苜蓿根和根颈腐烂病病原致病性及品种抗病性研究

用室内试管苗人工接种方法对苜蓿根和根颈腐烂病的3个致病镰刀菌的致病性及20个苜蓿品种的抗病性进行了测定。结果表明，尖孢镰刀菌的7个分离物、锐顶镰刀菌的4个分离物和半裸镰刀菌的5个分离物都对苜蓿具有致病性，但致病性有差异；20个苜蓿品种幼苗测定，各品种对根和根颈腐烂病的抗性间存在差异，其中抗性较强的有维拉（Verla）、德福（Derful）、巨人201（Ameristand201）、草原2号（Caoyuan2）、塞物（Sitel）、阿尔冈金（Algongum）、图牧2号（Tumu2）、甘农2号（Gannong2）。     

苜蓿根和根颈腐烂病病原致病性及品种抗病性研究

用室内试管苗人工接种方法对苜蓿根和根颈腐烂病的 3个致病镰刀菌的致病性及 2 0个苜蓿品种的抗病性进行了测定。结果表明 ,尖孢镰刀菌的 7个分离物、锐顶镰刀菌的 4个分离物和半裸镰刀菌的 5个分离物都对苜蓿具有致病性 ,但致病性有差异 ;2 0个苜蓿品种幼苗测定 ,各品种对根和根颈腐烂病的抗性间存在差异 ,其中抗性较强的有维拉 (Verla)、德福 (Derful)、巨人 2 0 1(Ameristand 2 0 1)、草原 2号 (Caoyuan 2 )、塞特 (Sitel)、阿尔冈金 (Algongum)、图牧 2号 (Tumu 2 )、甘农 2号 (Gannong 2 )。     

四种杀菌剂对苜蓿根和根颈腐烂病菌的室内毒力测定

采用室内平皿生长速率法,研究四种杀菌剂对苜蓿根和根颈腐烂病的病原、尖孢镰刀菌、锐顶镰刀菌和半裸镰刀菌的毒力测定。结果表明,四种药剂对三种病原菌都有显著的抑制作用。其中多菌灵、甲基硫菌灵、枯腐宁和枯萎绝四种药剂对锐顶镰刀菌的有效中浓度(EC₅₀)分别为84.93、221.00、53.74和7.90μg/mL,对尖孢镰刀菌EC50分别为70.12、125.76、35.75和5.87μg/mL,对半裸镰刀菌分别为49.55、126.61和221μg/mL。以枯萎绝的抑菌作用最为突出,对三种镰刀菌的EC₅₀都在10μg/mL以下,枯腐宁次之,甲基硫菌灵最差。四种药剂的相关系数均在0.96以上,药剂浓度与抑制作用呈正相关。     

苯丙氨酸解氨酶与苜蓿种质根和根颈腐烂病抗病性研究

通过对10个苜蓿品种人工接种和不接种尖孢镰刀菌的处理，研究了各品种幼苗根部和叶部的苯丙氨酸解氨酶活性，并探讨了酶活性与品种对根和根颈腐烂病抗性之间的关系。结果表明，不论接菌与否，苜蓿品种间幼苗根和叶中的苯丙氨酸解氨酶活性均存在着显著差异。同时，幼苗叶部不接菌时，苯丙氨酸解氨酶活性与品种对根和根颈腐烂病的抗性达到显著正相关。而经过接菌处理的幼苗根中，或接菌处理后幼苗叶片中苯丙氨酸解氨酶活性虽与种质抗病性有一定的相关性，但没有达到显著水平。结果表明苜蓿幼苗叶片中苯丙氨酸解氨酶活性可以作为种质对该病抗病性的评价指标.     

苜蓿幼苗叶片过氧化物同工酶与根和根颈腐烂病抗病性的关系

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，研究了17个苜缩品种在人工接种和不接种病原尖孢镰刀力的情况下过氧化物酶同工酶的变化，并探讨了同工酶与品种抗病性之间的相关性。结果表明：不论接菌与否，过氧化物同工酶的谱带数、最大迁移率以及同工酶活性在苜蓿品种幼苗根部均存在较大差异，且接菌处理后与对照间也存在明显不同；从同工酶的酶带数和最大迁移率来看，与品种对根和根颈腐烂病抗性间的相关性均未达到显著水平，而且在抗病品种和感病品种之间也没有规律性变化；但从同工酶活性的变化上分析发现，幼苗根部接菌后同工酶活性有降低的趋势。     

苜蓿幼苗叶片过氧化物同工酶与根和根颈腐烂病抗病性的关系

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了17个苜蓿品种在人工接种和不接种病原尖孢镰刀菌的情况下过氧化物酶同工酶的变化,并探讨了同工酶与品种抗病性之间的相关性.结果表明不论接菌与否,过氧化物同工酶的谱带数、最大迁移率以及同工酶活性在苜蓿品种幼苗根部均存在较大差异,且接菌处理后与对照间也存在明显不同;从同工酶的酶带数和最大迁移率来看,与品种对根和根颈腐烂病抗性间的相关性均未达到显著水平,而且在抗病品种和感病品种之间也没有规律性变化;但从同工酶活性的变化上分析发现,幼苗根部接菌后同工酶活性有降低的趋势.     

采用EF-1α序列分析法对苜蓿根腐病病原菌——锐顶镰刀菌的鉴定

苜蓿根腐病对苜蓿生长和产量造成严重影响,为了解引起根腐病病原真菌的种类,本文对从陕西省定边县牧草草场紫花苜蓿根部分离得到的根腐病病原菌进行形态学观察、EF-1α序列分析鉴定及接种试验。结果表明:通过对病原菌在PDA培养基中的分离、纯化得到的单菌落形态学观察及显微镜下菌丝、孢子的观察,该病原菌属于引起苜蓿根腐病的镰刀菌属(Fusarium);用CTAB法提取病原菌基因组DNA,并对EF-1α序列进行PCR扩增、回收纯化、克隆测序,将测序结果进行Blast比对,构建系统发育树,分析与Genbank已知近缘种属亲缘关系,结果显示与锐顶镰刀菌(F.acuminatum)亲缘关系最近,可信度达99%;最后通过根部接种试验,接种苜蓿根部发病症状与田间根腐病发病症状一致,鉴定结果显示本试验研究的引起紫花苜蓿根腐病的病原菌为镰刀菌属锐顶镰刀菌(F.acuminatum)。     

苜蓿品种对根颈和根腐烂病抗性的评价

<正> 众所周知,根颈和根腐烂病是引起豆科牧草植株衰败和减产的一个很重要因素。不少的研究指出,从发病的苜蓿根系中通常分离出的多种镰刀菌,包括茄镰孢(F.So-lani),尖镰孢(F.oxysporum)和渐尖镰孢(F.acuminatum)是经常由苜蓿根中分离出来的种。     

苜蓿根和根颈腐烂病病原及防治研究进展

综述了国内外苜蓿Medicago sativa根和根颈腐烂病的病原研究、品种抗病性鉴定及其防治方法的研究进展,为该病害的进一步研究提供理论依据.     

紫花苜蓿镰刀菌根腐病研究进展

紫花苜蓿(简称苜蓿)是我国和世界种植面积最大最重要的豆科牧草。由镰刀菌引起的根腐病(称为镰刀菌根腐病)是苜蓿生产上的主要限制因素之一,严重影响该牧草的产量和品质,导致草地衰败和利用年限缩短。镰刀菌作为一类重要的土传病原真菌,一直是苜蓿根腐病研究的热点。由于镰刀菌能在土壤中长期存活,且苜蓿为多年生牧草,导致苜蓿根腐病的防治尤为困难。从苜蓿镰刀菌根腐病的分布与危害、病原种类与生物学特性、侵染源及发病规律、镰刀菌对苜蓿的致病性及致病机理、苜蓿品种对镰刀菌的抗病性以及防治方法等方面阐述苜蓿镰刀菌根腐病的研究进展,并对今后的研究方向进行了展望,以期为苜蓿镰刀菌根腐病后续研究及其防治新方法的开发利用提供理论依据。     

苜蓿根腐病生防真菌筛选鉴定及其防治效果研究

根腐病是苜蓿（Medicago sativa）生产中的重要限制性病害,应用生物技术对其进行防治对环境友好型可持续农业具有重要意义。本研究从不同地区苜蓿根际土壤中分离得到的95株真菌中筛选出了2株对根腐病病原菌抑菌率较高的菌株,经鉴定,2株拮抗真菌ZY56和GY37分别为哈茨木霉（Trichoderma harzianum）和康宁木霉（Trichoderma koningii）。对2株菌株的拮抗能力及盆栽防效的测定结果表明：2株菌株对4种镰刀菌（Fusarium spp.）均有较好的抑制效果,其7 d抑菌率在54.9%~75.3%之间,其中ZY56对尖孢镰刀菌（F.oxysporum）和半裸镰刀菌（F.semitectum）的抑菌率较高,而GY37对燕麦镰刀菌（F.avenaceum）和腐皮镰刀菌（F.solani）的抑菌效果更好;ZY56对盆栽苜蓿根腐病的防效显著高于多菌灵,达到66.4%,且促进生根效果明显,GY37也具有良好的防治效果,防效为55.1%。     

苜蓿与3种多年生禾草混播效应研究北大核心CSCD

以紫花苜蓿分别与草地早熟禾、无芒雀麦和苇状羊茅按混播比例为7∶3、5∶5和3∶7建立的人工草地群落为研究对象,以4个草种单播处理为对照,通过对生物量、植物形态特征以及种间关系的测定分析,探讨种间关系对混播草种和比例的响应以及植物生长特征和生物量对种间关系的响应,为建植高产、优质的混播草地提供理论基础。研究结果表明3种混播组合中紫花苜蓿相对产量(RY)值均大于1.0且大于禾草,紫花苜蓿较禾草均具有竞争优势,紫花苜蓿+草地早熟禾和紫花苜蓿+无芒雀麦混播组合中,紫花苜蓿对禾草的生长具有压迫作用,紫花苜蓿+苇状羊茅组合表现为两种牧草协同生长。随紫花苜蓿比例的下降和禾草比例的提高,紫花苜蓿RY值表现为豆禾比例3∶7>5∶5>7∶3,禾草RY值表现为豆禾比例3∶7>7∶3>5∶5,混播系统通过降低紫花苜蓿株高、增加茎粗和叶面积,禾草通过提高株高,降低茎粗以及先增大再减小叶面积来响应种间关系的变化,使得各混播比例下相对产量总和(RYT)值均大于1.0,进而使两种牧草达到协同生长,最终达到增产的目的。3种混播组合中,紫花苜蓿与苇状羊茅混播增产效果好于其他混播组合,并且以3∶7混播增产率最高,紫花苜蓿与草地早熟禾、紫花苜蓿与无芒雀麦以7∶3混播增产效率最高。     

48个苜蓿品种对3种病害抗性的初步评价

在兰州大学榆中校区品种比较试验田,以发病率为指标,采用国际上通用的苜蓿病害抗病性评价的分级标准,比较了国内外48个苜蓿品种对褐斑病、霜霉病和锐顶镰刀菌根腐病的抗病性,并对其进行了综合评价。抗病性等级评价结果表明,不同苜蓿品种对褐斑病的抗性表现是UC-1465为高抗（HR）品种,UC-1887为抗病（R）品种,Siriver与Trifecta为中抗（MR）品种,Avrora、Hunter River、Saranac AR为低抗（LR）品种,其余41个品种均为感病（S）品种;对霜霉病的抗性表现是48个苜蓿品种均为高抗（HR）品种;对锐顶镰刀菌根腐病的抗性表现是48个苜蓿品种均为高抗（HR）品种。综合评价结果表明,Vertus、中兰1号和新牧1号对褐斑病、霜霉病和锐顶镰刀菌根腐病均具有较强的抗病性,为高抗品种;UC-1887、UC-1465和Saranac AR对褐斑病、霜霉病和锐顶镰刀菌根腐病的抗病性均较差,为感病品种。     

Prokaryotic Expression and Immunogenicity Analysis of Hemagglutinin-related Outer Membrane Protein from F.necrophorum

In order to analyze the immunogenicity of 120 ku hemagglutinin-related outer membrane protein from F.necrophorum,specific primers were designed to amplify the 3 truncated overlapping gene fragments covering the whole open reading frame (ORF) based on the result of antigenic epitope analysis.The gene fragments were ligated into the prokaryotic expression vector to construct pET-28a-p1,pET-32a-p2 and pET-32a-p3,respectively.Then recombinant plasmid was induced expression in E.coli.The SDS-PAGE results showed that the expression of recombinant proteins P1,P2 and P3,molecular mass of the expressed proteins were about 48,59 and 62 ku,respectively.Western blotting indicated that the recombinant proteins could be recognized by antiserum against F.necrophorum from mouse.Humoral immunity response against recombinant proteins was detected in the immunized rabbits.Altogether,these findings suggested that 120 ku hemagglutinin-related outer membrane protein from F.necrophorum had good immunogenicity,and this study provided a reference for further research on genetic engineering subunit vaccine of F.necrophorum.     

紫花苜蓿与不同生活型多年生禾本科牧草混播生长生理特征

本研究通过测定紫花苜蓿分别与3种生活型禾草混播草地牧草生产力和生理指标对混播成分和比例的响应,为建植可持续高产的混播草地提供理论依据。结果显示：混播紫花苜蓿和苇状羊茅MDA含量减小,抗逆能力和光合能力增强;建植初期混播草地早熟禾MDA含量大于单播,抗逆生理和光合生理指标在豆禾比为7∶3时小于单播,5∶5和3∶7时大于单播;混播无芒雀麦MDA含量大于单播,抗氧化指标在豆禾比为7∶3时小于单播,5∶5和3∶7时大于单播,渗透调节物质含量和光合生理指标大于单播,说明紫花苜蓿与苇状羊茅混播时二者生理协同效应较好,建植初期豆禾比为7∶3时紫花苜蓿对草地早熟禾和无芒雀麦有种间竞争胁迫,适当下调紫花苜蓿比例有利于草地早熟禾和无芒雀麦生长。隶属函数评价结果显示紫花苜蓿与丛生型苇状羊茅3∶7混播时两种牧草生理表现最好,增产率和产量最高。     

植物病原真菌尖孢镰刀菌检测与定量研究进展

尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）是一种危害严重的土传病原真菌,被列为世界十大植物病原真菌之一。该菌能够侵染棉花（Gossypium hirsutum）、大豆（Glycine max）、西瓜（Citrullus lanatus）、香蕉（Musa nana）、番茄（Lycopersicon esculentum）和苜蓿（Medicago sativa）等100多种具有重要经济价值的作物,引起枯萎病和根腐病等。对土壤和植物根组织中的尖孢镰刀菌进行检测和定量是病害早期诊断和有效防治的基础。本文对国内外关于尖孢镰刀菌检测和定量方法（主要包括培养基菌落平板稀释法、常规PCR和实时荧光定量PCR等）及其应用进行总结,旨在对农牧业生产中尖孢镰刀菌检测和定量提供理论指导。     

三种镰孢菌对不同苜蓿品种致病性的比较研究

为了进一步了解根腐病病原菌的生物学特性以及不同病原菌对苜蓿的致病性,本研究以苜蓿根腐病病原BF1(Fusarium equiseti)、BF28(F.oxysporum)、BF36-2(F.solani)三种镰孢菌菌株为试验材料,观测菌落的外观特征与产孢量,并对WL343、金皇后、阿尔冈金、WL525四个苜蓿品种以菌液和菌饼两种方式接种,比较不同菌株对苜蓿的致病性。结果表明,菌液接种方式,苜蓿感病较快,感病程度较重。不同菌株在苜蓿根系的定植能力不同,BF1菌丝在根系附近聚集;而BF28及BF36-2菌丝则均匀分布于培养基表面。菌饼接种方式,不同菌株对苜蓿的致病性存在较大差异,产孢能力强的菌株致病力强。BF28对苜蓿的致病性最强,BF36-2次之,而BF1的致病性较弱。通过对感病植株进行解剖构造与致病过程观察,病菌以厚垣孢子入侵根系及叶片表皮细胞,以菌丝体及孢子形式在细胞间隙扩展,并向植物组织中释放细胞壁溶解物质,植物细胞壁溶解,根髓部腐烂中空,根颈部缢缩,叶部出现溃烂斑,植株的生长受阻。     

外来植物黄顶菊的入侵机制及生态调控技术研究进展

黄顶菊是近年来入侵我国的一种外来植物,其强大的繁殖能力和入侵性已经对生态环境造成了严重的危害,同时也威胁到农业生态安全。基于此,笔者围绕黄顶菊入侵的生态学机制和生态调控方法等进行了综述。首先,黄顶菊的化感作用和其对不利环境条件的快速适应能力对其入侵扩张具有重要作用;其次,黄顶菊和土壤生态系统之间可能形成“正反馈”作用机制,而这种机制又进一步促进了其成功入侵,其对土壤生态系统包括对养分循环、酶活性和微生物的组成和功能等均产生了深远影响;最后,遵循种群演替的基本规律,可通过建立能与黄顶菊抗衡的本地植被实现生态重建从而达到遏制其扩张,其中选择竞争力强且适合当地气候条件的植物材料至关重要。在此基础上,笔者围绕如何有效控制黄顶菊的危害尚需开展的工作进行了展望,以期为实现对其有效管理和利用提供参考。     

羊茅属4种牧草苗期抗旱性鉴定

对羊茅属(Festuca L.)4种牧草苗期幼苗在连续干旱、反复干旱和复水后的抗旱性特征进行研究,并通过综合评定,比较4种材料的抗旱性强弱,提出了羊茅属牧草抗旱性鉴定的指标。结果表明,连续干旱胁迫下,羊茅属各牧草叶片组织含水量、相对含水量、土壤含水量显著降低(P<0.05),而细胞膜透性、脯氨酸、丙二醛、叶绿素显著增加(P<0.05);复水后各指标均有不同程度的恢复。反复干旱后,法恩苇状羊茅成活率最低(40%左右),西北羊茅和毛稃羊茅次之(50%左右),中华羊茅最高(80%左右)。经评定4种牧草苗期抗旱性顺序为:中华羊茅>西北羊茅>毛稃羊茅>法恩苇状羊茅。脯氨酸、相对含水量、叶绿素a可作为羊茅属牧草抗旱性鉴定首选生理生化指标;土壤相对含水量、叶片枯死率、牧草成活率可作为羊茅属牧草生物学鉴定的可靠指标。