秋水仙素处理‘罗田甜柿’获得12倍体再生植株

 以‘罗田甜柿’试管苗离体叶片为材料，研究了秋水仙素浓度及处理时间对诱导染色体倍性变异的影响。结果表明：0.3％秋水仙素处理4～6 d，可诱导染色体加倍; 与对照比较, 再生变异植株的气孔孔径增大，密度降低，根尖染色体数2n=12x=180，叶片DNA含量为对照的两倍。LI、LⅡ、LⅢ细胞层均加倍的证据表明，获得的倍性变异株为同质12倍体。     

罗田甜柿原生质体分离、培养及植株再生

 以‘罗田甜柿’休眠芽茎尖诱导的愈伤组织为试材, 对原生质体分离培养技术进行了研究。结果表明: ( 1) 继代10 d 的愈伤组织最适于分离原生质体; ( 2) 优化的酶解体系为CPW+ 0. 5% Cellulase Onoruka R-10+ 0. 03% Pectinase from Aspergillus Niger+ 0. 7 mol/ L Mannitol+ 1% PVP-10; ( 3) 原生质纯化方式以上浮法为好, 100×g 离心6 min; ( 4) 琼脂糖念珠培养5~ 6 d 观测到第1 次分裂, 多为不均等分裂, 60~70 d 形成肉眼可见的小愈伤组织, 愈伤组织增殖到5 mm 以上, 分化成苗, 转至生根培养基生根。     

‘木门’组织离体培养与植株再生研究

以OT型百合‘木门’鳞片为试验材料,通过不同溶度激素,进行愈伤诱导及分化、生根诱导、组培苗移栽,建立OT型百合生根移栽体系。结果表明,最佳分化诱导培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;最佳生根培养基为1/2 MS＋0.1 mg/L NAA。     

甜柿下胚轴再生不定植株的研究

研究获得了次郎甜柿成熟胚下胚轴再生的不定植株。在大量元素铵盐减半的ＭＳ培养基上附加玉米素１．５ｍｇ／Ｌ,ＩＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ,暗培养３周后转光培养,下胚轴不定梢再生率为３３．３％。不定梢在１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖２％的培养基上生根率为７８％。     

番茄子叶离体培养的植株再生

番茄是我国的主要蔬菜之一,每年因病毒病危害造成的损失很大,运用转基因技术培育抗病品系是一个新途径。番茄是较早被应用于体外培养的植物,经过几十年众多研究者的研究证明:番茄外植体产生愈伤组织的数量和不定芽的分化频率受到植物本身基因型和激素配比条件等多种因素的影响。     

醉蝶花离体培养植株再生研究

 诱导醉蝶花下胚轴和子叶形成愈伤组织, 以MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L + KT 0.5 mg/L培养基中子叶的出愈率最高, 达到100 % , 下胚轴出愈率最高只有93 %。MS + 6-BA 2 mg/L + NAA 0.05 mg/L最适合于芽的诱导, 诱导率达到100 %。再生苗在MS + NAA 0.1 mg/L 培养基中生根完成植株再生。带单个侧芽的茎作为外植体接种在MS + 6-BA 1 mg/L + NAA 0.05 mg/L 培养基中, 一个月以后形成无数丛生芽。     

秋水仙素诱导樱桃矮化砧木'吉塞拉6号'获得六倍体再生植株

 以三倍体樱桃矮化砧木'吉塞拉6号'（Prunus ceransus × P. canescens）的离体叶片为外植体,采用秋水仙素诱导处理再生出六倍体植株。将外植体首先在加有秋水仙素（50 mg. L-1）、生长素（IBA 0.5 mg. L-1）和细胞分裂素（BA 5.0 mg. L-1）的改良WPM液体培养基中培养5 d,再转移到不含秋水仙素（其它成分相同）的固体培养基上继续培养56 d,再生出形态变异明显的新梢。采用流式细胞仪鉴定染色体倍性,确定其为六倍体新梢。六倍体植株与三倍体的'吉塞拉6号'植株形态学上有明显差异。六倍体的试管苗已在大田移栽成活,并已成功高接在甜樱桃大树上。     

叶用莴苣离体培养和植株再生

 以叶用莴苣( Lactuca sativa L. ) 4 个栽培品种的子叶和真叶为材料进行诱导芽分化及生根成苗试验, 从中选出较理想的品种和培养基配方, 建立了我国叶用莴苣栽培品种的快速、高频离体植株再生体系。外植体分化频率可达100 % , 平均每外植体分化不定芽5. 6 个。3 d 苗龄的子叶分化效果最佳。从子叶外植体培养至形成完整小植株仅需30～35 d。     

辣椒子叶离体培养植株再生研究

对影响辣椒子叶培养的主要因素材料的基因型、培养基的成分、培养环境的研究情况作了综合论述，并指出辣椒子叶离体培养研究的意义和存在的主要问题。     

枣花药培养再生植株及其染色体倍性研究

用ＭＳ培养基附加不同浓度的２，４－Ｄ、ＮＡＡ、ＩＢＡ和６－ＢＡ，对金丝小枣花药进行离体培养，通过诱导愈伤组织，再生小植株，并进行了染色体倍性观察。结果表明，花药的采接时间，低温处理及某些激素的浓度对愈伤组织的诱导有直接影响，６－ＢＡ是愈伤组织分化小植株的重要因素，同一块愈伤组织绿芽生长点的染色体倍性表现出较大差异。     

无籽西瓜子叶离体培养及植株再生试验

无籽西瓜比普通二倍体西瓜糖度高、食用方便、耐贮运，倍受人们青睐。但其制种复杂，成本高，所得的三倍体无籽西瓜种子中很多胚芽发育不良，子叶畸形，种皮厚，种子发芽率低，苗期生长缓慢，这些因素制约了无籽西瓜的生产。西瓜组织培养始于20世纪70年代，自1979年获得初步成功以来，国内外相继报道了这方面的研究进展，但利用无籽西瓜子叶作为外植体获得再生植株的报道甚少。为此，我们以无籽西瓜子叶为外植体，研究了通过愈伤组织阶段诱导芽及获得再生植株的培养条件。     

桃离体培养与植株再生的优化研究

以桃杂种单株‘2-7’带腋芽茎段为试材,对桃离体培养进行优化。结果表明:MS+1.5mg/L 6-BA+0.3mg/L IBA培养基中腋芽诱导率最高达88.89%;MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L IBA培养基增殖系数最高2.37;试管内培养出的健壮新梢,接种于0.5mg/L IBA的1/2MS培养基中10d后转入无生长调节剂的1/2MS培养基中光/暗(12h/12h)周期下生根效果较好,生根率达90.6%。     

黄瓜未授粉子房离体培养获得胚囊再生植株

以7种F1代黄瓜(Cucumis sativus L.)未授粉子房为试材进行再生植株培养,通过石蜡切片观察、激素含量测定探究胚囊再生植株形成过程及相关生理变化。结果表明:在MS+0.06 mg·L^-1 TDZ培养基中有3个供体黄瓜材料未授粉子房获得再生植株,经流式细胞检测、染色体计数、SSR验证分别为单倍体、双单倍体和同源四倍体。MS+0.04 mg·L^-1 TDZ+1.0 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA+12mg·L^-1 AgNO₃培养基中子房产生大量胚状结构,但分化培养后没有获得再生植株。石蜡切片观察到在MS和MS+0.06 mg·L^-1 TDZ培养基中培养5 d和17 d时胚囊已经发育。供体黄瓜子房切片中GA、IAA含量随培养天数增加呈现先降低后升高的趋势,在培养8 d时最低,17 d时GA含量比2 d时更高,IAA含量无明显变化。     

走马胎离体培养及植株再生

以走马胎幼嫩叶片为外植体,研究不同培养基对走马胎叶片愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖及生根培养的影响。结果表明:叶片在MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1)培养基上诱导产生的愈伤组织最适合用于进行分化和增殖;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化率高达88.9%;壮苗培养基为MS+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+10%椰子水(CW);最适的生根培养基为MS+NAA0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1),生根率达100%,根系发达,植株生长健壮。经生根培养及练苗,走马胎的假植成活率达85%。     

山杜英离体培养植株再生的研究

 研究了山杜英[Elaeocarpus sylvestris(Lour．)Poir．]带芽茎段的离体培养及植株再生。筛选出最佳培养基：(1)启动培养：Ms+BA 1.0～2.0 mg·L^-1 (单位下同)+NAA 0.05+蔗糖3%；(2)愈伤组织发生型丛生苗增殖培养：MS+BA 1.0+NAA 0.5+蔗糖3%；腋芽发生型丛生苗增殖培养：MS+BA2.0+IBA 0.1+蔗糖3%；(3)有效苗诱导培养：MS+BA 0.5+IBA 0.1+GA 1.0+蔗糖3%；(4)生根培养：1/2 MS+IBA 3.0+蔗糖2%。用透气膜封FI比用聚乙烯菌膜生根率明显提高，生根明显提前。     

不同倍性苹果叶片不定植株再生研究

以苹果二倍体、三倍体、四倍体共２８个品种的无菌苗叶片为试材,研究了倍性、光和暗培养及叶片的生长部位对叶片不定梢再生的影响。结果表明：多倍体比二倍体容易再生不定梢,平均不定梢再生率,三倍体达９８．４％,二倍体６８．４％,一个四倍体品种达９３．３％。暗培养比光培养有利于促进不定梢再生,无菌苗顶部刚展开的嫩叶比中下部成熟老化叶再生率高。     

铁皮石斛兰离体培养再生植株的研究

选用铁皮石斛兰组培苗为试验材料,以添加椰汁的MS培养基为基本培养基,研究在不同激素浓度配比条件下,对于铁皮石斛兰产生愈伤组织、诱导不定芽以及继代培养的影响,并优化铁皮石斛兰的再生条件,进而获得铁皮石斛兰离体茎尖高效扩繁再生体系。结果表明,以铁皮石斛兰的幼嫩茎尖作为试验材料,可达到高效繁殖的目的,诱导不定芽的最佳激素配比为2,4-D 0.5 mg/L和NAA 0.2 mg/L。     

‘富有’和‘次郎’甜柿叶片再生植株的研究

 比较了不同生长调节剂及其种类浓度和培养时间对‘富有’和‘次郎’两个甜柿(Diospyros kaki Thunb. ) 品种的叶片愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。TDZ诱导叶片愈伤组织和不定芽再生的能力很强, 在含ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的培养基中, 愈伤组织的形成率达96% , 愈伤组织不定芽分化率达80%以上,由0.5 mg·L ^{- 1} TDZ诱导形成的富有和次郎愈伤组织, 在含有ZT 0.5 mg·L ^{- 1}的1/2DKW培养基培养30 d,不定芽分化率均达96%以上, 平均芽数分别为7.8和5.4, 所得再生苗的生根率近75%。     

鄂柿1号离体叶片秋水仙素诱导和再生植株倍性鉴定

以鄂柿1号甜柿离体新梢叶片为外植体,研究了秋水仙素浓度及处理时间对诱导染色体倍性变异的影响。结果表明,0.5%秋水仙素处理4d左右,可诱导获得十二倍体再生植株,低浓度的秋水仙素不能产生加倍效应,高浓度会导致叶片死亡或严重抑制愈伤组织再生能力;与对照比较,再生变异植株叶片气孔孔径增大、密度降低,PA倍性分析叶片DNA含量为对照的2倍。因此,试验获得的倍性变异株初步确认为12倍体。