鸡克雷伯氏菌病研究

本研究双鸡克雷伯氏菌病的流行病学，病原学，病理学，诊断学，以及防治法上进行试验。在国内首次较系统地报告了母鸡带菌垂直传播的死胚，幼雏带菌死亡型和小鸡间水平传播的小鸡腹泻败血死亡型的鸡克雷伯氏菌病；揭示了该菌具有肠素性和致细胞毒性；建立了具有当代国内先进、适用于生产的简易，快速，敏感的鸡克氏菌病玻璃凝集法和竞争性酶联免疫法。     

幼雏克雷伯氏菌病研究

本文在国内首次报告了一起由种鸡输卵管、泄殖腔带菌垂直传播，造成种蛋蛋白带菌，引起死胚、弱雏和幼雏腹泻败血症死亡的幼雏肺炎克雷伯氏菌病，病菌也可以通过口腔、脐孔行水平传播。     

对流免疫电泳检测鸡肺炎克雷伯氏菌抗原的研究

用对流免疫电泳检测鸡肺炎克雷伯氏菌抗原，结果表明，该法敏感，特异，快速，重复性好，且可用１％球脂为载体，０．０５ＭｐＨ８．６巴比妥液为电泳缓冲液。     

乌骨鸡产酸克雷伯氏菌病

重庆市××养鸡场自上海引进一批乌雏鸡,入场前后曾接种马立克氏病、法氏囊病及新城疫等疫苗。1995年3月8日,鸡群内开始出现病鸡,(其时雏鸡已80日龄,存栏4850只)两周内发病率达23.1％,致死率为10.2％,经病原分离鉴定确诊为产酸克雷伯氏菌病。用药敏试验法筛选出高效药物K_1散剂、氯霉素等进行治疗,制止了疫情,现报道如下: 1 发病情况 1995年3月8日,××养鸡场白丝羽乌骨鸡群内,突然发现两只病鸡,因有明显的拉稀症状,遂隔离用痢特灵治疗,治疗无效,两只病鸡均于当晚死亡。此后病鸡日渐增多,每日约有10～18只新病例发生、至3月14日发病鸡已越70只,虽即隔离并分组以青霉素、痢特灵、氨丙啉及磺胺类药物进行治疗均未获良效,未能控制疫情。     

鸡源肺炎克雷伯氏菌的致病性和生物学特性研究

本文系统地报告鸡源肺炎克雷伯氏菌通过口腔接种，种蛋及种蛋蛋壳用新洁而灭消毒而后涂沫该菌进行的感染试验，试验表明该菌不产生血凝素和溶血素，但具有肠毒素和致细胞病变因子等生物学特性。     

一鸡群发生臭鼻克雷伯氏菌病的诊治报告

1988年4月庆安县某户饲养的肉鸡群发生疫病,一周之内发病率高达93.4％,死亡率高4.6％。经综合诊断,确诊为臭鼻克雷伯氏杆菌病。通过药敏试验筛选出有效的药物进行治疗,制止了疫情。现报告如下。     

凝集试验检测鸡克雷伯氏杆菌病

本文建立了快速、简便、微量、高特异性的检测鸡克雷伯氏杆菌病玻片凝集试验。测得最适凝集原最适凝集原量为５０亿个菌／毫升，用来检测鸡克雷伯氏杆菌标准株和分离株的兔、抗血清效价分别为２５６－５１２（标准株）、５１２－１０２４（分离株）。临１６９分水岭分鸡粪样，８２５份鸡血清，阳性率分别为２８．４０％（４８／１６９）、２９．４５（２４３／８２５），而用细菌分离生化鉴定鸡粪阳性率为２９．５９（５０／１６９）     

用竞争性酶联免疫技术检测活猪盐酸克仑特罗残留

本文应用竞争性ＥＬＩＳＡ检测饲喂某厂生产浓缩料的健康猪,证实该逍缩料中添加了盐酸克仑特罗。     

鸡白血病病毒抗原ELISA试剂盒的研制和应用

以双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）为基本原理，成功地研制出鸡白血病病毒抗原ＥＬＩＳＡ试剂盒，该试剂盒与国外同类试剂盒相比，具备相同的特异性和敏感性，对ＲＡＶ－１纯化样品的最小检出量可达０．７８ｕｇ／ｍｌ，且敏感性高于直接补体结合试验。经初步应用发现，我国商品种鸡群ＡＬＶ阳性率为０．７－１４％，在部分ＳＰＦ鸡群中未检出阳性鸡。     

用ELISA检测猪链球菌病血清抗体（初报）

以2．5％NaCl浸提猪链球菌荚膜多糖抗原,选用2％明胶作封闭液,4％PEG－PBS为血清稀释液,用ELISA检测猪链球菌病血清抗体,特异性强,比琼扩敏感25-250倍,简便快速,在本病诊断、检疫中有一定实用价值。     

禽流感病毒夹心ELISA快速检测方法的研究

以禽流感病毒(AIV)湖北分离株(H9N2亚型)提纯物为免疫原，制备出鸡抗AIV和兔抗AIV抗体，经用琼脂扩散法测得效价分别为1:32和1:16。以纯化的鸡抗AIVIgG为包被抗体，兔抗AIVIgG为第二抗体，建立了检测AIV抗原的夹心ELISA法。结果表明，鸡抗AIVIgG的最佳包被浓度为1μg/mL，兔抗AIV IgG的最适工作浓度为5μg/mL；对已知的阳性样品，用夹心ELISA法测得的病毒滴度比血球凝集滴度高16倍以上，且能检出其它亚型的禽流感病毒；与新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病病毒、鸡痘病毒、马立克氏病病毒等无交叉反应，说明本方法有很高的特异性及敏感性。对14个鸡场送检的、患有呼吸道疾病或有腹膜炎、眼炎、产蛋下降、怀疑为禽流感感染的病鸡进行了检测，结果有7个鸡场为阳性。本方法的建立为禽流感病鸡群的临床检验提供了一种方便、敏感、快速的检测方法。     

间接法DOT—ELISA检测临床病料中的鸡传染性支气管炎病毒

将间接法ＤＯＴ－ＥＬＩＳＡ用于鸡传染性支气管炎感染的诊断，以病鸡肾１：１００的悬浮上清液进行了检测可以显示出阳性反应。     

鸡传染性支气管炎ELISA抗体检测试剂盒的研制

采用加蔗糖垫离心纯化鸡传染性支气管炎病毒(IBV)制备抗原，用提纯的IBV抗原包被微量板，建立了检测鸡传染性支气管炎(IB)抗体的ELISA试剂盒。抗原、被检血清和酶标结合物的最佳工作浓度分别为10ug／ml、1：200和1：3200。与IDEXX试剂盒相比，其敏感性、重复性、特异性均接近国外同类产品水平。对SPF鸡血清、实验免疫与攻毒的SPF鸡血清进行检测，结果表明所建立的ELISA特异性为95．6％，与IDEXX试剂盒符合率为95．6％。用于检测抗IBV特异性IgG抗体发现在免疫接种IB弱毒苗后，第4天即可检测到IgG抗体，峰值在第3周。试验鸡在通过滴鼻、点眼途径人工感染IBV强毒后，第5天抗体滴度明显上升。我们认为，该法是目前我国SPF鸡质量监测、养鸡生产中进行IB监测较好的方法。     

禽流感病毒重组核蛋白ELISA诊断技术的研究

用表达禽流感病毒（ＡＩＶ）核蛋白基因的杆状病毒感染Ｓｆ９昆虫细胞。以其表达产物制备抗原,建立了以杆状病毒系统表达的ＡＩＶ核蛋白为抗原的禽流感间接酶联免疫吸附试验诊断技术（ｒＮＰ－ＥＬＩＳＡ）。其抗原最适包被量为０．６μｇ／孔,等检血清最适稀释度为１：２００,酶标抗体使用浓度为１：１０００。根据对１４０份ＳＰＦ鸡血清检测结果的统计分析,确定其判定标准为ＯＤ均为阴性;检测Ａ型ＡＩＶ１５个不同亚型（Ｈ１￣Ｈ１５）毒株的特异性血清均为阳性;对人工接种ＡＩＶ的ＳＰＦ鸡第３天即能检出抗体,到第１６２天试验结束时检测仍为阳性。其批内和批间重复试验的变异系数分别在２．９％￣７．２％和３．４％￣９．８％之间。对３１３８份鸡血清进行监测,ｒＮＰ－ＥＬＩＳＡ与全病毒间接ＥＬＩＳＡ与全病毒间接ＥＬＩＳＡ（ＡＩＶ－ＥＬＩＳＡ）、琼脂扩散     

用重组核衣壳蛋白ELISA检测PRRSV抗体的研究

ＰＲＲＳＶ重组Ｎ蛋白ＥＬＩＳＡ检测人工感染猪血清７５份,与ＩＤＥＸＸ公司ＥＬＩＳＡ试剂盒及ＩＦＡ的符合率分别为９７．３％和１００％。检测疫苗免疫猪血清,阳性率１００％。在免疫后６ｄ就能检出抗体,比ＩＦＡ敏感。检测８５份我国田间猪血清,阳性率１８．８％。