一种简便的拓宽噬菌体宿主谱方法的建立及其结果分析

为拓宽噬菌体宿主谱,本研究通过将产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)特异性噬菌体v B_Eco M_JS09与肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7细菌进行多轮共培养,筛选到了6株能够同时裂解ETEC和EHEC O157∶H7的噬菌体,并多次传代和宿主谱鉴定,选择其中1株噬菌体Bp47-12鉴定其生物学特性。双层琼脂平板试验结果表明,噬菌体Bp47-12在平板上均呈现出了典型的裂解性噬菌体特征,空斑透亮,边缘整齐清晰,无晕环噬菌斑;宿主谱鉴定结果表明,ETEC和EHEC O157∶H7菌株均对噬菌体Bp47-12敏感,实现了噬菌体在ETEC和EHEC O157∶H7菌株之间的交叉裂解反应,拓宽了亲本噬菌体JS09的宿主谱;噬菌体Bp47-12能够耐受60℃左右高温,在p H值3~9时效价稳定;最佳感染复数为1;潜伏期为30 min,爆发期为70 min,平均爆发量分别为15;体外裂解试验结果表明,在5 h之内噬菌体Bp47-12能够有效裂解ETEC和EHEC O157∶H7菌株,OD600值下降约0.66;吸附曲线结果表明,在25 min之内,效价为105 PFU/mL的噬菌体Bp47-12能够完全吸附到宿主菌表面。本研究具有潜在的应用价值,也为拓宽裂解性噬菌体宿主谱和应用噬菌体提供了科学依据。     

一株宽宿主谱裂解性大肠杆菌噬菌体的进化分析

裂解性噬菌体能够特异性裂解细菌,本研究分析了一株从自然界中分离的宽宿主谱裂解性大肠杆菌噬菌体的种属和进化关系。前期用Adams双层平板琼脂法从猪场污水中分离纯化出一株裂解性噬菌体v B_Eco M_JS09,裂解谱分析能够裂解禽致病性大肠杆菌和产肠毒素大肠杆菌。扩增分析gene18、gene 23序列,并根据gp18和gp23氨基酸序列构建系统进化树,分析JS09的遗传进化关系。结果表明噬菌体v B_Eco M_JS09基因组为ds DNA,属于有尾噬菌体目、肌尾噬菌体科、T4-like噬菌体、T-evens亚群。其gp18氨基酸序列与大肠杆菌噬菌体RB69同源性最高,为100%;gp23氨基酸序列与大肠杆菌T4噬菌体同源性最高为96%。该结果为禽致病性大肠杆菌和产肠毒素大肠杆菌的防控提供了生物学基础。     

一株宽裂解谱大肠杆菌噬菌体的分离和裂解谱的测定及电镜观察

<正>噬菌体是一类能够寄生于细菌、放线菌及蓝细菌等微生物的病毒,又被称为细菌病毒,其体积微小并可通过细菌滤器,没有完整的细胞结构,是由英国科学家Twort在培养葡萄球菌的过程中偶然发现的[1]。噬菌体有着广泛的应用前景,最引人注目的还是其能够裂解细菌的特性,可以应用于细菌病的预防和治疗。不过用噬菌体治疗作为一种新兴的方法更多地只是停留在研究方面。因为噬菌体治疗有其缺点,即噬菌体裂解细菌的作用具有严格的宿主特异性;所以能否对症下药是保证用噬菌体治疗效果的关键。     

一株鸡大肠杆菌噬菌体的分离鉴定及治疗试验

为探究大肠杆菌噬菌体的生物学特性及其治疗效果,本研究采用双层平板法分离纯化大肠杆菌噬菌体,并测定噬菌体的效价、温度稳定性、p H稳定性、感染复数(MOI)、一步生长曲线等生物学特性,以及噬菌体治疗大肠杆菌病的效果。结果显示分离的噬菌体Bp1805最佳MOI为1时,其效价可达2.4×10^10 pfu/m L;噬菌体Bp1805对温度的耐受范围较广,在p H5~p H10范围内非常稳定,该噬菌体潜伏期为20 min,裂解期为50 min。大肠杆菌病治疗试验结果显示,注射噬菌体比口服噬菌体治疗效果好,大肠杆菌病的防治效果与噬菌体治疗方式和治疗时间有关;噬菌体治疗大肠杆菌病效果优于恩诺沙星和硫酸庆大霉素。噬菌体Bp1805能够裂解致病性大肠杆菌,为临床大肠杆菌病的噬菌体防治提供参考依据。     

噬菌体特性及应用研究进展

近年来,随着“禁抗令”的实施,养殖业迫切需要找到新的替代品来适应无抗的新时代。噬菌体能够特定地裂解某类细菌,且能与细菌同步进化,因此能很大程度上减少细菌的耐药性与药物在动物体内的残留。本文介绍了噬菌体的结构、分类和噬菌体的优势,以及噬菌体在人类、食品和动物中的应用,以期为噬菌体今后更广阔的研发及应用提供参考。     

产气荚膜梭菌噬菌体鉴定及其环境消减效果评价

分离获得1株禽源产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,Cp)噬菌体,拟鉴定其生物学特性及裂解力,并在环境中应用评价其对Cp的消减效果。通过双层及单层平板法从肉鸡肠道组织样品中分离并纯化1株Cp噬菌体。运用透射电镜观察该噬菌体形态,分析其MOI、一步生长曲线、pH及温度耐受特性、宿主谱及体外抗菌活性。通过基因组测序分析其基因组信息,最终在模拟环境下评价噬菌体对Cp污染量消减效果。扫描电镜结果显示,该噬菌体为长尾噬菌体,潜伏期<20 min,爆发量为28.5 PFU·cell^-1,最佳MOI为0.01,能够特异性裂解禽源Cp菌株,对待检的43株Cp裂解率高达83.72%。基因组分析表明,该噬菌体为双链DNA噬菌体,全长41 590 bp,拥有59个开放阅读框,其中33个ORF与已知功能蛋白具有一定同源性,将该噬菌体命名为vB＿CpeS＿SD72。小亚基末端酶构建进化树分析表明,噬菌体与Clostridium phage vB CpeS-CP51同源性较高。在环境消减测试中观察到噬菌体作用0.5 h,杀菌效率可达98.36%;2 h能够抑制...     

噬菌体对肉鸡大肠杆菌性呼吸道疾病的防治效果

噬菌体是一种能够感染和细菌的微生物,美国学者Huff等队噬菌体(SPR02)防治肉鸡大肠干菌性呼吸道疾病的效果进行了研究。在实验1中,3     

1株大肠杆菌噬菌体EPH11的分离鉴定及生物学特性分析

【目的】拟分离1株对大肠杆菌具有良好抑菌效果且适应性广泛的噬菌体,为开发新的大肠杆菌防治方法提供基础。【方法】以大肠杆菌H11为宿主菌,采用双层琼脂平板法从污水样品中分离纯化1株大肠杆菌噬菌体,电镜下观察噬菌体的形态,测定噬菌体的效价、宿主谱、最佳感染复数、一步生长曲线、pH稳定性与温度敏感性,对噬菌体的全基因组进行分析和序列比对,并探究该噬菌体在液体培养基中对H11的抑制效果。【结果】成功分离到1株裂解性大肠杆菌噬菌体,命名为EP＿H11(登录号：OP688485)。双层琼脂平板法结果显示,该噬菌体能够形成大小一致、中间有透明亮点、周围有光晕的噬斑,噬菌体裂解效价可达10⁹～10¹⁰ PFU/mL。电镜观察显示噬菌体EP＿H11头部呈规则的多面体状,直径约85 nm,尾部直径约23 nm,长度约109 nm。以大肠杆菌H11为宿主菌测得EP＿H11的最佳感染复数是0.1,一步生长曲线结果显示其潜伏期为40 min,爆发期为80 min,裂解量为200 PFU/cell。该噬菌体在pH 4.0～10.0的环境中至少可以存活2 h以上,并能够在...     

金黄色葡萄球菌感染的治疗新策略—噬菌体

自1915年发现噬菌体以来,因其具有独特的能力,能够感染其特定的细菌宿主而不影响其他细菌种群,噬菌体被用于治疗各种动物和人类的细菌感染。后期由于抗生素的发明,使得人们渐渐放弃了对噬菌体的研究,转向抗生素,但是近几年由于抗生素耐药现象越来越严重,尤其是“超级细菌”的出现使得人们将目光重新转向噬菌体治疗。而金黄色葡萄球菌作为除了大肠杆菌,沙门氏菌以外的第三大病原菌,在各个领域广泛引起各种疾病,深受人们重视。本文就噬菌体的发展历史,噬菌体在金黄色葡萄球菌治疗上的优缺点及治疗的可行性做一综述。     

一株鸡源宋内志贺菌噬菌体的分离、生物学特性分析及预防试验研究

从青岛地区某鸡场污水中分离出一株具有裂解特性的鸡源宋内志贺菌噬菌体,暂编号为PG2-01。经透射电镜观察,该噬菌体为肌尾噬菌体,头部直径约70 nm,呈立体对称二十面体。试验测定,该噬菌体裂变能力强,潜伏时间短,能在较长时间内维持较强的裂解能力,能够适应的酸碱度、温度范围较广。预防试验中,90%以上的雏鸡能得到有效预防,这对该噬菌体的研究有深远的实践意义及很高的应用价值。