GC/MS法研究猪体内盐酸克伦特罗的残留代谢规律

样品用乙酸乙酯提取,盐酸溶液萃取后,再经SCX固相萃取柱净化,50℃水浴中氮气吹干后衍生化。以气相色谱-质谱选择86、212、262、277四个碎片离子进行定性定量分析。盐酸克伦特罗在0.01～2.0 mg/L成线性（R2为0.999）,猪肉中3种不同添加浓度0.01、0.10和0.20mg/kg下克仑特罗平均回收率分别为88.31%、92.85%、93.97%,相对标准偏差分别为5.26%、7.58%、4.59%,样品中最低检测限（S/N=3）为0.1 ug/kg。应用该方法研究了克仑特罗在猪体内的消除并初步探讨其代谢机理。结果表明,在饲喂浓度（3 mg/kg）1个月后,猪体内盐酸克伦特罗蓄积量不算太高,最高蓄积浓度为493.59 ug/kg,而且停药后代谢又非常快。     

用HPLC-MS/MS研究动物毛发中克伦特罗的残留及代谢规律

研究建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定毛发中盐酸克伦特罗残留的方法。猪毛发以0.1moL/L盐酸溶液提取,MCX固相萃取柱净化,流动相溶解定容。以SB-C18柱为分离柱,1%乙酸水溶液和甲醇(60∶40,V∶V)作为流动相,MS/MS进行定性和定量分析。在优化条件下的最低检出限为0.05μg/kg,定量限为0.2μg/kg。毛发样品中添加不同浓度盐酸克伦特罗,测得回收率在79.0%～86.2%之间,变异系数均低于15.2%。应用该方法研究了盐酸克伦特罗在猪毛发中的代谢并初步探讨其代谢机理。结果表明:在较高饲喂浓度(10mg/kg)时,用药5d后,黑色猪毛发有少量盐酸克伦特罗残留,而白色猪毛发中未检出。从第7天起猪毛发中盐酸克伦特罗蓄积量逐渐增加,最高蓄积浓度为4852.5μg/kg。     

气相色谱-质谱法同时测定饲料中三聚氰胺和盐酸克伦特罗

建立了同时测定饲料中三聚氰胺和盐酸克伦特罗的固相萃取-气相色谱-质谱分析方法。饲料样品用乙腈和50 mmol/L稀盐酸提取,然后用乙酸乙酯液液萃取净化,水相经PCX固相萃取小柱净化后用含1%三甲基氯硅烷的BSTFA衍生,采用选择离子模式进行测定,三聚氰胺衍生物选择离子为213,285,327,342,盐酸克伦特罗衍生物选择离子为86,212,262,277,外标法定量,三聚氰胺和盐酸克伦特罗检出限分别为0.6μg/kg和2.4μg/kg。在添加浓度10～200μg/kg范围内,饲料中三聚氰胺和盐酸克伦特罗的回收率分别为81.3%～92.0%和70.8%～82.2%,批内RSD分别为2.6%～4.5%和2.7%～5.2%,批间RSD分别为3.8%～7.0%和5.4%～6.1%。衍生物的峰面积与样品浓度在0.01～0.50mg/L范围内呈良好的线性关系,线性回归系数均大于0.999。     

14 C-盐酸克伦特罗在猪体内的残留消除研究

克伦特罗是一种β-兴奋剂 ,饲料中添加能提高家畜的瘦肉率。最近报道 ,人食用了含有克伦特罗的猪肉导致中毒。本实验的目的 :1测定添加于饲料中的 1mg/ kg14 　 C-盐酸克伦特罗在猪体内的处置 ;2 0、3、7d休药期后屠宰 ,14 C-盐酸克伦特罗在猪可食用组织和不可食用组织的分布 ;30、3、7d的休药期后 ,肝、肾、肌肉、脂肪、肺中克伦特罗原形药的浓度。1　实验9头阉猪和 9头母猪购回后 ,称重 ,打耳号 ,驱虫 ,并分成 3组 ,每组 3头阉猪和 3头母猪。实验前 ,动物饲喂 2周以适应实验环境。一天饲喂两顿 ,每顿给料量0 .5～ 0 .6 kg/头。正式实验时…     

表面增强拉曼光谱法研究β受体激动剂在生猪体内代谢与残留

探索用表面增强拉曼光谱法检测盐酸克伦特罗等β受体激动剂于给药和停药期间在猪尿液、毛发、粪便和组织中的浓度,为快速检出在饲养和市场流通环节中的瘦肉精提供方法支持。在生猪饲料中以10mg/kg的量添加一种β受体激动剂,并连续喂养14d,然后停止给药,使用正常饲料。在给药期间于l、2、3、4、6、8、10和14d分别采集尿液、毛发和粪便,通过前处理后与表面信号增强剂等体积混合,测定其中的β受体激动剂浓度。停药后每天剪去少量毛发,前处理后测定其中的主药的蓄积浓度。结果显示,样品回收率在94.0%以上,相对标准偏差小于2%。盐酸克伦特罗、硫酸沙丁胺醇、硫酸特布他林、班布特罗、盐酸氯丙那林、富马酸福莫特罗的标准溶液在0.05~50μg/L质量浓度范围呈良好线性关系,定量下限为0.05μg/L;尿液、粪便、毛发样品中在1~50μg/L质量浓度范围呈良好线性关系,定量下限为1μg/L。盐酸莱克多巴胺的标准溶液在0.1~50μg/L质量浓度范围呈良好线性关系,定量下限为0.1μg/L。结果表明,该研究测试方法便捷灵敏,用于β受体激动剂在猪体内代谢分析,以及检测其在猪各组织部位残留情况尤为适宜。     

克伦特罗在猪体内立体选择性降解行为研究

为了解克伦特罗在猪体内是否存在立体选择性降解行为,手性分离制备了克伦特罗单一对映体,然后对生猪进行饲喂含有克伦特罗外消旋体(2.0 mg/kg)和单一对映体(1.0 mg/kg)的饲料,7 d后进行屠宰,定期采集猪的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、肺脏和尿液,测定克伦特罗对映体含量。结果表明,克伦特罗在猪体内存在立体选择性降解行为,肝脏、肾脏和肺脏中对映体(右旋体/左旋体)比例较高,心脏和肌肉中的对映体比例相对较低;休药3 d时,肝脏、肾脏、猪尿中的对映体比例均处于最高点。同时克伦特罗对映体在猪体内不存在相互转化现象。该研究为科学评估动物性食品残存的克伦特罗对人体健康造成的危害提供了科学依据。     

克伦特罗在猪尿液中的消除规律研究

[目的 ]研究克伦特罗在猪尿液中的消除规律。[方法 ]用含有克伦特罗1.5 mg/kg的饲料,饲喂一组体重约50 kg的90日龄育肥猪,正常饲喂35天后停药,收集停药后前32天的猪尿液,采用高效液相色谱法(HPLC)进行克伦特罗含量分析。[结果 ]停药后的前4天,猪尿液中的克伦特罗浓度迅速下降,第4天降至13.23μg/kg,之后消除速度放慢,第32天为0.44μg/kg,仍然高于最低检测限0.05μg/kg。[结论 ]克伦特罗在猪体内消除缓慢,容易蓄积。     

β-激动剂对体外培养的瘤胃微生物活力的影响

β-激动剂在提高反刍动物饲料转化率和胴体瘦肉率等方面比对其它动物的作用更明显。为探讨其作用是否与瘤胃代谢有关 ,本实验研究了 β-激动剂对瘤胃微生物活力的影响。实验选用了3种 β-激动剂———盐酸肾上腺素、克伦特罗(Clenbuterol)和塞曼特罗(Cimaterol) ,各设5个不同剂量(0.125 ,0.250 ,0.500 ,1.000 ,2.000mg/kg) ,研究不同剂量的β-激动剂对体外培养的瘤胃微生物产气量、微生物蛋白含量、底物消失率的影响。结果表明 :产气量、微生物蛋白含量和底物消失率与 β-激动剂之间存在着显著的量效关系。盐酸肾上腺素在0.5mg/kg 时微生物蛋白浓度最高(0.0917mg/ml) ,底物消失率最大(37.79 %) ,气体累计产量最大(269.06ml)。克伦特罗在0.5mg/kg 时微生物蛋白浓度最高(0.1167mg/ml),底物消失率最大(39.63 %) ,气体累计产量最大(269.38ml)。塞曼特罗在0.5mg/kg时 ,微生物蛋白浓度最高(0.1125mg/ml) ,1mg/kg 时气体累计产量最大(265.39ml)。3种 β-激动剂都显著促进了瘤胃微生物体外培养的活力(对照组微生物蛋白浓度为0.087mg/ml,底物消失率31.53 %,气体累计产量209.3ml) ,其中克伦特罗的作用最显著。本实验提示瘤胃微生物细胞本身可能存在 β-受体。     

盐酸克伦特罗在猪体内的消长动态研究

利用 3种不同浓度的盐酸克伦特罗饲喂 3组肥育猪 ,收集不同时期的尿液和宰后肝脏 ,采用酶标免疫分析法(ELISA)进行盐酸克伦特罗在猪体内的消长动态规律研究。结果表明 :饲喂不同浓度的克伦特罗 ,其在猪体内一般只需要 4～ 6小时即可达到峰值 ,而且峰值随添加剂量值的增大而升高。排泄速度比吸收速度慢 ,不同浓度克伦特罗在尿液中的消除时间一般都在 1 0天以上 ,而且随体内浓度的增加 ,消除时间随之延长。克伦特罗在内脏中的残留时间比尿液中更长     

不同贮藏时间及温度对猪尿中盐酸克伦特罗快速检测的影响研究

为研究不同贮藏时间及温度对猪尿中盐酸克伦特罗快速检测的影响,向阴性猪尿中添加盐酸克伦特罗标准品,配制成5、50、500μg/kg三个不同浓度后,分别在常温(室温)、冷藏(4℃)、冷冻(-20℃)条件下贮藏,于1、4、7、18、21、28 d用酶联免疫吸附法和胶体金免疫层析法进行快速检测。结果表明,所有的猪尿样本都呈阳性,且可检测到起始浓度为5μg/kg的样本随时间延长检测值降低,同时冷冻的保存效果最好。