紫花苜蓿的组织培养与快繁技术研究

以紫花苜蓿为材料,研究了不同外植体和不同激素处理对苜蓿愈伤和胚状体分化的影响。结果表明,子叶和下胚轴作外植体,在MS+2,4-D 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L+BA 0.5mg/L培养基上愈伤组织诱导率较高,下胚轴的诱导率要高于子叶;下胚轴在MS+BA 3.0mg/L培养基中胚状体分化率最高。     

藏红花愈伤组织的诱导及植株再生

以藏红花(Crocus sativus L.)当年新生小球茎为材料,在MS+0.5 mg/L BA+1.0 mg/L NAA+7%CM(椰乳)培养基上进行初代培养,再转入MS+5 mg/L BA+5 mg/L NAA中进行愈伤组织的诱导,黑暗条件下继代1-2次,51 d就可以获得高诱导串的愈伤组织,愈伤诱导率可达65%.将愈伤组织转入分化培养基MS+5 mg/L BA+5 mg/L NAA中分化丛生芽,丛生芽诱导率高达95%,将丛生芽分成单个植株,最终形成完整再生植株.     

孜然芹下胚轴胚性愈伤组织的诱导及再生植株的研究

以孜然芹下胚轴为外值体,研究了在不同种类和浓度激素处理下产生愈伤组织,经继代增殖成胚性愈伤组织,在分化培养基上,胚性愈伤组织进一步分化,得到了再生植株.结果表明:下胚轴在光照时间16 h/d,MS+2,4-D 0.5 mg/L的愈伤组织诱导启动培养基中,20 d愈伤诱导率达100;,继代培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L培养基中,增殖率达80;,在MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中光照16 h/d培养30 d,可见再生植株,再生率为18.75;.     

杨树叶片离体再生系统的构建

以杨树叶片为外植体,MS为基本培养基,使用不同激素不同浓度配比,建立了杨树叶片离体培养植株再生体系。结果表明：叶片的最佳诱导培养基为：MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽培养基为：MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L。NAA与BA对愈伤组织诱导有调控作用,NAA/BA比值增大有利于不定芽的诱导,但不能超过4∶1;BA与2,4-D关系比较复杂,当2,4-D和6-BA的浓度均为1.0mg/L时,愈伤组织诱导效果最好。     

杜仲愈伤组织诱导和植株再生体系的建立

【目的】研究在BA、NAA、IBA、2,4-D等激素作用下,杜仲愈伤组织诱导、愈伤组织诱导丛生芽及丛生芽诱导生根各阶段的最佳培养基配方,建立杜仲植株再生体系,为杜仲转基因研究提供基础材料。【方法】以杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段为外植体,使用BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行杜仲愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽诱导生根培养基的最佳配方,建立杜仲植株的再生体系。【结果】杜仲愈伤组织诱导的培养基分别为:成熟胚MS+BA 2.0mg/L+NAA 2.5mg/L,诱导率77.8%;幼嫩胚MS+BA 0.5mg/L+2,4-D 2.0mg/L,诱导率88.9%;叶片MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L,诱导率100%;茎段MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率为100%。愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L,不定芽诱导率为88.9%,增殖系数为3±1;杜仲在1/4MS的基本培养基中生根最好,生根率达80%,激素的存在反而会抑制生根。【结论】杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段均可通过愈伤组织途径诱导不定芽的形成,并诱导生根,建立杜仲愈伤组织再生体系,但不定芽的增殖系数较低。     

不同激素对杂交魔芋愈伤诱导及植株再生的影响

以杂交魔芋球茎为外植体,以添加不同种类和浓度的生长素及细胞分裂素的MS为培养基,研究不同浓度激素配比对魔芋愈伤组织诱导形成、增殖、分化以及植株再生等的影响。结果表明:6-BA浓度在3.0 mg/L时,对魔芋愈伤组织的诱导率最高,达到90%;6-BA与NAA配合使用时,有利于提高愈伤组织分化率,6-BA浓度在0.5~1.0 mg/L、NAA浓度在0.1~0.5 mg/L时,成苗率均较高,其中6-BA浓度在1.0 mg/L、NAA浓度在0.1 mg/L时,愈伤分化率最高,达到84.4%,成苗率达到253%;NAA浓度在0.2~0.5 mg/L时,生根率最高,达到247%。综合以上不同浓度及激素配比的作用效果,认为适合杂交魔芋麻杆球茎植株再生的最适愈伤诱导培养基是MS+6-BA 3.0 mg/L;最适愈伤分化及芽分化培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;最适生根培养基是1/2 MS+NAA 0.2~0.5 mg/L。     

北柴胡幼根、子叶和下胚轴组织培养研究

研究了北柴胡幼根、子叶和下胚轴愈伤组织诱导、分化的条件。结果表明,MS+2,4-D1.0 mg/L+KT0.1 mg/L的培养基最适合于幼根、下胚轴和子叶愈伤组织的诱导,其中,幼根和下胚轴愈伤组织诱导率高于子叶;在B5+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.03 mg/L+CH 250 mg/L的培养基中,下胚轴和子叶愈伤组织的分化率最高;北柴胡试管苗生根培养基为1/2 MS+NAA0.5 mg/L。     

苦豆子愈伤组织诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以苦豆子子叶和胚轴为材料,对苦豆子愈伤组织诱导和继代增殖的最佳培养条件进行研究,旨在建立苦豆子悬浮细胞体系。结果发现,子叶和胚轴为愈伤组织生成的最佳外植体,愈伤组织最佳诱导培养基是MS+0.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;最佳继代增殖培养基是MS+1.0 mg/L NAA+4.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L2,4-D。以胚轴诱导的愈伤组织是细胞悬浮培养的理想材料,初始接种量10%~20%,添加3%蔗糖,有利于悬浮细胞体系的生成。     

花魔芋组织培养初步研究

以花魔芋球茎切块作外植体,接种在MS附加6-BA、NAA和KT的培养基上诱导愈伤组织的形成.各种培养基均能诱导外植体产生愈伤组织,但不同激素浓度组合其诱导率不一样.其中以MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 1.0 mg/L的诱导率最高,达84.62%.愈伤组织芽分化最适培养基是MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L KT2.0 mg/L,分化率为73.81%.芽在MS NAA 0.5 mg/L和1/2MS NAA 0.5 mg/L培养基上的生根率均在78%以上.     

杜仲组织培养再生体系的优化

以幼嫩叶片为外植体,对杜仲再生体系的优化进行了研究.结果表明:叶片诱导愈伤组织的最适宜培养基为MS NAA1.5 mg/L BA2.0 mg/L,诱导率为95%、愈伤组织增殖最适宜培养基为MS NAA1.0 mg/L BA2.0 mg/L,良好率为98.5%、诱导不定芽的最适宜培养基为MS NAA0.5 mg/L BA2.0 mg/L,分化率为40%、最适宜生根培养基1/2MS IBA1.5 mg/L,生根率为92.5%.     

新疆野生枸杞愈伤组织分化及植株再生

以新疆枸杞的叶片、茎尖基部为外植体,分别诱导愈伤组织、继代培养和诱导分化,结果表明:①不同外植体愈伤分化率有明显差异:叶片愈伤组织分化率最高为100%,茎尖基部愈伤组织分化率最高为80%。每块愈伤的芽分化数最多可达15～20个。②激素组合影响愈伤分化。诱导分化最适培养基为6 BA2.0mg·L-1 IAA0.5mg·L-1,KT0.5mg·L-1 NAA1.0mg·L-1。③将分化出的无根苗转接到MS无激素培养基上,生根率可达到85%以上。因此叶片为诱导愈伤组织分化的最适外植体。     

二乔刺槐愈伤组织诱导及植株再生研究

以二乔刺槐的幼嫩茎段为外植体进行愈伤组织诱导及植株再生研究。结果表明:二乔刺槐茎段诱导愈伤组织的最适培养基为MS IBA0.2mg/L BA3.0mg/L,愈伤组织芽诱导的最适培养基为MS IBA0.1mg/L BA5.0mg/L,根诱导培养基为1/2MS IBA0.4mg/L。     

玉米茎尖培养诱导愈伤组织及植株再生的研究

以黑龙江省8个优良玉米自交系为试验材料,研究了玉米茎尖培养诱导愈伤组织及愈伤组织继代培养和植株再生的效果。结果表明,不同培养基和基因型的愈伤组织诱导再生能力差异大,单一培养基效果不如复合培养基。2,4-D和6-BA的浓度及比例是影响愈伤组织诱导的重要因素。8种基因型中只有3种成功获得愈伤组织诱导、继代和分化植株,另有3种基因型获得水性愈伤但不能继代,2种基因型未产生愈伤。     

玉米胚性愈伤组织诱导和植株再生研究

对 4 3个基因型的未熟幼胚进行离体培养 ,研究不同基因型对离体培养的反应 ,不同质量浓度 2 ,4 D对胚性愈伤组织百分率的影响以及不同基因型愈伤组织的再生苗率 .结果表明 ,自交系A188,87 1、郑 2 2、综 3、综 31和掖 4 78以及它们的杂交种产生了胚性愈伤组织 ;继代过程中 ,2 ,4 D质量浓度降至 1mg·L-1提高了胚性愈伤组织百分率 ;4 3个基因型中仅部分基因型再生了植株 ,基因型是能否再生植株的主要因素 ,培养基成分也影响再生苗率 ,改良MS成分和低浓度的激动素有利于植株再生     

影响玉米愈伤组织诱导和植株再生的有关因素研究

以几个玉米杂交种幼胚为外植体,研究了2,4-D浓度、幼胚大小对愈伤组织诱导的影响以及AgNO3和MET浓度对玉米愈伤组织分化成植株的影响。结果表明,2,4-D浓度为2 4mg/L,幼胚大小在1 0～2 0mm之间时,玉米愈伤组织诱导率较高且质量较好。8mg/L的AgNO3可以明显提高玉米再生率。MET可以有效抑制玉米苗徒长,大大提高玉米再生苗的移栽成活率。     

玻璃化法超低温保存匍匐翦股颖胚性愈伤组织及其植株再生

采用玻璃化法对匍匐翦股颖愈伤组织进行超低温保存条件及植株再生进行初步研究.结果表明:将继代2次的愈伤组织接种到预培养基上,4℃低温预培养5 d.预培养后的愈伤组织在常温下用装载液过渡10 min,再于0℃下用玻璃化溶液PVS2处理50 min后,加入新鲜的PVS2迅速投入液氮中保存1 h以上,取出后在30℃水浴中解冻,用MS+1.0 mol.L-1蔗糖溶液洗涤3次,每次10 min,细胞存活率可达85.6%,接种在恢复培养基上培养,胚性愈伤组织能正常进行体细胞胚胎发生、成熟和植株再生.     

玉米幼胚愈伤组织诱导及植株再生研究

以玉米幼胚为外植体,研究了2,4-D不同浓度对愈伤组织诱导以及6-BA不同浓度对愈伤组织分化的影响.结果表明,2,4-D浓度显著影响愈伤组织的诱导,愈伤组织诱导培养基中2,4-D适宜的浓度范围是2～3 mg/L,但不同品种的外植体对2,4-D浓度反应不同,其中辽单565愈伤组织诱导2,4-D最佳浓度为2.62 mg/L,自交系742愈伤组织诱导2,4-D理论最佳浓度为2.60 mg/L;6-BA对植株的再生有促进作用,胚性愈伤组织分化的最适6-BA浓度为1.0 mg/L.     

不同植物生长调节剂对蓝果忍冬叶片愈伤组织诱导的影响

以蓝果忍冬品种邱雷姆和娜雷姆无菌苗叶片为外植体,添加一种或多种生长调节剂诱导愈伤组织,结果表明,不同生长调节剂对蓝果忍冬叶片愈伤组织诱导影响不同,单独添加2,4-D(0.5~2 mg·L-1)可有效诱导蓝果忍冬叶片产生愈伤组织,出愈率达100%;单独添加6-BA和TDZ无法诱导蓝果忍冬叶片产生愈伤组织;6-BA(1~2 mg·L-1)与2,4-D(0.2、0.5、1.0 mg·L-1)配合使用可改善愈伤组织状态,增加绿色致密型愈伤组织,愈伤量增多;添加6-BA、IBA、KT组合的三种生长调节剂,品种邱蕾姆出愈率和愈伤量优于娜蕾姆,三种添加方式比较而言,6-BA与2,4-D组合诱导效果相对较好。研究可为蓝果忍冬组培快繁体系建立奠定基础。     

薄荷离体培养愈伤组织诱导与植株分化

从薄荷幼嫩茎尖诱导出愈组织,以B5为基本培养基,添加1.0mg/L NAA和0.4mg/L BA,愈伤诱导率达到90%以上。植株再生,B5培养基优于MS培养基和N6培养基。在B5培养基中添加0.1mg/L NAA和5.0mg/L BA,植株再生频率达5%。     

植物生长调节剂对广西地不容愈伤组织诱导的影响

以广西地不容叶片、茎段为材料,采用正交设计法研究6-BA、2,4-D、NAA3种植物生长调节剂组合对广西地不容愈伤组织诱导的影响。结果表明：不同组合均能诱导广西地不容叶片和茎段产生愈伤组织,但诱导效果存在一定差异;除6-BA、NAA对茎段愈伤组织相对生长速率影响显著外,3种生长调节剂对叶片、茎段愈伤组织诱导率及叶片愈伤组织相对生长速率影响均不显著。诱导叶片、茎段愈伤组织形成的适宜培养基分别为6-BA0．5mg／L＋2,4-D0．4mg／L＋NAA0．2mg／L和6-BA1．0rag／L＋2,4-DO．8mg／L＋NAA0．8mg／L,有利于提高愈伤组织生长速率的适宜培养基是：叶片6-BA0．5mg／L＋2,4-D0．4mg／L＋NAA0．2mg/L,茎段6-BA2．0mg／L＋2,4-D0．2m昏几＋NAA0．4mg／L。研究结果为广西地不容再生体系的建立奠定基础。