炎霉形体的血清学调查

本试验旨在了解绵羊肺炎霉形体在山西省雁北地区的流行状况,为该病的预防和控制提供科学依据,对雁北地区的大同市、朔州市和忻州市的12个县,随机抽取96份血清样本,用间接血凝试验进行血清学检测。共检出37份阳性血清,绵羊肺炎霉形体的总体平均阳性为38.54%,其中忻州市阳性率最高,为44%,朔州市最低,为25%;县(区)阳性率以大同市浑源县最高,达66.7%;饲养方式、环境卫生、动物年龄等对本病的感染均有影响,其中舍饲羊阳性率达50%,高于总体平均阳性率和半舍饲阳性率。结果提示,山西省雁北地区绵羊肺炎霉形体阳性率较高,通风不良和环境卫生较差为主要诱发因素。     

冀西北地区绵羊螨虫感染情况调查研究

为摸清冀西北地区绵羊螨虫的感染情况,选取冀西北地区坝上和坝下几个具有代表性的养殖场,通过临床症状、显微镜检查和统计学分析对绵羊感染螨虫的发病情况、不同年龄、不同季节感染情况进行试验研究。结果表明:冀西北地区绵羊螨虫阳性率44%,不同年龄、不同季节的绵羊螨虫阳性率均具有显著性差异(P<0.05)。     

牛病毒性腹泻病毒血清抗体检测

采用Svanova公司牛病毒性腹泻病毒血清抗体ELISA抗体检测试剂盒对采自新疆10个不同地区的875份牛血清进行了牛病毒性腹泻病毒血清抗体检测,共检出抗体阳性血清759份,最高阳性率为100％,最低为55.0％,平均为86.7％.检测结果表明该病已在新疆普遍存在,感染没有明确的地域分布规律.根据ELISA检测结果,从...     

广东省猪圆环病毒2型感染的血清学调查

为了解广东省猪群中猪圆环病毒2型(PCV-2)的感染情况,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对广东部分地区的764份不同年龄段的猪血清进行PCV-2抗体检测,对PCV-2与猪猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)混合感染情况做了进一步调查.结果表明,PCV-2抗体检测平均阳性率为61.91％(47...     

河北省唐山市奶犊牛病毒性腹泻流行病学调查

试验旨在掌握河北省唐山市13个县（市、区）奶牛场奶犊牛病毒性腹泻病原的流行状况,有效防控奶犊牛腹泻。采集唐山市不同地区38个奶牛场腹泻犊牛粪便样品788份,提取腹泻粪便样品中的基因组RNA。根据GenBank公布的牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）E2基因、牛轮状病毒（Bovine rotavirus,BRV）VP6基因、牛冠状病毒（Bovine coronavirus,BCV）N基因序列,利用Primer Premier 5.0软件分别设计特异性引物,采用PCR方法检测粪便样品中这3种基因,利用Excel 2007对不同地区、不同季节和混合感染病原检测结果进行汇总分析。在采样范围内的788份犊牛腹泻粪便样品中,BVDV、BRV和BCV阳性检出率分别为29.82%（235/788）、29.44%（232/788）和18.02%（142/788）;在所有被检地区,滦南县BVDV感染率最高,阳性检出率为45.38%（59/130）,汉沽区BRV和BCV感染率最高,阳性检出率分别为55.00%（22/40）和37.50%（15/40）;从采样季节来看,春季、夏季和秋季BRV感染率最高,阳性检出率分别为27.71%（46/166）、39.58%（114/288）和19.89%（39/196）,冬季则以BVDV感染为主,阳性检出率为52.17%（72/138）;从混合感染情况来看,以BRV＋BCV二重混合感染为主,感染率为8.37%（66/788）。河北省唐山市各地区腹泻犊牛群中均存在BVDV、BRV和BCV感染,以BVDV、BRV单一感染为主。     

2014年－2015年湖南省规模猪场猪伪狂犬病血清学调查

为了解湖南省规模化猪场猪伪狂犬病免疫状况及猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染情况,2014年－2015年,采用随机抽样的方式,采集343个不同规模猪场血清样品7049份,采用 ELISA 方法开展PRV 抗体血清学调查.结果显示,160个规模猪场中,检测免疫猪血清3415份,PRVgB 抗体合格数为2206份,合格率仅为64．60％,表明规模猪场猪伪狂犬病免疫不确实;343个规模猪场中,210个规模猪场PRVgE 抗体阳性,场阳性率61．22％;检测猪血清样品7049份,PRVgE 抗体阳性数为 1661份,阳性率为23．56％,其中2014年 PRVgE 抗体阳性率为21．71％,2015年 PRVgE 抗体阳性率为25．17％,呈上升趋势.全省14个市州的规模猪场均存在不同程度的 PRV 感染,不同地区感染率差异明显,永州感染率最高,长沙感染率最低.不同养殖规模 PRV 的感染率不尽相同,其中,存栏数200头以下 PRV 感染率较高,存栏数500~1000头感染率较低;种猪场免疫抗体优于商品猪场,PRV 感染率较商品猪场低.结果表明,PRV 在湖南省感染普遍存在,疫苗免疫在一定程度上可以阻止临床病例,但仍然无法根除隐性感染,对规模猪场伪狂犬病采取综合防控和净化措施势在必行.     

青海省部分地区商品猪旋毛虫感染的血清学调查

以旋毛虫肌幼虫排泄分泌)抗原作为检测抗原,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法,分别对采集自青海省西宁市张氏生猪屠宰场、互助县屠宰场、平安县屠宰场的商品猪血清进行旋毛虫抗体检测,共检查猪血清1 065份.结果阳性血清为19份,阳性率为1.78％.可见在青海省商品猪中旋毛虫具有一定的感染率,动物卫生监督以及肉品检疫部...     

吉林省2006--2010年羊传染性脓疱病的流行病学调查及分析

为了解近年来羊传染性脓疱病在吉林省的流行情况,本试验采用PCR方法对2006—2010年间采自吉林省9个不同市县85个养羊户疑似羊传染性脓疱病毒（ORFV）感染的628份痂皮样本（背部、乳房、四肢以及尾根等部位皮肤）进行羊传染性脓疱病毒核酸的检测,在各市县不同年龄不同品种羊的皮肤痂皮样本中均检测到一定程度的ORFV,平均阳性率为24．36％（153／628）,其中以1～6月龄羔羊的阳性检出率最高。应用间接ELISA方法对同期采集自上述地区羊群中的2160份血清样本进行ORFV抗体检测,其中有852份呈现0RFV抗体阳性反应,平均阳性率为39．44％（852／2160）。以上结果表明,ORFV在吉林省大部分地区羊群中的感染已经非常普遍。     

贵州省部分地区H7亚型禽流感监测与分析

为了解贵州省H7亚型禽流感感染情况,采用HI试验对全省9个地区家禽血清样本进行血清抗体检测,PT-PCR方法对家禽咽-肛拭子、养禽场环境样本和野鸟粪便进行病原核酸检测。结果显示:在1570份家禽血清样本中,H7亚型禽流感血清抗体阳性率为0.45%(7/1570);在350份家禽咽-肛拭子和310份养殖场环境样本中,均未检测出H7亚型禽流感病毒核酸;在160份野鸟粪便中,有1份为H7亚型禽流感病毒核酸阳性,阳性率为0.63%(1/160)。试验提示,在贵州省养禽场中不存在H7亚型禽流感感染,但迁徙野禽中可能存在H7亚型禽流感隐性感染,应当引起重视。     

青海省牛传染性鼻气管炎及病毒性腹泻黏膜病血清学调查

从青海省互助、玛多、海晏、玉树、贵德、德令哈、共和等14个地区采集牛血清样品420份,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）调查了青海省牛传染性鼻气管炎和病毒性腹泻黏膜病的感染情况。结果在被检牛血清420份样品中,共检出阳性血清样品228份,平均阳性率为50.67%（228/420）;在被检牦牛血清180份样品中,共检出阳性血清样品1份,平均阳性率0.56%（1/180）。