MicroRNA及其对哺乳动物繁殖的影响

卵巢功能的正常维持有赖于卵巢生殖细胞和体细胞之间的相互作用及若干卵巢自分泌和旁分泌的调节.这些调节物质调控卵巢内不同的细胞活动,包括细胞生长、分化和凋亡,从而对卵泡的发育起着至关重要的作用.Micro-RNAs(miRNAs)是一种小的、非编码、21～25 nt长的单链小分子RNA,近年来科学家们发现其在基因表达转录后水平的调控发挥了重要作用.鼠上的研究显示,miRNAs在卵母细胞成熟和卵巢卵泡发育过程中有调控功能.人上的研究也表明,miRNAs影响颗粒细胞中特定的基因表达,并参与卵巢癌的形成和发展.本文将对miRNAs的生物合成,及其在哺乳动物繁殖系统中的表达,正常和病理情况下miRNAs在繁殖系统中可能的调控作用作一综述.     

microRNAs在成年羊驼皮肤组织中的表达

本研究旨在分析成年羊驼皮肤中miRNAs的表达,探讨miRNAs在皮肤和毛囊中的调控作用.利用多物种miRNA芯片与成年羊驼皮肤组织miRNAs杂交,来分析成年羊驼皮肤组织中miRNAs的表达.结果显示有20个miRNAs信号在4个样本中表达量高,microRNAs在羊驼皮肤表达,提示它们可能参与了皮肤和毛囊的更新、生长和发育.     

睾丸发育与精子发生相关miRNAs的研究进展

miRNAs是一类广泛存在于真核生物中参与调节不同生物过程的非编码小RNA,可在转录后特异结合mRNAs 3'非翻译区降解靶mRNAs或抑制其翻译,调控其表达。miRNAs对精子发生的细胞特异性调控,对调节雄性生殖具有重要意义。本文概述了miRNAs的生物合成、作用机制,特别是miRNAs对睾丸组织发育及精子发生的表达调控,旨在为进一步深入研究miRNAs在雄性生殖中的作用及分子调控机制提供参考。     

绒山羊骨骼肌miRNAs及其靶基因表达谱分析

本试验选取了miR-1、miR-133、miR-24、miR-122、miR-103、miR-143、let7 7个miRNAs,旨在对其表达量及靶基因表达谱进行分析.选用4只绒山羊的背部和后腿肌肉提取RNA,反转录后,利用SYBR荧光定量PCR来检测各miRNAs的表达量,并采用靶基因指纹图谱(MTFP)技术获得各miRNAs的靶基因表达谱.结果表明,miR-NA表达量依次为:miR-1＞ miR-133＞ miR-24＞ let7＞ miR-143＞ miR-103＞ miR-122,其中miR-1和miR-133表达规律相似,且这7个miRNAs在成羊中的表达量均高于羔羊;此外,miRNAs表达量的差异还受性别影响,且miR-NA表达量与靶基因个数及其表达量之间具有相关性.对5个miRNAs的10个靶基因测序并比对,表明靶基因分别编码与信号转导、细胞周期等相关的蛋白.通过这7个miRNAs与其靶基因表达的分析,揭示了肌肉发育相关miRNAs及脂肪发育相关miRNAs在绒山羊骨骼肌中的异同,有利于绒山羊肉质基因的研究.     

microRNAs调控动物骨骼肌细胞发育的研究进展

microRNAs(miRNAs)是一类长度约为22个寡核苷酸左右的内源性单链非编码RNA,在动植物进化过程中十分保守。近年来研究表明,miRNAs参与细胞分化、增殖、凋亡等生理过程并发挥着重要的调节作用.本文综述了miRNAs的来源和作用机制,miRNAs对动物骨骼肌细胞增殖分化,再生以及肌纤维类型调节的最新研究进展。     

牛肺泡巨噬细胞微小RNA的克隆与鉴定

MicroRNA(miRNA)是一类长19～26个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,其异常表达将会导致生理的异常和疾病的产生.为了研究miRNAs在牛肺泡巨噬细胞抗菌机制中的作用,构建了牛肺泡巨噬细胞miRNA cDNA文库,从438个克隆中筛选出22个miRNAs,其中有19个miRNAs在牛的miRBase数据库中没有发现,但是有8个miRNAs与人和(或)鼠中的序列完全同源,因此,将它们命名为Bta-miR-141、Bta-miR-187、Bta-miR-191、Bta-miR-448、Bta-miR-589、Bta-miR-873、Bta-miR-463和Bta-miR-562;另外有11个miRNAs在所有miR-Base数据库中都没有发现,有待进一步研究.这些数据为研究miRNAs调控牛肺泡巨噬细胞抗菌机制奠定了基础.     

脂肪酸调控奶牛乳腺microRNAs研究进展

脂类是一种可以为动物体储存和提供能量的物质,大量研究证实,日粮中脂类的改变可以改变microRNAs（miRNAs）的表达从而影响机体生命活动。本综述主要概括了脂肪酸对奶牛乳腺miRNAs的调控作用,从奶牛乳腺miRNAs表达特征、调控乳脂合成的miRNAs及外源添加脂肪酸对乳腺miRNAs的调控三个方面进行概述,旨在从转录后调控角度,建立营养物质与乳腺功能的联系,为未来相关研究提供参考。     

水牛泌乳期与非泌乳期乳腺组织miRNAs表达谱鉴定及差异表达分析

旨在鉴定分析水牛乳腺泌乳期和非泌乳期miRNA的表达谱和差异作用机制。采集水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织,利用Solexa测序技术构建2个时期miRNAs表达谱,鉴定前体miRNAs、成熟miRNAs和新miRNAs,分析miRNAs的第一偏好性核苷酸和染色体分布,发掘水牛泌乳期和非泌乳期高表达及差异表达miRNAs。结果显示,本研究构建了水牛泌乳期和非泌乳期乳腺组织2个miRNA表达谱,分别获得12 768 110和12 569 467条18~31nt的高质量序列。测序确认了归属259个miRNAs家族的359个成熟miRNAs和363个pre-miRNAs及5个水牛特有的miRNAs。U是19和25nt miRNAs的5′端最普遍的核苷酸。bbu-let-7b、bbu-let-7a、miR-26a和miR-21等miRNAs在2个时期均呈现高表达;bbu-miR-148a、143、200c、200a和bbu-let-7f等miRNAs在非泌乳期特异性高表达。bbu-miR-125b、29a和bbu-let-7c等miRNAs在泌乳期特异性高表达。bbu-miR-148a、143、200a、141和30a-5p等miRNAs在泌乳期的表达量下降为非泌乳期的1/2以下。而bbu-miR-26a、29a、125b、99a和bbulet-7c等miRNAs在泌乳期表达量大于或等于2倍非泌乳期丰度。本研究构建了水牛泌乳期以及非泌乳期乳腺组织2个miRNAs表达谱,测序确认了259个水牛miRNAs家族的359个成熟miRNAs和363个前体miRNAs,5个水牛特有miRNAs和10个高差异表达miRNAs,为进一步阐明奶水牛泌乳关键miRNAs作用机制奠定了基础。     

猪脂肪发育相关miRNAs的功能研究进展

脂肪组织与猪肉品质密切相关,是影响猪胴体品质的一大因素。了解猪脂肪组织的生长发育及代谢调控机制,对于畜牧生产及疾病治疗具有重大意义。miRNAs(microRNAs)是一类内源性的、非编码的、长度为18~24nt的小分子RNA,其主要通过调控基因表达的转录后水平起作用。大量研究表明,miRNAs参与调控脂肪细胞分化、脂肪形成、脂肪酸代谢、胆固醇合成等多个生命过程。然而目前已报道的猪miRNAs仅有326个,且miRNAs调控猪脂肪发育的研究十分欠缺。本文对近年来猪脂肪相关miRNAs的挖掘和鉴定研究工作进行回顾,同时也关注了miRNAs调控猪脂肪发育的研究。     

鸡马立克氏病病毒编码的miRNA体内表达特征分析

最新研究发现,鸡马立克氏病病毒(MDV)基因组编码的miRNAs在肿瘤发生发展中发挥了重要的调控作用.为阐明强弱毒株编码的miRNA差异表达与病毒复制的关系,本研究采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测了MDV CVI988疫苗株和MDV GA强毒株编码的M4-5P、M8-3P和M12-3P 3种miRNAs在肝脏和胸腺中的动态表达特征.结果表明,强弱毒株编码的这3种miRNAs在病毒感染过程中具有明显的差异性,其中GA株编码的miRNAs表达量高于CVI988株,这是由于强弱毒株在体内的复制滴度差异造成的,表明在感染前期miRNAs的表达量与病毒载量有关.该研究为进一步研究miRNAs的功能提供了实验依据.     

miRNA-33的生物学功能及其对脂代谢的调控

miRNA-33与脂代谢紧密相关,是微小RNA(miRNAs)家族成员中参与脂代谢调控的主要因子。而脂代谢异常是诱发心血管疾病的罪魁祸首,对人类的健康具有重大威胁。实际生产实践中,脂代谢异常对家畜及禽类的影响也逐渐受到重视。研究发现,miRNA-33通过对靶基因转录水平的调控,影响脂代谢相关蛋白的表达水平,从而影响脂肪酸合成、脂质积累、胆固醇流出、胆汁酸代谢、动脉粥样硬化等,进而实现调节机体脂代谢的作用。本文就miRNA-33的生物学功能及其参与脂代谢作用的研究概况进行综述,以期为探讨miRNA-33调控脂代谢作用的机制奠定理论基础。     

牛多个组织microRNASolexa测序与生物信息学分析

本研究旨在发掘牛更多的microRNA(miRNA)信息及新的miRNA序列,为进一步研究miRNA的生物学功能奠定理论基础.运用高通量测序技术对来自一头西门塔尔公牛和一头荷斯坦母牛的多个组织的小RNA进行混池测序,对测序结果进行了生物信息学分析.随机选取了一条成熟miRNA:bta-miR-2346-5p和两条新预测的miRNAs:novel_miR-48和novel_miR-86,采用茎环RT-PCR进行验证.共鉴定了604条miRNAs,其中429条为牛的已知miRNAs,175条为新预测的miRNAs.通过茎环RT-PCR发现选取的这3条miRNAs在背最长肌、心肌、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠、小肠中均有表达,证明了高通量测序结果的准确性.本试验得到的数据在一定程度上丰富了牛miRNA的数量和种类,为后续牛或其他物种的miRNA相关生物学研究提供了更加详实的信息.     

miRNAs对肠道健康的调控作用及机理

本文在介绍肠道组织miRNAs表达的基础上,主要就miRNAs的差异表达对肠道上皮细胞增殖、分化、凋亡的影响以及miRNAs在肠道黏膜免疫、抵御外界病原感染、抗应激、调节肠道营养代谢和维持肠道稳态等方面所起的作用及其机理进行了综述。     

中药王不留行增乳活性单体及催乳素对奶牛乳腺上皮细胞特异性miRNA的影响

本试验旨在研究中药王不留行增乳活性单体邻苯二甲酸二丁酯及催乳素对奶牛泌乳中期乳腺上皮细胞miRNAs表达的影响;荧光定量RT-PCR检测增乳活性单体邻苯二甲酸二丁酯及催乳素作用后乳腺上皮细胞miRNAs表达变化;王不留行增乳活性单体邻苯二甲酸二丁酯及催乳素均抑制原代培养的泌乳中期奶牛乳腺上皮细胞miRNA-143、miRNA-125和miRNA-195表达;邻苯二甲酸二丁酯可抑制miRNA-21表达,催乳素对miRNA-21表达的影响尚不确定。首次阐明中药王不留行增乳活性单体邻苯二甲酸二丁酯和催乳素能引起乳腺上皮细胞miRNAs表达变化。     

萨能奶山羊胎儿成纤维细胞miRNA文库的构建及生物信息学分析

本试验旨在丰富山羊miRNA文库，并探讨miRNAs在胎儿成纤维细胞生长调控中的作用。试验以萨能奶山羊胎儿成纤维细胞为研究对象，运用Illumina高通量测序和生物信息学技术分析山羊胎儿成纤维细胞miRNAs表达。成功构建了萨能奶山羊胎儿成纤维细胞miRNAs的cDNA文库，获得16 395 039 total reads，去除冗余数据后获得16 150 181条clean reads，其中unique sRNAs 205 857条。生物信息学分析获得候选新miRNAs 247条，候选miRNAs靶基因8 401个，靶基因位点数10 832个；同时分析发现候选miRNAs首位碱基对U和A具有偏向性。GO注释表明，69.6%的基因与细胞和细胞组分相关，超过54.1%的基因参与了细胞器相关活动，多达65.0%的基因与细胞及细胞过程相关联。KEGG通路分析显示，约10.5%的基因与代谢通路有关，是占比最多的一条通路，数据显示miRNAs对胎儿成纤维细胞具有重要调控作用。试验结果为胎儿成纤维细胞的生长调控及奶山羊乳腺生物反应器中供核体细胞miRNAs深入研究提供参考。     

microRNA与猪肌肉发育

MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,成熟的miRNAs可通过与靶基因的3′UTR结合,从而发挥对靶向基因负调控作用。目前,研究人员已经证明miRNA在机体的生长、发育、繁殖、分化和凋亡等生理过程中发挥重要的作用。猪肌肉发育的相关研究备受关注,猪肌肉的发育与其他动物一样,受众多基因的调控,这些基因的表达和翻译同时受miRNAs的调控。本文对miRNAs与猪肌肉发育的相关性进行了系统的分析,提出miRNAs在猪生产中的研究和应用的某些展望。     

MicroRNA研究方法进展

miRNAs是一类内源性、约22个核苷酸长度的非编码RNA,具有稳定的特异性序列以调节基因表达。2001年,miRNAs作为线虫生长发育过程中的调节器而被发现,在病毒、植物和动物体中,miRNAs已被公认为主要的调控基因家族之一,通过mRNA靶向作用降解或抑制其翻译。     

miRNA调控哺乳动物卵泡发育和卵母细胞成熟的研究进展

雌性哺乳动物的卵泡发育和卵母细胞成熟受繁殖关键基因的时空调控,miRNA作为一类小的非编码RNA,调节大部分此类基因的表达。近十几年来,研究者通过高通量测序、敲除miRNA生成过程中的关键基因以及过表达或抑制miRNA表达等方法找到了大量与哺乳动物卵泡发育和卵母细胞生长相关的miRNAs。通过研究这些miRNAs及其靶基因的互作关系,最终确定其在哺乳动物卵泡发育和卵母细胞成熟中的作用。本文综述了雌性哺乳动物主要生殖细胞及细胞外miRNAs在卵泡发育和卵母细胞成熟过程中的表达及潜在作用,以期为深入探究雌性哺乳动物繁殖调控机制提供参考。     

微小RNA对肠道健康的影响及作用机制

肠道既是机体营养物质消化吸收的主要场所,也是防御肠道微生物感染的先天性屏障,肠道健康是机体正常生长发育的关键。微小RNA(miRNAs)是基因转录后调控的重要因子。本文主要对肠道miRNAs表达情况,miRNAs在肠道细胞中的增殖、分化、凋亡,miRNAs在营养代谢、肠道屏障功能、肠道相关疾病进程调控中的作用以及肠道对外源miRNAs摄取等方面的研究进行综述,以期为相关研究的开展提供参考。     

细胞内源miRNAs影响副黏病毒功能研究进展

自2001年miRNAs被正式命名以来,对于miRNAs的研究已体现在病毒学研究的各个领域。目前的研究结果表明,细胞内源miRNAs能够影响副黏病毒免疫反应、细胞分裂与细胞凋亡、肿瘤生成等生物学过程。本文总结了细胞内源miRNAs对副黏病毒作用的靶基因及其功能,以期为深入剖析副黏病毒的致病机制提供理论支持。