细胞因子IL-2和IL-12在基因免疫中的佐剂作用

基因免疫(Gene immunization)又称DNA免疫或核酸免疫,是指将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)与质粒重组后,利用某种方法直接导入动物细胞内,使带有目的基因的表达载体转化到体内,通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生针对该抗原的抗体并引起特异的免疫应答以     

IL-18的免疫调节功能及其应用

IL-18是一种具有多向和多层次免疫调节功能的细胞因子,其细胞来源较广。它可通过NF-κB、p56LCK-MAPK、Perforin等多个信号传导途径参与细胞凋亡以及IFN-γ分泌诱导及功能性免疫细胞活性的激活,从而直接或间接激活T细胞、NK细胞、PBMC、DC等免疫细胞的增殖、分化、抗原呈递、CTL反应等,并诱导这些细胞分泌效应性细胞因子或延长免疫保护,进而促进免疫系统增强抗感染、抗肿瘤等免疫效应。IL-18除了主要介导细胞免疫外,在一定条件下,亦能促进抗原特异性中和抗体以及Th2型细胞因子的应答。在某些疾病的防治和诊断中,具有重要临床意义。     

IL-21对LPS诱导的巨噬细胞中细胞因子IL-1β、IL-10、IL-12 mRNA表达的影响

通过分离并培养BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞,采用SqRT-PCR的方法检测IL-21对LPS诱导的巨噬细胞中细胞因子IL-1β、IL-10、IL-12mRNA表达的影响。结果表明,与NT组相比,单独LPS处理组IL-1β、IL-10、IL-12mRNA表达明显增加,差异极显著;与LPS组相比,在IL-21+LPS组中,IL-21显著抑制LPS诱导的巨噬细胞中IL-1β、IL-10、IL-12mRNA表达,差异显著。以上结果表明,IL-21通过抑制LPS诱导的巨噬细胞中IL-10、IL-12、IL-1β的表达,在固有免疫应答中发挥一定的作用。     

PCV2感染的IPEC-J2的IL-6/TGF-β/IL-12变化

【目的】探讨猪圆环病毒2型(PCV2)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)后,IPEC-J2中病毒载量和部分炎性因子的变化。【方法】病毒感染IPEC-J2细胞,于不同时间收取样品,提取总DNA,用荧光定量PCR方法测定病毒载量变化;提取总RNA反转录,用荧光定量PCR方法测定IL-6、TGF-β1、IL-12的含量变化。【结果】病毒载量随时间持续增高,且在72h达到顶峰。IL-6在48h显示明显上调,24h下调;TGF-β1在12h和72h均明显上调;IL-12在不同时间点变化不大。【结论】PCV2可在IPEC-J2中增殖,上调IPEC-J2中IL-6和TGF-β1的表达。该结论为进一步研究PCV2的肠道免疫致病机制提供研究数据。     

纳洛酮对帕金森病IL-12P40表达影响的实验研究

目的 利用动物模型探讨纳洛酮对帕金森病(PD)细胞因子IL-12P40表达的影响.方法 30只SD大鼠随机分成3组,每组10只.第一组(PD组)立体定向将6羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)注入右侧黑质制作PD模型,术后每周用阿朴吗啡诱发旋转30min至第4周旋转>6次/min者定为成功的PD模型,第二组(纳洛酮)利用立体定向将纳洛酮注入大鼠的右侧黑质,然后用与第一组相同的方法 制作PD模型,第三组注入生理盐水作为对照组.取鼠的术侧中脑黑质利用免疫组化(IH)检测IL-12P40的表达.结果 IH检测IL-12P40,与正常对照组比较,PD组显著增加(P<0.01);与PD组比较,纳洛酮组表达显著减少(P<0.01).结论 纳洛酮对PD发病的重要干预机制之一可能是通过影响IL-12P40的表达来实现.     

乳酸菌与免疫调节作用

乳酸菌是人消化道区域主要的微生物菌群,并作为益生菌应用于发酵食品,特别是乳制品的生产中,膳食中提供活性乳酸菌可以防止多种疾病的发生。乳酸菌在免疫调节,保持消化道微生物菌群平衡,保护消化道感染等方面起着重要作用。本文简要介绍肠道免疫系统,乳酸菌免疫调节在抗炎、抗感染、抗肿瘤中发挥重要作用,以及免疫调节功能特性评价方法。     

壳聚糖的免疫调节作用及其机理研究

壳聚糖的化学名为β-1,4-2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖胺,是自然界存在的唯一的碱性多糖。它具有提高机体的免疫力、抗菌消炎、促进伤口愈合、抗酸、抗溃疡、降血脂、降血糖、降血压及直接抑制肿瘤细胞等多种作用。本文就壳聚糖的免疫调节作用及其机理进行综述。     

鸡IL-12的基因克隆与序列分析

IL-12是一个70 kD的异二聚体细胞因子。由40 kD(P40)和35 kD(P35)两条多肽链组成,编码这两条链的基因位于两条不同的染色体上,各自有不同的调节机制[1]。P35、P40亚单位必须在同一细胞表达才能产生具有生物活性的异二聚体P70单体,P40单体无生物活性[2]。IL-12的主要功能是在一系列病理、生理变化中促进TH1细胞增殖、分化、活化,还可以促进NK细胞增殖、分化。在体内IL-12可以增强机体抵抗细菌和寄生虫感染的能力,促进抗肿瘤免疫,影响抗病毒效应包括HIV;同时,它的过度表达可导致自身免疫性疾病和致死性炎症反应[3]。P40仅限于在一些…     

中草药的免疫调节作用

中草药中某些活性成分具有免疫调节作用,参与机体特异性免疫和非特异性免疫的过程。文章主要阐述了中草药某些活性成分对淋巴系统的T、B细胞、巨噬细胞、红细胞、细胞因子和天然杀伤细胞的免疫促进作用及对肿瘤抑制作用。     

Ghrelin的免疫调节作用

Ghrelin是1999年发现的一种含28个氨基酸残基的脑肠肽,主要由胃黏膜的内分泌细胞分泌,与特异性受体结合后,会产生一系列生物学效应,如刺激垂体前叶释放生长激素、增加采食等。该文就Ghrelin在免疫调节方面的作用进行简要综述,为以后Ghrelin应用于抗炎症与免疫调节方面提供相关资料。     

白细胞介素12的研究概况与进展

白细胞介素12因其独特的生物学功能自发现以来就成为研究热点。它能够通过刺激NK细胞活化、增殖及产生IFN-γ而改变Th1/Th2平衡向Th1方向发展,在细胞介导的免疫中发挥了重要作用,因此在抗肿瘤、抗病毒、抗寄生虫等方面有广阔的应用前景,并成为一种良好的疫苗免疫佐剂。     

致病性耐药大肠杆菌的噬菌体裂解试验

临床分离的致病性大肠杆菌的耐药谱很广,常规抗生素的治疗效果较差,对18种抗生素的平均耐药率高达80%。而用从污水中分离得到的噬菌体,经纯化增殖提高效价后,用来进行裂解试验则取得了比较满意的效果,其中对H1、H2、B1、P等几种菌的裂解率在80%以上。     

Production of biologically active equine interleukin 12 through expression of p35, p40 and single chain IL-12 in mammalian and baculovirus expression systems.

Interleukin-12 (IL-12) is a key cytokine in the development of cell-mediated immune responses. Bioactive IL-12 is a heterodimeric cytokine composed of disulphide linked p35 and p40 subunits. The aim of this study was to verify biologically activity of the products expressed from equine interleukin-12 (IL-12) p35 and p40 cDNAs and to establish whether equine IL-12 could be expressed as a p35/p40 fusion polypeptide, as has been reported for IL-12a of several mammalian species. We report production of equine IL-12 through expression of p35 and p40 subunits in mammalian and insect cells and of a p35:p40 fusion polypeptide in mammalian cells. Conditioned medium recovered from cultures transiently transfected with constructs encoding equine p35 and p40 subunits or single chain IL-12 enhanced IFN-gamma production in cells derived from equine lymph nodes. Preincubation of IFN-gamma inducing preparations with anti-p40 monoclonal antibody resulted in a significant decrease in IFN-gamma induction capacity. Medium recovered from p35 and p40-expressing baculovirus infected cultures enhanced target cell IFN-gamma production and proliferation. Experimental studies in mice and other animals have revealed a therapeutic benefit of IL-12 in cancer, inflammatory and infectious disease and an adjuvant effect in prophylactic regimes. Production of a bioactive species-specific IL-12 is a first step towards an investigation of its potential application in equine species.     

广西沼泽型水牛IL-4和IL-5基因的克隆及其序列分析

从刀豆素A(Concanavalin A,ConA)刺激的广西沼泽型成年水牛外周血单个核细胞(Peripheralblood mononuclear cells,PBMCs)中提取总RNA,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增出白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-5(IL-5)基因,分别克隆到pMD18-T载体上,进行序列分析。结果表明,从培养9 h、17 h的单个核细胞中扩增得到的IL-4基因在核苷酸水平上与GenBank上登录的印度水牛IL-4 cDNA序列同源性为98.8%,与牛、绵羊、猪和马的同源性分别为99.3%、94.1%、84.8%和80.6%;氨基酸水平的同源性分别为96.3%、98.5%、90.4%、78.4%和59.6%。从培养12 h的单个核细胞中扩增得到的IL-5基因在核苷酸水平上与GenBank上登录的牛、绵羊、猪和马IL-5 cDNA序列同源性分别是99.0%、96.5%、89.6%和89.1%;氨基酸水平的同源性分别为97.8%、96.2%、85.9%和86.7%。本研究为进一步了解水牛IL-4和IL-5的结构和水牛免疫学特性奠定了基础。     

NO、TNF和IL-2与新型鸭肝炎病毒感染雏鸭肝脑组织损伤的关系

用新型鸭肝炎病毒人工感染9日龄健康樱桃谷雏鸭，对感染后12、24、48、96、168h和14d雏鸭血液、肝和脑组织中一氧化氮（NO）含量，血液中肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素2（IL-2）含量进行了测定，同时对感染雏鸭的组织病理学变化进行了观察。结果表明．血清中NO含量在接种后48h开始升高，一直持续到接种后96h，接种后7d恢复正常；肝脏组织中NO含量仅在接种后24h与对照组比较显著升高，在其他时间未表现有差异；脑组织中NO含量在整个试验期间没有变化。血清中的TNF和IL-2含量在接种后24h均表现升高，接种后96h降低，其他时间无改变。感染雏鸭的肝组织在接种后24h表现出血性坏死性肝炎变化，接种后48～96h呈增生性病变，而接种后各时期脑组织均呈非化脓性脑炎变化。由此表明，新型鸭肝炎病毒感染可导致雏鸭体内NO、TNF和IL-2发生变化，并且与肝组织损伤、疾病的发生发展有关。     

枸杞多糖对免疫抑制小鼠血清中IL-6、IL-10和IL-12/IL23 p40分泌水平的影响

通过研究枸杞多糖(LBP)对免疫抑制小鼠血清中细胞因子IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10分泌的影响,探讨LBP的免疫调节机制,为LBP的开发利用提供理论依据。60只ICR雌性小鼠,随机分为5组,对各组小鼠进行连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(40mg/kg),间隔3d后,再连续4d每日腹腔注射环磷酰胺(40mg/kg);同时,用高(40mg/1kg)、中(20mg/1kg)、低剂量(10mg/1kg)的LBP给小鼠连续灌胃2周,阳性对照和阴性对照分别用LPS(1mg/kg)和PBS,连续2周。小鼠眼眶取血,分离血清,ELISA检测血清中IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10的分泌水平。结果显示,与阳性对照和阴性对照组相比,LBP能提高免疫抑制小鼠血清中IL-6、IL-12/IL-23p40和IL-10的分泌水平,提示LBP能增强小鼠细胞免疫与体液免疫应答,为枸杞多糖作为免疫增强剂的开发应用奠定了一定的理论基础。     

中药复方对热应激下猪肠道组织IL-2 IL-10和黏液IgA含量影响

随着我国畜禽集约化养殖业的不断发展,应激性疾病,尤其是热应激已经成为我国养殖业中的重要疾病之一[1]。动物胃肠道不仅是消化、吸收营养物质的场所,也是动物体内免疫器官[2]之一,即肠壁内有大量的淋巴组织如上皮内淋巴细胞(iIEL)、固有层淋巴细胞(LPL)和Peyer's淋巴小结等,且     

不同光照条件下褪黑素对鸡鸭外周血中白介素含量变化的影响

为探讨不同褪黑素水平对禽类机体免疫系统的调节作用,本试验通过控制不同光照时间分3组(分别是短光照组6h,对照组12h,长光照组18h)饲养鸡45只、鸭45只,采用放射免疫法(RIA)测定血清中褪黑素(MLT)和白介素(IL-2、IL-6)含量,研究不同褪黑素水平对鸡、鸭血清中IL-2,IL-6含量变化的影响。结果表明:短光照组的鸡、鸭血清中褪黑素水平明显升高;长光照组血清中褪黑素水平明显降低,且与对照组相比,差异显著;短光照组鸡、鸭血清中IL-2含量由于褪黑素水平的升高而有不同程度的升高,长光照组的则有不同程度的降低,分别与对照组相比,差异显著;IL-6含量随光照时间变化不明显。结论:由于控制光照时间使内源性褪黑素水平不同,褪黑素水平对鸡、鸭外周血IL-2含量有显著影响,对IL-6含量影响不明显。     

IL-21及其受体在IBD大鼠结肠、大脑组织中的表达规律

从脑-肠互作的角度出发,研究IL-21及其受体在TNBS化学诱导的IBD模型大鼠的结肠、大脑组织中mR—NA表达水平以及血清蛋白水平变化,以此探讨IL-21在炎症性肠病中的调节作用。建立了大鼠IBD模型,用荧光定量PCR方法检测IL-21及其受体mRNA在结肠、大脑组织中的表达水平变化,并采用ELISA方法测定血清中IL-21在IBD大鼠不同发病时期的蛋白水平。结果显示：IL-21及其受体在IBD大鼠结肠和大脑组织中的mRNA水平的呈现一致变化,即随着炎症的加剧而逐渐增加,在痛变最为严重的时候达到最大值,而随着炎症的消退逐渐恢复至正常水平。在血清中,IL-21蛋白浓度变化也表现出一致的变化趋势。结果表明,IL-21参与了肠道炎症进程,并且IL-21可能通过脑一肠互作来调节IBD的炎症进程。     

白细胞介素-12对犬细小病毒VP2 DNA疫苗的免疫增强作用

犬细小病毒编码的VP2蛋白是该病毒重要的结构蛋白和抗原蛋白。利用VP2基因制备的DNA疫苗能够刺激机体产生免疫应答反应。为进一步提高VP2DNA疫苗的免疫应答水平,本研究在小鼠体内尝试了利用白细胞介素12（IL-12）基因表达载体提高VP2DNA疫苗的免疫应答水平。首先采用RT-PCR方法从小鼠脾淋巴细胞中分别扩增IL-12大亚基（P40）和小亚基（P35）cDNA基因;然后在真核表达载体pcDNA3.1A上通过引入内部核糖体进入位点（IRES）序列,分别将P40基因和P35基因插入到IRES序列的上下游,构建成IL-12（P40和P35双亚基）基因表达载体,pcDNA-P40-IRES-P35。将上述表达载体与本室构建的VP2表达载体通过磷酸钙方法转染HEK 293T细胞进行瞬时表达,以确定构建的表达载体能否介导相应基因在真核细胞中进行分泌表达。然后用VP2载体单免疫和VP2载体和IL-12载体共免疫方法对小鼠进行免疫（用pcDNA3.1A作为对照）。免疫后在特定时间通过ELISA方法检测小鼠血清抗VP2蛋白的抗体水平,并通过淋巴细胞增殖实验检测免疫后35d小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应。结果表明,扩增的小鼠IL-12P40和P35亚基基因与GenBank的参考序列基本一致。Western-blot检测结果表明,重组IL-12和VP2均能够在HEK293T细胞中进行分泌性表达。ELISA检测结果表明利用IL-2载体与VP2载体共免疫小鼠,其血清中抗VP2的抗体水平明显高于VP2载体单免疫组（P〈0.01）,抗体水平在第35天高达1：5120。淋巴细胞增殖试验结果表明,免疫小鼠的淋巴细胞刺激指数均明显高于对照组（P〈0.01）,VP2载体与IL2载体共免疫组的刺激指数明显高于VP2载体单免疫组（P〈0.05）。由此可见,在小鼠体内,IL-12基因表达载体可明显提高CPV VP2基因疫苗的免疫应答水平。