温度对果梅离体花柱S-RNase识别特异性的影响

 【目的】研究不同温度对果梅花柱S-RNase降解花粉管RNA的影响,为揭示果梅自交不亲和性机制提供依据。【方法】在液体培养基中添加从果梅‘月世界’花柱中纯化的S-RNase,并分别于10℃、25℃和35℃条件下培养自花（‘月世界’）、异花（‘莺宿’）花粉,测定不同培养时间后的花粉萌发率和花粉管生长长度;离体条件下进行果梅花柱S-RNase降解花粉管RNA反应后,用琼脂糖凝胶电泳检测不同温度条件下自花、异花花粉管RNA被降解的程度。【结果】10℃、25℃时,花柱S-RNase抑制自花花粉萌发和花粉管生长的程度极显著大于抑制异花花粉的程度;花柱S-RNase降解自花花粉管RNA的程度也明显大于降解异花花粉管RNA的程度;温度升高到35℃时,自花和异花间花粉萌发和花粉管生长被花柱S-RNase抑制的程度不存在显著性差异;花柱S-RNase降解自花和异花花粉管RNA的程度也相似。随着反应温度的升高,花柱S-RNase较大程度抑制自花花粉萌发和花粉管生长的特异性及较大程度降解花粉管RNA的特异性逐渐减弱,当温度达到35℃时,该抑制特异性和降解特异性消失。【结论】果梅花柱S-RNase特异性识别并降解自花花粉管RNA,导致自花花粉管停止生长;随着温度的升高花柱S-RNase对花粉管RNA的识别特异性减弱,从而调节果梅的自交不亲和性反应。     

苹果花柱蛋白质对其花粉萌发及生长的影响

[目的]研究花柱蛋白质对苹果(Malus domestica)花粉萌发及生长的影响,为克服苹果自交不亲和提供重要依据。[方法]以6个苹果品种(红奥、早红香、嘎拉、富士、金冠和夏光)的花柱和花粉为试验材料,花柱蛋白质浓度分别为0.5、1.0、2.0、3.0、5.0μg/μl,以不添加花柱蛋白质为对照。[结果]培养基中加入不同浓度苹果花柱蛋白质对其自花花粉萌发和生长均有抑制作用,并且同一品种花粉萌发受抑制程度随培养基中花柱蛋白质浓度的提高而加强。培养基中加入花柱蛋白质后对自交亲和的苹果品种早红香花粉萌发和花粉管生长的抑制程度较自交不亲和苹果弱,花粉萌发率均在76.46%以上,花粉管长度在770.16μm以上。[结论]花柱蛋白质对苹果花粉萌发及生长均有抑制作用,且对自交亲和品种的抑制程度较自交不亲和品种弱。     

Effects of Apple(Malts domestica) Style Protein on Its Pollen Germination and Growth

[目的]研究花柱蛋白质对苹果(Molus domestica)花粉萌发及生长的影响,为克服苹果自交不亲和提供重要依据.[方法]以6个苹果品种(红奥、早红香、嘎拉、富士、金冠和夏光)的花柱和花粉为试验材料,花柱蛋白质浓度分别为0.5、1.0、2.0、3.0、5.0 μg/μl,以不添加花柱蛋白质为对照.[结果]培养基中加入不同浓度苹果花柱蛋白质对其自花花粉萌发和生长均有抑制作用,并且同一品种花粉萌发受抑制程度随培养基中花柱蛋白质浓度的提高而加强.培养基中加入花柱蛋白质后对自交亲和的苹果品种早红香花粉萌发和花粉管生长的抑制程度较自交不亲和苹果弱,花粉葫发率均在76.46％以上,花粉管长度在770.16μm以上.[结论]花柱蛋白质对苹果花粉萌发及生长均有抑制作用,且对自交亲和品种的抑制程度较自交不亲和品种弱.     

微型月季花粉离体萌发培养基组分的优化

采用液体培养法研究了不同培养基组分对微型月季Unconditional Love花粉萌发和花粉管生长的影响,旨在为微型月季花粉活力检测和杂交育种提供参考。结果表明,在液体培养基内添加蔗糖、硼酸、硝酸钙、硫酸锌、硫酸镁和硝酸钾,均能促进微型月季Unconditional Love花粉萌发和花粉管生长;在一定范围内,花粉萌发率和花粉管生长长度均随培养基组分添加量的增加而增加,但超过一定添加量时,则出现抑制作用;在此基础上通过正交试验,比较了蔗糖、硼酸和硝酸钙对花粉萌发和花粉管生长的影响,结果表明,最适合微型月季花粉萌发的蔗糖、硼酸和硝酸钙3种组分的培养基配方为蔗糖150 g/L+H_3BO_3125 mg/L+Ca(NO_3)_2·4H_2O 100 mg/L。     

离体条件下微丝骨架解聚剂和稳定剂对梨自交不亲和性花粉萌发和花粉管生长的影响

以2个自交不亲和性梨品种“今村秋”和“丰水”为试材,在离体条件下通过花粉培养试验研究了不同浓度的微丝稳定剂鬼笔环肽（phalloidin）和微丝抑制剂细胞松弛素B（cytochalasin B）对梨花粉萌发率和花粉管长度的影响。结果表明：1）低浓度（10μg／ml）鬼笔环肽能促进花粉萌发和花粉管生长,但高浓度对花粉萌发和花粉管的生长具有抑制作用;细胞松弛素B抑制花粉萌发和花粉管生长,并且抑制效果随着浓度的增加而增强。2）细胞松弛素B和异花花柱S糖蛋白（S-Rnase）共同处理抑制了花粉萌发和花粉管生长,而一定浓度的鬼笔环肽能恢复自体花柱S糖蛋白对花粉萌发和花粉管生长的抑制作用。结果表明微丝骨架参与了梨花粉萌发及花粉管生长的过程,并可能参与了梨自交不亲和反应过程。     

‘嘎拉’苹果花粉萌发中培养基组分和培养条件优化

旨在优化‘嘎拉’苹果花粉萌发中不同培养基组分的添加量和培养条件,为生产中人工授粉和开展相关研究提供参考。采用花粉液体培养法,研究不同培养基组分和培养条件对花粉萌发的影响,结果表明,在液体培养基内添加硼酸(H_3BO_3)、氯化钙(CaCl_2·2H_2O)、尿素、聚乙二醇(PEG-3350)和蔗糖,均能促进‘嘎拉’苹果花粉萌发和花粉管生长;在一定范围内,花粉萌发率和花粉管长均随培养基组分添加量的增加而增加,但超过一定添加量时,促进作用逐渐减弱;当H_3BO_3、CaCl_2·2H_2O、尿素、PEG-3350和蔗糖的添加量分别为0.3、0.3、3.0、150和80g/L时,‘嘎拉’苹果花粉萌发率最高,花粉管长也达到最大值;花粉萌发率和花粉管长均随培养基pH的升高呈先增加后降低的趋势,花粉液体培养最适pH为6.5;随着培养温度的增加,花粉萌发率和花粉管长则呈先快速增加后骤降的趋势,花粉液体培养最适温度为25~30℃。     

离体萌发法测定垂丝海棠花粉生活力的研究

应用离体萌发法对垂丝海棠的花粉生活力进行测定,同时研究了不同浓度的钙对花粉萌发和花粉管生长的影响。研究结果表明,垂丝海棠花粉萌发和花粉管生长的最佳培养基是:0.8 g琼脂+15 mg/L蔗糖+2.0 mg/L硼酸;低浓度的钙对花粉萌发和花粉管的生长有促进作用,高浓度的钙对花粉萌发和花粉管的生长有抑制作用;培养基中的Ca(NO3)2浓度为1.6×10-5mg/L时最适合垂丝海棠花粉萌发和花粉管的生长。     

巴西野牡丹花粉活力与花粉管生长特性研究

以巴西野牡丹(Tibouchina semidecandra)花粉为材料,筛选花粉活力测定的最佳方法,同时探讨了光照对花粉萌发的影响;通过荧光显微观察不同授粉时长的花柱。结果表明:本试验中最适宜巴西野牡丹花粉生活力测定的染色方法为联苯胺染色法;与染色法相比,离体培养基法测定花粉生活力更可靠;适合的最佳萌发培养基为:蔗糖200 g/L+硼酸200 mg/L+CaCl_2 50 mg/L。光照对花粉萌发影响显著。荧光显微观察授粉3 h后花粉就已萌发,授粉12 h就有少数花粉管(20根)达到花柱底部,授粉48 h大部分的花粉管(80%)达到花柱底部。花粉管生长过程存在胼胝质阻挡、花粉管尖端膨大、花粉管缠绕等异常现象,从而不能通过柱头完成受精作用,表现出典型的配子体型自交不亲和性。     

牛角瓜花粉萌发及花粉管生长研究

运用方差分析、多重比较、正交实验和极差分析方法,对牛角瓜花粉的萌发和花粉管生长进行研究,结果表明,培养基内硼酸、硝酸钙、蔗糖、硫酸镁在一定浓度范围内,对花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但浓度过高或过低时,则有抑制作用;钾对花粉萌发及花粉管生长影响不显著;蔗糖和硝酸钙对牛角瓜花粉萌发有显著影响,蔗糖和硫酸镁对牛角瓜花粉管生长有显著影响;牛角瓜最适花粉液体培养基为:15%蔗糖+350mg/L Ca(NO_3)2·4H_2O+60 mg/L H_3BO_3+150 mg/L MgSO_4·7H_2O;在30~35℃温度条件下,牛角瓜花粉块萌发和花粉管生长最好。     

香花槐花粉萌发特性的测定

以香花槐的新鲜花粉为试验材料,利用TTC(氯化三苯四氮唑)和碘-碘化钾染色法及培养基萌发试验,选配出最适合花粉萌发的培养基.以研究不同浓度的Ca2+对花粉萌发和花粉管伸长的影响.结果袁明:香花槐花粉管萌发和花粉管生长的最适培养基是10 mg/L蔗糖+2.0mg/L硼酸+0.8g琼脂.较低浓度的钙对花粉萌发和花粉管生长有促进作用,而较高浓度的钙对其有一定的抑制作用.     

海州常山花粉活力测定及其萌发条件1）

选取海州常山（ Clerodne drum trichotomum Thumb．）花粉为研究对象,研究了海州常山花粉活力测定的方法、最佳培养基配方及其最佳培养条件;探究了花期及花粉采集时间对海州常山花粉萌发的影响。结果表明：染色法及无机酸培养法不适宜于海州常山花粉活力的测定,最佳花粉活力测定法为液体萌发法;海州常山花粉萌发最佳培养基配方为150 g· L－1蔗糖＋200 mg· L－1硼酸＋150 mg·L －1氯化钙;其中硼酸及氯化钙pH值为5．5条件下花粉萌发效果更佳;花粉最适宜培养条件为干燥9,h 于25℃光照条件下液体培养8 h;花粉活力最强时间为花后1～2 d的08：00。     

甜柿花粉萌发及贮藏特性研究

为研究甜柿花粉的萌发特性及适宜的贮藏方法,以"禅寺丸"花粉为试料,研究了不同蔗糖浓度,不同硼酸浓度,不同酸碱度,不同培养温度以及不同贮藏条件对"禅寺丸"花粉发芽的影响.试验结果表明:"禅寺丸"花粉最适培养温度为25℃,培养基附加10%蔗糖,50 mg/L硼酸,pH为6,该培养条件下花粉萌发率达到最大值69.53%;适宜的花粉贮藏条件依次为:-20℃冷冻干燥,-20℃冷冻,4℃冷藏干燥,4℃冷藏,常温干燥和室温保存.此研究可为甜柿生产上的花粉贮藏和人工授粉提供参考依据.     

不同染色剂及培养条件对马铃薯花粉育性测定结果

采用花粉染色、花粉萌发方法对6个马铃薯品种(系)花粉的育性进行了测定,结果表明,染色剂间、染色剂与品种互作间差异不显著,而马铃薯品种(系)间花粉育性差异极显著,其中以四倍体栽培品种甘农薯3号花粉育性最强,体细胞杂种C-1-4、C-1-12和四倍体栽培品种甘农薯1号次之,体细胞杂种P-1-12和P-2-118育性最差.研究还表明,马铃薯花粉培养以液体萌发培养基(8%蔗糖 1.5 mg/L硼酸 100 mg/kg氯化钙溶液)效果最佳,其培养条件为在28～30 ℃黑暗条件下培养5 h.通过比较,马铃薯花粉生活力测定方法以发芽法较染色法结果更理想.     

金太阳杏花粉量及花粉活力测定研究

[目的]比较金太阳杏花粉量及花粉活力的测定方法。[方法]采摘金太阳杏各单株已达气球期、饱满、正常、未开裂的花蕾,收集花粉,通过染色法、离体萌发法测定花粉活力,研究不同浓度的蔗糖、硼酸对花粉萌发花粉管的影响,并测定每枚花药花粉量。[结果]通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定花粉活力为11.50%。对于离体萌发法,当培养温度为25℃、培养基p H为6.5、蔗糖浓度为10%、硼酸浓度为25μg/m L时花粉萌发花粉管效果最好,此时花粉活力为27.00%。金太阳杏花粉量测定用单枚花药花粉量来衡量,测得单枚花药花粉量平均为1 303。[结论]试验结果为提高育种效率提供了理论依据。     

小叶野决明花粉萌发与低温贮藏研究

用不同方法测定小叶野决明花粉生活力,确定小叶野决明花粉离体萌发的最适培养基、培养时间、培养温度,并在常温(25℃)、4℃和0℃条件下对小叶野决明花粉进行了低温贮藏研究。结果表明,离体萌发法可以有效测定花粉生活力;花粉在10%蔗糖+1%硼酸的培养基上萌发率最高,25℃培养3 h为花粉的最佳萌发条件,随培养温度和培养时间的增加,花粉萌发力降低;贮藏天数增加,小叶野决明花粉生活力下降;贮藏温度越低,花粉生活力下降越缓慢;0℃下贮藏效果最好。     

一串红(Salvia splendens Ker-Gawl)花粉活性研究

[目的]探讨4种花色一串红花粉的生活力和在不同条件下的萌发率,为一串红育种提供理论依据。[方法]获取4种花色一串红花粉,采用TTC法和培养基法研究其生活力和萌发率。[结果]在TTC浓度为0.5%时活力测定效果最好,其中紫色和红白相间一串红达到94%。适宜一串红花粉萌发的培养条件为蔗糖浓度为10%,硼酸浓度为1.5%的液体培养条件下萌发率最高,达到83%(紫色一串红)。在常温贮藏条件下,6 h左右开始萌发,12 h的时候萌发率达到最高(紫色一串红为86%),48 h以后花粉几乎丧失了萌发力。[结论]花粉的生活力和萌发规律在一串红可育性上起关键作用。     

花药绒毡层发育相关基因的研究进展

在花粉发育中,花药绒毡层具有重要功能.绒毡层发育中的任何异常都将导致花粉败育.近年来,在对花粉发育的研究中,鉴定并克隆了一些与绒毡层发育相关的基因.对花药绒毡层发育相关基因的克隆、表达、调控及基因工程应用等方面作了综述.     

梅花花粉量及离体萌发特性研究

对44个梅花品种的花粉量和41个品种的花粉离体萌发率进行了测定,并比较了不同萌发培养液、不同采粉时期等因素对花粉萌发率的影响。结果表明:(1)梅花品种间单花药花粉量有很大差异,变化值0~11 083(。2)不同离体萌发培养液对花粉萌发有较大影响,多数品种的适宜培养液为10%蔗糖 0.01%硼酸。(3)品种间花粉萌发率存在很大差异,最高85.14%,最低为0.11%。(4)25℃,花粉于液体培养基30 min后开始萌发,6 h后花粉管达最长。(5)初花期和盛花期的花粉萌发率差异不显著,花粉萌发率与花粉饱满度和花粉量具有一定正相关性。     

不同种仁率山楂品种花粉量及花粉活力的测定

试验结果表明,种仁率分别为10.70%、18.50%、29.00%、41.70%、77.00%、80.00%、86.00%和86.20%的山楂品种聂家峪2号、甜水、西丰红、徐州大货、大金星、益都红口、秋金星和山东红面楂,其花粉量分别为每花药44133.2、52933.2、46923.5、41563.2、52364.0、57693.2、39200.0、62400.0粒;除甜水和大金星之间的花粉量差异不显著外,品种之间差异均达极显著水平;以山东红面楂的花粉量最多。在采用5%琼脂+100μg/g硼酸+10 g/L蔗糖的适宜培养基上培养4 h后观测的花粉萌发率分别为87.50%、81.50%、51.40%、68.50%、70.20%、62.30%、85.10%和56.20%;品种间差异明显,其中聂家峪2号的花粉萌发率最高。8个山楂品种的种仁率与花粉量和花粉萌发率之间无显著的相关性。本试验还观测了不同培养时间和4种培养基条件下的花粉萌发率和花粉管长度,证明观察花粉活力时间以培养4 h后的观测效果最好。