白菜根肿病生防菌的筛选及防治效果评价

从山东省临沂市兰陵县、山东省寿光市、河南省商丘市夏邑县多年种植白菜且根肿病爆发严重地块采集正常白菜植株根际周围土样,对其进行生防菌分离筛选及防治白菜根肿病效果评价,以期获得高效拮抗白菜根肿病菌的生防菌。通过梯度平板稀释法对采集土样进行生防菌分离,以黄瓜立枯病菌和香蕉枯萎病菌为指示菌对生防菌进行初步筛选,利用根肿病孢子裂解试验进一步筛选,通过盆栽试验评价生防菌株防治根肿病的效果。结果表明,放线菌株KA-35对白菜根肿病的防治效果为57.11%,单株地上部鲜重增加127.40%。该研究筛选出了对白菜根肿病有良好生防效果的菌株,为生防菌的进一步研究工作奠定了基础。     

白菜根肿病菌致病性因素研究

通过对2002年至2004年白菜根肿病主要影响因素研究,结果表明,土壤含水量为20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%时,白菜根肿病病情指数分别为0,1.5,10.5,28.6,26.9,19.8,2.9.对病田土壤中根肿病菌休眠孢子囊垂直分布测定,结果为0 cm土层平均含菌量为0.49×106～208.27×106个,10cm土层为83.85×106～1400.15 ×106个,20cm土层为5.1×102～28.7 ×102个,病田不同土层休眠孢子囊平均含量10 cm＞0cm＞20 cm.用0、10、20cm带菌土壤接种白菜,其根肿病病情指数分别为30.7,25.8,20.0,带菌烘干土样接种未发病.土壤酸碱度与田间根肿病发生有密切关系,pH值5.6～5.97,病株率为100%;pH值6.9～7.59,病株率45.68%～62.96%.病田晒垡60、40、20 d后接种白菜和甘蓝,其病情指数分别为0.47,4.4,38.2和0.2,1.2,24.8.对病根组织泡水和日晒5、10、15 d后接种白菜,其病株率分别为55.2%、79.2%、89.6%和85.7%、100%、100%;新鲜病根接种病株率为84.9%;无病土未发病.     

榨菜根肿病菌拮抗菌株的分离筛选及促生特性分析

从榨菜根际土壤中分离具有抗菌促生功能的菌株,为根肿病生防制剂的开发提供菌株资源。采用LB培养基分离榨菜根际土壤中的根际芽孢杆菌,并分析各菌株的抗菌促生能力。实验分离获得的86株根际芽孢杆菌中有18株菌具有产几丁质酶的能力,通过病原菌休眠孢子囊活性的抑制实验筛选出6株具有显著抑制效果的菌株,对其抑制病原菌侵染根毛以及其促生功能进行探究,结果表明6株菌在不同程度上都具有抑制病原菌侵染根毛的能力,其中A5、A10效果最显著。6株菌都具有产IAA和纤维素酶能力,其中A5的IAA产量最高,为13.20mg/L,除固氮能力外,A5其余促生功能指标都较好,A10菌株除无法溶磷外,在产纤维素酶、蛋白酶、固氮等功能上都具有较好效果。本研究获得的根际芽孢杆菌菌株为榨菜根肿病病原微生物的生防制剂的开发提供了菌种资源,具有良好的应用前景。     

不同消毒剂对甘蓝根肿病菌休眠孢子 和黑斑病菌分生孢子活性的影响

开展了70%酒精、50%酒精、35%酒精、Meliseptol和Soft-man5种消毒剂或化学试剂对甘蓝根肿病和黑斑病病原菌的灭菌效果的研究,以蒸馏水为对照。用休眠孢子死亡率和分生孢子萌发率分别衡量根肿病和黑斑病病原菌的活性。结果表明5种试剂对两种病原菌的处理效果与对照存在显著差异,根肿病菌休眠孢子的死亡率从高到低顺序排列分别为Meliseptol(94.3%)>Softa-man(91.3%)>70%酒精(65.2%)>35%酒精(53.3%)>50%酒精(50.5%)>蒸馏水(对照)(26.6%),对休眠孢子的致死率以Meliseptol和Softa-man最高,其次是70%酒精,35%酒精和50%酒精相对较低;黑斑病菌分生孢子萌发率从高到低顺序依次为蒸馏水(对照)(28.3%)>35%酒精(22.8%)>50%酒精(22.2%)>70%酒精(9.9%)>Softa-man(7.6%)>Meliseptol(0.7%),可以看出Meliseptol、Softa-man和70%酒精对黑斑病菌分生孢子致死程度较高,35%酒精和50%酒精相对较低。说明Meliseptol和Softa-man对两种病原菌具有很强的灭菌效果,是理想的消毒剂;70%酒精也具有较强的灭菌能力,但不彻底;50%酒精和35%酒精则基本不能作为消毒剂使用。     

氟啶胺对白菜根肿病的防治效果

白菜根肿病是威胁大白菜生产的一种土传性病害。为了筛选对白菜根肿病有效的杀菌剂,在室内和田间利用灌根方法测定氟啶胺对白菜根肿病的防治效果。室内药效测定结果显示氟啶胺乳油(有效质量浓度2.5和5μL·mL-1)的防治效果分别为89.9%和89.5%,均高于甲基硫菌灵的防治效果88%。氟啶胺乳油(有效质量浓度5和2.5μL·mL-1)的田间防治效果分别为77.6%和69.4%,均高于甲基硫菌灵的防治效果37.4%。结果表明,氟啶胺乳油可以用来防治白菜根肿病。     

烟草黑胫病菌的拮抗根际细菌的筛选

 从重病田健株采集根际土样13份,分离根际细菌753株,室内平皿对峙筛选到拮抗烟草黑胫病菌的菌株98株,占分离菌株的12.7%。温室测定发现有20个菌株防治效果达40.0%以上,超过药剂对照的有4个菌株,防治效果分别为75.7%,78.6%,78.6%,79.3%。其中,大部分菌株对烟草有不同程度的促生作用。     

烟草赤星病菌拮抗微生物的筛选及其对病原的抑制作用

从烟草赤星病斑上分离得到14株拮抗赤星病菌的微生物，对峙培养发现其中6株对赤星病主要病原Alternaria alternata具不同致病力的6个菌株均具拮抗作用。室内离体叶片悬滴法测定发现其中的AM1、AM2、AM6三株拮抗微生物100倍带菌培养液对赤星病的防效均达100％。平皿测定发现AM6 100倍带菌培养液对强致病力病菌的抑制作用为100％，其灭菌滤液的抑制效果为81.8%。其抑菌机理主要是产生拮抗物质，显微镜观察表明AM6能使病菌孢子和菌丝畸变，细胞壁破裂，原生质泄露。     

不同时期土壤消毒处理对白菜根肿病的防治效果

利用不同药剂进行土壤消毒处理,结果是甲醛处理对秋白菜根肿病的防效最高,平均防效为90.36％;其次为五氯硝基苯处理,平均防效为82.01％.利用甲醛和五氯硝基苯在春季和夏季各进行土壤消毒处理结果对秋白菜根肿病的防效和秋白菜增产率的影响差异不大.说明春季利用甲醛和五氯硝基苯进行土壤消毒处理是圆葱-秋白菜套种地秋白菜根肿病防治的一种有效方法.     

油菜根肿病菌形态及生物学特性研究

油菜根肿病近年在四川省发生日趋严重。本文报道了油菜根肿病菌休眠孢子的显微形态结构,其在扫描电镜下休眠孢子近球形,孢壁不光滑,有乳状突起,直径为1.9~4.3μm(平均3.5μm);透射电镜下游动孢子近球形、肾形或椭圆形,直径为1.6~3.5μm(平均2.8μm),同侧着生不等长尾鞭式双鞭毛。观察了休眠孢子萌发形成游动孢子、休止孢、休止孢再萌发形成芽管的过程。病菌休眠孢子萌发的最适温度是24℃,最适pH值是6.3,腐烂处理促进休眠孢子萌发,光抑制休眠孢子萌发,休眠孢子在过滤灭菌的根分泌物中萌发率最高为62.50%。     

稻瘟病菌拮抗微生物的筛选及鉴定

将稻叶和种子浸在NB培养液中，并研碎成浆浆液，用接种环挑少量匀浆液在NB琼脂平板上划线分离，获得356个菌株，分别将它们接种于NB培养液中，振荡培养3d，并利用它们的培养液对稻瘟菌分布孢子进行萌发抑制试验，最终获得具显抑制作用（分生孢子萌发抑制率分别为82．5％和100％）的2个拮抗菌株，按照伯杰手册进行严格的鉴定，初步确定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis) 和短小芽孢杆菌（B.pumillus)。     

四川省油菜区试材料对根肿病抗性差异研究

在自然发病条件下,对四川新育成油菜材料进行了根肿病抗性评价。根据发病严重度将70个油菜新材料分为高抗、中抗、低抄低感、中感、高感5个类型,其中,大部分新育成油菜材料为根肿病感病材料,40号和24号材料发病指数大于50,为高感材料;70号材料发病指数为2．67,为高抗材料,可用于进一步选育研究。     

几种药剂防治白菜根肿病效果试验初报

应用七种药剂防治白菜根肿病的田间药效试验结果表明，Flint50％水分散粒剂5000倍、1000倍、霉多克66．8％可湿性粉剂1200倍3种药液在白菜的育苗营养袋上浇淋单剂药液，白菜苗移栽后4天、14天各用单剂药液灌根一次，对白菜根肿病的防效分别达到94．67％、92．89％和81．58％，优于其他药剂处理，对试验作物无药害。     

稻瘟病菌拮抗细菌的筛选及其防效作用研究

从黑龙江省16个市县采集水稻根系土壤,利用平板画线分离获得579株细菌。通过平板对峙法进行抑菌试验,筛选获得一株拮抗细菌Sc2。该菌株对稻瘟病菌抑菌率达73.44%。经形态、生理生化特性和16S r DNA序列分析,Sc2被初步鉴定为枯草芽孢杆菌。Sc2无菌发酵上清液对稻瘟病菌菌丝生长和分生孢子萌发均有显著的抑制作用。随着稀释倍数的增加,抑制效果逐渐下降,其中将浓度为1.8×108cfu/m L的无菌发酵上清液稀释至40倍时,对稻瘟病菌分生孢子萌发的24 h抑制率及菌丝生长的7 d抑制率仍达60%以上。室内盆栽试验结果表明,Sc2对稻瘟病的防治作用主要在预防,Sc2与三环唑按1∶2混配,防治稻瘟病的防效达90.33%。     

香蕉枯萎病拮抗菌的筛选及盆栽防效的测定

从香蕉根围土壤中分离得到了六株对香蕉枯萎病具有较强抑制作用的拮抗菌,其中真菌2株(F1、F2)、细菌3株(B1、B2、B3)、放线菌1株(A1).利用土壤接种法和蘸根接种法分别测定了这6株拮抗菌对香蕉枯萎病的盆栽防治效果.结果表明:这6株拈抗菌对香蕉枯萎病均具有一定的防效,其中真菌F2菌株对香蕉枯萎病的防治效果最好,在接种其发酵液60 d后,两种接种方法的平均防效分别达60.54%和67.84%,这为利用生物防治方法控制香蕉枯萎病提供了潜在的资源.     

辣椒炭疽病菌拮抗菌的筛选与鉴定

辣椒炭疽病对辣椒生产影响很大,为了有效地防治辣椒炭疽病,从土壤中筛选到对辣椒炭疽病菌有较强抑制作用的生防菌株A和B,通过形态观察和生理生化测试,初步认为这两个菌株均为链霉属(Streptomyces)。     

十字花科蔬菜根肿病菌的PCR快速检测

利用设计合成的根肿病菌 (Ｐｌａｓｍｏｄｉｏｐｈｏｒａｂｒａｓｓｉｃａｅ)特异性寡聚核苷酸引物Ｄ85 81 9Ｆｗ/Ｄ85 81 9Ｒｖ,根据本研究组成员对十字花科蔬菜根肿病菌核糖体基因ＩＴＳ区段克隆测序结果 (未发表 )而设计的引物ＩＴＳＦｗ/ＩＴＳＲｖ和真菌核糖体基因ＩＴＳ区段通用引物ＩＴＳ1 /ＩＴＳ4,对分离自十字花科作物(白菜、青菜、甘蓝、芥蓝、花椰菜等 )根肿病菌全基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ(ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ)特异性扩增试验。试验结果表明 ,这 3对引物均能从十字花科根肿病菌全基因组ＤＮＡ中扩增…     

辣椒疫病病原真菌拮抗菌的筛选及抑菌活性研究

为有效防治辣椒疫病,采用皿内竞争、拮抗菌发酵液以及紫外线照射菌株代谢产物等方法,对筛选出的4株拮抗菌与16种辣椒疫病病原真菌进行拮抗作用试验以及抑菌活性研究。结果表明：16种靶标病原真菌在与4株供试拮抗菌平皿对峙培养后,均受到不同程度的抑制,其中,LCF-35、LCF-BY1和LCF-BY2同时受到4株拮抗菌较强的抑制作用,平均抑制率分别为52.2%、46.1%和27.3%;供试拮抗菌对靶标病原真菌具有选择抑制作用和不同的抑制能力,其中,BCHK抑制LCF-35生长效果较好,BCHK和KMCG-4抑制LCF-BY1生长效果明显;4株拮抗菌的代谢产物活性成分在紫外照射下不稳定,失去抑制作用,因此,这4株拮抗菌适用于活菌生防制剂生产。     

冬枣黑斑病菌拮抗菌株的筛选鉴定及其对该病的防治作用

为给冬枣(Ziziphus jujube Mill.)黑斑病的生物防治提供优良菌株资源,以冬枣黑斑病菌为靶标,从冬枣健果中进行拮抗微生物资源的筛选。利用梯度稀释法从健康冬枣果实表面分离出细菌397株,其中K5-4对冬枣黑斑病菌的抑菌效果最为明显,抑菌带宽度为10.06 mm,该菌的无菌发酵液也具有良好的抑菌活性。活体防病试验发现,该菌能够有效地抑制冬枣黑斑病的发生,浓度为1×108cfu/m L时对黑斑病的防效为78.50%。该菌能够在冬枣果实中定殖,在接种后48 h内K5-4菌数增长为初始值的31.62倍,有无黑斑病病原菌存在对K5-4的定殖影响不大。通过形态学观察、生理生化试验以及16S r DNA序列同源性分析,鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),其在防治冬枣黑斑病上有较好的应用前景。