海藻酸钠交联包埋法固定化纤维素酶研究

以海藻酸钠为载体,采用交联包埋法固定化纤维素酶.考察各因素对固定化酶相对酶活力的影响,并通过正交试验确定纤维素酶最佳固定化条件为:以1％戊二醛为交联剂,给酶量为64.52 μg/mL,纤维素酶与海藻酸钠溶液在65℃条件下固定化2h,滴入2％ CaCl2溶液中制备固定化纤维素酶.固定化酶酶活力较游离酶高约80％,其最适pH值向碱性方向偏移,最适反应温度不变,且固定化酶的酸碱稳定性和热稳定性均优于游离酶.     

纤维素酶固定化的最新研究进展

由于自然界中游离的纤维素酶活力比较低,不耐热,所以其应用受到限制,而把游离的纤维素酶制成固定化酶制剂后,与游离纤维素酶相比具有可重复操作,比游离酶耐温,与底物亲和力提高等特点。因此,酶的固定化可以改善游离酶的性质并提高其稳定性。近年来对纤维素酶固定化的研究比较多,文章主要对近年纤维素酶固定化的研究进展作一综述。     

细胞固定化技术--海藻酸钠包埋法的研究进展

概述了海藻酸钠(SA)包埋法细胞固定化技术的特点,分析了影响包埋的各主要因素及海藻酸钠(SA)包埋法的国内外研究现状和发展前景。     

海藻酸钠固定化中性蛋白酶的研究

探讨了中性蛋白酶在海藻酸钠中的固定化技术,并对影响固定化酶的固定化率和固定化酶活性的 因素进行了研究。结果表明,固定化酶的质量受海藻酸钠浓度、固定化酶量、固定化时间以及CaCl2浓度的影响,其 最佳工艺条件为:海藻酸钠浓度3．0％,固定化酶液量与海藻酸钠体积比1:2,固定化时间2．5 h,CaCl2浓度 3．0％,由此制得的固定化酶的固定化率可达97．5％,固定化酶活性为3 600 U／g,其热稳定性、pH值稳定性均极显 著高于游离酶。     

海藻酸钠法固定化酪氨酸酶的研究

为了确定海藻酸钠法固定化酪氨酸酶的最适条件,以海藻酸钠为栽体,研究了海藻酸钠浓度、CaCl2浓度、固定化时间和固定化酶的最适pH、最适温度、最适底物浓度及反复利用的稳定性.结果表明,最适固定化条件如下:3%海藻酸钠、2%CaCl2、固定化时间2 h.固定化酶的最适pH 7.0、最适温度30℃、最适底物浓度0.01 mol/L,反应进行5次后一半酶活损失.研究证明海藻酸钠法固定化酪氨酸酶转化邻苯二酚效果好,实用潜力大.     

两种改性壳聚糖载体对香菇纤维素酶固定化的研究

制备聚乙二醇改性壳聚糖(PEG-CS)载体与戊二醛改性壳聚糖载体,并以这两种载体对香菇纤维素酶进行固定化。探讨了载体制备过程中的主要影响因素与最适固定化酶条件,并对两种载体固定化纤维素酶的性能进行对比研究。结果表明,聚乙二醇改性壳聚糖与戊二醛改性壳聚糖固定纤维素酶的Km值分别为1.205、0.626g/L,游离酶的Km值为0.759g/L,两种载体固定纤维素酶的最适温度均比原酶有所提高,且前者的最适温度范围明显变宽;与游离酶相比,固定化酶有良好的操作和贮存稳定性。     

平菇纤维素酶固定化研究

从平菇中提取纤维素酶,通过戊二醛交联固定在壳聚糖上,戊二醛浓度为3%、给酶量为4 ml时固定化效果最好.原酶最适pH值为5.0,固定化酶最适pH值为3.0.原酶最适反应温度为55 ℃,固定化酶最适反应温度为70 ℃,60～90 ℃时均有较高酶活.     

新型硅基固载材料的制备及固定化酶性能

利用溶胶-凝胶原理,以正硅酸乙酯（TEOS）为原料,3?鄄缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷（KH-560）为偶联剂,在酸性条件下发生缩合反应制备新型基质材料,通过红外光谱（FT-IR）,固体核磁共振波谱（CP/MAS 13C NMR）和X-射线衍射（XRD）对基质载体进行结构表征。通过交联-包埋固定化法制备新型纤维素固载酶,分析研究了固载酶及游离酶酶解不同微观尺度纤维素基质的酶学性能。结果表明:固载酶进行酶促反应的最优pH 4.0,最优温度为60 ℃,表明固载酶的热稳定性优于游离酶;测得固载酶的米氏常数与游离酶无显著差异;固定化纤维素酶的重复使用性和储存稳定性较游离酶均有较大改善。有关研究可为制备性能优良的固载酶提供一定借鉴。图9表2参20     

海藻酸钠固定化莠去津降解酶的研究

选取包埋剂海藻酸钠浓度为2.0%、3.0%、3.5%、4.0%,固定剂氯化钙浓度为2.0%、3.0%、4.0%、5.0%以及酶液与海藻酸钠溶液包埋比为50%、20%、10%、5%,设计正交实验,将从细菌HB-5中提取到的莠去津降解酶进行固定化,测定不同配比制成的固定化酶对莠去津的降解特性。结果表明,莠去津降解酶的最佳固定化条件为海藻酸钠浓度为3.0%,酶液与海藻酸钠的包埋比为5%,氯化钙浓度为4.0%。最佳固定化时间为4h,适宜的保存温度为4℃。     

壳聚糖-海藻酸钠微胶囊固定化木聚糖酶的研究

[目的]研究游离酶和壳聚糖-海藻酸钠微胶囊固定化酶的酶学性质。[方法]以壳聚糖和海藻酸钠为载体,利用微胶囊技术固定木聚糖酶。[结果]结果表明,壳聚糖-海藻酸钠微胶囊法固定化木聚糖酶的固定率为39.4%,固定化酶和游离酶的Km值分别为0.765和0.687 g/L,固定化酶的热稳定性、重复操作稳定性和贮藏稳定性有了明显提高。[结论]采用壳聚糖-海藻酸钠微胶囊法固定化木聚糖酶具有一定的应用价值。     

香菇春季栽培的关键技术研究

分析了河南气候特征，讨论了香菇春季栽培的几项关键技术，根据接种后菌丝生长和子实体形成的温度要求，应利用当地气候特点，选择最佳栽培时期；香菇品种选用中低温型品种为宜；通风降温是菌袋安全越夏的保证；综合管理能确保香菇优质、高产高效益。     

香菇菌丝生理成熟特性及其生产应用

香菇菌筒通过培菌,只有达到生理成熟后才能出菇。其菌丝生理成熟的适宜温度为15-25℃,最佳为18-22℃;在成熟适温下累积够一定的日数才能达到成熟;不同香菇品种所需成熟适温日数也不同。     

纤维素酶高产菌株的筛选及最适产酶条件

从本实验室保存的57株菌株中筛选出一株可高效降解纤维素的纤维素酶高产菌株哈茨木霉APS62,其滤纸酶活力(FPA)为4.981 IU.g-1,是对照里氏木霉模式菌株APS63的3.02倍.产酶条件优化研究的结果表明,以稻草粉为底物,APS62菌株产滤纸酶的最适条件为:培养温度28℃,培养时间3 d,稻草粉与麸皮比5∶0,接种量6%,氮源为NH4NO3(总氮量0.4%),培养基起始pH为5.0,吐温80含量0.1%.此条件下的FPA为6.125 IU.g-1,比优化前提高8.10%.     

重组纤维素酶E4酶活性改变的初步研究

纤维素酶F4是一种噬温的丝状土壤放线菌Thermomonospora fusca分泌的一种特殊纤维素酶,对细菌微结晶纤维素(BMCC)有较高的活性,可与T.fusca中典型的外切酶和内切酶协同作用.初步研究显示,其不同底物水解活性与结合域(CBD)有很大关系,因此对F4的CBD进行删除,构建4组重组质粒,转入酵母GS115表达系统表达,得到对应重组蛋白.结果显示,CBD的删除对其温度、pH稳定性都有影响,且不同底物的降解活力有明显变化,对于纤维素酶降解机理复杂性有初步研究.     

不同来源香菇双-单杂交后代的遗传研究

采用交配基因型遗传标记的香菇野生株Q与栽培株苏香的孢子单核体和原生质体单核体进行完全亲和双－单杂交，并对杂交后代进行了遗传分析。显性检验表明，供试菌株的菌丝生长速度及CMC酶活力均达到极显差异水平。RAPD结果分析表明，6个杂交菌株在DNA水平上具有很高的相似性，但来源于原生质体单核体的杂交后代与来源于孢子单核体的杂交后代存在不同程度的差异，酯酶同工酶结果显示，来自孢子单核体的杂交后代比来自的生质体杂交后代的变异程度高，两种不同来源的杂交后代在农艺性状方面具有不同的变异范围。     

枫香与栎木基质栽培香菇比较分析

为科学评价枫香(Liquidambar formosana Hance)基质栽培香菇[Lentinus edodes(Berk)Sing]的可行性,试验比较了枫香基质对香菇菌丝生长和产量的影响,且对所栽培香菇的多糖、蛋白质含量及高效液相特征图谱进行了分析。结果表明,香菇品种森源135(L.edodes cv.Senyuan135)在不同比例枫香基质培养基的香菇菌丝生长速率方面略优于对照栎木基质培养基。随着枫香基质添加比例的逐渐增加,香菇菌丝满袋时间、转色完成时间略有延长,且产量略有降低。香菇醇提物的高效液相特征图谱基本一致,但枫香基质栽培的香菇多糖含量和蛋白质含量略高于栎木基质栽培的香菇。因此,采用枫香木屑代替传统栎木屑作为基质栽培香菇,技术上是切实可行的。     

香菇菌株的脱毒研究

香菇具独特香味且有多种保健功能,是我国栽培的主要食用真菌之一。但近些年我国大陆部分产区出现了不同程度的香菇病毒病,使香菇的产量和质量受到明显影响,重者绝收,损失严重。通过试验发现病毒在香菇中是普遍存在的。本文选取3株带毒香菇菌株,采用菌丝尖端挑取法（挑取长度小于0.2mm的菌丝尖端）进行脱毒。结果显示：通过菌丝尖端挑取法,获得一株无毒菌株（不含dsRNA条带）,和一些未完全脱毒菌株（含1条11kb的dsRNA）。对脱毒不彻底菌株、脱毒彻底菌株以及带毒菌株分别进行了生物学特性,纤维素酶、木聚糖酶、漆酶和多酚氧化酶活性的测定,发现在pH值8时,脱毒菌株的生长速度比带毒菌株快,脱毒菌株的漆酶和多酚氧化酶活性明显大于带毒菌株,而纤维素酶和木聚糖酶则没有显著区别。通过栽培实验,发现：三个菌株的子实体产量没有显著差别。     

香菇畸形菇成因分析

香菇在生产过程中往往由于品种选择和发菌管理不当等原因而产生畸形菇,直接影响香菇的品质,降低商品菇经济价值与生产效益.本研究对陕西省延安市香菇生产中出现畸形菇的原因进行了分析.结果表明:正常菇的污染率显著小于畸形菇的污染率;正常菇的菌丝体较畸形菇浓密、健壮、旺盛,菌丝体的生长速度极显著快于畸形菇.     

纤维素酶对壳聚糖降解作用的研究

目的：研究纤维素酶对壳聚糖的降解作用以及初步探讨壳聚糖水解反应的动力学。方法：测定反应液的粘度并用高压液像色谱(HPLC)分析壳聚糖水解的产物。结果：在18℃下水解180min后，壳聚糖溶液的粘度下降百分率为62．41％。水解的产物有氨基葡萄糖和它的二糖、三糖和四糖。水解反应随酶浓度的升高而加快，纤维素酶作用的最适温度为40℃。结论：纤维素酶能有效地催化壳聚糖降解。     

2种真菌纤维素酶系组分活性研究初报

在液体摇瓶培养和固体发酵条件下 ,对 2株产纤维素酶的野生型真菌的产酶动态和酶系活性进行了分析 ,并将固态酶曲与海林产酶粉进行了综纤维糖化对比试验。结果表明 ,2菌株酶系组分酶活较高 ,尤其是β-葡萄糖苷酶酶活远高于海林酶粉