微波快速石蜡切片法观察水稻叶片组织

 石蜡切片是植物解剖学和病理学观察的重要手段。该方法从取样到切片完成约需一周的时间,操作周期较长。本试验对水稻品种丽江新团黑谷的叶片分别进行了微波石蜡和传统石蜡的切片并用苯胺蓝染色对结果进行比较。在微波石蜡切片中通过对固定、脱水和浸蜡等操作的改进使得该方法只需约3h即可完成切片。微波石蜡切片组织的完整性和染色的效果与传统石蜡切片相近,叶片的表皮、叶肉细胞和维管束等不同叶片结构均可清楚地进行显微观察和拍照。结果显示,可利用微波石蜡方法对水稻叶片进行制片且可较大幅度缩短处理的时间,提高工作效率。     

动物胃平滑肌组织石蜡切片制作技术研究

为解决动物胃平滑肌组织石蜡切片的制作过程中肌束出现严重分离的问题,设定3组不同的试验方案,分别改变组织脱水、透明和浸蜡时间,制作兔胃和狗胃的石蜡切片,HE染色,光镜观察.结果表明,组织经过50%乙醇180min、70%乙醇180min、80%乙醇660min、95%乙醇(Ⅰ)50min、95%乙醇(Ⅱ)50min、100%乙醇(Ⅰ)50min、100%乙醇(Ⅱ)50min的脱水效果最好;经过二甲苯乙醇(二甲苯:乙醇=1:1)20min、二甲苯5min、二甲苯石蜡(二甲苯:石蜡=1:1)40min的透明效果最好;经过石蜡Ⅰ(52～54℃)60min、石蜡Ⅱ(54～56℃)60min和石蜡Ⅲ(56～58℃)50min的浸蜡效果最好;在42℃水中展片,将水分晾干后,放置在52～54℃的摊片机上40 min的展片效果较好.以上方案均可有效改善动物胃平滑肌组织肌束分离的现象.     

裸鼠淋巴结及肺组织石蜡连续切片的制作体会

裸鼠淋巴结及肺组织石蜡连续切片的制作体会李飞虹，黄剑（广东医学院病理学教研室，湛江５２４０２３）近十年来，我室利用裸鼠进行了鼻咽癌转移及致病机制的科研课题研究。裸鼠淋巴结及肺组织石蜡连续切片或半连续切片的制作，对了解裸鼠移植瘤在这两种组织中的转移情况...     

含羞草石蜡切片的制作

通过对含羞草进行取材、固定、脱水、透明、浸蜡、切片、脱蜡、染色、透明等一系列过程的试验研究,掌握了含羞草石蜡切片的制作方法,总结出了含羞草石蜡切片制作过程中的关键技术,并通过显微观察分析,从解剖学上为研究含羞草的运动机理提供了理论基础。     

蕨类植物石蜡切片制作技术探讨

石蜡切片是一种常规的生物组织形态结构研究手段.由于蕨类植物不同世代的样本具有显著差异,仅依常规流程进行石蜡制片与切片,往往不能达到预期的效果.在实际操作中,操作者会遇到一些书本上没有答案的难题,从而影响试验的进程与操作.试验以荷叶铁线蕨(Adiantum reniforme L.var.sinense Y.X.Lin)...     

动物组织HE染色石蜡切片技术的改进

组织切片方法是教学、科研、病理检验工作中广泛应用的一种实验技术.近年来对传统的组织切片方法进行了全面地改进试验研究,使组织固定完全,脱水彻底,透明适度,浸蜡充分,切片较薄,染色良好;不仅缩短时间,简化程序,节省药液,而且提高了组织切片的质量.     

葡萄胚珠石蜡切片制作技术的研究

通过试验总结了有核葡萄和无核葡萄胚珠石蜡切片制作的主要操作方法,同时强调指出了制作过程中应注意的问题,并提出了相应的解决方法。     

乌拉尔甘草愈伤组织石蜡切片与半薄切片的对比

以乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fich.)不同来源愈伤组织为材料,采用石蜡切片和半薄切片技术,对乌拉尔甘草不同来源愈伤组织细胞进行了观察,结果表明,半薄切片在制作不同来源愈伤组织装片时优于石蜡切片,其清晰度高,分辨率更为精确。石蜡切片中,根源愈伤组织有核细胞较少,而且细胞出现解体现象;半薄切片中观察到了叶源愈伤组织细胞中的着色颗粒、线粒体和圆球体,可为透射电镜制样提供有效的材料。     

石蜡切片法在纸页样品制备中的应用

本文介绍的是利用扫描电镜对纸页的纤维形态及断面结构观察的一种制样方法——石蜡切片法。它适用不同类型纸页样品的研究,特别适用于极薄型纸页样品的制备,其主要目的是了解不同造纸原料在制浆造纸中其性能优劣的情况,以及了解纸页中纤维的排列方向和分布状况对算机械强度的影响等。这项研究工作不仅为制浆造纸合理的加工利用提供了重要依据,也为我们在纸页样品制备中摸索出了更为理想的技术方法。     

适合植物组织原位杂交和原位PCR的切片制作

随着生物技术的不断发展,原位杂交技术与原位PCR技术在植物方面也有所进展.本文介绍了适合植物组织原位杂交和原位PCR的石蜡切片和冰冻切片的制备.     

斑马鱼石蜡组织切片技术的优化

为优化斑马鱼(Danio rerio)石蜡切片制作技术,以斑马鱼心、肠、肝脏为材料,研究了斑马鱼石蜡组织的切片制作方法,并采集图像进行分析。结果表明,改进后的实验方法能够制作出高质量的斑马鱼石蜡组织切片。     

小鼠部分组织器官石蜡切片制作方法的改良

为了克服小鼠组织器官传统石蜡切片制作方法存在组织易碎、结构不完整的缺点,对传统石蜡切片制作进行了改良.将浸蜡前的透明步骤改为异硬脂醇与石蜡混合液处理,替代苯类透明剂制作空肠、脾脏2种器官的石蜡切片,并以切片机切片时蜡带质量和HE染色后镜下质量为切片制作效果的评定指标.结果表明,2种器官在切片机上均能切出完整、较长的蜡带,组织块无硬化、不碎裂,展片平整;HE染色过程中不掉片,染色后光镜下细胞质与细胞核染色对比清晰,器官组织结构完整.就脾脏和空肠而言,应用异硬脂醇与石蜡混合液替代苯类透明剂能制作出优良的石蜡切片.     

四倍体刺槐茎段组织石蜡切片的制作方法

以传统石蜡切片方法为基础,针对林木茎段木质化程度高、硬度和脆性大的特点对固定、软化、脱水、透明、染色等具体步骤进行了改进,并成功应用于四倍体刺槐生根过程插穗基部解剖学研究。结果表明:较传统方法切片时组织不易碎,切片结构完整,减少了脱水时间,缩短了制片周期;获得了厚度为8 μm且染色清晰、细胞结构完整的林木茎段横切面切片;四倍体刺槐插穗石蜡切片可清晰的观察大量能够反映生根各时期发育特征。该方法为进一步从解剖学上研究林木茎段组织生长机制提供基础,为探究其组织形态变化提供了新的技术方法。     

石蜡包埋动物组织块染法制片技术

常规的动物组织石蜡切片法,通常是把动物组织块先用石蜡包埋,然后切片染色,程序繁多。本文介绍一种新的制片法,是将组织的染色、改放在组织包埋切片之前进行,其效果与切片后染色基本相同。这种方法节约了大量的乙醇、二甲苯,简化了染色程序,缩短了制片时间,为教学实验、病理检查和科学研究提供了简便易行的制片方法。     

利用冷冻切片法与石蜡切片法对水貂组织切片进行优化研究

应用冷冻切片法和石蜡包埋切片法,对水貂体组织进行切片后HE染色观察;并在冷冻切片方法中应用3种不同的固定剂,对固定剂的同定效果进行对比分析。结果表明,石蜡切片法更适合于脑组织,而冰冻切片法更适合于皮肤组织。冰冻切片方法中3种固定剂的固定效果比较,同定NA（无水乙醇80mL、甲醛10％10mL、冰醋酸10mL）优于固定剂C（10％的福尔马林溶液）与固定剂B（甲醛40％15mL、无水乙醇85mL）。     

组织胚胎学实验教学中浦肯野纤维组织切片的制作

为了提高组织胚胎学课程的教学质量,笔者以现代教育思想为指导,以多年的教学经验为基础,介绍了制作实践教学中缺少的浦肯野纤维组织切片的方法,以丰富实践教学资源,让学生形象地掌握普通心肌纤维与浦肯野纤维的差别,从而提高实验教学质量和教学效果。     

一种适用于植物组织的快速石蜡制片法

为了建立一种快速石蜡制片方法,减少实验过程中有毒试剂的使用量。该文以葡萄、桃、花叶锦带等的部分组织为实验材料,采用石蜡切片法,通过改良透明、包埋试剂、染色等制片环节,进行石蜡制片研究。试验结果表明：该法不但简化了实验步骤、将制片周期缩短为原来的1/3,而且其制得的切片质量与常规方法无区别,同时也减少了实验过程中有毒试剂的使用量,整体上提高了植物石蜡制片的效率。     

褪黑激素处理间情期水貂卵巢的切片制备及观察

为研究间情期内水貂卵巢发育规律及褪黑素作用后不同发育阶段卵泡的组织形态特点,实施本试验.随机选取埋植褪黑素的健康短毛雌性黑水貂5只,取左侧卵巢,固定经洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋,制备HE染色的石蜡切片,进行组织学观察,测量和拍照.结果表明:水貂卵巢由表面上皮、白膜、皮质和髓质构成,间质腺发达;卵巢中存在各级卵泡;透明带在第Ⅱ阶段卵泡中开始出现;卵巢在其各个发育阶段均可能闭锁,其中第Ⅳ阶段的卵泡闭锁较多.     

绵羊卵丘-卵母细胞复合体石蜡切片技术的改良

【目的】在绵羊有腔卵泡发育过程中,多层卵丘细胞紧密包绕着卵母细胞形成卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complex,COCs)特殊结构,存在于卵泡腔内。卵泡成熟后,绵羊COC从卵泡内排出,进入输卵管,等待受精。现有的卵丘-卵母细胞复合体蛋白鉴定技术,或者将包含各级卵泡的卵巢组织直接进行切片处理,或者将COCs从卵泡内分离,在完整卵丘-卵母细胞复合体水平上进行免疫染色。但这两种方法在检测绵羊有腔卵泡COCs中目的蛋白表达时,存在显著缺陷。研究旨在对常规石蜡组织切片技术进行改进,以期满足绵羊COCs蛋白鉴定需求。【方法】首先采用抽吸法从绵羊有腔卵泡内获得COCs,以石蜡包埋方式人为构建了一种可以进行切片处理的"包含多枚绵羊卵丘-卵母细胞复合体的仿组织结构"。然后以该特殊结构与健康绵羊卵巢组织为研究对象,分别采用改良与传统的石蜡组织免疫化学技术流程,检测了目的蛋白,尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)与其受体(urokinase-type plasminogen activator recepter,uPAR),在绵羊COCs中的表达情况,比较了两种技术的免疫染色效果与染色流程差异。【结果】将所构建的绵羊COCs仿组织结构与正常绵羊卵泡组织,进行石蜡组织切片处理,经切片、贴片与脱蜡等步骤,分别形成了散在分布于载玻片上的COCs薄片与包含卵泡的卵巢组织薄层(厚度5μm)。经间接免疫染色处理后,结果显示:①目的蛋白在两种结构COCs中的表达是一致的,即uPAR在绵羊卵丘与卵母细胞上都有表达,而uPA只存在于绵羊卵丘细胞中;②在绵羊COCs薄片结构中,COCs整体形态完好,卵母细胞与外围卵丘细胞层次清晰,蛋白定位清楚,染色效果良好;在卵巢薄层结构中,绵羊卵泡内壁颗粒细胞与COCs等形态结构相对完整,卵母细胞蛋白定位清楚,但是卵丘细胞层次与蛋白表达较不清晰;③与绵羊卵巢组织石蜡切片技术相比较,绵羊COCs仿组织结构石蜡切片技术,在固定、脱水、透明、浸蜡以及脱蜡等步骤的处理时间都大大缩短,例如固定处理由24h缩短为2h;由逐级脱水的10h缩短为两级脱水的1h;透明由30min缩短为10min;软蜡与硬腊浸入由原来的6h缩短为1h;由逐级脱蜡的25min缩短为两级脱蜡的10min等。【结论】改进后的COCs仿组织石蜡切片染色技术,显示更优质的免疫定位与染色效果,不仅具有COCs获得率高、卵母与卵丘细胞形态层次清晰等优点,而且显著缩短了操作时间,简化了操作流程。该技术在保留COCs结构完整的基础上,有效检测了目的蛋白在绵羊卵丘-卵母细胞复合体中的表达模式,对于探明绵羊卵泡发育与卵母细胞成熟机制,具有重要意义。     

石蜡切片扫描法在昆虫病毒病理学研究中的应用

目前,光学显微镜、电子显微镜等技术已广泛应用干昆虫病毒病理学的研究。利用光镜、特别是透射电镜研究细胞内部的病理紊乱,能够得到比较理想的结果;利用扫描电镜则适于观察虫体三维结构的病变。但是,如何将昆虫细胞内部的细微病变立体地展现出来,还需要一种简便易行的方法。在黄地老虎[Scotia segetum(Schiffermüller)]颗粒体病毒病的组织细胞病理学