GnRH在妊娠期黄牛下丘脑—垂体—卵巢轴中的表达

旨在研究促性腺激素释放激素(GnRH)在妊娠期黄牛下丘脑—垂体—卵巢轴中的表达,探索其与妊娠的关系。运用免疫组化ABC法和图像分析软件Image-ProPlus6.0对妊娠期黄牛下丘脑、垂体和卵巢组织中GnRH的表达情况进行研究。结果表明:(1)在下丘脑中,GnRH阳性神经元主要分布于下丘脑前核(AH)、乳头体内侧核(MMN)、腹内侧核(VMN)、弓状核(ARC)及室旁核(PVN),其中AH和MMN阳性产物分布面积(S)和累计光密度(IOD)值均较大(SAHSMMNSVMNSARCSPVN和IODAHIODMMNIODVMNIODARCIODPVN;P0.001);(2)在腺垂体中,存在大量GnRH阳性细胞,而神经垂体中仅有GnRH阳性纤维;(3)在卵巢中,GnRH阳性产物分布在妊娠黄体、卵泡颗粒细胞及间质中。结果提示,在下丘脑各核团中,AH和MMN的GnRH可能对维持黄牛妊娠起主导作用,而垂体和卵巢中GnRH可能是通过自分泌和旁分泌方式与相关激素协同作用来维持妊娠黄牛的激素平衡及内环境稳态等。     

禽类下丘脑-垂体-性腺轴的内分泌调节

动物生殖系统的发育和功能维持受到下丘脑-垂体-性腺（HPG）轴的调控。下丘脑、垂体、性腺在中枢神经的调控下形成一个封闭的自动反馈系统，三者相互协调、相互制约使动物的生殖内分泌系统保持相对稳定。下丘脑接受经中枢神经系统分析与整合后的各种信息，以间歇性脉冲形式分泌促性腺激素释放激素（GnRH），刺激垂体前叶分泌促性腺激素（GTH），即卵泡刺激素（FSH）和黄体生成素（LH），然后促进睾丸或卵巢的发育并分泌睾酮或雌二醇。性腺、垂体、下丘脑释放的调控因子又可以作用于上级中枢或其自身，形成长轴、短轴和超短轴反馈调节通路。     

GnRH对人工孪生处理母牛下丘脑—垂体—性腺轴的调控

从农区黄牛群中选择２１头产后正常母牛，分布三组。组Ⅰ在产后发情周期第１７天注射孕马血清促进腺激素（ＰＭＳＧ），发情当天注射抗ＰＭＳＧ血清，配种时注射生理盐水。组Ⅱ和组Ⅲ的ＰＭＳＧ及其抗血清处理方法与组Ⅰ相同，但在配种时分别注射促性腺激素释放激素或其抗体。     

下丘脑-垂体-性腺轴在动物生殖中的作用

下丘脑－垂体－性腺轴在动物生殖中的作用王根林（南京农业大学动物科技学院２１００１５）动物生殖是一个十分复杂的生理过程。广义而论，生殖过程的开始应从早期胚胎性分化为起点。虽然此时胚胎并没有一般意义上的性腺及性器官的明显发育，但却伴随着一系列生殖生理及形...     

Leptin和下丘脑一垂体-性腺轴

Leptin是一种主要由脂肪组织分泌的蛋白质类激素，广泛存在于各组织、器官中。它可通过调节能量代谢来保持体脂相对稳定。近年来研究发现，Leptin作为一种代谢信号对下丘脑－垂体－性腺轴的调节功能发挥着重要作用。其可以调节胎儿胎盘和子宫代谢，可以使动物提前发情，缩短发情周期，因此，在提高动物繁殖性能上有重要的应用价值。     

Booroola绵羊分泌学研究进展——Ⅰ.下丘脑——垂体轴的结果

从下丘脑－－垂体轴角度综述了Booroola美利权绵羊内分泌学研究进展。结果表明在新出生的和成年母羊黄体期、卵泡期和整个发情周期，乏情期、卵巢被摘除，下丘脑－－垂体切断联系之后，用GnRH处理的卵巢被摘除的母羊和卵巢完好的母羊，BB母羊血浆FSH浓度一致高于＋＋母羊的。FecB携带者高FSH释放不是由下丘脑GnRH浓度的变化引起的，不是由垂体GnRH受体结合特性引起的，也不是由下丘脑GnRH的释放引起的，而可能起源于FecB推带者中FSH蛋白翻译后修饰或分泌的差异。BB／B＋母羊比＋＋母羊，对外源GnRH、PMSG更敏感。     

苜蓿总黄酮对未达性成熟期及成年雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢性腺轴相关基因表达量的影响

为研究苜蓿（Medicago sativa）黄酮对动物未达性成熟期及成年期下丘脑-垂体-卵巢性腺轴相关基因表达量的影响,以雌性大鼠为模式动物,分为5个试验组：3个苜蓿黄酮剂量组（120,400,1200 mg·kg^-1）和2个对照组（己烯雌酚0.5 mg·kg^-1、空白对照组）。结果表明：未达性成熟期雌鼠中、高剂量组和己烯雌酚组促性腺激素释放激素（GnRH）表达量显著降低（P<0.05）;低剂量苜蓿黄酮组促黄体生成素（LH）表达量显著高于高剂量组（P<0.05）;其卵巢中苜蓿黄酮高剂量组促卵泡生成素受体（FSHR）表达量极显著升高（P<0.01）;芳香化酶（CYP19A-1）在苜蓿黄酮低剂量组表达量极显著升高11倍（P<0.01）,在己烯雌酚组显著升高8倍（P<0.05）。成年大鼠苜蓿黄酮3个剂量组和己烯雌酚组的GnRH表达量显著降低（P<0.05）;低剂量苜蓿黄酮的促黄体生成素受体（LHR）表达量极显著升高6倍（P<0.01）,CYP19A-1表达量比空白对照提高8倍（P<0.05）。苜蓿黄酮对不同生理阶段雌鼠影响各不相同,但都通过下丘脑-垂体-卵巢性腺轴产生负反馈调节,并通过负反馈调节显著抑制了GnRH的表达,从而影响雌鼠性腺轴上其他相关基因的表达量。     

初情期前后GPR54 mRNA在猪下丘脑-垂体-卵巢轴内的定位

研究应用原位杂交技术检测GPR54 mRNA在苏姜猪下丘脑-垂体-卵巢轴中的分布定位.在60日龄和初情期(160日龄)2个不同发育阶段的下丘脑-垂体-卵巢轴中均检测到GPR54 mRNA阳性杂交信号,结果表明:苏姜猪2个不同发育阶段的3种组织中均有GPR54 mRNA表达.其中下丘脑以弓状核、腹内侧核的阳性杂交信号最强,尤其是在初情期更明显;各级卵泡中以初情期时成熟卵泡的阳性杂交信号最强.     

ER免疫反应产物在幼龄公山羊下丘脑-垂体-性腺轴的表达

应用免疫组化SP法时雌激素受体(ER)免疫反应产物在幼龄公山羊下丘脑、垂体、性腺中的分布特点进行了研究。结果显示，下丘脑中ER免疫反应阳性神经元主要分布在视上核、室旁核、室周核等9个核团，在视前区、下丘脑外侧区等核团也有一定数量的阳性神经元；阳性细胞呈圆形、卵圆形、三角形不等，阳性物质大多位于细胞质和胞核，阳性纤维散布于各阳性核团中；在正中隆起和第三脑室室管膜可见大量小而密集排列的深染的阳性神经元。神经垂体中可见大小不等、排列较均匀且染色较深的纤维，腺垂体中腺细胞呈强阳性着色。睾丸曲细精管中的初级精母细胞和支持细胞以及睾丸间质细胞中的ER阳性产物均为微弱表达。由此表明，幼龄公山羊雌激素除作用于性腺外，还主要作用于中枢神经系统的广泛区域，推测其参与了脑中生殖、内分泌、认知等多种功能的调控。     

下丘脑-垂体-肾上腺轴参与动物采食调控的研究进展

采食是动物维持生命活动的基本生理过程,是动物生长发育的基础。畜禽采食量的高低直接影响到营养物质的摄入量及生产性能的发挥。在畜牧业生产中,影响采食的因素很多,而应激是其中一个非常重要的影响因素。动物机体的应激反应主要由下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴来调控。下丘脑、垂体和肾上腺皮质通过释放促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）和糖皮质激素（GC）这3种应激激素来协同调控动物的应激反应。应激激素对采食行为的调节是一个非常复杂的过程,主要通过稳态和非稳态途径来调节采食,可以双向调控食物的摄入量。稳态途径指的是通过调控机体能量稳态而调控采食。CRH和ACTH通过抑制下丘脑促食欲肽的表达而抑制采食;而GC在中枢和外周发挥着完全相反的作用。非稳态途径指的是通过影响中脑奖赏系统调控采食的愉悦感,是近年来食欲调控研究的热点,越来越多的研究证明了应激激素与奖赏系统的联系。作者针对应激激素调控采食的最新研究报道进行综述,以期为生产实践中新型的采食调控技术研发提供一定的参考。     

发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴差异表达基因筛选及分析

研究旨在分析发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴基因表达的差异,探讨母猪乏情调控的分子机制。选用6头健康的断奶初产母猪,分为发情组（3头）和乏情组（3头）,屠宰后分别采集下丘脑、垂体、卵巢进行转录组测序（RNA-Seq）、GO功能富集、KEGG通路及相关蛋白的Western blotting分析。结果发现,发情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52 432 800、52 573 730和52 209 252条clean reads,与猪参考基因组（Sus scrofa 11.1）的比对率分别为78.69%、81.49%和79.26%;乏情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52 516 724,52 476 820和52 195 962条clean reads,与猪参考基因组的比对率分别为82.38%、83.05%和80.20%。与发情组母猪相比,乏情组母猪下丘脑中共有710个差异表达基因,其中上调基因392个,下调基因318个;垂体中共有707个差异表达基因,其中上调基因283个,下调基因424个;卵巢中共有956个差异表达基因,其中上调基因635个,下调基因321个。3种组织中的共有差异表达基因为36个。与母猪情期调控相关的亲吻素-1（KISS1）、G-蛋白偶联受体54（GPR54）、速激肽3（TAC3）、速激肽3受体（TACR3）、17-α-羟化酶/17,20碳链裂解酶（CYP17A1）、芳香化酶（CYP19A1）、类固醇激素合成急性调节蛋白（STAR）、促性腺激素释放激素受体（GnRHR）和雌激素受体1（ESR1）基因在乏情组母猪体内显著下调（P<0.05;P<0.01）。Western blotting分析结果显示,TAC3、TAC3R、KISS1和GPR54相关蛋白在乏情组母猪下丘脑中也显著下调（P<0.05）。GO和KEGG通路分析发现,差异表达基因显著富集于正调控胆固醇酯化反应、卵巢类固醇生成、GnRH信号通路、FoxO信号等一些与类固醇激素生成和卵泡发育相关的信号通路。本研究结果表明,发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴上与情期调控相关的基因存在差异表达,尤其是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR3两大系统的mRNA及蛋白表达水平在乏情组母猪下丘脑中均显著下调,推测可能是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR表达受损导致了下丘脑调节功能障碍,进而导致了初产母猪乏情。该研究为揭示初产母猪乏情分子调控机制提供了重要支持,为今后利用分子技术改善母猪乏情问题提供了重要理论依据。     

哺乳动物促性腺激素细胞研究进展

哺乳动物促性腺激素细胞的增殖分化受多种因子影响,它分泌的促性腺激素在生殖调控中占有中心地位。文章系统地介绍了促性腺激素细胞的组织胚胎学研究、促性腺激素细胞分泌的促卵泡素和促黄体素的基因表达调控、分泌调节和合成代谢的研究情况,为研究生殖内分泌提供系统的资料。     

促性腺激素释放激素及其类似物在母猪繁殖中应用的研究进展

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH))是下丘脑分泌的生殖激素,主要通过下丘脑-垂体-性腺轴参与调控动物的生殖活动,也可直接作用于性腺或其他器官发挥重要功能。哺乳动物的GnRH具有相同的十肽结构,通过改变十肽结构中第六、九、十位氨基酸可合成不同的GnRH类似物。GnRH及其类似物可通过刺激促黄体素(LH)分泌、抑制雌激素受体二聚化及调节胚胎附植期相关蛋白质的合成来影响动物的繁殖性能。GnRH及其类似物已被证明可提高猪的繁殖力。在母猪生产中,GnRH类似物的应用仍存在受胎次影响、促进排卵但不能增加产仔数等问题。文章主要从GnRH的来源与功能、GnRH及其类似物的结构、GnRH受体(GnRHR)的结构与功能、GnRH及其类似物对母猪繁殖性能的影响,以及存在的问题与展望五方面介绍了GnRH及其类似物在母猪繁殖中的应用研究进展。     

哺乳动物成体干细胞的研究进展

干细胞具有自我更新能力,能够产生高度分化的功能细胞。干细胞按照发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。胚胎干细胞的发育等级较高,是全能干细胞,而成体干细胞的发育等级较低,是多能或单能干细胞。一般认为成年组织或器官内的干细胞具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,然而,研究结果表明,组织特异性干细胞同样具有分化成其他细胞或组织的潜能,这为干细胞的应用开创了更广泛的空间。作者主要综述了干细胞的研究进展及几种成体干细胞的诱导分化。     

哺乳动物胚胎干细胞研究进展

胚胎性干细胞包括从动物早期胚胎的卵裂球、囊胚内细胞团细胞分离建系的胚胎干细胞（embryonic stem cell,ESC）、从胚胎生殖嵴原始生殖细胞（primordial germ cell,PGC）分离建系的胚胎生殖细胞（embryonic germ cell,EGC）和来源于畸胎瘤中的胚胎性癌细胞（embryonic carcinoma cell,ECC）。ESC具有发育分化的多潜能性和无限的自我更新能力,能在体外长期培养并具有向机体各种组织细胞分化的潜能。所以,被广泛应用于胚胎发育与细胞分化调控的研究,作为修复器官与器官移植的种子细胞,并可用于转基因动物的生产。作者主要综述了干细胞的最新研究进展,ESC培养扩增诱导机制,定向分化方法。     

哺乳动物肠道干细胞与Wnt信号通路研究进展

肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)是位于胃肠道的一类具有持续增殖分化能力的细胞;Wnt信号通路是最早发现于果蝇体内的与胚胎发育和癌症发生相关的蛋白质作用网络,对维持肠内稳态具有多层次的调节作用。作者概述了肠道干细胞的研究进展和Wnt信号通路的主要作用,了解了肠道干细胞参与病理性炎性的过程,进而揭示了发育不良和慢性炎症导致癌症的分子机理。     

哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术研究进展

随着生物制品行业的快速发展,哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术已经运用到越来越多的领域中。该技术能够扩大哺乳动物细胞培养的规模,提高生物制品的产量及质量,拓宽哺乳动物细胞的应用领域,并促进哺乳动物细胞生产实现工业化与产业化。但悬浮驯化后的细胞,与父母代细胞相比,蛋白表达水平与生长调节通路均发生了不同程度的改变,使其生产性能受到影响。对此,国内外学者开展了大量的研究并取得了较好进展。作者阐述了哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术的研究现状以及临床生产工艺的优化策略,以期为哺乳动物细胞无血清全悬浮培养技术的发展提供参考。     

光照周期对褪黑激素受体在母兔下丘脑-垂体-卵巢轴中分布与表达的影响

旨在观察不同光照周期对新西兰白色母兔褪黑激素受体在"下丘脑-垂体-性腺轴"中的分布和表达模式,从而进一步分析褪黑激素在不同光照周期下调控母兔发情的机制。选用5月龄未经产新西兰母兔48只,随机分成3组,每组16只,前10 d各试验组采用"12 h光照：12 h黑暗"的光照制度,后6 d分别采用长光照（16 h光照：8 h黑暗）、短光照（8 h光照：16 h黑暗）和正常光照（12 h光照：12 h黑暗,对照组）的光照制度,光照强度80 lx,试验期为16 d。试验结束后剖杀动物,取下丘脑、垂体和卵巢,用qPCR、免疫印迹、免疫组织化学方法,研究不同光照周期对母兔的下丘脑、垂体、卵巢中褪黑激素受体亚型分布与表达的影响。结果表明：在下丘脑,短光照组的MT1 mRNA表达量较长光照组高88.8%（P<0.05）,较对照组高54.9%（P<0.05）,长光照组与对照组间无显著差异;MT2 mRNA表达量在不同光周期组间差异不显著（P>0.05）。免疫组织化学染色结果显示,长光照组下丘脑室周核的MT1阳性细胞数明显较短光照组少69.4%（P<0.05）,较对照组少37.3%（P<0.05）,短光照组比对照组显著多104.8%（P<0.05）;同样,长光照组室旁核的MT1阳性细胞数明显较短光照组少52.9%（P<0.05）,对照组明显较短光照组少55.8%（P<0.05）,而长光照组与对照组间差异不显著（P>0.05）。在垂体,短光照组的MT1 mRNA表达量比长光照组显著高164%（P<0.05）,比对照组显著高49.5%（P<0.05）,而长光照组比对照组显著低43.5%（P<0.05）;但不同光周期下MT2 mRNA表达量差异不显著（P>0.05）;长光照组的卵巢MT1 mRNA表达量较对照组低33.3%（P<0.05）,较短光照组低53.6%（P<0.05）,短光照组与对照组间差异不显著（P>0.05）;卵巢中短光照组MT2的mRNA相对表达量比对照组显著高90.0%（P<0.05）,比长光照组显著高100%（P<0.05）,长光照组与对照组差异不显著（P>0.05）。短光照周期显著提高了下丘脑、垂体和卵巢中褪黑激素受体亚型MT1表达,而不是MT2受体亚型。光照周期调控母兔发情的作用机制可能是褪黑激素通过MT1受体途径实现的。     

哺乳动物性别控制研究进展

为哺乳动物性别,从哺乳动物性别控制的机理、性别控制的方法及现状进行简要综述,控制技术在生产实践广泛应用提供理论指导。     

哺乳动物精子线粒体研究进展

哺乳动物精子线粒体是维持精子活力的关键细胞器,对精子超激活运动、获能、顶体反应及受精等过程起到重要的调节作用。哺乳动物精子线粒体特有的形态特征与特异性酶异构体使其具有独特动力学和调节特性。精子线粒体中发生的氧化磷酸化过程是维持精子运动的重要途径,该过程产生的活性氧对精子功能的维持具有重要作用,但过量可能导致精子损伤,加速精子凋亡。哺乳动物精子质膜磷脂酰丝氨酸外翻和相关半胱氨酸蛋白酶激活级联反应引起细胞凋亡。区别于体细胞线粒体,精子线粒体钙信号可能并未参与精子固有的凋亡途径,作为衡量线粒体功能的敏感指标,其对线粒体膜电位和耗氧量的检测研究至关重要。哺乳动物精子线粒体具有自身的遗传系统,线粒体基因拷贝数可能作为无创衡量精子质量和受精能力的标记。作者重点阐述了哺乳动物精子线粒体的结构、线粒体鞘的形成及其生物功能,包括发生在线粒体中的氧化磷酸化过程、活性氧对精子的利与弊、线粒体参与钙稳态与细胞凋亡过程;介绍了线粒体膜电位和耗氧量的检测,简述了线粒体基因组的研究进展,为进一步探讨线粒体所涉及的精子功能机制奠定基础。