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相似文献
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1.
改良CTAB法用于提取红麻成熟叶片高质量DNA的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
红麻处于光合高峰期的成熟叶片中的次生物质含量很高,给DNA的提取造成很大的困难.CTAB法能有效去除多糖杂质,但普通CTAB法用于红麻的DNA提取效果很不理想,为使CTAB法能更好地用于红麻的DNA提取,我们对此方法进行了改进,通过前处理除去大部分的杂质,减小了后续操作的难度.为了验证前处理是否会损失DNA,研究了液氮研磨对材料细胞的破碎程度问题,还讨论了DNA提取中的其它一些相关问题.  相似文献   

2.
以野牡丹科植物幼叶为材料,对影响野牡丹科植物DNA提取质量的主要因子进行研究,以期建立适宜野牡丹科植物DNA提取的优化反应体系。结果表明,当提取液中CTAB浓度为4%,沉淀时加入0.6倍体积预冷异丙醇、1/2倍体积5 mol/L NaCl、2倍体积无水乙醇时,所提取的DNA纯度较高,电泳条带清晰。且在此条件下,能提出野牡丹科7种植物的DNA。  相似文献   

3.
采用改良的CTAB方法提取龙柚新鲜叶片的总DNA,在提取过程中,采用不同的处理液进行预处理,提得的DNA产量高,纯度好,降解少,可用于PCR扩增,能满足相关的分子生物学研究要求。同时,尝试用饱和NaCl-CTAB保存液来保存新鲜叶片,并对分别保存7天、14天、21天、28天的叶片进行总DNA提取,实验结果表明:保存7天的叶片总DNA提取效果最佳。  相似文献   

4.
改良CTAB法和高盐低pH值法提取花生DNA的效果   总被引:25,自引:0,他引:25  
采用改良CTAB法和高盐低pH法提取花生总DNA,结果表明,高盐低pH法提取的花生DNA分子量略小,DNA有一定程度的降解,但得率大大高于CTAB法,按我们稍有改动的实验方法,每克鲜重的叶片,可提取1000μg以上的DNA。两种方法提取的DNA均可酶切完全,RAPD-PCR扩增,结果相同。高盐低pH值法廉价、步骤少、易掌握,是提取花生DNA较好的方法。  相似文献   

5.
为了提取高质量的红毛丹基因组DNA,本研究以红毛丹叶片为试材,比较改良CTAB法、改良SDS法和试剂盒法对红毛丹叶片DNA的提取效果。结果表明:3种方法均可从红毛丹叶片中提取DNA,但由于改良CTAB法通过多次洗涤,并联合使用PVP和β-巯基乙醇处理,可有效去除红毛丹叶片中的多糖、多酚和蛋白质等物质,所获得的DNA纯度高且完整性较好,可用于SRAP-PCR等分子标记分析。此结果为后续分子生物学等相关研究奠定了基础。  相似文献   

6.
红麻基因组总DNA的提取纯度,关系到新型分子标记ISSR、SRAP的PCR扩增效果。经反复实验,对CTAB法提取红麻总DNA技术进行了改进,即采集足量的红麻嫩叶、提取时加入β-巯基乙醇、提取过程中使用2.5%CTAB、最后用预冷的无水乙醇沉淀DNA。OD260/OD280比值检测结果为平均1.824,而且DNA得率也较高,证明用此法提取的DNA能完全满足ISSR和SRAP分析的要求和获得较理想的效果,本文还讨论了高质量DNA提取应注意的有关技术环节。  相似文献   

7.
CTAB法提取红麻总DNA技术优化与ISSR和SRAP扩增效果   总被引:11,自引:1,他引:11  
红麻基因组总DNA的提取纯度,关系到新型分子标记ISSR、SRAP的PCR扩增效果。经反复实验,对CTAB法提取红麻总DNA技术进行了改进,即采集足量的红麻嫩叶、提取时加入β-巯基乙醇、提取过程中使用2.5%CTAB、最后用预冷的无水乙醇沉淀DNA。OD260,OD2踯比值检测结果为平均1.824,而且DNA得率也较高,证明用此法提取的DNA能完全满足ISSR和SRAP分析的要求和获得较理想的效果.本文还讨论了高庸量DNA提取应注意的有关技术环节.  相似文献   

8.
以转基因抗草甘膦大豆为研究材料,分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取基因组DNA,以提取DNA的浓度和纯度,同时以PCR扩增大豆的内源基因(lectin)及外源特异性序列(CaMV35S,nos,Cp4-epsps)的效果对两种方法进行比较和评价.结果表明:虽然改良Chelex-100法DNA提取纯度不高,但是提取效率与常规CTAB法相当,而且改良Chelex-100法能够快速在1 h之内从大豆中提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰.因此,改良Chelex-100法可以替代CTAB法提取DNA用于转基因检测,该方法具有经济、简便、快速的特点.  相似文献   

9.
为了获取高质量的油梨果肉DNA,以油梨果肉为试材,比较改良SDS法、改良CTAB法和试剂盒法对油梨果肉DNA的提取效果。结果表明:上述3种方法均可从油梨果肉中提取DNA,但改良SDS法与改良CTAB法所获得的DNA浓度都在600 μg/mL以上,纯度(OD260nm/OD280nm)均在1.8左右,纯度高且完整性较好,可用于未来分子标记分析。  相似文献   

10.
分别采用TRIzol法和改良的CTAB法提取阔叶薰衣草叶片的RNA,并用紫外光谱和琼脂糖凝胶电泳对其提取效果进行鉴定。实验结果表明:TRIzol法提取的总RNA浓度高,但杂质较多且有部分降解、稳定性差;改良的CTAB法提取得到的总RNA的纯度较高,OD260/OD280值为1.909,效果稳定,有良好的可重复性。因此,改良的CTAB法是一种较为简便、经济的提取阔叶薰衣草叶片总RNA的方法。  相似文献   

11.
一种快速高效提取花生叶片DNA的简化方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
为获得适用于高通量测序的高质量花生叶片DNA,本方法取第三对真叶为实验材料,设计烧制圆球状枪头和离心管装置代替研钵研磨,并在CTAB法的基础上在杂质沉淀前快速分离DNA等简化方法提取DNA。琼脂糖凝胶电泳检测结果表明DNA条带清晰、完整性高。经超微量分光光度计检测,DNA浓度范围在104~131ng/μL,OD260/OD280为1.7~2.0,OD260/OD230大于2.0,说明杂质少,可获得高纯度,高浓度的DNA。此方法与常用的植物基因组DNA提取方法相比,具有成本低、时间短、质量高的优点,可用于基因组重测序、分子生物学技术以及分子标记筛选等后续研究,可提高花生分子育种与筛选工作效率。  相似文献   

12.
不同熟期覆膜春大豆生育特性及产量、品质的比较研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
为研究不同熟期春大豆覆膜后生育特性及产量品质变化规律,以3个不同熟期春播大豆品种(系)为材料,研究其在地膜覆盖条件下生育规律及产量变化情况。结果表明:各品种覆膜较露地生育进程明显提前,在前期表现更加突出,各个阶段的生长量显著增加,株高、节数、株荚数、株粒数、百粒鲜重均大于露地,同时覆膜品(系)间,收获期最早的品系是黑河17(8月29);最晚是九农26,其中九农26单株荚数、单株粒数、百粒重及产量均居首位,就综合性状而言,九农26最适合在本地区春播覆膜高产种植。  相似文献   

13.
The sampling of living insects should be avoided in highly endangered species when the sampling would further increase the risk of population extinction. Nonlethal sampling (wing clips or leg removals) can be an alternative to obtain DNA of individuals for population genetic studies. However, nonlethal sampling may not be possible for all insect species. We examined whether remnants of traffic-killed specimens of the endangered and protected flighless longhorn beetle Iberodorcadion fuliginator (L., 1758) can be used as a resource for population genetic analyses. Using insect fragments of traffic-killed specimens collected over 15 yr, we determined the most efficient DNA extraction method in relation to the state of the specimens (crushed, fragment, or intact), preservation (dried, airtight, or in ethanol), storage duration, and weight of the sample by assessing the quantity and quality of genomic DNA. A modified cetyltrimethyl ammonium bromide method provided the highest recovery rate of genomic DNA and the largest yield and highest quality of DNA. We further used traffic-killed specimens to evaluate two DNA amplification techniques (quantitative polymerase chain reaction [qPCR] and microsatellites). Both qPCR and microsatellites revealed successful DNA amplification in all degraded specimens or beetle fragments examined. However, relative qPCR concentration and peak height of microsatellites were affected by the state of specimen and storage duration but not by specimen weight. Our investigation demonstrates that degraded remnants of traffic-killed beetle specimens can serve as a source of high-quality genomic DNA, which allows to address conservation genetic issues.  相似文献   

14.
研究培养料三次发酵不同培养时间、不同培养温度对双孢蘑菇菌丝生长及出菇情况、产量和病虫害的影响,结果表明:与二次发酵相比,采用三次发酵,双孢蘑菇菌种发菌、吃料快,菌丝粗壮浓密,吃满料时间短,病虫害危害轻,无杂菌,并且菇大,结实,产量也比二次发酵高,增产幅度为5.24%~12.57%。三次发酵最佳培养温度为50℃、发酵培养时间为48 h。  相似文献   

15.
Improved rice varieties(IRVs) play a significant role in establishing food security and improving livelihood in the Global South since its introduction in the 1960s. However, the adoption of new IRVs has remained relatively low. This low adoption poses a challenge to rice-producing and consuming countries as they are increasingly threatened by production shortages, malnutrition, and poor rice quality. Many empirical studies have attempted to identify the determinants influencing the adoption of ...  相似文献   

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